2011-科研方法-2

1、五、臨床前安全性評價的范圍和方法（一）急性毒性實驗 （1）概念：24小時之內(nèi)單次或多次給藥 后，7-14天動物的毒性反應(yīng)及其死亡 情況。7/6/20221（2）目的毒性劑量與范圍表現(xiàn)及是否可逆定位靶器官解毒方法7/6/20222（3）觀察目標(biāo)定性研究因-果關(guān)系是否存在定量研究量-效關(guān)系是否明確7/6/20223（4）關(guān)于LD50實驗動物：大鼠、小鼠、雌雄各半組距：5-6個分組觀察重點：時間、癥狀、給藥當(dāng)天變化（尤其給藥4小時內(nèi)為重點時間段，連續(xù)觀察7-14天。）7/6/20224（二）長期毒性試驗（1）概念： (2）周期及條件、指標(biāo)（3）問題7/6/202251、周期長： 臨床用藥時間 長毒時

2、間 1W內(nèi) 免 2W內(nèi) 4W 2-4W 13W 4W rat 26w；dog 36w7/6/202262、是否進(jìn)行長毒試驗：療程；藥物組成3、劑量：高、中、低4、指標(biāo)：血液學(xué)、生化、免疫、臟器重量；重要器官病理；體重；攝食量；活動量等。7/6/20227 5、存在問題 缺乏預(yù)見性； 樣本不足； 指標(biāo)變化未進(jìn)行分類處理； 未達(dá)到規(guī)定動物標(biāo)準(zhǔn)； 儀器誤差； 時間不足。7/6/202286、動物數(shù)量 大鼠：每組不少于20只，時間12周以上者，可以增至3040只； 狗：每組不少于6只。7、給藥方法： 應(yīng)該和臨床擬采用的給藥方法盡量保持一致。7/6/20229中藥毒性研究必須注意的幾個問題1.關(guān)于中藥毒

3、性的相對性。中藥是借助于藥物的偏性糾正疾病的偏性，辨證準(zhǔn)確，效如桴鼓。如果辨證不準(zhǔn)確，就會產(chǎn)生毒副作用。如：小柴胡湯應(yīng)用引起間質(zhì)性肺炎的案例。三氧化二砷對正常人使用反應(yīng)為毒性，而用于急性粒細(xì)胞白血病卻發(fā)揮了很好的治療作用，并未發(fā)生毒副反應(yīng)。7/6/202210 2.辨證看待古代文獻(xiàn)毒性的記載。如七情和合中相反的涵義為配伍后能增加毒性，但并不意味著絕對不能配伍。金匱要略中的“甘遂半夏湯”以甘遂與甘草同用；千金翼方腎瀝散中烏頭、白蘞同用；儒門事親中通氣丸海藻、甘草同用；經(jīng)過長期臨床使用并未見有毒性反應(yīng)的報道。7/6/202211合理質(zhì)疑：有研究認(rèn)為“十八反”是古人在臨床用藥中發(fā)現(xiàn)的問題，病人處于病

4、理生理狀態(tài)，因此十八反應(yīng)限定于專屬的病理生理條件下，廣泛地增加毒性，未必是十八反的普遍規(guī)律。病理生理條件下某些十八反組可顯示毒性增強(qiáng)，死亡率升高或某些不利于治療的情況。7/6/202212課堂討論部分3.關(guān)于中藥毒性研究的復(fù)雜性你是 如何認(rèn)識的？7/6/202213 要點歸納：其復(fù)雜性主要在于中藥多存在制劑粗、用量大、毒性小、起效慢、療程長、靶點多、給藥途徑以口服為主等，給中藥毒理學(xué)的研究帶來了困難。7/6/202214制劑較粗：與對照組在顏色、氣味、用藥量、給藥途徑等方面存在很大的差異，影響了各實驗組間的齊同性；藥量大：超過實驗動物的胃容量；毒性較低：甚至檢測不出半數(shù)致死量等數(shù)據(jù)；用藥療程長：短期內(nèi)可能無毒性反應(yīng)，有毒性蓄積的傾向；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)均不夠嚴(yán)格和科學(xué)，從原藥材到制劑的不同標(biāo)準(zhǔn)使實驗重復(fù)性受到很大的影