藥物分析維生素類藥物的分析[2]

1、第九章 維生素類藥物的分析 Analysis of Vitamines維生素A維生素B1維生素C維生素E藥物分析維生素類藥物的分析2第一節(jié) 維生素A( Vit A)2-Cis Neovitamin Aa 2,6-dicis Isovitamin Ab4-Cis Neovitamin Ab2,4-dicis Neovitamin Ac6-Cis Isovitamin Aa Retinol (Vit A alcohol)VA acetateVA polmitate912345678藥物分析維生素類藥物的分析2Vit A含量表示I.U.(international Unit) 國際單位效價(jià)(I.U.

2、/g)按WHO規(guī)定 VA acetate VA alcohol效價(jià)(I.U./g) 2.907106 3.33106 1g pure VA acetate 2.907106I.U. 藥物分析維生素類藥物的分析2按WHO規(guī)定 VA acetateVA alcoholVit A含量表示I.U.(international Unit) 國際單位效價(jià)(I.U./g)效價(jià)(I.U./g) 2.9071063.331061g pure VA acetate 2.907106I.U. 藥物分析維生素類藥物的分析2藥物分析維生素類藥物的分析2第一法測(cè)定VA acetate 環(huán)己烷為溶劑 max328nm吸收度

3、比值0.555 0.907 1.000 0.811 0.299 測(cè)定吸收度 (nm) 300 316 328 340 360 如果max為326329nm;-規(guī)定值0.02則不需要校正如果max為326329nm;但是，-規(guī)定值0.02，則需校正藥物分析維生素類藥物的分析2Vit A UV法校正公式第一法 A328(校正)=3.25(2A328- A316 -A340)若 在3%范圍，則仍以A328計(jì)算含量若 在-15%-3%范圍，則以A325(校正)計(jì)算含量若 3%，或-15%，則采用第二法藥物分析維生素類藥物的分析2第二法 測(cè)定其他維生素第一法未通過，包括：則A325(校正)=6.815A

4、325-2.555A310-4.260A334max不在326329nm，必須經(jīng)皂化： 酯 乙醚提取VA醇，洗滌，過濾 溶于異丙醇在 300，310，325，334nm處分別測(cè)A當(dāng)max為323327nm，A300nm/A325nm0.73 若 在3%范圍，則仍以A325計(jì)算含量藥物分析維生素類藥物的分析2若max不在323327nm，或者 A300nm/A325nm0.73表明干擾雜質(zhì)含量過高，則可采用色譜法將未皂化部分純化后再進(jìn)行測(cè)定藥物分析維生素類藥物的分析2第一法 A328(校正)=3.25(2A328- A316 -A340)A213nmA213nmVit A samplepure

5、VA acetateimpurities校正公式由來藥物分析維生素類藥物的分析2用幾何圖形推導(dǎo)出公式A325(校正)=7A325-2.625A310-4.375A334比實(shí)際值高出2.62.7%故扣除2.65%得第二法校正公式A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334藥物分析維生素類藥物的分析2 稱取Vit A滴劑0.1082g(標(biāo)示量50 000I.U./g)，加環(huán)已烷至50.0ml，取出5.0ml置于另一50 ml量瓶中，加環(huán)已烷至刻度，搖勻后置石英比色皿中，以環(huán)已烷為空白，分別于以下波長(zhǎng)處測(cè)得相應(yīng)的吸收度值，試求此滴劑中Vit A的標(biāo)示量百分率：(nm)

6、 300 316 328 340 360A 0.330 0.508 0.570 0.477 0.190藥物分析維生素類藥物的分析2 精密稱取Vit A滴劑0.06126g(標(biāo)示量50000 I.U./g)，置于25ml量瓶中，加環(huán)已烷至刻度，精密吸取2ml置于另一25ml量瓶中，加環(huán)已烷至刻度，并混勻，置石英比色皿中，以環(huán)已烷為空白，分別于以下波長(zhǎng)處測(cè)得吸收度值，試求此滴劑中Vit A為標(biāo)示量的百分含量：(nm) 300 316 328 340 360A 0.330 0.508 0.570 0.477 0.190藥物分析維生素類藥物的分析2第二節(jié) 維生素B1( Vit B1)Vit B1Thi

7、amine Hydrochloride藥物分析維生素類藥物的分析2NaOHH2O藥物分析維生素類藥物的分析2環(huán)合O2H硫色素Thiochtome藥物分析維生素類藥物的分析2 結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與鑒別 噻唑環(huán)在堿性介質(zhì)中可被高鐵氰化鉀等氧化劑氧化，然后與嘧啶環(huán)上的-NH2縮合生成具有熒光的硫色素，后者易溶于異丁醇中顯強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光，該反應(yīng)又稱為硫色素?zé)晒夥磻?yīng)。為維生素B1所特有藥物分析維生素類藥物的分析2生成沉淀反應(yīng)分子結(jié)構(gòu)中含有雜環(huán)，易與生物堿沉淀劑(碘化鉍鉀、碘化汞鉀、苦味酸等)，硅鎢酸，雷氏鹽等作用形成組成恒定的沉淀 維生素B1在堿性加熱條件下反應(yīng)放出H2S,與Pb(Ac)2試液形成黑色PbS藥物分

8、析維生素類藥物的分析2 含量測(cè)定 Assay硅鎢酸重量法 Silicotungstic Acid Gravimetry 非水溶液滴定法 Non-aqueous Titrimetry 硫色素?zé)晒夥?Thiochrone Fluoremetry藥物分析維生素類藥物的分析2Vit B1 硅鎢酸重量法2Vit B1+過量硅鎢酸*濾過洗滌*用熱的稀HCl洗干燥恒重*80H+煮沸*23分鐘；過長(zhǎng)，沉淀易于 附著于器壁上Vit B12SiO2(OH)212WO34H2O沉淀藥物分析維生素類藥物的分析2第三節(jié) 維生素C( Vit C)612345藥物分析維生素類藥物的分析2L-抗壞血酸 L-去氫抗壞血酸 L-

9、二酮古羅糖酸有生物活性 有生物活性 無生物活性-2H+2HH2OOH-(H+)藥物分析維生素類藥物的分析2H2O50藍(lán)色-3H2O糠醛-CO2戊糖藥物分析維生素類藥物的分析2含量測(cè)定碘量法2,6-二氯靛酚法藥物分析維生素類藥物的分析2第五節(jié) 維生素E( Vit E)R1R2Vit E (dl-Tocopheryl Acetate)Synthetic NaturalProductR1 R2 content(%)-Tocopheryl 52.0 68.0-Tocopheryl 9.3 22.0-Tocopheryl 28.0 5.0-Tocopheryl 10.7 5.0藥物分析維生素類藥物的分析

10、2ChP VE 中檢查生育酚 取Vit E 0.1g，加無水乙醇5ml溶解后，加二苯胺T.S.1滴，用硫酸鈰滴定液(0.01mol/L)滴定，消耗硫酸鈰滴定液(0.01mol/L)不得過1.0ml藥物分析維生素類藥物的分析2藥物分析維生素類藥物的分析2固定液：5% SE30柱 溫：25510檢測(cè)器：FID內(nèi) 標(biāo)：十六酸十六醇酯鈰量法(%) GC(%) 97.91 83.53 97.99 82.51 98.48 85.0914.54VE24.40內(nèi)標(biāo)VE丸劑GC法VE(純品)測(cè)得量(mg) 17.22 17.15加入量(mg) 17.3回收率(%) 99.54 99.13藥物分析維生素類藥物的分

11、析2中國藥典 維生素E色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) System Suitability Tests SST 以硅酮(OV-17)為固定相，涂布濃度為2%；柱溫為265，理論板數(shù)按VE峰計(jì)算，應(yīng)不低于500，VE峰與內(nèi)標(biāo)峰的分離度應(yīng)大于2。內(nèi)標(biāo)：正三十二烷藥物分析維生素類藥物的分析2校正因子測(cè)定 取正三十二烷適量，加正已烷溶解并稀釋成每1ml中含1.0g的溶液，搖勻，作為內(nèi)標(biāo)溶液。另取Vit E對(duì)照品約20mg，精密稱定，置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液10ml，密塞，振搖使溶解；取13l注入氣相色譜儀，計(jì)算校正因子測(cè)定法 取本品約20mg，精密稱定，置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液10m

12、l，密塞，振搖使溶解；取13l注入氣相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得藥物分析維生素類藥物的分析2JP Vit E: dl-生育酚色譜柱：ODS 1530cm4mm 510m流動(dòng)相：甲醇-水 (491)流 速：調(diào)整到生育酚的tr10minUVD：292nm R2.6人血清中VA和VE的含量測(cè)定Waters -Bondapak C18 30cm3.9mm Resolve C18 預(yù)柱甲醇-水 (964)，1.2ml/minUVD：08min 330nm 8min后 292nm血清樣品的制備血樣離心后，分離血清，置5ml塑料試管中，充N2密封，于-40保存?zhèn)溆盟幬锓治鼍S生素類藥物的分析24,6 Cholestadienol膽甾醇，膽固醇Cholesteral膽甾-5烯-3-醇Vit D2 骨化醇 Ergocalciferol9,10-開鏈麥角甾-5,7,10(19),22-四烯-3-醇22123456710Vit D3 膽骨化醇 Cholecalciferol膽鈣化醇9,10-開鏈膽甾-5,7,10(19)-三烯-3-醇藥物分析維生素類藥物的分析2USP 24Cleanup column 30cm4.6mm C8Mobile phase A CH3CNCH3OHH2O 25 25 1 The amount of H2O & the flow