培養(yǎng)標(biāo)本處理

1、培養(yǎng)前標(biāo)本處理篇培養(yǎng)前標(biāo)本處理篇標(biāo)本采集處理標(biāo)本采集處理n血液培養(yǎng)相關(guān)問(wèn)題血液培養(yǎng)相關(guān)問(wèn)題n腦脊液相關(guān)問(wèn)題n糞便相關(guān)問(wèn)題n生殖道標(biāo)本相關(guān)問(wèn)題n膿,吸出液及組織標(biāo)本相關(guān)問(wèn)題n痰標(biāo)本相關(guān)問(wèn)題痰標(biāo)本相關(guān)問(wèn)題n咽標(biāo)本相關(guān)問(wèn)題n真菌培養(yǎng)相關(guān)問(wèn)題n尿標(biāo)本相關(guān)問(wèn)題血培養(yǎng)血培養(yǎng)主要病原菌：沙門(mén)菌、布氏桿菌、其他革蘭陰性桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌主要病原菌：沙門(mén)菌、布氏桿菌、其他革蘭陰性桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌以下菌應(yīng)視為非病原菌以下菌應(yīng)視為非病原菌(除非除非1次血培養(yǎng)分離出次血培養(yǎng)分離出)：芽孢桿菌屬、凝固酶陰性葡萄球菌、草綠色鏈球菌、棒狀革蘭陽(yáng)性桿菌：芽孢桿菌屬、凝

2、固酶陰性葡萄球菌、草綠色鏈球菌、棒狀革蘭陽(yáng)性桿菌從兩個(gè)獨(dú)立的皮膚位點(diǎn)采血，每瓶從兩個(gè)獨(dú)立的皮膚位點(diǎn)采血，每瓶采集采集10ml#135C 空氣中孵育空氣中孵育5天天每天檢查濁度并翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶每天檢查濁度并翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶#2#318小時(shí)后傳進(jìn)行次代培養(yǎng)小時(shí)后傳進(jìn)行次代培養(yǎng)當(dāng)培養(yǎng)瓶顯示細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)進(jìn)當(dāng)培養(yǎng)瓶顯示細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)進(jìn)行革蘭染色和傳代培養(yǎng)行革蘭染色和傳代培養(yǎng)革蘭陽(yáng)性球菌革蘭陽(yáng)性球菌接種血接種血平皿奧普托欣試驗(yàn)平皿奧普托欣試驗(yàn)革蘭陰性桿菌革蘭陰性桿菌接種血平皿和接種血平皿和麥康凱平皿麥康凱平皿革蘭陰性雙球菌或球桿革蘭陰性雙球菌或球桿菌菌接種巧克力平皿和接種巧克力平皿和血平皿血平皿CO2中孵育中孵育72h#

3、5#4將重要的革將重要的革蘭染色結(jié)果蘭染色結(jié)果盡快通知臨盡快通知臨床醫(yī)生床醫(yī)生對(duì)重要病原菌對(duì)重要病原菌進(jìn)行鑒定進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)和藥敏試驗(yàn)#6例如：肺炎克雷伯菌例如：肺炎克雷伯菌例如：肺炎鏈球菌例如：肺炎鏈球菌 Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attribution血培養(yǎng)是診斷敗血癥最有價(jià)值的手段血培養(yǎng)是診斷敗血癥最有價(jià)值的手段敗血癥是一個(gè)非常嚴(yán)重的問(wèn)題敗血癥是一個(gè)非常嚴(yán)重的問(wèn)題.血液中的微生物在血液中的微生物在3分鐘內(nèi)到達(dá)每個(gè)器官分鐘內(nèi)到達(dá)每個(gè)器官.在死于敗血癥的患者中在死于敗血癥的患者中,盡管采用抗生素給與合適盡管采用抗生素給與合適的治療，的治療，

4、1/4的人死亡時(shí)，血中循環(huán)的微生物為的人死亡時(shí)，血中循環(huán)的微生物為10/cc或更少或更少 微生物或其產(chǎn)物在血液中引起疾病循環(huán)的循環(huán)的 CFU/ml vs. 病原體病原體成人成人 (12 歲歲): 1 CFU/ml金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌 27%銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌55%大腸埃希菌大腸埃希菌62%其他菌種其他菌種40%From Mayo Clinic, Boston City Hosp., National Childrens Hosp., Univ. of Washington, Seattle.循環(huán)的循環(huán)的 CFU/ml vs. 病原體病原體兒童兒童: 5 CFU/ml任何病原體任何

5、病原體 19% 10 CFU/ml任何病原體任何病原體 27%新生兒新生兒: 4 CFU/ml大腸埃希菌大腸埃希菌 26%From Mayo Clinic, Boston City Hosp., National Childrens Hosp., Univ. of Washington, Seattle, York Hosp., York, PA. 1 CFU/ml任何病原體任何病原體 42%用于培養(yǎng)的血液體積用于培養(yǎng)的血液體積 體重 磅 千克體積 (ml)/穿刺總量/2次穿刺1% 全血體積% 總血液體積199042204040 ml1-2%體積體積% 陽(yáng)性血培養(yǎng)結(jié)果陽(yáng)性血培養(yǎng)結(jié)果 vs. 采

6、集的套數(shù)采集的套數(shù)%99%89%80%真陽(yáng)性真陽(yáng)性20 ml/套套Mayo Clinic Study立即獲得足夠血液并且開(kāi)始抗生素立即獲得足夠血液并且開(kāi)始抗生素治療治療 從不同部位獲得從不同部位獲得2-3套血培養(yǎng)套血培養(yǎng)(40-60ml血血液液) 最好在最好在5分鐘內(nèi)采集分鐘內(nèi)采集#1#2采集血培養(yǎng)時(shí)間的重要性采集血培養(yǎng)時(shí)間的重要性9% +14% +9% +11% +發(fā)熱高峰前發(fā)熱高峰前12-2.5小時(shí)小時(shí)發(fā)熱高峰前發(fā)熱高峰前2.5-0.5小時(shí)小時(shí)發(fā)熱高峰期間發(fā)熱高峰期間發(fā)熱高峰后發(fā)熱高峰后1-12小時(shí)小時(shí)166 病人病人105 病人病人199 病人病人258 病人病人Thomson et a

7、l. 1991. ASCP. Mayo Clinic Study要學(xué)會(huì)導(dǎo)管相關(guān)感染的診斷要學(xué)會(huì)導(dǎo)管相關(guān)感染的診斷關(guān)鍵點(diǎn)關(guān)鍵點(diǎn): 患者必須有菌血癥患者必須有菌血癥檢測(cè)導(dǎo)管相關(guān)感染檢測(cè)導(dǎo)管相關(guān)感染移走導(dǎo)管移走導(dǎo)管 Maki Roll (半定量半定量)超聲波降解和稀釋超聲波降解和稀釋 (定量定量)通過(guò)管腔抽吸通過(guò)管腔抽吸 (定量定量)保留導(dǎo)管保留導(dǎo)管管腔刷管腔刷定量培養(yǎng)定量培養(yǎng) (CVC & 外周血外周血)達(dá)到陽(yáng)性的時(shí)間達(dá)到陽(yáng)性的時(shí)間 (CVC & 外周血外周血)兩個(gè)血培養(yǎng)瓶必須同一時(shí)間抽取兩個(gè)血培養(yǎng)瓶必須同一時(shí)間抽取CVC陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間(TTP)比外周血快比外周血快 2

8、小小時(shí)時(shí)短期插管短期插管 81% 敏感性敏感性 & 92% 特異性特異性長(zhǎng)期插管長(zhǎng)期插管 93% 敏感性敏感性 & 75% 特異性特異性不需要拔掉導(dǎo)管不需要拔掉導(dǎo)管-陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間Raad, I. et al. 2004. Ann. Int. Med. 140:18.6138 份即時(shí)血培養(yǎng)份即時(shí)血培養(yǎng); 191份兩個(gè)血培養(yǎng)瓶中鑒定的細(xì)菌相同份兩個(gè)血培養(yǎng)瓶中鑒定的細(xì)菌相同 (25份不同份不同). 108 (1.8 %) 有導(dǎo)管相關(guān)性感染有導(dǎo)管相關(guān)性感染; 9.8% 僅僅只有僅僅只有CVC培養(yǎng)陽(yáng)性培養(yǎng)陽(yáng)性.Maki 滾動(dòng)法滾動(dòng)法導(dǎo)管尖陽(yáng)性培養(yǎng)結(jié)果導(dǎo)管尖陽(yáng)性培養(yǎng)結(jié)果1. 導(dǎo)

9、管血在外周血陽(yáng)性之前導(dǎo)管血在外周血陽(yáng)性之前2 小時(shí)小時(shí)內(nèi)內(nèi)陽(yáng)性陽(yáng)性 報(bào)告報(bào)告: CVC不可能是菌血癥的來(lái)源不可能是菌血癥的來(lái)源2.導(dǎo)管血在外周血陽(yáng)性導(dǎo)管血在外周血陽(yáng)性 2 小時(shí)之小時(shí)之前前陽(yáng)性陽(yáng)性 報(bào)告報(bào)告: CVC 可能是菌血癥的來(lái)源可能是菌血癥的來(lái)源3. 只有其中一瓶報(bào)警陽(yáng)性只有其中一瓶報(bào)警陽(yáng)性 (如果所有瓶子中的血量如果所有瓶子中的血量足夠足夠)報(bào)告報(bào)告: 可能污染可能污染; 患者無(wú)菌血癥患者無(wú)菌血癥根據(jù)陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間判讀根據(jù)陽(yáng)性報(bào)警時(shí)間判讀污染細(xì)菌污染細(xì)菌血培養(yǎng)污染定義為在幾次血培養(yǎng)中單個(gè)血培血培養(yǎng)污染定義為在幾次血培養(yǎng)中單個(gè)血培養(yǎng)下列細(xì)菌陽(yáng)性養(yǎng)下列細(xì)菌陽(yáng)性:凝固酶陰性葡萄球菌凝固酶陰性

10、葡萄球菌棒狀桿菌棒狀桿菌 微球菌微球菌丙酸桿菌丙酸桿菌 芽孢桿菌芽孢桿菌血培養(yǎng)污染 vs. 皮膚消毒% 污染污染Studies from Baylor, Nashville, & France敗血癥敗血癥 vs. “污染的污染的” 血培養(yǎng)血培養(yǎng)%陽(yáng)性陽(yáng)性Mayo Clinic Study心內(nèi)膜炎心內(nèi)膜炎菌血癥菌血癥皮膚定植細(xì)菌皮膚定植細(xì)菌#血培養(yǎng)套數(shù)血培養(yǎng)套數(shù)腦脊液（腦脊液（CSF)培養(yǎng)培養(yǎng)主要病原菌：主要病原菌：B群群溶血鏈球菌（新生兒），流感嗜血桿菌（溶血鏈球菌（新生兒），流感嗜血桿菌（2 2月月-2-2歲兒童），肺炎鏈球菌，腦膜炎奈瑟氏菌歲兒童），肺炎鏈球菌，腦膜炎奈瑟氏菌最少最

11、少1ml，最佳，最佳5ml醫(yī)生通過(guò)無(wú)菌皮膚醫(yī)生通過(guò)無(wú)菌皮膚穿刺采集腦脊液穿刺采集腦脊液（腰椎穿刺）于無(wú)（腰椎穿刺）于無(wú)菌管中。第二管和菌管中。第二管和第三管用于微生物第三管用于微生物學(xué)檢測(cè)。學(xué)檢測(cè)。# 11500g離心離心15分鐘分鐘（可能的話(huà)）（可能的話(huà)）# 2# 3用吸管吸去用吸管吸去上清，留下上清，留下1cc的腦脊液沉淀的腦脊液沉淀注意：不要傾倒注意：不要傾倒# 4滴一滴沉淀滴一滴沉淀于巧克力平皿和于巧克力平皿和血平皿血平皿上下吸取上下吸取10次以上次以上混勻沉淀混勻沉淀# 5CO2中孵中孵育育72小時(shí)小時(shí)# 6將一大滴沉淀將一大滴沉淀滴在玻片上。滴在玻片上。不要涂開(kāi)。不要涂開(kāi)。自然干燥

12、并進(jìn)行革蘭染色。自然干燥并進(jìn)行革蘭染色。如見(jiàn)到大量多形核白細(xì)胞如見(jiàn)到大量多形核白細(xì)胞則則強(qiáng)烈支持感染強(qiáng)烈支持感染# 7 Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attribution腦脊液（腦脊液（CSF)培養(yǎng)培養(yǎng)主要病原菌：主要病原菌：B群群溶血鏈球菌（新生兒），流感嗜血桿菌（溶血鏈球菌（新生兒），流感嗜血桿菌（2 2月月-2-2歲兒童），肺炎鏈球菌，腦膜炎奈瑟氏菌歲兒童），肺炎鏈球菌，腦膜炎奈瑟氏菌最少最少1ml，最佳，最佳5ml醫(yī)生通過(guò)無(wú)菌皮膚醫(yī)生通過(guò)無(wú)菌皮膚穿刺采集腦脊液穿刺采集腦脊液（腰椎穿刺）于無(wú)（腰椎穿刺）于無(wú)菌管中。第二管和菌管中。第二管和第三

13、管用于微生物第三管用于微生物學(xué)檢測(cè)。學(xué)檢測(cè)。# 11500g離心離心15分鐘分鐘（可能的話(huà)）（可能的話(huà)）# 2# 3用吸管吸去用吸管吸去上清，留下上清，留下1cc的腦脊液沉淀的腦脊液沉淀注意：不要傾倒注意：不要傾倒# 4滴一滴沉淀滴一滴沉淀于巧克力平皿和于巧克力平皿和血平皿血平皿上下吸取上下吸取10次以上次以上混勻沉淀混勻沉淀# 5CO2中孵中孵育育72小時(shí)小時(shí)# 6將一大滴沉淀將一大滴沉淀滴在玻片上。滴在玻片上。不要涂開(kāi)。不要涂開(kāi)。自然干燥并進(jìn)行革蘭染色。自然干燥并進(jìn)行革蘭染色。如見(jiàn)到大量多形核白細(xì)胞如見(jiàn)到大量多形核白細(xì)胞則則強(qiáng)烈支持感染強(qiáng)烈支持感染# 7 Ellen Jo Baron 20

14、07; Use with proper attribution#1#2接種血平皿，麥康凱平皿，接種血平皿，麥康凱平皿，Hektoen或或DCA，若懷疑弧菌則還接種，若懷疑弧菌則還接種TCBS平皿。平皿。37 C 空氣孵育空氣孵育48h#3糞便標(biāo)本采集后糞便標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)進(jìn)行接種或分鐘內(nèi)進(jìn)行接種或置于置于cary-blair運(yùn)輸運(yùn)輸培養(yǎng)基中培養(yǎng)基中#4糞便培養(yǎng)糞便培養(yǎng)重要的病原菌：沙門(mén)菌、志賀菌、彎曲桿菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌、重要的病原菌：沙門(mén)菌、志賀菌、彎曲桿菌、霍亂弧菌、副溶血弧菌、產(chǎn)毒性大腸桿菌產(chǎn)毒性大腸桿菌&難辨梭菌（在難辨梭菌（在常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室可能檢測(cè)不出）常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室可

15、能檢測(cè)不出）選擇血性或膿性的部選擇血性或膿性的部分進(jìn)行接種分進(jìn)行接種血平皿上氧化酶陽(yáng)性的革蘭陰性血平皿上氧化酶陽(yáng)性的革蘭陰性桿菌需進(jìn)一步鑒定桿菌需進(jìn)一步鑒定將菌落接種將菌落接種TCBS或含或含0-6鹽濃鹽濃度的肉湯中。度的肉湯中。麥康凱、麥康凱、HEK或或DCA平皿上不利用平皿上不利用乳糖的革蘭陰性桿菌需進(jìn)一步鑒定。乳糖的革蘭陰性桿菌需進(jìn)一步鑒定。氧化酶陽(yáng)性、濕潤(rùn)氧化酶陽(yáng)性、濕潤(rùn)的米色菌落的米色菌落革蘭染色顯示彎曲或螺旋形革蘭染色顯示彎曲或螺旋形的桿菌的桿菌彎曲桿菌屬?gòu)澢鷹U菌屬Campy瓊脂瓊脂#6 Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attributio

16、n#5將菌落接種至將菌落接種至Campy瓊脂瓊脂或使用濾紙法。微需氧環(huán)或使用濾紙法。微需氧環(huán)境下境下37-42 C 孵育孵育 72 hCO2孵育孵育72h TM培養(yǎng)基上尋找淋球菌，血培養(yǎng)基上尋找淋球菌，血平皿上尋找酵母菌平皿上尋找酵母菌# 2血平皿血平皿& Thayer-Martin平皿平皿# 1# 1接種接種Thayer-Martin培養(yǎng)基培養(yǎng)基&革蘭染色革蘭染色將拭子在玻片上滾將拭子在玻片上滾動(dòng)制成一個(gè)細(xì)胞厚動(dòng)制成一個(gè)細(xì)胞厚度的涂片；尋找度的涂片；尋找“線(xiàn)索細(xì)胞線(xiàn)索細(xì)胞”C. 懷孕懷孕35-37周的孕婦陰道周的孕婦陰道或肛拭子或肛拭子營(yíng)養(yǎng)肉湯中營(yíng)養(yǎng)肉湯中孵育過(guò)夜孵育過(guò)夜血平

17、皿上次代培養(yǎng)檢測(cè)血平皿上次代培養(yǎng)檢測(cè)B群鏈球菌群鏈球菌# 1# 2CO2中孵育中孵育48小時(shí)小時(shí)D. 女性的陰道拭子女性的陰道拭子# 1血平皿上尋找血平皿上尋找酵母菌，酵母菌，T-M培養(yǎng)基上尋培養(yǎng)基上尋找淋球菌找淋球菌革蘭染色輔助診斷細(xì)菌革蘭染色輔助診斷細(xì)菌性陰道病性陰道病# 1# 230 min內(nèi)將拭子置于內(nèi)將拭子置于0.5ml生生理鹽水中檢測(cè)滴蟲(chóng)理鹽水中檢測(cè)滴蟲(chóng)T-M培養(yǎng)基上的淋球菌培養(yǎng)基上的淋球菌血平皿上的酵母菌血平皿上的酵母菌A. 女性的子宮頸或肛拭子女性的子宮頸或肛拭子B. 男性的尿道拭子男性的尿道拭子非病原菌非病原菌金黃色葡萄球菌任何革蘭陰性桿菌，包括大腸桿菌和變形桿菌B群群溶血鏈

18、球菌（溶血鏈球菌（GBS)，僅為孕婦報(bào)告僅為孕婦報(bào)告生殖道標(biāo)本培養(yǎng)生殖道標(biāo)本培養(yǎng)主要病原菌：淋病奈瑟菌，滴蟲(chóng)，酵母菌主要病原菌：淋病奈瑟菌，滴蟲(chóng)，酵母菌&女性的細(xì)菌性陰道病綜合征，孕婦攜帶的女性的細(xì)菌性陰道病綜合征，孕婦攜帶的B群群溶血鏈球菌溶血鏈球菌 Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attribution陰道感染的病因?qū)W陰道感染的病因?qū)WFrom a major U.S. Ob/Gyn department.衣原體衣原體混合性混合性傳播疾傳播疾病病念珠菌念珠菌女女性性百百分分比比細(xì)菌性陰細(xì)菌性陰道炎道炎正常正常女性生殖道感染的癥狀和致病菌女性生

19、殖道感染的癥狀和致病菌子宮頸炎子宮頸炎陰道炎陰道炎其他其他細(xì)菌性陰道炎細(xì)菌性陰道炎念珠菌念珠菌陰道毛滴蟲(chóng)陰道毛滴蟲(chóng)衣原體衣原體淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌支原體支原體/脲原脲原體體損傷損傷:l單純皰疹單純皰疹l人乳頭瘤病毒人乳頭瘤病毒l梅毒螺旋體梅毒螺旋體l觸染性軟疣觸染性軟疣 痰標(biāo)本痰標(biāo)本主要病原菌：肺炎鏈球菌，克雷伯菌屬，流感嗜血桿菌，金黃色葡萄球菌，銅綠假單胞菌。主要病原菌：肺炎鏈球菌，克雷伯菌屬，流感嗜血桿菌，金黃色葡萄球菌，銅綠假單胞菌。非病原菌：酵母菌，草綠色鏈球菌，凝固酶陰性葡萄球菌非病原菌：酵母菌，草綠色鏈球菌，凝固酶陰性葡萄球菌病人需用水清潔口腔，病人需用水清潔口腔，深咳肺部痰，深咳

20、肺部痰，不要唾液不要唾液#1 進(jìn)行革蘭染色以評(píng)價(jià)標(biāo)本是否適于接進(jìn)行革蘭染色以評(píng)價(jià)標(biāo)本是否適于接種。種。 向臨床醫(yī)生盡快報(bào)告重要的革蘭染色向臨床醫(yī)生盡快報(bào)告重要的革蘭染色結(jié)果結(jié)果#2#3好：很少扁平好：很少扁平上皮細(xì)胞上皮細(xì)胞奧普托欣紙片奧普托欣紙片CO2中孵育中孵育48小時(shí)小時(shí)#4接種巧克力平皿，血接種巧克力平皿，血平皿和麥康凱平皿平皿和麥康凱平皿#5拒絕：大量拒絕：大量 扁平扁平上皮細(xì)胞上皮細(xì)胞肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌對(duì)重要病原菌進(jìn)行對(duì)重要病原菌進(jìn)行鑒定鑒定&藥敏試驗(yàn)藥敏試驗(yàn)金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌肺炎鏈球菌肺炎鏈球菌膽汁溶菌膽汁溶菌 Ellen Jo Baron 2007; U

21、se with proper attribution奧普托欣奧普托欣流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌膿，吸取物或組織標(biāo)本膿，吸取物或組織標(biāo)本主要病原菌：金黃色葡萄球菌，化膿鏈球菌，其他主要病原菌：金黃色葡萄球菌，化膿鏈球菌，其他溶血鏈球菌，銅綠假單胞菌，其他革蘭陰性桿溶血鏈球菌，銅綠假單胞菌，其他革蘭陰性桿菌。菌。非病原菌：凝固酶陰性葡萄球菌，少量的棒狀革蘭陽(yáng)性桿菌非病原菌：凝固酶陰性葡萄球菌，少量的棒狀革蘭陽(yáng)性桿菌用酒精消毒傷口用酒精消毒傷口 周?chē)つw周?chē)つw最好的標(biāo)本是吸取物和組織最好的標(biāo)本是吸取物和組織最差的標(biāo)本是拭子最差的標(biāo)本是拭子#1接種血平皿和麥康凱平皿接種血平皿和麥康凱平皿如果是吸取物或

22、組織，進(jìn)行如果是吸取物或組織，進(jìn)行革蘭染色，將重要結(jié)果通知革蘭染色，將重要結(jié)果通知臨床醫(yī)生臨床醫(yī)生#2#3銅綠假單銅綠假單胞菌胞菌中孵育中孵育48小小時(shí)時(shí)#4對(duì)對(duì)1或或2種種重要病原菌進(jìn)行鑒定重要病原菌進(jìn)行鑒定&藥藥敏試驗(yàn)敏試驗(yàn)金黃色葡萄球金黃色葡萄球菌為主菌為主溶血鏈球菌溶血鏈球菌肺炎克肺炎克雷伯菌雷伯菌混合的混合的2種腸道革蘭陰性種腸道革蘭陰性桿菌：桿菌：2種均報(bào)告；種均報(bào)告；當(dāng)檢出當(dāng)檢出3種或更多病原菌時(shí)，報(bào)告種或更多病原菌時(shí)，報(bào)告“混合菌叢混合菌叢”并描述性列出假單胞菌，金葡菌，變形桿菌，腸并描述性列出假單胞菌，金葡菌，變形桿菌，腸道革蘭陰性桿菌等。道革蘭陰性桿菌等。 Elle

23、n Jo Baron 2007; Use with proper attribution#5咽部標(biāo)本培養(yǎng)咽部標(biāo)本培養(yǎng) 主要病原菌：主要病原菌：A群群溶血鏈球菌。溶血鏈球菌。 選擇性報(bào)告：溶血隱秘桿菌選擇性報(bào)告：溶血隱秘桿菌拭子擦取咽部和拭子擦取咽部和扁桃體。不要碰扁桃體。不要碰觸舌頭和面頰。觸舌頭和面頰。將拭子擦拭血平皿（羊血將拭子擦拭血平皿（羊血或馬血）的或馬血）的1/5區(qū)域區(qū)域在第一區(qū)貼相鄰的兩紙片：復(fù)在第一區(qū)貼相鄰的兩紙片：復(fù)方磺胺和桿菌肽方磺胺和桿菌肽# 1拭子拭子# 2在燭缸中在燭缸中37C孵育過(guò)夜并檢查孵育過(guò)夜并檢查平板；若陰性，繼續(xù)孵育平板；若陰性，繼續(xù)孵育過(guò)夜過(guò)夜總孵育時(shí)間總孵

24、育時(shí)間48小時(shí)小時(shí)# 5# 3分區(qū)畫(huà)線(xiàn)分區(qū)畫(huà)線(xiàn)3或或4區(qū)區(qū)接種環(huán)接種環(huán)溶血菌落，溶血菌落， 0.5 mm, 對(duì)復(fù)方磺對(duì)復(fù)方磺胺耐藥，對(duì)桿菌肽敏感胺耐藥，對(duì)桿菌肽敏感A群鏈球群鏈球菌（觸酶陰性）菌（觸酶陰性）# 6桿菌肽桿菌肽& SXT 紙片紙片# 4桿菌肽桿菌肽復(fù)方復(fù)方磺胺磺胺PYR陽(yáng)性可確證陽(yáng)性可確證A群鏈球菌群鏈球菌# 7 Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attribution不要報(bào)告不要報(bào)告咽炎中非致病菌：咽炎中非致病菌：金黃色葡萄球菌金黃色葡萄球菌肺炎鏈球菌肺炎鏈球菌流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌卡他莫拉菌卡他莫拉菌 溶血鏈球菌溶血鏈球菌 所

25、有革蘭陰性桿菌所有革蘭陰性桿菌 所有酵母菌所有酵母菌報(bào)告結(jié)果：報(bào)告結(jié)果： 1+ to 4+ A群群溶血鏈球菌溶血鏈球菌 或1+ to 4+ 非非A群群溶血鏈球菌溶血鏈球菌 或未檢出未檢出溶血鏈球菌溶血鏈球菌 # 8# 9#1#2常規(guī)：接種沙氏平皿和常規(guī)：接種沙氏平皿和Mycobiotic培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。 30 C 空氣孵育四周。空氣孵育四周。對(duì)于皮膚癬菌：接種對(duì)于皮膚癬菌：接種Mycobiotic和和DTM培養(yǎng)基培養(yǎng)基組織，皮膚刮取物或指甲：將組織，皮膚刮取物或指甲：將一小塊完整的標(biāo)本插入瓊脂表一小塊完整的標(biāo)本插入瓊脂表面面#3重要的真菌：組重要的真菌：組織活檢，痰，腦織活檢，痰，腦脊液，血培

26、養(yǎng)脊液，血培養(yǎng)皮膚癬菌：皮膚皮膚癬菌：皮膚刮片，指甲刮片刮片，指甲刮片，根部的頭發(fā)，根部的頭發(fā)不要研磨組織：不要研磨組織：使用解剖刀將其使用解剖刀將其切成小塊切成小塊#4真菌培養(yǎng)真菌培養(yǎng) 重要病原菌：新型隱球菌，人芽囊原蟲(chóng)重要病原菌：新型隱球菌，人芽囊原蟲(chóng) ，皮膚癬菌，和，皮膚癬菌，和 其他真菌（考慮標(biāo)本來(lái)源和病人情況）其他真菌（考慮標(biāo)本來(lái)源和病人情況）拭子僅用于酵母菌的分離拭子僅用于酵母菌的分離接種血平皿和沙氏平皿接種血平皿和沙氏平皿 Ellen Jo Baron 2008; Use with proper attribution#6將標(biāo)本研于一滴將標(biāo)本研于一滴10%KOH，加蓋玻片后，加蓋

27、玻片后鏡檢真菌鏡檢真菌接種后接種后7天內(nèi)每日觀察平皿天內(nèi)每日觀察平皿，之后每周兩次，之后每周兩次光滑菌落酵母菌光滑菌落酵母菌毛狀菌落絲狀真菌毛狀菌落絲狀真菌用通氣膠帶粘貼平皿的側(cè)面用通氣膠帶粘貼平皿的側(cè)面或兩邊或兩邊#5#1babUrine Culture尿培養(yǎng)尿培養(yǎng)主要病原菌：大腸埃希菌，變形桿菌，克雷伯菌，其他革蘭陰性桿菌，腸球菌，腐主要病原菌：大腸埃希菌，變形桿菌，克雷伯菌，其他革蘭陰性桿菌，腸球菌，腐生葡萄球菌，純的金黃色葡萄球菌生葡萄球菌，純的金黃色葡萄球菌#2接種血平皿和麥康凱平皿#3空氣孵育空氣孵育24小時(shí)小時(shí)收集中段尿收集中段尿a#4菌落計(jì)數(shù)菌落計(jì)數(shù)0.001ml接種環(huán)接種環(huán)

28、尿尿培培養(yǎng)養(yǎng)的的評(píng)評(píng)估估標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn) 病病人人 標(biāo)標(biāo)本本類(lèi)類(lèi)型型 有有意意義義的的病病原原菌菌 C CF FU U/ /m ml l 無(wú)無(wú)癥癥狀狀 清清潔潔留留取取或或留留置置管管留留取取 1 10 00 0, ,0 00 00 0 有有癥癥狀狀但但不不需需臥臥床床 清清潔潔留留取取 1 1- -2 2 種種病病原原菌菌。 2 2 種種視視為為污污染染 有有癥癥狀狀，性性生生活活活活躍躍的的女女性性 清清潔潔留留取取 1 10 00 0 純純培培養(yǎng)養(yǎng)的的腸腸桿桿菌菌科科菌菌 男男性性 清清潔潔留留取取 1 10 00 00 0 潛潛在在病病原原菌菌 所所有有 從從導(dǎo)導(dǎo)尿尿管管中中直直接接留留取取

29、1 10 00 0 個(gè)個(gè)所所有有種種類(lèi)類(lèi)的的潛潛在在病病原原菌菌 所所有有 外外科科或或膀膀胱胱吸吸取取 任任何何數(shù)數(shù)量量（肉肉湯湯增增菌菌，厭厭氧氧菌菌） 所所有有 有有爭(zhēng)爭(zhēng)議議 任任何何酵酵母母菌菌 若若 2 種菌生長(zhǎng)，對(duì)種菌生長(zhǎng)，對(duì)每種菌進(jìn)行鑒定和藥每種菌進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)；敏試驗(yàn)；若若2種菌生長(zhǎng)，報(bào)種菌生長(zhǎng)，報(bào)告告“混合菌群混合菌群”#5注意注意: 革蘭陰性桿菌在血平革蘭陰性桿菌在血平皿和麥皿和麥 康凱平皿上均康凱平皿上均生長(zhǎng)良好生長(zhǎng)良好革蘭陽(yáng)性球菌僅在血革蘭陽(yáng)性球菌僅在血平皿上生長(zhǎng)良好平皿上生長(zhǎng)良好GNR#675,000 cfu/ml50,000 cfu/ml100,000 cfu/ml Ellen Jo Baron 2007; Use with proper attributionGPC尿道感染尿道感染每年每年850萬(wàn)例尿路感染萬(wàn)例尿路感染, 90%為女為女性性1/2.5個(gè)婦女在一生中會(huì)得個(gè)婦女在一生中會(huì)得UTI下行性感染：血流下行性感染：血流腎臟腎臟膀胱（金膀胱（金黃色葡萄球菌，酵母菌，結(jié)核分枝桿菌黃色葡