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1、1小鼠的超數(shù)排卵不同激素對不同小鼠超排的影響研究指導(dǎo)老師:劉云海10131乙 于昊2研究的理論依據(jù)w造成超排效果(獲卵率和可用的胚胎數(shù))不穩(wěn)定的因素主要有兩大類:一類是動物因素,包括個體和遺傳的差異、生理和營養(yǎng)狀態(tài)、開始超排的日期、季節(jié)及其它影響動物的環(huán)境因素;另一類是藥物因素,包括激素的半衰期、激素制劑中的FSHLH比例、給藥途徑、劑量和頻率等。 3研究的理論依據(jù)w動物的整個生殖活動都是受神經(jīng)、激素控制的。生殖系統(tǒng)與神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)之間形成一條中樞神經(jīng)、下丘腦、垂體、性腺軸。由于這條軸的作用,使動物的生命活動按照嚴格的規(guī)律有條不紊的進行。中樞神經(jīng)系統(tǒng)把外界環(huán)境刺激傳到下丘腦,使之分泌促性
2、腺釋放激素,促性腺釋放激素作用于垂體,促使垂體分泌促性腺激素,促性腺激素即作用于性腺,使性腺分泌性腺激素。垂體激素可以通過反饋作用調(diào)節(jié)下丘腦釋放激素的分泌。同樣,性腺激素也可以通過反饋作用調(diào)節(jié)下丘腦和垂體釋放相應(yīng)的激素。w生殖激素是指與動物性器官、性細胞、性行為等的發(fā)生和發(fā)育以及發(fā)情、排卵、妊娠、分娩和泌乳等生殖活動有直接關(guān)系的激素。4幾種對母鼠繁殖有作用的激素A類別名稱簡稱來源化學(xué)特征生理功能下丘腦部激素促性腺激素釋放激素GnRH下丘腦十肽促進腺垂體釋放促黃體素和促卵泡素催產(chǎn)素OXT下丘腦合成,神經(jīng)垂體釋放九肽促進子宮收縮、促進子宮收縮、排乳,并具溶排乳,并具溶解黃體作用解黃體作用5幾種對母
3、鼠繁殖有作用的激素B促性腺激素促卵泡素GnRH腺垂體糖蛋白促使卵泡發(fā)育和成熟,促進精子發(fā)生促黃體素LH腺垂體糖蛋白刺激排卵,促進黃體生成,促進雄激素和孕激素的分泌促乳素PRL腺垂體糖蛋白促進泌乳,對某些動物刺激黃體功能和孕酮的分泌,增強母性行為孕馬血清促性腺激素PMSG馬屬動物尿囊絨毛膜糖蛋白與促卵泡素類似,促進馬屬動物輔助黃體的形成人類絨毛膜促性腺激素hCG靈長類胎盤絨毛膜糖蛋白與促黃體素類似其它前列腺素 PG子宮及其他脂肪酸溶解黃體,促進子宮收縮6目前的研究進展w在目前,關(guān)于超數(shù)排卵已有一些研究。如楊文勝、倪和民等發(fā)現(xiàn)采用相同品種、月齡和體重的處女母兔進行超數(shù)排卵試驗, 過低或過高劑量的P
4、MSG,顯著降低母兔的超排效果,hCG劑量的提高,有助于提高排卵率,獲得較多的胚胎。而徐平對不同品系及日齡小鼠的超排研究發(fā)現(xiàn),用PMSG和hCG分別對不同日齡(28日齡、56日齡及112日齡)的ICR、B6C3F1及C57BL/6J三個品系超排處理后,28日齡小鼠的排卵數(shù)高于56日齡及112日齡的排卵數(shù)(P0.01)。而這與Yokoyama與朱士恩研究結(jié)果完全相同。在李秦等研究中,用PMSG、APMSG、hCG、LHRH等對大鼠、小鼠、豚鼠、家兔、綿羊、豬、牛等的超排作用系統(tǒng)探索后發(fā)現(xiàn),PMSG和hCG各510IU可使小鼠產(chǎn)生穩(wěn)定的超排,取卵數(shù)達5010個。 7目前的研究進展w參考文獻w楊文勝
5、 倪和民等 母兔超數(shù)排卵方法的研究 實驗動物科學(xué)與管理 1996. 4 w徐平 不同日齡與品系小鼠超排卵、體外受精及受孕率的比較研究 中國實驗動物學(xué)雜志 2001. 6 w李秦等 不同激素對哺乳動物超數(shù)排卵作用的研究 實驗動物科學(xué)與管理 1997.38實驗方法 主要實驗內(nèi)容:主要實驗內(nèi)容: 以小鼠為研究對象,其腹腔注射以小鼠為研究對象,其腹腔注射PMSGhCG、PMSGhCG或或PG F2比較幾組注射后排比較幾組注射后排卵的效果。卵的效果。 主要研究方法:主要研究方法: 實驗所需要的材料: a、實驗動物:清潔級小白鼠30只 b、實驗藥品:一定量的孕馬血清促性腺激素(PMSG)人類絨毛膜促性腺激
6、素 (hCG) 前列腺素F2a(PG F2)需要產(chǎn)地明確。生理鹽/水,75%乙醇、PBS(自配)。9實驗方法w主要研究方法主要研究方法wc.實驗器械 一次性塑料培養(yǎng)皿、顯微鏡、滅菌手術(shù)器械(眼科剪、眼科鑷)、?ml無菌注射器、吸管等。wd.實驗步驟w將小鼠分為A、B及對照組三組,A、B每組6只,對照組8只,A組腹腔注射PMSG + hCG ,B組腹腔注射PSMG + PG F2 ,對照組不作任何處理。這樣的注射一般在每天下午四點左右進行。先注射PMSG(A、C組)、FSH(B組),在44小時候后注射hCG (B組組)和PG F2(C組)組),在注射后第二天上午約八點左右將前一天處理過得小鼠處死,打開小鼠腹腔,取出輸卵管及卵巢,撕裂輸卵管壺腹部,將胚胎沖出,在顯微鏡下檢查胚胎、卵巢,計數(shù)、記錄 。10實驗方法11實驗結(jié)果w觀察解剖小鼠
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