性傳播疾病STD實驗室相關(guān)檢查-業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)用

1、性病實驗室檢查性病實驗室檢查班班后業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)后業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)地點：行政樓5樓會議室時間：2014年11月23日性傳播疾病實驗室性傳播疾病實驗室相關(guān)檢查相關(guān)檢查一、梅毒、淋病、一、梅毒、淋病、非淋菌性尿道炎、尖銳濕疣、非淋菌性尿道炎、尖銳濕疣、生殖器皰疹、軟下疳、細菌性陰道病；生殖器皰疹、軟下疳、細菌性陰道病；二、各性病的實驗室檢測的檢測二、各性病的實驗室檢測的檢測方法及臨床意義；方法及臨床意義；概述概述歷史上：（傳統(tǒng)歷史上：（傳統(tǒng)） 把通過性活動傳染的疾病稱為把通過性活動傳染的疾病稱為性病 （Venereal diseases, VD） 主要指: 梅毒(syphilis) 淋病(gonorrhea)

2、性病肉芽腫 軟性下疳四種又稱又稱經(jīng)典性病經(jīng)典性病概念更新概念更新上世紀(jì)年代以來發(fā)現(xiàn)上世紀(jì)年代以來發(fā)現(xiàn)許多病原體也可以通過許多病原體也可以通過性生活性生活傳播傳播概念有了大幅度的更新概念有了大幅度的更新迄今為止大約已發(fā)現(xiàn)余種性病迄今為止大約已發(fā)現(xiàn)余種性病同時：同時：四種性病大都有了明確診斷手段及治療方法，明顯地得到了抑制四種性病大都有了明確診斷手段及治療方法，明顯地得到了抑制 性病的發(fā)病性病的發(fā)病“順位譜順位譜”，有了變化，鮮為人知的性病提前，而久為人知，有了變化，鮮為人知的性病提前，而久為人知的性病占到了后位的性病占到了后位 19701970年，世界衛(wèi)生組織把舊名稱年，世界衛(wèi)生組織把舊名稱“性

3、病性病”改為改為“性傳播疾病性傳播疾病”。 （Sexually transmitted diseases, STDSexually transmitted diseases, STD） 性病（性?。╒DVD）：）： 是指通過性交傳染的、具有明顯生殖器損是指通過性交傳染的、具有明顯生殖器損 害癥狀的全身性疾病。害癥狀的全身性疾病。4 4種種性傳播疾?。ㄐ詡鞑ゼ膊。⊿TDSTD）：）： 是指通過性接觸可以傳染的一組傳染病是指通過性接觸可以傳染的一組傳染病, ,在在 我國我國, ,人們簡稱為性病人們簡稱為性病 。包容。包容2020余種余種病毒病毒生殖器皰疹生殖器皰疹 單純皰疹病毒單純皰疹病毒(HSV

4、) (HSV) (主要由主要由HSV-2HSV-2引起引起) )生殖器生殖器CMVCMV感染感染巨細胞病毒巨細胞病毒(CMV(CMV) )乙型肝炎乙型肝炎 乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒(HBV)(HBV)甲型肝炎甲型肝炎 甲型肝炎病毒甲型肝炎病毒(HAV)(HAV)尖銳濕疣尖銳濕疣 人乳頭瘤病毒人乳頭瘤病毒(HPV)(HPV)生殖器傳染性軟疣生殖器傳染性軟疣 傳染性軟疣病毒傳染性軟疣病毒獲得性免疫缺陷綜合征獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)(AIDS)人類免疫缺陷病毒人類免疫缺陷病毒(HIV(HIV) )非細菌性微生物非細菌性微生物性病性淋巴肉芽腫性病性淋巴肉芽腫 (CT(CTL L型引起型引起)

5、)非淋菌性尿道非淋菌性尿道( (宮頸宮頸) ) 炎炎 沙眼衣原體沙眼衣原體(CT(CTD DK K型引起型引起) ) 解脲支原體（解脲支原體（UUUU） 人型支原體人型支原體(MH)(MH) 生殖道支原體生殖道支原體(GU)(GU)梅毒梅毒 梅毒梅毒( (蒼白蒼白) )螺旋體螺旋體(TP)(TP)細菌細菌淋病淋病 奈瑟淋病雙球菌奈瑟淋病雙球菌(NG) (NG) 腹股溝肉芽腫腹股溝肉芽腫 肉芽腫莢膜桿菌肉芽腫莢膜桿菌(DG,CBG)(DG,CBG)軟下疳軟下疳 杜克雷嗜血桿菌（杜克雷嗜血桿菌（HD)HD)細菌性陰道炎細菌性陰道炎 加特納嗜血桿菌加特納嗜血桿菌(GV)(GV)志賀氏菌屬志賀氏菌屬

6、痢疾志賀氏菌感染痢疾志賀氏菌感染彎曲桿菌病彎曲桿菌病 彎曲桿菌彎曲桿菌 B B群鏈球菌群鏈球菌 陰部感染及陰道病陰部感染及陰道病細菌性陰道病細菌性陰道病 某些陰道厭氧菌某些陰道厭氧菌真菌真菌由白色念珠菌由白色念珠菌/ /擬酵母菌：擬酵母菌： 念珠菌性陰道炎念珠菌性陰道炎 念珠菌性龜頭包皮炎念珠菌性龜頭包皮炎 外陰陰道真菌感染外陰陰道真菌感染表淺部真菌：表淺部真菌： 股癬股癬 原蟲原蟲 ： 滴蟲性陰道炎滴蟲性陰道炎 尿道炎（陰道毛滴蟲）尿道炎（陰道毛滴蟲） 阿米巴?。ㄈ芙M織阿米巴原蟲）阿米巴?。ㄈ芙M織阿米巴原蟲） 藍氏賈第鞭毛蟲感染藍氏賈第鞭毛蟲感染體表寄生蟲：體表寄生蟲： 陰虱?。幨╆幨?/p>

7、（陰虱） 陰部疥（疥螨）陰部疥（疥螨） 讓患者能接受讓患者能接受 社會性很強的疾病社會性很強的疾病我國重點防治的性病我國重點防治的性病艾滋病艾滋病(AIDS)梅毒梅毒(syphilis)尖銳濕疣尖銳濕疣(condyloma acuminatum)(condyloma acuminatum)淋病淋病( (Gonorrhea)生殖器皰疹生殖器皰疹( (genital herpes)非淋菌性尿道炎非淋菌性尿道炎( (NGU) )軟下疳軟下疳( (chancroid)性病性淋巴肉芽腫性病性淋巴肉芽腫( (lymphogranuloma Venereum)STDSTD的診斷：的診斷： 病史病史接觸史接觸

8、史 臨床表現(xiàn)臨床表現(xiàn) 實驗室檢查實驗室檢查STDSTD監(jiān)測和療效判斷的重要依據(jù)監(jiān)測和療效判斷的重要依據(jù) 實驗室檢查實驗室檢查性病實驗室檢查特點性病實驗室檢查特點診斷技術(shù)種類較多（診斷技術(shù)種類較多（形態(tài)學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、分形態(tài)學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、分 子生物學(xué)等許多檢子生物學(xué)等許多檢測方法）測方法）臨床檢驗工作中不確定性臨床檢驗工作中不確定性（需借助圖譜病原體形態(tài)（需借助圖譜病原體形態(tài) 典型和不典型，可借助書籍典型和不典型，可借助書籍資料篇幅有限資料篇幅有限疾病的社會性疾病的社會性（健康、精神、經(jīng)濟、家庭和聲譽健康、精神、經(jīng)濟、家庭和聲譽）性病實驗室診斷原則性病實驗室診斷原則慎重：慎重：不能

9、盲目濫用各種非標(biāo)準(zhǔn)檢測方法、注重社會效益不能盲目濫用各種非標(biāo)準(zhǔn)檢測方法、注重社會效益 和客觀條件，和客觀條件，新技術(shù)：新技術(shù)：對待新技術(shù)一定要科學(xué)比對，慎重使用對待新技術(shù)一定要科學(xué)比對，慎重使用梅毒梅毒一、梅毒的臨床分期一、梅毒的臨床分期后天梅毒后天梅毒 ：一期梅毒一期梅毒 二期梅毒二期梅毒 三期梅毒三期梅毒( (晚期梅毒晚期梅毒) ) 先天梅毒（胎傳梅毒）先天梅毒（胎傳梅毒）梅毒一期皮損-硬下疳梅毒二期皮損梅毒晚期損害二、梅毒的實驗室診斷二、梅毒的實驗室診斷 1. 1.檢查病原體的試驗檢查病原體的試驗 2.2.檢測抗體檢測抗體血清學(xué)檢查血清學(xué)檢查 檢查病原體的試驗檢查病原體的試驗1.1.暗視

10、野顯微鏡檢查法（暗視野顯微鏡檢查法（WHOWHO推薦）推薦）2.Fontana-Tribondean2.Fontana-Tribondean鍍銀染色法鍍銀染色法（難、敏感性差）（難、敏感性差）3.3.單克隆免疫銀光法（單克隆免疫銀光法（DFIDFI）-PCR-PCR暗視野顯微鏡下見纖細螺旋狀微生物，暗視野顯微鏡下見纖細螺旋狀微生物，長約長約4 414 m14 m，寬約，寬約2 m2 m，8 81414個規(guī)則的螺旋，折光性強，運動緩慢，個規(guī)則的螺旋，折光性強，運動緩慢，有規(guī)律。有規(guī)律。螺旋有三種活動方式，旋轉(zhuǎn)式，螺旋有三種活動方式，旋轉(zhuǎn)式， 蛇形蛇形式，伸縮式。式，伸縮式。 暗視野顯微鏡檢查臨床

11、意義暗視野顯微鏡檢查臨床意義1.1.可確證梅毒可確證梅毒- -直接檢查到梅毒螺旋體直接檢查到梅毒螺旋體2.2.對早期現(xiàn)癥梅毒檢測最好的方法（一期、二期梅毒皮損或淋巴節(jié)結(jié)、對早期現(xiàn)癥梅毒檢測最好的方法（一期、二期梅毒皮損或淋巴節(jié)結(jié)、孕婦羊膜穿刺）孕婦羊膜穿刺）需要儀器設(shè)備：暗視野顯微鏡需要儀器設(shè)備：暗視野顯微鏡選擇試驗注意事項選擇試驗注意事項1.1.清潔皮損表面清潔皮損表面用生理鹽水清潔，用生理鹽水清潔，不能用消毒液不能用消毒液2.2.取材取材- -滲出液、盡量避免出血滲出液、盡量避免出血（降低陽性率）（降低陽性率）3.3.口腔潰瘍要謹(jǐn)慎口腔潰瘍要謹(jǐn)慎4.4.陰性結(jié)果不能排除梅毒可能性陰性結(jié)果不

12、能排除梅毒可能性- -取材不當(dāng)、皮損致數(shù)量不足、近取材不當(dāng)、皮損致數(shù)量不足、近期使用抗生素、損害接近自然消退等期使用抗生素、損害接近自然消退等梅毒血清學(xué)檢查梅毒血清學(xué)檢查【原理】【原理】當(dāng)機體感染梅毒螺旋體后，經(jīng)過當(dāng)機體感染梅毒螺旋體后，經(jīng)過一定潛伏期，在血清中產(chǎn)生一定數(shù)量一定潛伏期，在血清中產(chǎn)生一定數(shù)量的抗類脂質(zhì)抗體（的抗類脂質(zhì)抗體（非特異性的反應(yīng)素非特異性的反應(yīng)素）和抗密螺旋體抗體（和抗密螺旋體抗體（特異性免疫球蛋特異性免疫球蛋白白），主要是），主要是IgGIgG抗體，因此，可以用抗體，因此，可以用各種免疫學(xué)的方法來檢測反應(yīng)素或抗各種免疫學(xué)的方法來檢測反應(yīng)素或抗體，協(xié)助梅毒的診斷。體，協(xié)助

13、梅毒的診斷。 兩組試驗：兩組試驗：1.1.非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗2.2.梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗兩組試驗的目的都是檢測抗體兩組試驗的目的都是檢測抗體非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗（抗非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗（抗- -脂質(zhì)抗體脂質(zhì)抗體- -非特異性非特異性）梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗（抗梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗（抗- -梅毒螺旋體抗體梅毒螺旋體抗體- -特異性特異性）非特異性梅毒的血清學(xué)初篩試驗非特異性梅毒的血清學(xué)初篩試驗方法：方法：1.1.性病研究實驗室試驗性病研究實驗室試驗VDRLVDRL2.2.不加熱血清反應(yīng)素試驗不加熱血清反應(yīng)素試驗USR

14、USR3.3.快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗RPRRPR4.4.不加熱甲苯胺紅血清試驗不加熱甲苯胺紅血清試驗TRUSTTRUST 1.1.性病性病研究實驗室試驗（研究實驗室試驗（venersal disease venersal disease research laboratory testresearch laboratory test，VDRL)VDRL)： VDRLVDRL試驗所用抗原是從牛心中提取心磷脂加上試驗所用抗原是從牛心中提取心磷脂加上卵磷脂和膽固醇，梅毒螺旋體在破壞組織的過程卵磷脂和膽固醇，梅毒螺旋體在破壞組織的過程中，體內(nèi)釋放一種抗原性心磷脂，它刺激機

15、體產(chǎn)中，體內(nèi)釋放一種抗原性心磷脂，它刺激機體產(chǎn)生反應(yīng)素，這種反應(yīng)素與牛心中提取的心磷脂在生反應(yīng)素，這種反應(yīng)素與牛心中提取的心磷脂在體外有抗原抗體反應(yīng)。體外有抗原抗體反應(yīng)。實驗步驟：實驗步驟： 將待檢血清先滅活，吸取將待檢血清先滅活，吸取0.5ml0.5ml血清滴入玻片的圓圈中，血清滴入玻片的圓圈中，使血清涂使血清涂布擴散到整個圓圈布擴散到整個圓圈。用。用1ml1ml注射器裝上專用針頭取一滴抗原試劑加入圓注射器裝上專用針頭取一滴抗原試劑加入圓圈內(nèi)。用轉(zhuǎn)動器或手轉(zhuǎn)動玻片圈內(nèi)。用轉(zhuǎn)動器或手轉(zhuǎn)動玻片4min4min，每分鐘約，每分鐘約180180次左右，立即判斷結(jié)次左右，立即判斷結(jié)果。果。* * *

16、*試驗時應(yīng)用已知陽性血清對照。試驗時應(yīng)用已知陽性血清對照。結(jié)果判定：結(jié)果判定： “”陰性陰性: :僅見微小顆粒，液體渾僅見微小顆粒，液體渾濁。濁。 “+”“+”弱陽性弱陽性: :肉眼見小的塊狀物或者肉眼見小的塊狀物或者用放大鏡見到塊狀物，液體渾濁。用放大鏡見到塊狀物，液體渾濁。 +陽性陽性: :肉眼見大的或中等大的塊肉眼見大的或中等大的塊狀物。狀物。VDRLVDRL玻片定量試驗：玻片定量試驗： 將待測血清用生理鹽水在小試管中作將待測血清用生理鹽水在小試管中作6 6個稀釋度，原倍血清、個稀釋度，原倍血清、1:21:2、1:41:4、1:81:8、1:161:16、1:321:32，每個稀釋度樣本

17、取，每個稀釋度樣本取0.5ml0.5ml加于玻片圓圈中，按加于玻片圓圈中，按定性的方法測定和判斷結(jié)果。定性的方法測定和判斷結(jié)果。 2. 2. 不加熱血清反應(yīng)素試驗（不加熱血清反應(yīng)素試驗（unheated serum reagin testunheated serum reagin test，USRUSR）：）： 該試驗用改良的該試驗用改良的VDRLVDRL抗原，稀釋后離心沉淀，于沉淀中加入抗原，稀釋后離心沉淀，于沉淀中加入EDTAEDTA（二胺四乙酸二鈉）氯化膽堿可起化學(xué)（二胺四乙酸二鈉）氯化膽堿可起化學(xué) 滅活滅活 作用，所以血清不必滅作用，所以血清不必滅活，抗原不必每天配制，在活，抗原不必每

18、天配制，在4 488冰箱中保存冰箱中保存6 6個月。個月。 (1) USR(1) USR玻片定性試驗玻片定性試驗方法：方法：吸取吸取5050l l血清放入反應(yīng)板圈內(nèi)，并均勻涂布整血清放入反應(yīng)板圈內(nèi)，并均勻涂布整個圈。個圈。 將將USRUSR抗原輕輕搖勻，用標(biāo)準(zhǔn)針頭吸取抗原，每抗原輕輕搖勻，用標(biāo)準(zhǔn)針頭吸取抗原，每個標(biāo)本中加個標(biāo)本中加1 1滴抗原液。滴抗原液。 將反應(yīng)板置旋轉(zhuǎn)器旋轉(zhuǎn)將反應(yīng)板置旋轉(zhuǎn)器旋轉(zhuǎn)4min4min，(180(1805)r/min5)r/min。 立即用肉眼或顯微鏡觀察結(jié)果。立即用肉眼或顯微鏡觀察結(jié)果。 本實驗應(yīng)用已知陽性血清作陽性對照。本實驗應(yīng)用已知陽性血清作陽性對照。結(jié)果判定

19、：結(jié)果判定：根據(jù)凝集反應(yīng)絮狀物大小判斷陽性程度根據(jù)凝集反應(yīng)絮狀物大小判斷陽性程度強陽性強陽性(3(34+)4+)： 大或中等大小的絮狀物，溶液清亮。大或中等大小的絮狀物，溶液清亮。陽性陽性(2+)(2+)： 絮狀物比較小，懸液較清亮。絮狀物比較小，懸液較清亮。 弱陽性弱陽性(1+)(1+)： 絮狀物比較小，均勻分布，液體混濁。絮狀物比較小，均勻分布，液體混濁。可疑可疑( () )： 抗原顆粒較粗一般屬于陰性反應(yīng)?？乖w粒較粗一般屬于陰性反應(yīng)。 陰性陰性( () )： 抗原顆粒均勻，針狀細小?？乖w粒均勻，針狀細小。 （2 2）USRUSR定量試驗定量試驗 正反應(yīng)板圓圈內(nèi)加入正反應(yīng)板圓圈內(nèi)加入5

20、050l l等滲鹽水等滲鹽水( (一般做一般做6 6個個滴 度 ， 有 必 要 者 應(yīng) 繼 續(xù) 稀 釋滴 度 ， 有 必 要 者 應(yīng) 繼 續(xù) 稀 釋 ) ) 。 吸取吸取5050l l血清加到第一孔混勻后，再吸取血清加到第一孔混勻后，再吸取5050l l至第二孔稀釋，依此作倍比稀釋至第二孔稀釋，依此作倍比稀釋(1:2(1:21:64)1:64)，最，最后 所 稀 釋 的 圓 圈 內(nèi) 應(yīng) 棄 去后 所 稀 釋 的 圓 圈 內(nèi) 應(yīng) 棄 去 5 05 0 l l 每個圓圈加每個圓圈加1 1滴抗原混勻，將反應(yīng)板置旋轉(zhuǎn)器旋滴抗原混勻，將反應(yīng)板置旋轉(zhuǎn)器旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)4min4min，(180(1805)5)轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)/

21、min/min。觀察結(jié)果同定性試驗。觀察結(jié)果同定性試驗。 記錄出現(xiàn)記錄出現(xiàn)1+1+陽性反應(yīng)的最高血清稀釋倍數(shù)，即陽性反應(yīng)的最高血清稀釋倍數(shù)，即抗體效價?？贵w效價。 3. 3. 快速血漿反應(yīng)環(huán)狀卡片試驗（快速血漿反應(yīng)環(huán)狀卡片試驗（rapio plasma reagin card testrapio plasma reagin card test，RPR)RPR) 原理與原理與USRUSR試驗基本相同，其優(yōu)點是試驗基本相同，其優(yōu)點是RPRRPR抗原中加入了活性碳顆粒，抗原中加入了活性碳顆粒，試驗在特制的白色紙卡上進行，因此，容易判斷結(jié)果，肉眼即可觀察，試驗在特制的白色紙卡上進行，因此，容易判斷結(jié)果

22、，肉眼即可觀察，不需顯微鏡，血漿也可進行檢測。不需顯微鏡，血漿也可進行檢測。 (1) RPR(1) RPR定性試驗定性試驗吸取吸取5050l l血清或血漿放在白色卡片圈內(nèi)，并均血清或血漿放在白色卡片圈內(nèi)，并均勻涂布整個圈內(nèi)勻涂布整個圈內(nèi)( (每張卡片有每張卡片有1010個或個或1212個反應(yīng)圈個反應(yīng)圈) )。 將將RPRRPR抗原輕輕搖勻，用標(biāo)準(zhǔn)針頭吸取抗原，每抗原輕輕搖勻，用標(biāo)準(zhǔn)針頭吸取抗原，每個標(biāo)本中加個標(biāo)本中加1 1滴抗原。滴抗原。 將卡片置旋轉(zhuǎn)器旋轉(zhuǎn)將卡片置旋轉(zhuǎn)器旋轉(zhuǎn)8min8min，(100(1005)5)轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)/min/min。 立即在明亮光線下觀察結(jié)果。立即在明亮光線下觀察結(jié)果。

23、結(jié)果判定：結(jié)果判定： 陽性：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小至大的黑色絮狀物為陽性，不分其陽性的程度。陽性：圓圈內(nèi)出現(xiàn)小至大的黑色絮狀物為陽性，不分其陽性的程度。必 要 時 可 以 依 絮 狀 物 的 大 小 和 多 少 ， 用必 要 時 可 以 依 絮 狀 物 的 大 小 和 多 少 ， 用 “ + ”+ ” 號 表 示 。號 表 示 。 陰性：圓圈內(nèi)僅見碳顆粒集于中央一點或均勻分散為陰性。陰性：圓圈內(nèi)僅見碳顆粒集于中央一點或均勻分散為陰性。 (2) RPR(2) RPR定量試驗定量試驗在紙卡圓圈內(nèi)加入在紙卡圓圈內(nèi)加入5050l l等滲鹽水等滲鹽水( (一般做一般做6 6個滴度，超過者應(yīng)繼續(xù)稀個滴度，超過者應(yīng)繼

24、續(xù)稀釋釋) )。 吸吸5050l l血清或血漿系列稀釋血清或血漿系列稀釋(1:2(1:21:64)1:64)，最后所稀釋的圓圈內(nèi)應(yīng)棄，最后所稀釋的圓圈內(nèi)應(yīng)棄去去5050l l。 滴加滴加1 1滴抗原混勻，旋轉(zhuǎn)時間、速度、觀察結(jié)果同定性試驗。滴抗原混勻，旋轉(zhuǎn)時間、速度、觀察結(jié)果同定性試驗。 記錄出現(xiàn)記錄出現(xiàn)1+1+陽性反應(yīng)的最高血清稀釋倍數(shù)，即抗體效價。陽性反應(yīng)的最高血清稀釋倍數(shù)，即抗體效價。 4.4.甲苯胺紅不加熱血清試驗（甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUSTTRUST）【原理】【原理】 TRUSTTRUST試驗原理與試驗原理與RPRRPR試驗原理相同，差別在于試驗原理相同，差別在于TRUSTT

25、RUST抗原中加入抗原中加入甲苯胺紅染料顆粒代替碳顆粒作為指示物，使陽性結(jié)果出現(xiàn)紅色絮狀甲苯胺紅染料顆粒代替碳顆粒作為指示物，使陽性結(jié)果出現(xiàn)紅色絮狀凝集現(xiàn)象，陰性結(jié)果甲苯胺紅顆粒聚集于中央一點或均勻分散。凝集現(xiàn)象，陰性結(jié)果甲苯胺紅顆粒聚集于中央一點或均勻分散。 【方法】【方法】 TRUSTTRUST試驗方法同試驗方法同RPRRPR試驗。試驗。 【結(jié)果】【結(jié)果】 TRUSTTRUST試驗結(jié)果判斷同試驗結(jié)果判斷同RPRRPR試驗。試驗。 【注意事項】【注意事項】 1 1實驗環(huán)境適宜溫度為實驗環(huán)境適宜溫度為23232929；抗原應(yīng)保存；抗原應(yīng)保存在在44冰箱；應(yīng)防止凍結(jié)，以免破壞；實驗前抗原冰箱；應(yīng)

26、防止凍結(jié)，以免破壞；實驗前抗原恢復(fù)到室溫?；謴?fù)到室溫。 2 2校準(zhǔn)針頭，校準(zhǔn)針頭，RPRRPR、TRUSTTRUST等抗原等抗原( (用用9 9號針頭號針頭) )為為60601 1滴滴/ml/ml，USRUSR抗原抗原( (用用1212號針頭號針頭) )為為45451 1滴滴/m1/m1。一 般 試 劑 盒 內(nèi) 已 有 配 套 專 用 針 頭 。一 般 試 劑 盒 內(nèi) 已 有 配 套 專 用 針 頭 。 3 3 用 用 旋 轉(zhuǎn) 式 搖 床旋 轉(zhuǎn) 式 搖 床 ， 不 用 平 衡 式 振 蕩 儀 。， 不 用 平 衡 式 振 蕩 儀 。 4 4 試 驗 完 畢 ， 立 即 觀 察 結(jié) 果 。 試

27、驗 完 畢 ， 立 即 觀 察 結(jié) 果 。 5 5 為 防 假 陰 性 ， 試 驗 最 好 用 純 血 清 。 為 防 假 陰 性 ， 試 驗 最 好 用 純 血 清 。 6 6初篩試驗陽性特別是初診患者，應(yīng)做確證試驗以排除生物學(xué)假陽性。初篩試驗陽性特別是初診患者，應(yīng)做確證試驗以排除生物學(xué)假陽性。 7 7避免出現(xiàn)避免出現(xiàn)“前帶前帶”現(xiàn)象現(xiàn)象，對可疑者應(yīng)將血清稀釋后測定。，對可疑者應(yīng)將血清稀釋后測定。 8 8定性試驗陽性都必須做定量試驗，陽性者需了解抗體效價的高低，定性試驗陽性都必須做定量試驗，陽性者需了解抗體效價的高低，以便監(jiān)視疾病活動情況和觀察療效。定量試驗還可排除以便監(jiān)視疾病活動情況和觀察

28、療效。定量試驗還可排除 前帶現(xiàn)象前帶現(xiàn)象 。四種初試驗篩方法的比較四種初篩方法四種初篩方法 原理：相同原理：相同 目的：相同目的：相同 臨床意義：相同臨床意義：相同 不同：方法學(xué)上改良不同：方法學(xué)上改良四種初篩方法四種初篩方法原理：原理： 當(dāng)人體感染梅毒螺旋體當(dāng)人體感染梅毒螺旋體4 4周周1010周左右后，血清中可產(chǎn)生一定數(shù)量的周左右后，血清中可產(chǎn)生一定數(shù)量的抗類脂質(zhì)抗原的非特異性反應(yīng)素抗體抗類脂質(zhì)抗原的非特異性反應(yīng)素抗體( (主要是主要是IgMIgM和和IgG) IgG) 目的：目的： 檢測檢測 抗抗- -脂質(zhì)抗體脂質(zhì)抗體四種初篩方法四種初篩方法方法：方法：定性法定性法-意義局限意義局限定量

29、定量抗體的效價抗體的效價滴度滴度（倍比稀釋）（倍比稀釋）通過看化驗單可判別定量或定性通過看化驗單可判別定量或定性陽性陽性原倍、原倍、1 1：2/12/1：4/14/1：8/1:648/1:64梅毒初篩試驗定性定量梅毒初篩試驗定性定量 陰性陰性 原倍原倍 1 1：2 12 1：4 4梅毒血清學(xué)初篩實驗臨床意義梅毒血清學(xué)初篩實驗臨床意義1.1.輔助診斷梅毒輔助診斷梅毒 初篩實驗有較高的敏感性和特異性初篩實驗有較高的敏感性和特異性2.2.觀察滴度變化可用于療效觀察觀察滴度變化可用于療效觀察3.3.鑒別早期或晚期梅毒鑒別早期或晚期梅毒（前滴度（前滴度快后慢快后慢）4.4.鑒別先天性梅毒鑒別先天性梅毒（

30、被動出生（被動出生3-43-4月轉(zhuǎn)陰，不降反升）月轉(zhuǎn)陰，不降反升）5.5.發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)或再感染病人復(fù)發(fā)或再感染時發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)或再感染病人復(fù)發(fā)或再感染時 血清陽轉(zhuǎn)或滴度上升，定血清陽轉(zhuǎn)或滴度上升，定量試驗量試驗2 2次結(jié)果，滴度上升次結(jié)果，滴度上升2 2個稀釋度以上（個稀釋度以上（ 1:21:81:21:8以以上上 ）才可判斷為上升，要排除技術(shù)性因素，）才可判斷為上升，要排除技術(shù)性因素，相同的實驗方相同的實驗方法才能進行滴度比較法才能進行滴度比較6.6.梅毒的篩查試驗梅毒的篩查試驗注意事項注意事項假陽性假陽性 ： 1 1生理性生理性 孕婦孕婦0.4%0.4%2 2膠原性或自身免疫性病膠原性或自身免疫性病

31、 麻風(fēng)、系統(tǒng)紅斑狼瘡麻風(fēng)、系統(tǒng)紅斑狼瘡3 3某些急性發(fā)熱病某些急性發(fā)熱病 后后 風(fēng)疹、瘧疾、水痘、肺炎風(fēng)疹、瘧疾、水痘、肺炎4 4免疫接種免疫接種鑒別方法：鑒別方法：抗體效價抗體效價 特異性試驗證實特異性試驗證實 特異性梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗特異性梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗?zāi)康哪康? : 檢測特異性抗梅毒螺旋體抗體檢測特異性抗梅毒螺旋體抗體- -特異性強原理：原理：(FTA-ABS)(FTA-ABS) 完整的梅毒螺旋體作抗原完整的梅毒螺旋體作抗原TPHA/TPPATPHA/TPPA 超聲裂解梅毒螺旋體超聲裂解梅毒螺旋體提取抗原族致敏載提取抗原族致敏載體體致敏的載體致敏的載體抗梅毒抗體抗梅毒抗體

32、/ /免疫血清免疫血清適宜條件適宜條件下下肉眼可見凝集肉眼可見凝集特異性梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗特異性梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗方法：方法：1.1.梅毒螺旋體血球凝集試驗（梅毒螺旋體血球凝集試驗（TPHATPHA）2.2.梅毒螺旋體明膠凝集試驗（梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPATPPA） 快速、簡便、準(zhǔn)確而青睞快速、簡便、準(zhǔn)確而青睞3.3.熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(FTA-ABS)(FTA-ABS) WHO WHO推薦金標(biāo)準(zhǔn)推薦金標(biāo)準(zhǔn)特異性梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗特異性梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗4. 4. 梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗 T

33、P-ELISATP-ELISA： TP-AbTP-Ab是一種通過基因工程經(jīng)利用梅毒螺旋是一種通過基因工程經(jīng)利用梅毒螺旋體多肽抗原（體多肽抗原（KD47KD47、 KD42/KD15KD42/KD15）包被于反應(yīng)板）包被于反應(yīng)板的試驗。它用雙抗原夾心法，同時檢測的試驗。它用雙抗原夾心法，同時檢測IgM/IgGIgM/IgG抗抗體，故可用于早期診斷，并避免了單片段抗原混體，故可用于早期診斷，并避免了單片段抗原混合干擾合干擾 5.PCR5.PCR方法（略）方法（略）用于診斷梅毒試驗方法選擇用于診斷梅毒試驗方法選擇要求要求準(zhǔn)確率（特異性） TPHATPHA在各期梅毒的特異性為在各期梅毒的特異性為98%

34、98%99%99%，敏感性敏感性 治療前一期：治療前一期：69% 69% 90%90%；二期；二期100%100%；潛；潛伏期伏期97%97%100%100%；晚期；晚期94%94%1.1.梅毒螺旋體血球凝集試驗（梅毒螺旋體血球凝集試驗（TPHATPHA）2.2.梅毒螺旋體明膠凝集試驗（梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPATPPA）敏感性強，特異度高，現(xiàn)為梅毒診斷的金標(biāo)準(zhǔn)敏感性強，特異度高，現(xiàn)為梅毒診斷的金標(biāo)準(zhǔn) 梅毒特異性試驗的臨床意義梅毒特異性試驗的臨床意義1.1.診斷梅毒診斷梅毒 敏感性高、特異性強，是梅毒較好的確證實驗敏感性高、特異性強，是梅毒較好的確證實驗2.2.早期診斷梅毒（早期診斷梅毒

35、（19S 19S IgMIgM ） 一期梅毒特異性試驗比非特異性試驗早一周出現(xiàn)，梅毒一期梅毒特異性試驗比非特異性試驗早一周出現(xiàn)，梅毒感染后第二周就可從血清中測出抗體感染后第二周就可從血清中測出抗體IgMIgM，而，而IgGIgG要在感染要在感染后后4 4周方可測出周方可測出梅毒特異性試驗的注意事項梅毒特異性試驗的注意事項1.1.定性試驗定性試驗 一般定性試驗陽性即可確診，定性抗體效價一般定性試驗陽性即可確診，定性抗體效價1 1：80802.2.不能作療效觀察指標(biāo)不能作療效觀察指標(biāo) 由于記憶細胞抗體復(fù)制能力強，特異性敏感性高，即使經(jīng)由于記憶細胞抗體復(fù)制能力強，特異性敏感性高，即使經(jīng) 抗梅治療也終

36、生陽性（陽性現(xiàn)癥或既往）抗梅治療也終生陽性（陽性現(xiàn)癥或既往）3.1%3.1%生物學(xué)假陽性存在生物學(xué)假陽性存在 麻風(fēng)、傳單（嗜異性抗體）麻風(fēng)、傳單（嗜異性抗體）TPPATPPA假陽性，紅斑狼瘡假陽性，紅斑狼瘡 FA-ABS FA-ABS呈假陽性呈假陽性不主張叫確證試驗不主張叫確證試驗梅毒血清學(xué)試驗選擇梅毒血清學(xué)試驗選擇一、用于篩查：一、用于篩查：首選首選-TP-ELISA-TP-ELISA其次其次-初篩試驗初篩試驗二、由于診斷梅毒（首次）：必須二、由于診斷梅毒（首次）：必須1.1.非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗/ /梅毒初篩試驗梅毒初篩試驗 有效價有效價2.2.梅毒螺旋體抗

37、原血清學(xué)試驗梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗/TPPA/TPHA/TPPA/TPHA梅毒血清學(xué)試驗選擇梅毒血清學(xué)試驗選擇三、用于療效觀察、治療后隨訪：三、用于療效觀察、治療后隨訪：非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗/ /梅毒初篩試驗梅毒初篩試驗 有效價有效價一張完善的檢驗單報告部分：一張完善的檢驗單報告部分： 結(jié)果：結(jié)果： 梅毒血清學(xué)初篩試驗梅毒血清學(xué)初篩試驗TRUST 1:16TRUST 1:16陽性陽性（梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗）（梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗）TPPA TPPA 陽性陽性 簽名簽名 XXX XXX 日期日期XXXXXXXXXX 其他實驗其他實驗免疫印跡法：免疫印跡法

38、： 是一種診斷梅毒感染的特異性實驗，是一種診斷梅毒感染的特異性實驗，膠體金免疫結(jié)合技術(shù)（膠體金免疫結(jié)合技術(shù)（TPTPAbAb）：）： 是在酶免結(jié)合技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的是在酶免結(jié)合技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的, , 具有簡單、快速、不需任何儀具有簡單、快速、不需任何儀器的特點。器的特點。 PCRPCR試驗：試驗： 多聚酶鏈反應(yīng)檢測梅毒螺旋體多聚酶鏈反應(yīng)檢測梅毒螺旋體DNA DNA 三、淋病三、淋病(gonorrhea)(gonorrhea)的實驗室診斷的實驗室診斷淋?。菏俏覈壳皺z測八種主要性病中發(fā)病人數(shù)最淋病：是我國目前檢測八種主要性病中發(fā)病人數(shù)最 多的一種多的一種病因：淋病奈瑟菌病因：淋病奈瑟菌親和

39、性：人類是唯一宿主，嗜人類泌尿生殖道的柱親和性：人類是唯一宿主，嗜人類泌尿生殖道的柱 狀上皮細胞狀上皮細胞特點：局部化膿性感染特點：局部化膿性感染 細菌和毒素細菌和毒素粘膜壞死、脫落、神粘膜壞死、脫落、神 經(jīng)末梢暴露、炎性浸潤、組織液滲出經(jīng)末梢暴露、炎性浸潤、組織液滲出所致疾病所致疾病 主要是泌尿生殖道局部化膿性感染主要是泌尿生殖道局部化膿性感染-淋病淋病 不及時治療可入侵泌尿生殖道其他部位不及時治療可入侵泌尿生殖道其他部位附睪、附睪、前列腺炎、前列腺炎、輸卵管炎及盆腔炎輸卵管炎及盆腔炎 甚至經(jīng)血液傳播全身其他部位淋菌性關(guān)節(jié)炎、心甚至經(jīng)血液傳播全身其他部位淋菌性關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎及腦膜炎等內(nèi)膜炎

40、及腦膜炎等淋菌性尿道炎淋菌性尿道炎診斷淋病的實驗室檢查診斷淋病的實驗室檢查男性患者：男性患者：急性期典型病例急性期典型病例-尿頻、尿急、尿痛，局部流膿尿頻、尿急、尿痛，局部流膿首選：首選： 試驗方法試驗方法-分泌物涂片革蘭染色分泌物涂片革蘭染色 試驗?zāi)康脑囼災(zāi)康?找革蘭陰性雙球菌找革蘭陰性雙球菌女性女性可拒絕用此法可拒絕用此法分泌物涂片革蘭染色分泌物涂片革蘭染色原理：原理：1 1急性患者尿道有大量膿性分泌物急性患者尿道有大量膿性分泌物 2 2淋球菌呈革蘭陰性反應(yīng)，具特殊形態(tài)淋球菌呈革蘭陰性反應(yīng)，具特殊形態(tài) 3 3有些膿細胞內(nèi)可有許多淋球菌有些膿細胞內(nèi)可有許多淋球菌臨床意義：臨床意義：1.1.鏡

41、檢結(jié)果陽性可初步診斷淋病鏡檢結(jié)果陽性可初步診斷淋病2.2.用于新生兒、嬰兒膿漏眼診斷用于新生兒、嬰兒膿漏眼診斷 鏡檢白細胞中吞噬有陰性雙球菌者為陽性新生兒淋菌性結(jié)膜炎新生兒淋菌性結(jié)膜炎 常常在出生常常在出生2323天后雙眼出現(xiàn)膿性分天后雙眼出現(xiàn)膿性分泌物，劇烈腫脹發(fā)紅，不能睜眼，如泌物，劇烈腫脹發(fā)紅，不能睜眼，如不及時治療還可侵犯到角膜，如角膜不及時治療還可侵犯到角膜，如角膜發(fā)生穿孔會導(dǎo)致失明發(fā)生穿孔會導(dǎo)致失明 診斷淋病的實驗室檢查診斷淋病的實驗室檢查女性患者及癥狀不典型的男性患者：女性患者及癥狀不典型的男性患者：經(jīng)典方法：經(jīng)典方法： 淋球菌分離培養(yǎng)淋球菌分離培養(yǎng)原理：原理：1 1標(biāo)本中有淋球

42、菌標(biāo)本中有淋球菌 2 2合適的培養(yǎng)基（合適的培養(yǎng)基（T-MT-M選擇性培養(yǎng)基）選擇性培養(yǎng)基） 3 3生長呈特征性菌落（生長呈特征性菌落（24H24H36H36H） 4 4菌苔氧化酶呈陽性，糖發(fā)酵試驗符合菌苔氧化酶呈陽性，糖發(fā)酵試驗符合 5 5菌苔涂片革蘭染色呈陰性，菌體形態(tài)菌苔涂片革蘭染色呈陰性，菌體形態(tài) 具特殊性具特殊性淋球菌培養(yǎng)淋球菌培養(yǎng)臨床意義臨床意義1.1.診斷淋?。ń饦?biāo)準(zhǔn)）診斷淋?。ń饦?biāo)準(zhǔn)）2.2.適用于男性女性標(biāo)本，適用于男性女性標(biāo)本，WHOWHO推薦的篩查淋病的唯推薦的篩查淋病的唯一方法一方法3.3.判斷病人治愈判斷病人治愈依據(jù)只可選擇依據(jù)只可選擇此方法此方法4.4.-內(nèi)酰胺酶內(nèi)

43、酰胺酶陽性：表明該菌陽性：表明該菌對對PG PG ，氨芐西，氨芐西林和阿莫西林林和阿莫西林耐藥耐藥 淋病病人實驗室診斷步驟淋病病人實驗室診斷步驟淋菌感染 男性患者 女性患者尿頻、尿急、尿道分泌物 膿性宮頸分泌物/無癥狀 膿性分泌物涂片G-染色 拒絕做 G-雙球菌細胞內(nèi) 取宮頸分泌物 初步診斷 MTM培養(yǎng)基培養(yǎng) 治療 典型菌落形態(tài) G-雙球菌、OX(+)、糖發(fā)酵試驗 確診關(guān)于取材關(guān)于取材正確采集標(biāo)本是試驗結(jié)果成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)正確采集標(biāo)本是試驗結(jié)果成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)涂片取材：涂片取材： 清潔尿道口清潔尿道口 手指由后向前擠出膿液手指由后向前擠出膿液 輕輕涂布玻片上輕輕涂布玻片上 排尿前或排尿后排尿前或排

44、尿后2 23 3小時采集小時采集培養(yǎng)標(biāo)本采集培養(yǎng)標(biāo)本采集關(guān)鍵是深度一定要夠關(guān)鍵是深度一定要夠男性取材：拭子深入尿道男性取材：拭子深入尿道2cm-4cm2cm-4cm處并轉(zhuǎn)動處并轉(zhuǎn)動 蘸取少量粘膜蘸取少量粘膜女性取材：女性取材：子插入宮頸子插入宮頸1 12 2厘米處稍轉(zhuǎn)動并停留厘米處稍轉(zhuǎn)動并停留1010秒秒3030秒，以獲得上皮秒，以獲得上皮細胞，取出棉拭子時細胞，取出棉拭子時不要碰到陰道壁避免受陰道分泌物污染不要碰到陰道壁避免受陰道分泌物污染其他相關(guān)試驗其他相關(guān)試驗1.1.直接免疫銀光染色直接免疫銀光染色2.SPA2.SPA協(xié)同實驗協(xié)同實驗3.3.酶反應(yīng)酶反應(yīng)4.4.白細胞脂酶快速法白細胞脂酶

45、快速法5.5.固相酶免疫試驗固相酶免疫試驗小結(jié)小結(jié)診斷淋病診斷淋病1 1泌尿生殖道泌尿生殖道分泌物涂片革蘭染色分泌物涂片革蘭染色找陰性雙球菌找陰性雙球菌2 2泌尿生殖道分泌物泌尿生殖道分泌物淋球菌分離培養(yǎng)淋球菌分離培養(yǎng)3 3其他方法不能作為常規(guī)診斷應(yīng)用其他方法不能作為常規(guī)診斷應(yīng)用注意標(biāo)本采集注意標(biāo)本采集四、非淋菌性尿道炎四、非淋菌性尿道炎-NGU-NGU臨床：尿道炎表現(xiàn)，分泌物查不到淋球菌臨床：尿道炎表現(xiàn)，分泌物查不到淋球菌臨床合并癥：臨床合并癥： 附睪炎、輸卵管炎、宮外孕、不孕癥等附睪炎、輸卵管炎、宮外孕、不孕癥等 威脅人們健康威脅人們健康流行病學(xué)：流行病學(xué)： 西方國家自西方國家自6060年

46、代發(fā)病年代發(fā)病超過淋病躍超過淋病躍 居居STDSTD首位，國內(nèi)發(fā)病不斷增加已占首位，國內(nèi)發(fā)病不斷增加已占STDSTD的的 第三位第三位非淋菌性尿道炎非淋菌性尿道炎-NGU-NGU病因：病因： 沙眼衣原體沙眼衣原體CTCT（D DK K）40%40%50%50% 支原體支原體（UUUU、MHMH）20%20%30%30% 陰道滴蟲、白念和單皰病毒陰道滴蟲、白念和單皰病毒10%10%20%20%NGU-CTNGU-CT檢測檢測生活史特性：嚴(yán)格細胞內(nèi)寄生生活史特性：嚴(yán)格細胞內(nèi)寄生親和性：親和性： 泌尿生殖道柱狀上皮細胞泌尿生殖道柱狀上皮細胞血清學(xué)試驗對診斷衣原體感染價值有限血清學(xué)試驗對診斷衣原體感染

47、價值有限1.1.迄今止尚無哪一種試驗完全適合所有種類的迄今止尚無哪一種試驗完全適合所有種類的CTCT的檢測的檢測2.CT2.CT感染輕微，潛伏期長，影響急性期采血時間配對血清難感染輕微，潛伏期長，影響急性期采血時間配對血清難 以得到以得到3.3.血清抗體持續(xù)時間長，單一血清標(biāo)本只能顯示曾經(jīng)感以前血清抗體持續(xù)時間長，單一血清標(biāo)本只能顯示曾經(jīng)感以前染過染過CTCT4.4.雙份血清效價比有雙份血清效價比有4 4倍增高才有臨床意義倍增高才有臨床意義 臨床標(biāo)本直接檢查臨床標(biāo)本直接檢查- -目前最合適的方法目前最合適的方法NGU-CTNGU-CT檢測方法檢測方法1.1.細胞涂片的吉姆薩染色細胞涂片的吉姆薩

48、染色- -發(fā)現(xiàn)一定數(shù)量的包涵體（發(fā)現(xiàn)一定數(shù)量的包涵體（原體呈紫色，包原體呈紫色，包涵體呈金黃色涵體呈金黃色）不適用于不適用于NGUNGUNGU-CTNGU-CT檢測方法檢測方法2.2.涂片碘染色法：涂片碘染色法：包涵體中有糖原遇碘呈棕色敏感性包涵體中有糖原遇碘呈棕色敏感性 差，不適用于差，不適用于NGUNGU3.3.直接免疫熒光法染色：直接免疫熒光法染色：敏感性敏感性93%93%，特異性，特異性9696與與 培養(yǎng)并列為金標(biāo)準(zhǔn)對試劑，顯微鏡質(zhì)量要求培養(yǎng)并列為金標(biāo)準(zhǔn)對試劑，顯微鏡質(zhì)量要求很高，很高， 操作人員技術(shù)要求高，價格昂貴操作人員技術(shù)要求高，價格昂貴4.4.衣原體酶免疫測定衣原體酶免疫測定E

49、IAEIA：抗：抗CTCT單抗包被固相載體單抗包被固相載體+ + 標(biāo)本再標(biāo)本再+ +多克隆抗體多克隆抗體+IgG+IgG酶標(biāo)抗體酶標(biāo)抗體酶標(biāo)儀酶標(biāo)儀檢測檢測 適用于批量篩查適用于批量篩查NGUNGU衣原體感染衣原體感染5.5.衣原體分離培養(yǎng)：衣原體分離培養(yǎng)：McCoyMcCoy、HelaHela、 BHK-21BHK-21細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)NGU-CTNGU-CT檢測方法檢測方法6.PCR6.PCR7.“7.“立明立明“（Clearview)Clearview)衣原體快速免疫測定法：衣原體快速免疫測定法：原理：沙眼衣原體檢測試劑盒采用高特異性的抗體原理：沙眼衣原體檢測試劑盒采用高特異性的抗體 抗

50、原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)來定性檢抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)來定性檢測臨測臨 床標(biāo)本中是否含有沙眼衣原體抗原床標(biāo)本中是否含有沙眼衣原體抗原。臨床意義：臨床意義：NGUNGU衣原體感染衣原體感染 診斷參考診斷參考該試驗是目前診斷該試驗是目前診斷NGUNGU衣原體感染普遍采用的方法衣原體感染普遍采用的方法注意事項注意事項1 1試驗敏感性試驗敏感性87%,87%,特異性特異性98.8%98.8%，但標(biāo)本中需要有，但標(biāo)本中需要有 一定的抗原量，量低于敏感性可出現(xiàn)假陰性；一定的抗原量，量低于敏感性可出現(xiàn)假陰性；2.2.檢測試劑盒僅證明標(biāo)本中存在沙眼衣原體抗原，檢測試劑盒僅證明標(biāo)本中存在沙眼衣原體抗原， 不

51、能區(qū)別是衣原體感染還是攜帶者，也不能區(qū)不能區(qū)別是衣原體感染還是攜帶者，也不能區(qū)別別 衣原體死活，不能作為判愈試驗衣原體死活，不能作為判愈試驗；3.3.標(biāo)本采集是關(guān)鍵標(biāo)本采集是關(guān)鍵NGU-NGU-支原體感染支原體感染非淋支原體感染：非淋支原體感染：UUUU為主，為主，MHMH次之次之我國報道我國報道7 7個地區(qū)健康人攜帶率個地區(qū)健康人攜帶率解脲支原體（解脲支原體（UUUU）占）占10.59%10.59%人型支原體（人型支原體（MHMH）占）占5.34%5.34%正常菌群的組成部分正常菌群的組成部分支原體檢測方法支原體檢測方法1.1.分離培養(yǎng)分離培養(yǎng)2.2.聚合酶鏈反應(yīng)聚合酶鏈反應(yīng)-PCR/DNA

52、-PCR/DNA探針技術(shù)診斷探針技術(shù)診斷3.3.血清學(xué)檢測血清學(xué)檢測：代謝抑制試驗、：代謝抑制試驗、ELISAELISA、間接免疫熒光、間接免疫熒光 都僅用于科研和流行病學(xué)調(diào)查上，不適于診都僅用于科研和流行病學(xué)調(diào)查上，不適于診斷用斷用支原體培養(yǎng)支原體培養(yǎng)固體培養(yǎng)基：生長耗時固體培養(yǎng)基：生長耗時5 5天左右天左右液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基- -原理：原理：UUUU尿素尿素氨氨 PH PH 含酚紅培養(yǎng)基由黃含酚紅培養(yǎng)基由黃紅紅MHMH精氨酸精氨酸氨氨 PH PH 含酚紅培養(yǎng)基由黃含酚紅培養(yǎng)基由黃紅紅支原體培養(yǎng)支原體培養(yǎng)培養(yǎng)結(jié)果：陽性不一定有臨床意義培養(yǎng)結(jié)果：陽性不一定有臨床意義量化量化uuuu、mh 1

53、0mh 104 4 ccu/ml ccu/ml 具有臨床治療意義具有臨床治療意義 臨床意義：臨床意義：1.1.培養(yǎng)是檢測支原體最好的方法培養(yǎng)是檢測支原體最好的方法2.2.臨床有尿道炎癥狀、量其他檢查陰性時，培養(yǎng)陽臨床有尿道炎癥狀、量其他檢查陰性時，培養(yǎng)陽 性有治療意義性有治療意義量量應(yīng)重視支原體感染治療應(yīng)重視支原體感染治療 小結(jié)小結(jié)目前應(yīng)用較多診斷的非淋的試驗?zāi)壳皯?yīng)用較多診斷的非淋的試驗1.1.支原體培養(yǎng)加藥敏，注意量支原體培養(yǎng)加藥敏，注意量2.2.免疫層析金標(biāo)免疫層析金標(biāo)/ /硒標(biāo)衣原體檢測硒標(biāo)衣原體檢測非淋檢測標(biāo)本采集是關(guān)鍵非淋檢測標(biāo)本采集是關(guān)鍵五、生殖器皰疹實驗室檢查五、生殖器皰疹實驗室

54、檢查病因：單純皰疹病毒病因：單純皰疹病毒HSVHSV SHV-1SHV-1主要感染上半身部位主要感染上半身部位（1515歲以下多）歲以下多） SHV-2SHV-2主要感染腰以下部位主要感染腰以下部位（多見于青春期后）（多見于青春期后）生殖器皰疹檢查方法生殖器皰疹檢查方法病原體檢查：病原體檢查：1.1.病毒體外細胞培養(yǎng)和鑒定：病毒體外細胞培養(yǎng)和鑒定： 技術(shù)條件要求較高，不宜用于臨床技術(shù)條件要求較高，不宜用于臨床2.2.單純皰疹病毒抗原檢查單純皰疹病毒抗原檢查( (1 1）ELISA ELISA ( (3 3）DNADNA雜交雜交( (2 2) )IFA IFA ( (4 4）PCRPCR PCR

55、 PCR和和DNADNA不能單獨作為確診指標(biāo)不能單獨作為確診指標(biāo) 病原學(xué)檢查病原學(xué)檢查ELISAELISA有敏感性高，特異性強，準(zhǔn)確有敏感性高，特異性強，準(zhǔn)確率高應(yīng)用面廣，操作簡便等優(yōu)點率高應(yīng)用面廣，操作簡便等優(yōu)點生殖器皰疹檢查方法生殖器皰疹檢查方法血清學(xué)檢查血清學(xué)檢查- -抗體檢測：抗體檢測：所有用于檢測抗原的方法經(jīng)適當(dāng)改良后，均可用所有用于檢測抗原的方法經(jīng)適當(dāng)改良后，均可用于抗體檢查于抗體檢查SHVSHV感染個體中的不均一性和不穩(wěn)定性成年人群感染個體中的不均一性和不穩(wěn)定性成年人群中有很高的中有很高的HSV HSV 抗體檢出率，大多獲自隱性感染，抗體檢出率，大多獲自隱性感染，且抗體的存在尚不

56、能完全保護機體免受皰疹病毒且抗體的存在尚不能完全保護機體免受皰疹病毒的重復(fù)感染的重復(fù)感染; HSV ; HSV 抗體檢測陽性對臨床診斷幫助抗體檢測陽性對臨床診斷幫助不大不大; ;一般一般HSV HSV 抗體檢測抗體檢測對新生兒、嬰幼兒感染診斷有一定意義對新生兒、嬰幼兒感染診斷有一定意義六、尖銳濕疣實驗室檢查六、尖銳濕疣實驗室檢查病因：人類乳頭瘤病毒病因：人類乳頭瘤病毒-HPV-HPV發(fā)病率：持續(xù)增長，我國急劇上升，已占發(fā)病率：持續(xù)增長，我國急劇上升，已占 各種性病第二位各種性病第二位六、尖銳濕疣實驗室檢查六、尖銳濕疣實驗室檢查 尖銳濕疣檢測：尖銳濕疣檢測：典型的尖銳濕疣通常不需作實驗室檢測便可

57、作出診斷典型的尖銳濕疣通常不需作實驗室檢測便可作出診斷臨床醫(yī)生觀察為主臨床醫(yī)生觀察為主醋酸白試驗有助于檢查不明顯的疣醋酸白試驗有助于檢查不明顯的疣尖銳濕疣尖銳濕疣尖銳濕疣實驗室檢查方法尖銳濕疣實驗室檢查方法1.1.細胞學(xué)檢查細胞學(xué)檢查 ： 病理皮損活檢病理皮損活檢: :發(fā)現(xiàn)有發(fā)現(xiàn)有HPVHPV感染的特征性凹空細胞感染的特征性凹空細胞的組織病理變化特點的組織病理變化特點.(.(較可靠的辦法較可靠的辦法) )2. 2. 組織病理：組織病理：基本上為角化不完整，棘層深層肥基本上為角化不完整，棘層深層肥厚，奶頭瘤樣增生。粒層和棘層上部細胞有顯著厚，奶頭瘤樣增生。粒層和棘層上部細胞有顯著的空泡形成。棘細

58、胞基底細胞有特別數(shù)量之核皴的空泡形成。棘細胞基底細胞有特別數(shù)量之核皴裂，很像癌變，但細胞排裂規(guī)則，且增生上皮和裂，很像癌變，但細胞排裂規(guī)則，且增生上皮和真皮之間規(guī)模清楚。真皮之間規(guī)模清楚。尖銳濕疣實驗室檢查方法尖銳濕疣實驗室檢查方法3.3.核酸雜交試驗核酸雜交試驗-PCR-PCR 皮損活檢中用抗原或核酸檢測顯示有皮損活檢中用抗原或核酸檢測顯示有HPVHPV感染感染. .常見的是常見的是HPPV6.11HPPV6.11型型. . 陽性率可達陽性率可達80%80%左右左右. .當(dāng)真性和假性尖銳濕疣鑒別困難時當(dāng)真性和假性尖銳濕疣鑒別困難時. .可用可用HPV-DNAHPV-DNA原位分子雜交進行鑒別

59、原位分子雜交進行鑒別. .此法是目前一種敏感性和特異性很高的鑒別手此法是目前一種敏感性和特異性很高的鑒別手段段. .陽性率可高達陽性率可高達90%90%以上以上. .尖銳濕疣實驗室檢查方法尖銳濕疣實驗室檢查方法 在操作中因引物不純易導(dǎo)致假陽性在操作中因引物不純易導(dǎo)致假陽性但但PCRPCR檢測檢測HPVHPV感染具有快速、方便、高度感染具有快速、方便、高度敏感和特異的優(yōu)點在診斷敏感和特異的優(yōu)點在診斷HPVHPV感染和癌癥研感染和癌癥研究中有著光明的前景究中有著光明的前景七、軟下疳實驗室檢查七、軟下疳實驗室檢查病因：杜克雷嗜血桿菌病因：杜克雷嗜血桿菌診斷標(biāo)準(zhǔn)診斷標(biāo)準(zhǔn)1.1.有不潔性交史有不潔性交史

60、2.2.會陰部發(fā)生于會陰部發(fā)生于1-21-2個潰瘍個潰瘍, ,周圍可發(fā)生多個衛(wèi)星狀小潰瘍周圍可發(fā)生多個衛(wèi)星狀小潰瘍, ,疼痛明顯疼痛明顯, ,基基底軟底軟, ,上有膿性分泌物上有膿性分泌物, ,腹股溝淋巴腫大、觸痛、化膿腹股溝淋巴腫大、觸痛、化膿3.3.梅毒血清學(xué)檢查陰性梅毒血清學(xué)檢查陰性, ,涂片或培養(yǎng)可檢測出杜克雷嗜血桿菌涂片或培養(yǎng)可檢測出杜克雷嗜血桿菌軟下疳實驗室檢查軟下疳實驗室檢查疾病特征：疾病特征：1.1.潛伏期潛伏期1-301-30天，發(fā)病快進展快感染道潰瘍天，發(fā)病快進展快感染道潰瘍4 46 6天天2. 2. 初起一個或數(shù)個言行丘疹或結(jié)節(jié)周圍紅斑初起一個或數(shù)個言行丘疹或結(jié)節(jié)周圍紅斑