第五章酶和酶類藥物

1、第五章 酶和酶類藥物生物催化劑酶 蛋白質(zhì)類酶核酶（具有催化作用的核酸）1926年，Summer從刀豆中分離獲得了脲酶結(jié)晶，提出酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì).后來(lái)發(fā)現(xiàn)某些RNA分子也有酶活性，出現(xiàn)核酶 ribozyme.酶學(xué)、微生物學(xué)的基本原理與化學(xué)工程等有機(jī)結(jié)合而產(chǎn)生酶工程。酶工程利用酶或含酶細(xì)胞作為生物催化劑完成重要的化學(xué)反應(yīng)。酶工程主要內(nèi)容包括：酶的生產(chǎn)、分離純化、酶的固定化、酶生物反應(yīng)器、酶與固定化酶的應(yīng)用等。 遵循這一過(guò)程，已經(jīng)出現(xiàn)了一批基因工程表達(dá)的酶制劑。從早期的消化、消炎為主擴(kuò)展到降壓、凝血與抗凝血、抗氧化與抗腫瘤等。本章內(nèi)容第一節(jié) 酶是生物催化劑第二節(jié) 酶的化學(xué)本質(zhì)、結(jié)構(gòu)與功能第三節(jié)

2、酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)第四節(jié) 酶的命名、分類和活性測(cè)定第五節(jié) 固定化酶第六節(jié) 酶在醫(yī)藥學(xué)上的應(yīng)用一、酶的生物學(xué)意義酶的定義：酶是生物體內(nèi)一類具有催化活性和特定空間構(gòu)象的生物大分子，包括蛋白質(zhì)和核酸。第一節(jié) 酶是生物催化劑底物一般催化劑催化酶催化能量非催化產(chǎn)物酶不能改變反應(yīng)的平衡常數(shù)酶與一般催化劑不同，有以下特點(diǎn)： 高度的不穩(wěn)定性 高度的催化效率 高度的特異性 酶活力可調(diào)節(jié)性二、酶作用的專一性和專一性學(xué)說(shuō)受酶催化的化合物稱為該酶的底物(substrate)酶對(duì)底物的專一性立體化學(xué)專一性非立體化學(xué)專一性立體異構(gòu)專一性（D-氨基酸 氧化酶）幾何異構(gòu)專一性鍵專一性基團(tuán)專一性（磷酸酶）絕對(duì)專一性（脲酶）（一）專

3、一性類型1、立體化學(xué)專一性（1）旋光異構(gòu)專一性：當(dāng)?shù)孜锞哂行猱悩?gòu)體時(shí)，酶只能作用其中一種。同樣，底物沒(méi)有不對(duì)稱碳原子，而酶促反應(yīng)含有不對(duì)稱碳原子時(shí)，該底物受酶催化后往往只得到一種立體異構(gòu)體。（2）幾何異構(gòu)專一性：當(dāng)?shù)孜锸呛须p鍵的順?lè)串悩?gòu)體時(shí)，酶只能作用其中一種。2、非立體化學(xué)專一性（1）鍵專一性（2）基團(tuán)專一性（3）絕對(duì)專一性（二）酶的專一性學(xué)說(shuō)Koshland提出“誘導(dǎo)契合學(xué)說(shuō)” 一方面認(rèn)為酶與底物之間互補(bǔ)，另一方面認(rèn)為酶本身不是固定不變的，酶分子與底物的契合是動(dòng)態(tài)的契合。酶分子與底物分子接近時(shí)，酶蛋白受底物分子的誘導(dǎo)，其構(gòu)象發(fā)生有利于同底物結(jié)合的變化，酶與底物在此基礎(chǔ)上互補(bǔ)契合，進(jìn)行反

4、應(yīng)。Fischer曾提出“鎖鑰學(xué)說(shuō)”誘導(dǎo)契合學(xué)說(shuō)E + S ES E + P第一節(jié) 酶是生物催化劑第二節(jié) 酶的化學(xué)本質(zhì)、結(jié)構(gòu)與功能第三節(jié) 酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)第四節(jié) 酶的命名、分類和活性測(cè)定第五節(jié) 固定化酶第六節(jié) 酶在醫(yī)藥學(xué)上的應(yīng)用第二節(jié) 酶的化學(xué)本質(zhì)、結(jié)構(gòu)與功能一 、酶的化學(xué)本質(zhì)及其組成1、酶的化學(xué)本質(zhì) 由于大多數(shù)酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，因此，酶與其他蛋白質(zhì)一樣，主要由氨基酸組成，具有一、二、三、四級(jí)結(jié)構(gòu)。也是兩性電解質(zhì)，具有等電點(diǎn)，易變性失活，能被蛋白水解失活。但是，不是所有蛋白質(zhì)都是酶，只是具有催化活性的蛋白質(zhì)才是酶。酶蛋白 蛋白質(zhì)部分+非蛋白質(zhì)部分+輔助因子=全酶（有活性）結(jié)合酶單純酶小分子有

5、機(jī)化合物（B族維生素）無(wú)機(jī)金屬離子輔酶輔基2、酶的化學(xué)組成酶結(jié)合酶酶蛋白作用： 輔酶或輔基的作用： 起傳遞電子、原子和某些基團(tuán) 的作用即決定反應(yīng)的類型決定催化反應(yīng)的專一性和高效性輔助因子金屬離子作用：1.活性中心的組成成分2.連接酶與底物的橋梁3.維持酶的構(gòu)象 對(duì)結(jié)合酶而言，通常全酶才具有催化活性 酶的輔助因子分為輔基和輔酶。輔酶與酶蛋白結(jié)合比較疏松（一般為非共價(jià)鍵結(jié)合），并可用透析方法除去；輔基與酶蛋白結(jié)合牢固（一般以共價(jià)鍵結(jié)合），不能以透析方法除去。維生素與輔酶維生素輔酶形式主要作用維生素B1TPP-酮酸氧化脫羧維生素B2FMN、FAD遞氫維生素PPNAD+、NADP+遞氫維生素B6磷酸吡

6、哆醛（胺）轉(zhuǎn)移氨基泛酸輔酶A轉(zhuǎn)移?；锼厣锼毓潭–O2葉酸四氫葉酸一碳單位轉(zhuǎn)運(yùn)維生素B12甲基-B12轉(zhuǎn)移甲基硫辛酸硫辛酸轉(zhuǎn)移?；⒚阜肿咏Y(jié)構(gòu)與功能必需基團(tuán)：酶分子中與酶活性相關(guān)的基團(tuán)（羥基、巰基、咪唑基和羧基）活性中心內(nèi)必需基團(tuán)結(jié)合和催化活性中心外必需基團(tuán)維持酶構(gòu)象 活性中心：酶分子與底物結(jié)合并將底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的空間結(jié)構(gòu)區(qū)域結(jié)合基團(tuán)：與底物結(jié)合，形成酶底物復(fù)合物催化基團(tuán)：把底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物1.一級(jí)結(jié)構(gòu)與活性中心2. 酶活性與高級(jí)結(jié)構(gòu)的關(guān)系 酶的活性不僅與一級(jí)結(jié)構(gòu)有關(guān)，并且與其高級(jí)結(jié)構(gòu)也密切相關(guān)。就某種程度而言，在酶活性的表現(xiàn)上，空間結(jié)構(gòu)甚至比一級(jí)結(jié)構(gòu)更為重要。 某些酶在細(xì)胞內(nèi)初合成或分泌

7、時(shí)并無(wú)催化活性，必須經(jīng)過(guò)某些物質(zhì)的作用，才能轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘拿浮＿@種無(wú)活性狀態(tài)的酶的前身稱為酶原。使酶原轉(zhuǎn)化為酶的作用稱為酶原的激活。3. 酶原的激活 胰蛋白酶原的激活 絲組纈天天天天賴異纈甘纈異組絲纈天天天天賴S-SSSSSS - S離子鍵或氫鍵六肽腸激酶胰蛋白酶原胰蛋白酶胃蛋白酶原的激活 幾種碎片彈性蛋白酶胰蛋白酶彈性蛋白酶原幾種碎片羧基肽酶A胰蛋白酶羧基肽酶原A2個(gè)二肽胰凝乳蛋白酶胰蛋白酶或胰凝乳蛋白酶胰凝乳蛋白酶原六肽胰蛋白酶腸激酶或胰蛋白酶胰蛋白酶原6個(gè)多肽碎片胃蛋白酶H+或胃蛋白酶胃蛋白酶原除去的小分子活性酶激活條件酶原各種蛋白酶的激活4. 同工酶概念：催化同一化學(xué)反應(yīng)，但酶蛋白的分

8、子組成、結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)和電泳行為都不同的一組酶稱為同工酶LDH1LDH2LDH3LDH4LDH5H4H3MH2M2HM3M4乳酸脫氫酶（LDH）：H型M型四聚體, 5種同工酶乳酸脫氫酶同工酶電泳圖譜LDH同工酶的亞單位組成及在人體各組織器官中的分布同工酶百分比組織器官 LDH 1 LDH2 LDH3 LDH4 LDH5心肌 67 29 4 1 1 腎 52 28 16 4 1 肝 2 4 11 27 56骨骼肌 4 7 21 27 41紅細(xì)胞 42 36 15 5 2肺 10 20 30 25 15胰腺 30 15 50 5脾 10 25 40 25 5子宮 5 25 44 22

9、 4LDH同工酶的生理功能葡萄糖 丙酮酸 乳酸（LDH5：丙酮酸還原酶）三羧酸循環(huán) 丙酮酸 乳酸（LDH1：乳酸脫氫酶）經(jīng)血液運(yùn)輸NADH + H+NAD+氧化磷酸化ATP骨骼肌心 肌LDH同工酶譜分析的臨床意義：LDH1： 染色斑點(diǎn)大而深幫助診斷心肌梗塞LDH5： 染色斑點(diǎn)大而深幫助診斷肝癌第一節(jié) 酶是生物催化劑第二節(jié) 酶的化學(xué)本質(zhì)、結(jié)構(gòu)與功能第三節(jié) 酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)第四節(jié) 酶的命名、分類和活性測(cè)定第五節(jié) 固定化酶第六節(jié) 酶在醫(yī)藥學(xué)上的應(yīng)用第三節(jié) 酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué) 酶濃度E 底物濃度S 溫度（T） 酸堿度（ pH ） 抑制劑（I） 激活劑（A）影響酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)的因素主要有:一、酶濃度對(duì)酶促反應(yīng)

10、速度的影響條件：底物濃度足夠大反應(yīng)速度與酶濃度成正比酶濃度反應(yīng)速度E2E1SE二、底物濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響Km矩形雙曲線圖形V=Km+SVmS米氏方程式中 Vm為最大反應(yīng)速度， S為底物濃度， Km 為米氏常數(shù)， V為底物濃度不足以產(chǎn)生最大速度時(shí)的反應(yīng)速度米氏常數(shù)的意義米氏常數(shù)Km為酶促反應(yīng)速度達(dá)到最大反應(yīng)速度一半時(shí)的底物濃度。 = 1/2 Vm， Km = SKm單位為mol/LKm 可以近似地代表E與S的親和力, Km越小，代表 E與S親和力越大三、溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響在一定溫度范圍內(nèi)， T，酶活性 ， T，酶活性；超過(guò)一定溫度范圍， 酶反而變性失活；最適溫度，酶活性最高；低溫酶活

11、性 高溫，破壞酶活性四、PH對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響PH 影響酶必需基團(tuán)、底物等的解離程度最適 PH體外實(shí)驗(yàn)選取適當(dāng)緩沖液6 最適PH 10 PH反應(yīng)速度/相對(duì)活力胰蛋白酶五、抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響 巰基酶抑制劑 *專一性抑制 絲氨酸酶抑制劑 不可逆抑制 非專一性抑制抑制作用 *競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 可逆性抑制 *非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用（一）不可逆抑制作用概念：抑制劑與酶活性中心必需基團(tuán)共價(jià)結(jié)合， 不能用透析、超濾等物理方法將其除去常見抑制劑：巰基酶抑制劑 絲氨酸酶抑制劑1、巰基酶抑制劑 抑制劑：重金屬離子Ag+、Hg2+、砷劑等巰基酶失活的酶分子2、羥基酶抑制（膽堿酯酶）抑制劑：有機(jī)磷

12、化合物絲氨酸酶絲氨酸酶乙酰膽堿 + H2O膽堿 + 乙酸膽堿酯酶有機(jī)磷殺蟲劑膽堿能神經(jīng)興奮中毒（心跳變慢、瞳孔縮小、流涎、多汗、呼吸困難）（二）可逆性抑制作用概念：抑制劑與酶非共價(jià)結(jié)合，可用透析、 超濾等方法除去類型：競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用1、競(jìng)爭(zhēng)性抑制 概念：抑制劑結(jié)構(gòu)與底物結(jié)構(gòu)相似，互相競(jìng)爭(zhēng) 酶的活性中心，從而抑制酶的活性ESEEE + S ES E + PI+EISII琥珀酸脫氫酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制CH2COOHCH2COOH琥珀酸脫氫酶H-C-COOHHOOC-C-HCH2-COOHCOOH（-）琥珀酸延胡索酸丙二酸I：磺胺藥S：對(duì)氨基苯甲酸（PABA）磺胺類藥物

13、的競(jìng)爭(zhēng)性抑制二氫葉酸合成酶磺胺藥與PABA相互競(jìng)爭(zhēng)與FH2合成酶結(jié)合PABA二氫蝶呤谷氨酸FH2合成酶磺胺類藥物（-）FH2FH2還原酶FH4結(jié)構(gòu)相似磺胺類藥物的抑菌機(jī)理 MTX（-）結(jié)構(gòu)相似（氨甲蝶呤）細(xì)菌不能利用環(huán)境中的葉酸合成二氫葉酸 競(jìng) 爭(zhēng) 性 抑 制 作 用 特 點(diǎn) 1. i與S結(jié)構(gòu)相似； 2. i與S互相競(jìng)爭(zhēng)與 酶 結(jié)合； 3. 抑制程度取決于S和i的相對(duì)比例； 4. S，可以減少或去除抑制作用。 （Km， Vm不變）2、非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 概念：抑制劑和底物結(jié)構(gòu)不相似，兩者互不干擾 同時(shí)與酶結(jié)合，從而抑制酶活性。E + S ES E + P+I+IEI+SESIESI 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制

14、作用特點(diǎn) 1. i與S結(jié)構(gòu)不相似； 2. i與S互不干擾同時(shí)與 酶 結(jié)合； 3. 抑制程度只取決于i的濃度； 4. S，不能去除抑制作用。 （Km不變， Vm ）非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用3、反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用 概念：抑制劑僅與酶-底物復(fù)合物（ES）結(jié)合， 使酶失去催化活性E + S ES E + P+I ESI六、激活劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響凡能提高酶活性的物質(zhì)，大部分是離子或簡(jiǎn)單的有機(jī)化合物必需激活劑非必需激活劑第一節(jié) 酶是生物催化劑第二節(jié) 酶的化學(xué)本質(zhì)、結(jié)構(gòu)與功能第三節(jié) 酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)第四節(jié) 酶的命名、分類和活性測(cè)定第五節(jié) 固定化酶第六節(jié) 酶在醫(yī)藥學(xué)上的應(yīng)用第四節(jié) 酶的命名、分類和活性測(cè)

15、定 酶的分類與編號(hào) 酶活性的測(cè)定 酶的命名習(xí)慣命名系統(tǒng)命名酶的分類與編號(hào)氧化還原酶類轉(zhuǎn)移酶類水解酶類裂解酶類（裂合酶類）異構(gòu)酶類合成酶類（連接酶類）每種酶的分類編號(hào)均有4個(gè)數(shù)字組成酶活性的測(cè)定 酶活性： 酶活性單位： 酶活性的測(cè)定：時(shí)間Sor P IUKatmol分mol秒酶所具有的催化能力 反應(yīng)的初速度測(cè)定條件：1ml血清，PH=7.4，37，2.5g丙酮酸30分鐘1個(gè)單位（1U）丙氨酸 + -酮戊二酸丙酮酸 + 谷氨酸血液中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）活性的測(cè)定 谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）第一節(jié) 酶是生物催化劑第二節(jié) 酶的化學(xué)本質(zhì)、結(jié)構(gòu)與功能第三節(jié) 酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)第四節(jié) 酶的命名、分類和活性測(cè)定第

16、五節(jié) 固定化酶第六節(jié) 酶在醫(yī)藥學(xué)上的應(yīng)用第五節(jié) 固定化酶（Immobilized Enzyme） 酶在水溶液中不穩(wěn)定，一般不能反復(fù)使用，而且不易與產(chǎn)物分離，不利于產(chǎn)物的提純和精制。 針對(duì)這些限制酶廣泛應(yīng)用的因素，將水溶性酶或游離細(xì)胞經(jīng)過(guò)化學(xué)或物理手段處理，將酶束縛在一定的空間內(nèi)，限制酶分子在此區(qū)間進(jìn)行活躍的催化作用，成為不溶于水的固定化的酶或細(xì)胞。 固定化酶、固定化細(xì)胞是一種在空間運(yùn)動(dòng)上受到完全約束或局部約束的酶、細(xì)胞?？墒顾褂玫拿浮⒓?xì)胞能反復(fù)使用，使產(chǎn)物分離提取容易，并在生產(chǎn)工藝上可以實(shí)現(xiàn)連續(xù)化和自動(dòng)化，故在20世紀(jì)70年代后得到迅速發(fā)展 。 其新的功能和新的應(yīng)用正在迅速不斷地?cái)U(kuò)展，是一項(xiàng)

17、研究領(lǐng)域?qū)拸V、應(yīng)用前景極為引人矚目的新研究領(lǐng)域和新技術(shù)。 固定化酶是指借助于物理和化學(xué)的方法把酶束縛在一定空間內(nèi)并仍具有催化活性的酶制劑。 廣義的固定化酶又包括固定化酶和固定化細(xì)胞兩類。 一、固定化酶的概念和優(yōu)點(diǎn)固定化酶優(yōu)點(diǎn)：酶經(jīng)固定化后，穩(wěn)定性有了提高；可反復(fù)使用，提高使用效率、降低成本；有一定機(jī)械強(qiáng)度，可進(jìn)行柱式反應(yīng)或分批反應(yīng)，使反應(yīng)連續(xù)化、自動(dòng)化，適合于現(xiàn)代化規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)；極易和產(chǎn)物分離，酶不混入產(chǎn)物中，簡(jiǎn)化了產(chǎn)品的純化工藝。 吸附法 包埋法 共價(jià)結(jié)合法 交聯(lián)法 二、固定化酶的制備方法共價(jià)結(jié)合法1.吸附法 吸附法是通過(guò)載體表面和酶分子表面間的次級(jí)鍵相互作用而達(dá)到固定目的的方法。 只需將

18、酶液與具有活潑表面的吸附劑接觸，再經(jīng)洗滌除去未吸附的酶便能制得固定化酶。是最簡(jiǎn)單的固定化技術(shù)，在經(jīng)濟(jì)上也最具有吸引力。物理吸附法： 載體有高嶺土、磷酸鈣凝膠、多孔玻璃等。離子吸附法： 載體有CM-纖維素、DEAE-纖維素和DEAESephadex、合成的大孔陽(yáng)離子和陰離子交換樹脂等。 吸附法的優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，可供選擇的載體類型多，吸附過(guò)程可同時(shí)達(dá)到純化和固化的目的，所得到的固定化酶使用失活后可以重新活化和再生。吸附法的缺點(diǎn)：酶和載體的結(jié)合力不強(qiáng)，易脫落， 會(huì)導(dǎo)致催化活力的喪失和沾污反應(yīng)產(chǎn)物。 世界第一例獲得工業(yè)應(yīng)用的固定化酶是 DEAE-Sephadex A-25吸附的氨基?；阜磻?yīng)用于 DL

19、-AA的光學(xué)分析。吸附法的優(yōu)點(diǎn)、缺點(diǎn)共價(jià)結(jié)合法是目前研究中最為活躍的方法。它是酶蛋白分子上的功能基團(tuán)和固相支持物表面上的反應(yīng)基團(tuán)之間形成共價(jià)鍵，因而將酶固定在支持物上（借助共價(jià)鍵將酶的非活性必需側(cè)鏈基團(tuán)和載體的功能基團(tuán)進(jìn)行偶連）。2. 共價(jià)結(jié)合法 共價(jià)結(jié)合法有數(shù)十種，如重氮化、迭氮化、酸酐活化法、異硫氰酸酯法、雙功能試劑反應(yīng)等。 優(yōu)點(diǎn)： 酶與載體結(jié)合牢固，操作穩(wěn)定性良好。 缺點(diǎn)： 載體需活化，固定化操作復(fù)雜，反應(yīng)條件較劇烈，酶易失活并產(chǎn)生空間位阻效應(yīng)。 3 . 交聯(lián)法 是用雙功能或多功能試劑使酶分子內(nèi)或分子間彼此連接成網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)而使酶固定化的技術(shù)。交聯(lián)法常與吸附法結(jié)合使用，或者與包埋法配合，目的

20、是使酶緊緊地結(jié)合于載體上。 有4種交聯(lián)方法： 交聯(lián)酶法, 酶與輔助蛋白交聯(lián)法 吸附交聯(lián)法, 載體交聯(lián)法。 包埋法又分為凝膠包埋法及微囊化包埋法兩種。 凝膠包埋法是將酶或細(xì)胞限制于高聚物網(wǎng)格中，包埋介質(zhì)有卡拉膠、海藻膠、瓊脂、明膠和聚乙烯醇（PVA）等 ； 4. 包埋法四種固定化酶制備方法的特點(diǎn)小結(jié)物理吸附包埋法共價(jià)結(jié)合法共價(jià)交聯(lián)法制備易易難難結(jié)合力弱強(qiáng)強(qiáng)強(qiáng)酶活力高高中中底物專一性無(wú)變化無(wú)變化有變化有變化再生可能不可能不可能不可能固定化費(fèi)用低中高中制法特性三 . 固定化酶在醫(yī)藥中的應(yīng)用工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)藥物生產(chǎn)親和層析醫(yī)療固定化酶(細(xì)胞）應(yīng)用實(shí)例固定化酶和固定化細(xì)胞應(yīng)用生產(chǎn)時(shí)間氨基?；D(zhuǎn)移酶DL-氨基酸

21、的旋光度解析1969葡萄糖異構(gòu)酶將葡萄糖異構(gòu)變?yōu)楣?973青霉素酰胺酶生產(chǎn)6-APA1973天冬氨酸酶生產(chǎn)L-天冬氨酸1973延胡索酸酶生產(chǎn)L-蘋果酸1974-半乳糖苷酶水解乳糖1977L-天冬氨酸-脫羧酶生產(chǎn)L-丙氨酸1982 固定化酶在工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的應(yīng)用 產(chǎn) 物 酶或細(xì)胞 固定化方法 原 料L-氨基酸果糖漿6APAL-門冬氨酸L-蘋果酸低乳糖牛奶乳糖干蛋白果汁脫苦啤酒植物白脫脂肪酸氨基酰化酶葡萄糖異構(gòu)酶或含該酶之菌體青霉素酰胺酶含有門冬氨酸的菌體含有反丁烯二酸酶的菌體乳糖酶堿性蛋白酶葡萄糖氧化酶和氧化氫酶柚苷酶木瓜蛋白酶脂肪酶脂肪酶載體結(jié)合法載體結(jié)合法或交聯(lián)法載體結(jié)合法膠格包埋法膠格包埋

22、法載體結(jié)合法載體結(jié)合法膠格包埋法載體結(jié)合法載體結(jié)合法或包埋法膠格包埋法載體結(jié)合法乙酰-DL-氨基酸葡萄糖青霉素G反丁烯二酸反丁烯二酸牛奶牛奶蛋白桔類果汁生啤酒植物油植物油 產(chǎn) 物 酶或細(xì)胞 固定化方法 原 料類固醇L-丙氨酸D-苯甘氨酸ATP核苷酸類味精乙醇啤酒L-亮氨酸乙酸乳酸淀粉酶桿菌肽氫氣含脫氫酶及羥化酶的菌體含有L-門冬氨酸、-脫羧酶的菌體氨基酰化酶乙酰激酶5-磷酸二酯酶，5-腺苷酸脫氨酶Sacharomyces carlsbergensie或S.Cerevisiae同上Serratia marcescensAectobcter.sp.乳酸桿菌與酵母Bacillus substilis

23、Bacill sp.Clostridium butyicum Rhodospirillium rubrum膠格包埋法包埋法載體結(jié)合法載體結(jié)合法載體結(jié)合法角叉膠或聚丙烯酰胺膠包埋聚乙烯氯或多孔磚吸附或海藻酸包埋角叉膠包埋水合氧化鈦吸附明膠包埋聚丙烯酰胺膠包埋聚丙烯酰胺膠包埋聚丙烯酰胺或瓊脂包埋類固醇前體L-門冬氨酸乙酰-DL-苯基苷氨酸ADPRNA葡萄糖培養(yǎng)基 蘇氨酸培養(yǎng)基乙醇培養(yǎng)基 固定化生長(zhǎng)菌體在三廢處理上的應(yīng)用應(yīng)用內(nèi)容 菌 體 固定化方法 毒 物廢水處理脫氮作用Candida tropicalisPsendomonas Putida各種微生物混合培養(yǎng)Pseadomonas sp Micrococcus deritrificans聚丙烯酰胺膠包埋聚丙烯酰胺膠包埋皂土和Mg或聚氨基甲酸乙酯海綿活性炭吸附液膜酚苯廢水亞硝酸、硝酸 固定化酶在醫(yī)藥治療上的應(yīng)用 溶液酶的應(yīng)用缺陷：酶作為異體物質(zhì)，在體內(nèi)應(yīng)用會(huì)導(dǎo)致免疫反應(yīng)酶是蛋白質(zhì)，在體內(nèi)易被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)移除和被蛋白質(zhì)酶水解破壞由于稀釋效應(yīng)，藥物酶無(wú)法集中于靶器官組織以達(dá)到治療所需的