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1、電子顯微鏡技術(shù)和其在醫(yī)學(xué)中的臨床應(yīng)用透射電子顯微鏡Transmission Electron Microscope, TEM透射電鏡外觀一、結(jié)構(gòu)(一)照明系統(tǒng)1.電子槍: 陰極:鎢絲,V 型 陽(yáng)極:帶孔的金屬圓盤 -10-120kv 柵極:控制電子束2.聚光鏡( 1-3個(gè)活動(dòng)光闌):200、300、400um控制照明束的強(qiáng)弱(二)樣品室(三)成像系統(tǒng):物鏡、中間鏡、投影鏡 (四)觀察室、底片室透射電子顯微鏡剖面圖透射電鏡的成像原理 高速電子與樣品中原子核發(fā)生碰撞,從而發(fā)生散射現(xiàn)象。標(biāo)本厚度、密度、電子束受阻情況不同,透過(guò)標(biāo)本電子束流就有多少的區(qū)別,熒光屏上出現(xiàn)明暗不同影像。標(biāo)本的密度、厚度與電

2、子的散射作用成正比。 標(biāo)本中電子散射得少,透過(guò)的部分就多-標(biāo)本亮;反之亦然。電子產(chǎn)生與樣品發(fā)生的多種作用入射電子束二次電子俄歇電子背散射電子特征X射線散射電子散射電子透射電子樣品二、超薄切片技術(shù) 受電子束穿透能力的限制,標(biāo)本切成厚度小于m稱超薄切片,常用厚度為50-70nm(在光視野下呈現(xiàn)灰色)TEM樣品制備取材固定脫水浸透、包埋超薄切片染色三、組織、細(xì)胞、細(xì)胞器的電鏡表現(xiàn)膠原纖維骨骼肌細(xì)胞突 觸有髓神經(jīng)纖維四、透射電鏡在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用病毒、微生物: 負(fù)染技術(shù):2%4%PTA,稀釋 注意點(diǎn):1.定位性、特征性、重復(fù)性、 排列性,忌偶見性 2.偽性:SER、鉛污染、核內(nèi) 假包含體、初級(jí)溶酶體、絨毛

3、 突起甲型流感病毒負(fù)染,圖示一條完整的絲狀體和一個(gè)小球狀體乙型肝炎抗原負(fù)染細(xì)胞核內(nèi)結(jié)晶狀排列的腺病毒粘液病毒金黃色葡萄球菌120,00078,000 78,000 支原體電鏡技術(shù)在活檢中的作用1、腫瘤細(xì)胞鱗狀細(xì)胞癌,T-張力微絲惡性黑色素瘤細(xì)胞電鏡在腎活檢中的應(yīng)用IgA腎病,可見免疫復(fù)合物沉積活動(dòng)性狼瘡性腎炎,腎小球毛細(xì)血管腔中可見炎癥細(xì)胞腎淀粉樣變,腎小球系膜基質(zhì)中有呈細(xì)絲狀淀粉樣物沉著(AF)電鏡在代謝性疾病診斷中的應(yīng)用電鏡在肌肉活檢診斷中的應(yīng)用線粒體肌病,肌膜下線粒體數(shù)量明顯增多,形態(tài)異常16000周期性麻痹,肌纖維內(nèi)可見許多小管()聚集,排列有序 16000電鏡在生殖系統(tǒng)診斷中的應(yīng)用電鏡在生殖系統(tǒng)診斷中的應(yīng)用電鏡在其他方面的應(yīng)用人肺慢支-肺泡壁纖維化,間隔增厚,由成纖維細(xì)胞(F)和大量膠原原纖維(Co)占據(jù),雜有彈

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