霉菌形態(tài)及菌落特征的觀察山東大學(xué)-供參考

1、霉菌的培養(yǎng)與形態(tài)觀察 實驗?zāi)康?掌握霉菌的觀察法小室觀察法。了解四種常見霉菌形態(tài)。實驗原理1、霉菌霉菌可產(chǎn)生復(fù)什分枝的菌絲體，分基內(nèi)菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲生長到一定階段分化產(chǎn)生繁殖菌絲，由繁殖菌絲產(chǎn)生孢子。霉菌菌絲體（尤其是繁殖菌絲）及孢子的形態(tài)特征是識別不同種類霉菌的重要依據(jù)。霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細(xì)菌和放線菌粗得多（約 310m ），常是細(xì)菌菌體寬度的幾倍至幾十倍，因此，用低倍顯微鏡即可觀察。2、觀察方法觀察霉菌的形態(tài)有多種方法，常用的有直接制片觀察法、載玻片培養(yǎng)觀察法和玻璃培養(yǎng)觀察法三種方法，本次實驗采用載玻片培養(yǎng)觀察法（小室培養(yǎng)法）。3、載玻片培養(yǎng)觀察法（小室培養(yǎng)法）用無菌操作將

2、培養(yǎng)基瓊脂薄層置于載玻片上，接種后蓋上蓋玻片培養(yǎng)，霉菌即在載玻片和蓋玻片之間的有限空間內(nèi)沿蓋玻片橫向生長。培養(yǎng)一定時間后，將載玻片上的培養(yǎng)物置于顯微鏡下觀察。這種方法既可以保持霉菌自然生長狀態(tài)，還便于觀察不同發(fā)育期的培養(yǎng)物。實驗器材菌種：曲霉 ( Aspergillus sp. ) ，青霉，根霉 ( Rhizopus sp. ) ， 毛霉（ Mucor sp. ），培養(yǎng) 7d 的馬鈴薯瓊脂平板培養(yǎng)物 培養(yǎng)基：馬鈴薯培養(yǎng)基（簡稱PDA）（配方見附表）儀器或其他用具：平皿，載玻片，蓋玻片，無菌吸管，U 型玻棒，解剖刀，鑷子，50%乙醇，20%甘油，顯微鏡，接種環(huán)，酒精燈等實驗內(nèi)容配置150ml的P

3、DA（霉菌）培養(yǎng)基，然后高溫滅菌。培養(yǎng)小室的滅菌：在平皿皿底鋪一張略小于皿底的圓濾紙片，再放一形玻棒，其上放一潔凈載玻片和兩塊蓋玻片，蓋上皿蓋，包扎后于110滅菌2030分鐘，烘干備用。 倒平板：取已滅菌的馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基各67ml 注入另兩個滅菌平皿中，使之凝固成薄層。 用解剖刀切培養(yǎng)基：在無菌操作的情況下，利用解剖刀將培養(yǎng)基切成1cmx1cm的瓊脂塊，并將其移至上述培養(yǎng)室中的載玻片上（每片放兩塊 )。 在培養(yǎng)基邊緣接種：通過無菌操作，用接種環(huán)從斜面培養(yǎng)物上挑取很少量的孢子，接種于培養(yǎng)小室中瓊脂塊的邊緣上，用無菌鑷子將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上。培養(yǎng)：通過無菌操作，在培養(yǎng)小室中的圓濾紙上加 3ml

4、 滅菌的20 %的甘油（用于保持平皿內(nèi)的濕度 ) ，蓋上皿蓋，28 正置培養(yǎng)一周。 鏡檢：取出載玻片置低倍鏡下觀察，必要時換高倍鏡。實驗結(jié)果實驗繪圖四種霉菌： A曲霉 B曲霉局部放大圖 A青霉 B青霉局部放大圖 毛霉 毛霉分析圖根霉： 根霉整體裝片 根霉放大圖實驗結(jié)果描述菌種曲霉根霉毛霉青霉形態(tài)特征具有分隔；氣生菌絲的一部分形成長而粗糙的分生孢子梗，頂端膨大成球狀頂囊，表面輻射出一層或兩層小梗，小梗上著生成串的球形分生孢子。分生孢子梗生于足細(xì)胞上，并通過足細(xì)胞與營養(yǎng)菌絲相連。菌絲無隔、多核、分枝狀，有匍匐菌絲和假根。在假根的上方直立地生長出一至數(shù)根孢囊梗，其頂端膨大成球形孢子囊。囊的基部有囊托，中間有球形或半球形囊軸。菌絲無隔、多核、分枝狀，無假根或匍匐菌絲。菌絲體上直接生出單生、總狀分枝或假軸狀分枝的孢囊梗。各分枝頂端著生球形孢子囊，無囊托。菌絲有橫隔，分生孢子梗亦有橫隔，光滑或粗糙?；繜o足細(xì)胞，頂端不形成膨大的頂囊，其分生孢子梗經(jīng)過多次分枝，產(chǎn)生幾輪對稱或不對稱的小梗，形如掃帚，稱為帚狀體。實驗結(jié)果分析及感悟本次試驗學(xué)會了霉菌的基本培養(yǎng)方法，對霉菌的形態(tài)特征