發(fā)光說明書貧血維生素b

1、用途：用免疫學(xué)方法定量測定人血清或血漿中的的含量。電化學(xué)發(fā)光免疫測定試劑，適用于概述:Elecsys2010和E170免疫測定分析儀。膳食中缺乏肉類和菌類產(chǎn)品引起的缺乏可導(dǎo)致營養(yǎng)性和巨細胞性貧血。吸收不良是該缺乏癥的主要原因,見于胰腺功能低下、胃萎縮或胃切除術(shù)、腸損壞、腸內(nèi)結(jié)合蛋白(內(nèi)因子)損耗、體內(nèi)產(chǎn)生了針對內(nèi)因子的自身抗體或相關(guān)的等等。為機體維持正常代謝、DNA缺乏得不到及時糾正可導(dǎo)致和紅細胞再生所必需。細胞貧血及不可逆性中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷。維生素B12或葉酸測定對查明、葉酸缺乏有意義.價值,尤其對細胞貧血的鑒別有1961年首次了的放射免疫測定法,以后建立的方法大多采用57Co標(biāo)記的化鈷胺素

2、示蹤劑和內(nèi)因子作為的結(jié)合物.各種商品化檢測方法在游離物和結(jié)合物的分離技術(shù)上各不相同，標(biāo)本預(yù)處理方法也不盡相同。為消除內(nèi)源性血清中對化鈷胺素的結(jié)合蛋白質(zhì)(包括R-蛋白質(zhì))以及針對內(nèi)因子的抗體造成的影響,需煮沸或堿性 條件處理標(biāo)本,和破壞結(jié)合的蛋白質(zhì)。1970年代的后期,放射免疫測定法采用血清結(jié)合蛋白質(zhì)或部分純化的內(nèi)因子來檢測水平,檢測值高于微生物學(xué)方法。這是由存在的血清結(jié)合蛋白或R-蛋白造成的。與內(nèi)因子相比，R-蛋白的特異性較差，除外，的類似物也被檢測出來。因此，后來均使用高純度的內(nèi)因子。Elecsys測定法采用競爭法原理和特異的內(nèi)因子。標(biāo)本中的與生物素化的共同競爭釕標(biāo)記的內(nèi)因子上的結(jié)合位點。原

3、理：采用競爭法原理，整個過程27分鐘完成。 第1步：15l標(biāo)本與預(yù)處理試劑1和預(yù)處理試劑2混勻，結(jié)合的被內(nèi)源性內(nèi)因子。 第2步：將預(yù)處理標(biāo)本與釕標(biāo)記的內(nèi)因子混勻，形成-結(jié)合蛋白復(fù)合物，其數(shù)量取決于標(biāo)本中待測物的濃度。 第3步：加入鏈霉親和素的微粒和生物素化的，后者與釕標(biāo)記的內(nèi)因子上仍未占據(jù)的位點結(jié)合，形成釕標(biāo)記的內(nèi)因子-生物素標(biāo)記的復(fù)合物。此復(fù)合物通過生物素與鏈霉親和素間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。 反應(yīng)混和液吸到測量池中，微粒通過磁鐵吸附到電極上，未結(jié)合的物質(zhì)被液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通過光電倍增管進定。檢測結(jié)果由機器自動從標(biāo)準曲線上查出。此曲線由儀器通過2點定標(biāo)校正，由從試劑條形碼掃描入

4、儀器的原版標(biāo)準曲線而得。試劑：PT1：預(yù)處理試劑1（）1瓶，4ml，二硫蘇糖醇1.028g/l,含穩(wěn)定劑,5.5PT2：預(yù)處理試劑2（灰蓋）1瓶，4ml，氫氧化鈉36g/l,化鈉2.205g/lM：鏈霉親和素的微粒（透明瓶蓋），1瓶，6.5ml。粒子濃度0.72mg/ml，生物素結(jié)合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐劑。R1：釕標(biāo)記的內(nèi)因子（灰蓋），1瓶，10ml。濃度4g/l，二化鈷胺酰胺15g/l,含穩(wěn)定劑,人血清白蛋白,磷酸緩沖液， 5.5。含防腐劑。R2：生物素化的（黑蓋），1瓶，8.5ml，濃度 25g/l，生物素3g/l,磷酸緩沖液，7.0。含防腐劑。儲存和穩(wěn)定性：存放在2

5、8 度，切莫倒置。未開封，可穩(wěn)定至標(biāo)明的保質(zhì)期。開封后，28 度12周；放在Elecsys2010上，8周；標(biāo)本和準備：血清：按標(biāo)準常規(guī)方法。血漿：肝素鈉或EDTA-K3抗凝。標(biāo)本在28度可穩(wěn)定2天，-20度可穩(wěn)定2個月。只能凍融一次。避光保存。含沉淀的標(biāo)本使用前需離心。不要使用加熱滅活的血清。采血前檢測步驟方法：應(yīng)空腹。標(biāo)本和質(zhì)控品禁用疊氮鈉防腐。按儀器操作說明進行操作。檢查試劑與消耗品是否充足。使用前需混勻微粒。儀器通過掃描試劑盒條形碼自動輸入測試所需的特異性參數(shù)，不需手工輸入。如果特殊情況下儀器無法閱讀條形碼，可以手工輸入15位數(shù)字。Elecsys2010：將冷藏試劑預(yù)溫到20 度后放置

6、于儀器的試劑盤上，避免產(chǎn)生和開/關(guān)試劑瓶蓋。定標(biāo)：。儀器自動控制試劑溫度每批試劑有一條形碼定標(biāo)液定標(biāo)。定標(biāo)頻率：，含有該批試劑定標(biāo)所需的特殊信息。應(yīng)用每批試劑必須用新鮮試劑（試劑經(jīng)儀器要求：Elecsys2010或E170：24小時以內(nèi)）定標(biāo)一次，如再次定標(biāo)即根據(jù)下列一個月（同一批號試劑）7天（放置儀器上的同一試劑盒）根據(jù)要求進行標(biāo)定：如質(zhì)控結(jié)果超出范圍時。質(zhì)控：Elecsys通用質(zhì)控品（PreciControl ）1和2或其它合適的質(zhì)控品。各濃度區(qū)域的質(zhì)控至少每24小時或每一次定標(biāo)后測定一次。質(zhì)控間隔期應(yīng)適用于各的具體要求。檢測值應(yīng)落在確定的范圍內(nèi)，如出現(xiàn)質(zhì)控值落在范圍以外，應(yīng)采取校正措施。

7、計算：對每一個標(biāo)本，儀器會自動計算含量，是pg/ml或pmol/l。換算方法是pg/ml0.738=pmol/l pmol/l1.36=pg/ml干擾：該方法不受黃疸（膽紅素65mg/dl）、溶血（血紅蛋白1000mg/dl）、脂血（脂質(zhì)1500mg/dl）和生物素5mg/天）治療的，至少要等最后一次攝入生物素8小時后才能采血。不受類風(fēng)濕因子干擾（1500IU/ml）。54種常用藥物經(jīng)試驗對本測定無干擾。Elecsys 測定結(jié)果應(yīng)結(jié)合檢測范圍：病史、臨床其他檢查結(jié)果綜合起來進行。30-2000pg/ml（22-1476pmol/l）稀釋：高于檢測范圍的標(biāo)本可用通用稀釋液稀釋。建議手工1:2稀釋。稀釋后的標(biāo)本含量必須高于1000pg/ml（738pmol/l）。結(jié)果應(yīng)乘上2。注意：稀釋標(biāo)本的含量可能不呈線性，這可能是因為通用稀釋液中含有低濃度的內(nèi)源性。如要做線性，建議用低的混合血清。稀釋后的標(biāo)本含量高于2000pg/ml（1476pmol/l）時，這種內(nèi)源性的干擾可忽略不記。正常參考值：由于人群和飲食的不同可能會引起測定結(jié)果的差異，建議各在適當(dāng)?shù)臅r段，選擇有統(tǒng)計學(xué)意義的