2021屆全國新高考生物精品復(fù)習(xí)-生物技術(shù)實(shí)踐知識清單課件(70頁P(yáng)PT)

1、2021屆全國新高考生物精品復(fù)習(xí)生物技術(shù)實(shí)踐知識清單第1頁，共70頁。專題1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1 果酒和果醋的制作 課題2 腐乳的制作課題3 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量第2頁，共70頁。 1. 果酒制作菌種是 ，是一種單細(xì)胞真菌，真核生物，代謝類型為 ，適宜條件下進(jìn)行 生殖。酵母菌在有氧條件下進(jìn)行 ，無氧條件下進(jìn)行 。 （1）有氧呼吸反應(yīng)式：（2）無氧呼吸反應(yīng)式：（3）制酒原理 ： 2. 果醋制作菌種是 ，原核生物，代謝類型為 ，以二分裂方式增殖。原理如下： （1）當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)， 。 （2）當(dāng)氧氣充足，缺少糖源時(shí)， 。 課題1 果酒和果醋的制作 酵母菌異養(yǎng)兼性厭氧型出芽有氧呼吸大

2、量繁殖酒精發(fā)酵產(chǎn)生酒精C6H12O66H2O6O2 6CO212H2O大量能量酶C6H12O6 2C2H5OH2CO2少量能量酶酵母菌無氧呼吸將葡萄糖轉(zhuǎn)化為酒精醋酸菌異養(yǎng)需氧型醋酸菌將果汁中的糖分解成醋酸醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再變?yōu)榇姿岬?頁，共70頁。3. 葡萄酒的自然發(fā)酵，菌種來自 ；工業(yè)釀酒可在無菌條件下 。 4. 葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因： 。 5. 在傳統(tǒng)釀酒過程中，一般不需要嚴(yán)格的滅菌過程，是因?yàn)椋涸谌毖酢⒊仕嵝缘陌l(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，絕大多數(shù)其他微生物無法適應(yīng)而受到抑制。 6. 果酒制作中，酒精含量達(dá)一定程度后不變，CO2也不產(chǎn)生，原因可能是 。 7. 喝剩的果酒放置一段時(shí)

3、間后會變酸，原因是： 。 8. 制作果醋時(shí)，變酸的酒表面常常有一層白色菌膜，這層白色菌膜是 形成的。 課題1 果酒和果醋的制作 附著在葡萄皮上的野生型酵母菌人工接種酵母菌菌種在發(fā)酵過程中，紅葡萄皮的色素進(jìn)入發(fā)酵液中，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色原料耗盡或高濃度的酒精抑制了酵母菌細(xì)胞呼吸醋酸菌在有氧條件下把酒精變?yōu)榇姿岽姿峋罅糠敝车?頁，共70頁。9. 果酒和果醋制作流程： （1）新鮮的葡萄應(yīng) 。若先去梗再沖洗，會造成汁液流失和雜菌污染。 （2）沖洗的目的是 ，但不能反復(fù)沖洗，以防止菌種流失。 （3）葡萄汁裝入發(fā)酵瓶，要留約 的空間，目的是讓酵母菌有氧呼吸大量繁殖，防止發(fā)酵液溢出。 （4）果酒制作溫度控

4、制在 ，時(shí)間為 ；果醋制作溫度控制在 ，時(shí)間為 。 （5）果酒制作前期需氧后期不需氧，果醋制作 。 10. 果酒和果醋制作的發(fā)酵裝置（見圖） 課題1 果酒和果醋的制作 挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵(果酒)醋酸發(fā)酵(果醋)先沖洗再去梗洗去浮塵1/318251012d303578d一直需氧第5頁，共70頁。課題1 果酒和果醋的制作 （1）充氣口：在酒精發(fā)酵時(shí)應(yīng) ；在醋酸發(fā)酵時(shí) 。 （2）排氣口：排氣口連接 目的是 。（3）出料口： 。注：若使用帶蓋的瓶子制果酒果醋：在發(fā)酵過程中，每隔12h左右將瓶蓋擰松一次，以放出CO2，此后再將瓶蓋擰緊。11. 酒精檢測：在 條件下，橙色的重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈 。

5、關(guān)閉長而彎曲的膠管取樣、監(jiān)測酸性灰綠色連接充氣泵泵入無菌空氣防止空氣中微生物的污染第6頁，共70頁。1. 腐乳制作的菌種主要是 ，絲狀真菌，真核生物，代謝類型為 ，進(jìn)行 生殖。 2. 腐乳制作原理：3. 腐乳制作流程：（1）豆腐含水量為70%左右為宜。含水量過高， ；含水量過低， 。 （2）豆腐上長毛霉：課題2 腐乳的制作毛霉異養(yǎng)需氧型孢子豆腐不易成形不利于毛霉生長毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將腐乳中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸。讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制。第7頁，共70頁。（2）豆腐上長毛霉：現(xiàn)代腐乳生產(chǎn)是在 條件下將 直接接種在豆腐上，這樣

6、可避免雜菌污染，保證產(chǎn)品品質(zhì)。 （3）加鹽方法：鹽的作用：課題2 腐乳的制作嚴(yán)格無菌優(yōu)良毛霉菌種利用空氣中的毛霉孢子，溫度控制在1518，保持一定濕度，5d后豆腐塊表面布滿菌絲； 逐層加鹽，隨層數(shù)加高而增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些，以有效防止雜菌污染。 1鹽具有析出豆腐中水分，2抑制微生物生長，3調(diào)味的作用。鹽濃度過低，不足以抑制微生物的生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽濃度過高，會影響腐乳的口味(苦咸)。第8頁，共70頁。（4）鹵湯由 組成。鹵湯中酒的含量一般控制在 左右，酒具有 的作用；香辛料有 的作用。酒精含量過高， ；含量過低，不足以抑制微生物生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)。（5）密封

7、腌制：創(chuàng)造無氧環(huán)境，利用厭氧菌產(chǎn)生的酶繼續(xù)厭氧發(fā)酵，促進(jìn)腐乳的后熟。 課題2 腐乳的制作酒及各種香辛料12%抑制微生物生長及調(diào)味防腐殺菌和調(diào)味腐乳成熟時(shí)間會延長第9頁，共70頁。1. 泡菜制作的菌種是 ，來自 。常見乳酸菌有 ，其中 常用于生產(chǎn)酸奶。 2. 乳酸菌屬于原核生物，代謝類型為 ，以二分裂方式增殖。 3. 泡菜制作原理：4. 含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶:課題3 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量乳酸菌蔬菜表面乳酸鏈球菌和乳酸桿菌乳酸桿菌異養(yǎng)厭氧型乳酸菌在無氧條件下進(jìn)行乳酸發(fā)酵，將葡萄糖分解成乳酸。因?yàn)樗崮痰闹谱饕揽康氖侨樗峋陌l(fā)酵作用，而抗生素能夠殺死或抑制乳酸菌的生長，因此含有抗生素的

8、牛奶不能發(fā)酵成酸奶。 第10頁，共70頁。5. 選用的蔬菜要新鮮，否則蔬菜中的 。膳食中的絕大部分亞硝酸鹽在人體內(nèi)以“過客”形式隨尿排出，只有在特定的條件下(如 )，才會轉(zhuǎn)變成致癌物亞硝胺。 6. 配制鹽水：清水與鹽的質(zhì)量比為 ，鹽水要煮沸冷卻。煮沸的目的是 ，冷卻是 。鹽有 的作用。鹽水濃度不能太高，因?yàn)辂}水濃度太高會引起 ，影響乳酸菌生長繁殖，甚至導(dǎo)致乳酸菌死亡。 7. 在冷卻后的鹽水中加入少量“陳菜泡液”，目的是課題3 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量硝酸鹽易被還原為亞硝酸鹽適宜的pH、溫度和一定的微生物作用4:1滅菌除氧保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響滅菌、滲出蔬菜中過多的水分以及調(diào)味乳

9、酸菌細(xì)胞滲透失水增加乳酸菌數(shù)量，縮短泡菜制作時(shí)間。 第11頁，共70頁。8. 加入調(diào)味料后要裝壇密封(壇蓋邊沿水槽注水)，目的是9. 泡菜中亞硝酸鹽的含量與 有關(guān)。溫度過高、食鹽用量過低、腌制時(shí)間過短，易造成細(xì)菌大量繁殖，使亞硝酸鹽含量增加。一般在腌制 后，亞硝酸鹽的含量開始下降。 10. 亞硝酸鹽含量的測定 （1）方法： 。 （2）原理：在 條件下，亞硝酸鹽與 發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與 結(jié)合形成玫瑰紅色染料。將顯色反應(yīng)后的樣品與 進(jìn)行目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。課題3 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量創(chuàng)造無氧條件，利用乳酸菌發(fā)酵。腌制時(shí)間、腌制溫度和食鹽用量10d比色法鹽酸酸化對氨基

10、苯磺酸N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液第12頁，共70頁。（3）步驟：11. 發(fā)酵過程中應(yīng)定期測定亞硝酸鹽的含量，原因是:12.泡菜腌制過程中，亞硝酸鹽的含量 ，13.從開始制作到泡菜質(zhì)量最佳這段時(shí)間，泡菜液逐漸變酸，這段時(shí)間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌數(shù)量 ，雜菌數(shù)量 ，原因是: 課題3 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量配制溶液制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液制備樣品處理液比色。發(fā)酵不同時(shí)期亞硝酸鹽含量會發(fā)生變化，及時(shí)測定是為了把握取食泡菜的最佳時(shí)機(jī)。先增加后減少最后穩(wěn)定在較低水平。 增加減少乳酸菌比雜菌更耐酸。第13頁，共70頁。專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的

11、分離與計(jì)數(shù)課題3 分解纖維素的微生物的分離第14頁，共70頁。1.培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分為 ，區(qū)別是: ；按用途分為 。微生物可在 表面形成肉眼可見的菌落，固體培養(yǎng)基可用于 。液體培養(yǎng)基可用于微生物的 ，目的是 。 2.各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有 。另外，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對 以及 的要求。如培養(yǎng)細(xì)菌(如乳酸菌)時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加 ，培養(yǎng)霉菌(真菌)時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至 ，培養(yǎng)細(xì)菌需將pH調(diào)至 ，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供 的條件。 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基中加入了凝固劑瓊脂選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基微生物的分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)和保藏

12、菌種選擇培養(yǎng)增加目的菌的數(shù)量水、碳源、氮源和無機(jī)鹽pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)氧氣維生素酸性中性或微堿性無氧第15頁，共70頁。3. 無菌技術(shù)的目的是 ，關(guān)鍵是創(chuàng)造 條件，防止 。 4. 消毒和滅菌 （1）消毒：常用方法：課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)獲得純凈培養(yǎng)物無菌外來雜菌的入侵用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物，不包括芽孢和孢子。1煮沸消毒法；2巴氏消毒法(既殺死牛奶中微生物，又使牛奶中的營養(yǎng)成分不被破壞)；3化學(xué)藥劑消毒法(用酒精擦拭雙手、氯氣消毒水源)；4紫外線消毒法(接種室、接種箱或超凈工作臺)。 第16頁，共70頁。（2）滅菌：常用方法：5. 制備培養(yǎng)基的步驟：課題1 微

13、生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。1灼燒滅菌：在火焰的充分燃燒層灼燒，可迅速徹底的滅菌，如接種環(huán)、接種針、試管口、瓶口。 2干熱滅菌：工具為干熱滅菌箱，如培養(yǎng)皿、試管、吸管等耐高溫、需保持干燥的物品。3高壓蒸汽滅菌：工具為高壓蒸汽滅菌鍋，如培養(yǎng)基、無菌水,此法能留住培養(yǎng)基的水分。計(jì)算稱量溶化(調(diào)節(jié)pH)滅菌倒平板。第17頁，共70頁。5. 制備培養(yǎng)基的步驟：（1）在溶化后滅菌前調(diào)節(jié)pH，若先滅菌后調(diào)pH 。（2）培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌，培養(yǎng)皿干熱滅菌。 （3）平板冷卻凝固后需 ，目的是防止 。 6. 微生物接種方法(分離純化細(xì)菌方法) （1）平板劃線法：通過

14、 在 表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。在數(shù)次劃線后，可以分離到由 。 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)易污染培養(yǎng)基皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基中造成污染倒置接種環(huán)瓊脂固體培養(yǎng)基一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體，即菌落第18頁，共70頁。灼燒接種環(huán)目的：第一次灼燒： ；以后每次劃線前灼燒： ； ；劃線結(jié)束灼燒： 。 灼燒次數(shù) 。 在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線，以免 。 每次從上一次劃線的末端開始，目的是 。 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃線的菌種來自上次劃線末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種

15、，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者劃線次數(shù)1接種環(huán)溫度太高殺死菌種將聚集的菌體逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面，以便得到單個(gè)菌落第19頁，共70頁。（2）稀釋涂布平板法：用 (工具)和 將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后用 (工具)將不同稀釋度的菌液分別 地涂布到 的表面進(jìn)行培養(yǎng)。 在 的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成 ，從而能在培養(yǎng)基表面形成 。 梯度稀釋原因： ；目的： 。 梯度稀釋中，每次取樣前需用手指輕壓移液管橡皮頭，吹吸三次，目的是 。 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)移液管無菌水涂布器瓊脂固體培養(yǎng)基均勻稀釋度足夠高單個(gè)細(xì)胞單個(gè)的菌落培養(yǎng)液中菌體濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落將聚集的菌體分散開，

16、以便獲得單菌落使微生物和無菌水混合均勻第20頁，共70頁。涂布器浸在酒精中的主要目的是 ；為保證菌液均勻分布，應(yīng)在涂布時(shí) 。 注：以上操作均在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止雜菌污染。若要分離并統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)，應(yīng)選用稀釋涂布平板法。 平板劃線法不能用于活菌計(jì)數(shù)的原因是 。 7. 菌種保藏：頻繁使用的菌種用 ，但保存時(shí)間不長，因?yàn)?；需長期保存的菌種用 。 課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)為涂布器的灼燒滅菌做準(zhǔn)備轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿菌落連成片，無法計(jì)數(shù)臨時(shí)保藏法(4冷藏室)菌種易被污染或產(chǎn)生變異甘油管藏法(-20冷凍箱)第21頁，共70頁。1. 在自然界尋找目的菌：要根據(jù)目的菌對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。實(shí)驗(yàn)室目

17、的菌株篩選原理： 2. 選擇培養(yǎng)基：例如：以 為唯一氮源的培養(yǎng)基可篩選出尿素分解菌；以 為唯一碳源的培養(yǎng)基可篩選出纖維素分解菌； 可篩選出自養(yǎng)微生物； 的培養(yǎng)基可篩選出固氮微生物；加入抗生素的培養(yǎng)基可篩選出 。 課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長.允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。尿素纖維素缺乏有機(jī)碳源的培養(yǎng)基缺乏氮源酵母菌、霉菌等真菌第22頁，共70頁。3. 微生物計(jì)數(shù)方法 （1）稀釋涂布平板法（活菌計(jì)數(shù)法） 原理：原則：設(shè)置 ，同一稀釋度下 ，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)說服力和準(zhǔn)

18、確性。 為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。 課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。重復(fù)組至少涂布3個(gè)平板30300第23頁，共70頁。計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù) 。結(jié)果：統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，原因是: 。 需要設(shè)置 的培養(yǎng)基作為空白對照，目的是: 。 課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(CV)M(個(gè)/mL)C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液體積(mL)(一般為0.1mL)，M代表稀

19、釋倍數(shù)。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落未接種(或接種等量無菌水)判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染第24頁，共70頁。（2）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法 主要用具： 。 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板使用方法：“先蓋后滴再吸”，即先蓋蓋玻片，后滴培養(yǎng)液，再用吸水紙吸。 計(jì)算公式：1mL培養(yǎng)液中細(xì)胞個(gè)數(shù)小方格中細(xì)胞平均數(shù)400104稀釋倍數(shù)(個(gè)/mL) 結(jié)果：估算值比實(shí)際值 ，因?yàn)樵摲椒ú荒? 。 課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板和顯微鏡偏大區(qū)分細(xì)胞的死活，計(jì)數(shù)到的細(xì)胞數(shù)包括了死亡的細(xì)胞數(shù)第25頁，共70頁。4. 實(shí)驗(yàn)流程：（1）土壤取樣：取樣時(shí)應(yīng)選取取富含有機(jī)質(zhì)、pH接近中性且潮濕的、距地

20、表約 的土壤層。取一定量土溶于 中，制成土壤溶液。 （2）將樣品進(jìn)行梯度稀釋：用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行涂布培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在30300之間、適于計(jì)數(shù)的平板。測定細(xì)菌數(shù)量一般選用 倍稀釋液，測定放線菌數(shù)量一般選用 倍稀釋液，測定真菌數(shù)量一般選用 倍稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)。 課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)土壤取樣樣品稀釋涂布培養(yǎng)與觀察計(jì)數(shù)。38cm無菌水104 ,105 ,106103 ,104 ,105102 ,103 ,104第26頁，共70頁。（3）培養(yǎng)與觀察：不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和時(shí)間。為防止皿蓋上的水珠滴入培養(yǎng)基造成污染，需將培養(yǎng)皿呈 狀態(tài)放置。每隔24

21、h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，最后選取 的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因 。一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征，這些特征包括: 等方面。 （4）計(jì)數(shù)：當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，取同一稀釋度下至少3個(gè)平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，求出平均值，并根據(jù)所對應(yīng)的稀釋度計(jì)算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。用記號筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí)，應(yīng)標(biāo)記在 。 課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)倒置菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色皿底第27頁，共70頁。5. 的培養(yǎng)基(空白對照)上有菌落生長，說明培養(yǎng)基被雜菌污染。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落的數(shù)目和種類遠(yuǎn)大于選擇培養(yǎng)基時(shí)，說明選擇培養(yǎng)基具有

22、篩選作用。 6. 分解尿素的細(xì)菌合成的 能將尿素分解為氨，使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高。在以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基中加入 (鑒別培養(yǎng)基)培養(yǎng)細(xì)菌，若pH升高，指示劑將變紅，可初步確定該種細(xì)菌能夠分解尿素。 7. 伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基屬于 ，大腸桿菌代謝產(chǎn)物會和伊紅、美藍(lán)發(fā)生反應(yīng)，使菌落呈現(xiàn) 。 課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)未接種或接種等量無菌水脲酶酚紅指示劑鑒別培養(yǎng)基黑色第28頁，共70頁。1. 纖維素是一種多糖，其組成單位是為 。纖維素酶是一種復(fù)合酶，它至少包括三種組分，即 。2. 纖維素分解菌的篩選方法是 。剛果紅(簡稱CR)是一種染料，能與纖維素形成 ，當(dāng)纖維素被分解后，培養(yǎng)基

23、中會出現(xiàn)以 ， 反應(yīng)細(xì)菌降解纖維素的能力。 3. 實(shí)驗(yàn)流程：課題3 分解纖維素的微生物的分離葡萄糖C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶剛果紅染色法紅色復(fù)合物纖維素分解菌為中心的透明圈透明圈的大小土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。 第29頁，共70頁。（1）土壤取樣：選擇纖維素含量豐富的土壤環(huán)境采集土樣。取一定量土溶于無菌水中，制成土壤溶液。 （2）選擇培養(yǎng)(擴(kuò)大培養(yǎng)/富聚培養(yǎng))：以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基，屬 (物理性質(zhì))、 (用途)。選擇培養(yǎng)的目的是 ；振蕩培養(yǎng)的目的是 。 （3）梯度稀釋：目的是使纖維素分解菌分散開，以便能夠得到單細(xì)胞菌落。 （4）涂

24、布培養(yǎng)：用 (物理性質(zhì))、 (用途)。為防止皿蓋上的水珠滴入培養(yǎng)基造成污染，需將培養(yǎng)皿呈倒置狀態(tài)放置。課題3 分解纖維素的微生物的分離液體培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基增加目的菌濃度增加培養(yǎng)液中溶解氧含量，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率固體培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基第30頁，共70頁。（5）篩選菌株：挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。透明圈越大，說明細(xì)菌分解利用纖維素的能力越強(qiáng)。(如圖) 4. 以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基可初步篩選出纖維素分解菌，為進(jìn)一步確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行 實(shí)驗(yàn)。纖維素酶的發(fā)酵方法有 兩種。 課題3 分解纖維素的微生物的分離發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶液體發(fā)酵和固體發(fā)酵第31頁，共70頁。專題4 酶的研究與應(yīng)用 課

25、題1 果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用 課題2 探討加酶洗衣粉的洗滌效果 課題3 酵母細(xì)胞的固定化 第32頁，共70頁。1. 果膠：（1）作用：組成 的主要組成成分之一。 （2）成分：由 聚合而成的一種高分子化合物。 （3）特點(diǎn)：2. 果膠酶：（1）來源： 均能產(chǎn)生果膠酶。食品加工業(yè)中的果膠酶是由 發(fā)酵生產(chǎn)的。 （2）作用：將不溶性的果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，使渾濁的果汁變得澄清。瓦解植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和胞間層，使榨取果汁變得更加容易，提高出汁率。 課題1 果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用植物細(xì)胞壁以及胞間層半乳糖醛酸不溶于水。在果汁加工中，果膠的存在易導(dǎo)致果汁出汁率低，果汁渾濁。植物、霉菌、酵母菌和細(xì)菌霉

26、菌第33頁，共70頁。（3）組成：是分解果膠的一類酶的總稱，包括: 。 3. 酶的活性與影響酶活性的因素 （1）酶的活性：概念： 。 表示方法：酶活性的高低可以用在一定條件下，酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的 來表示。 酶反應(yīng)速度的表示方法： 來表示。 （2）影響酶活性的因素： 等。 課題1 果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠脂酶等指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力反應(yīng)速度用單位時(shí)間內(nèi)、單位體積中反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量溫度、pH和酶的抑制劑第34頁，共70頁。4. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 【實(shí)驗(yàn)一】探究溫度(pH)對酶活性的影響 （1）自變量： ； 因變量： ； 無關(guān)變量： 。 （2）注意事項(xiàng)

27、：探究溫度對酶活性影響時(shí)，在果泥和果膠酶混合之前，將它們分裝在不同的試管中恒溫處理，可以保證底物和酶在混合時(shí)的溫度是相同的，避免了果泥和果膠酶混合時(shí)影響混合物的溫度，從而影響果膠酶活性。 探究溫度(pH)對酶活性的影響時(shí)，不同的溫度(pH)梯度之間就可以作為相互對照。 課題1 果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用溫度(pH)酶的活性果泥用量、果膠酶的濃度和用量、反應(yīng)時(shí)間、過濾時(shí)間等第35頁，共70頁。（3）判斷果膠酶活性高低的方法： 課題1 果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用測定單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生果汁的體積(或出汁率)來判斷。獲得的果汁越多，說明果膠酶的活性越高。 比較果汁的澄清度來判斷果膠酶的活性。果汁越澄清，表明果

28、膠酶的活性越高。 第36頁，共70頁?！緦?shí)驗(yàn)二】探究果膠酶的用量 （1）自變量： ；因變量： ；無關(guān)變量： 。 （2）判斷果膠酶用量是否合適的思路 如果隨著酶的用量增加，過濾得到的果汁體積也增加，說明 ； 當(dāng)酶的用量增加到某個(gè)值后，再增加酶的用量，過濾得到的果汁的體積 ，說明酶的用量已經(jīng)足夠，那么，這個(gè)值就是 。 課題1 果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用酶的用量果汁體積果泥用量、反應(yīng)時(shí)間、溫度、pH等酶的用量不足不再改變酶的最適用量第37頁，共70頁。1. 加酶洗衣粉 （1）概念：加酶洗衣粉是指 的洗衣粉。 （2）酶制劑 常用種類： 四類。 應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的種類是： 。 作用原理：酶制劑能將

29、，使污跡易從衣物上脫落。如堿性蛋白酶能將血漬、奶漬中含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子肽，脂肪酶將脂肪水解成甘油和脂肪酸。 影響酶活性的因素：溫度、酸堿度和 。 課題2 探討加酶洗衣粉的洗滌效果含有酶制劑蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶堿性蛋白酶和堿性脂肪酶難溶性大分子物質(zhì)分解為可溶性小分子物質(zhì)表面活性劑第38頁，共70頁。生產(chǎn)方式：通過基因工程生產(chǎn)出能夠 。 （3）優(yōu)點(diǎn)：加酶洗衣粉降低了 ，使洗滌劑朝低磷無磷的方向發(fā)展，減少對環(huán)境的污染。普通洗衣粉中含有磷，含磷污水的排放可能導(dǎo)致微生物和藻類的大量繁殖，造成水體的污染(富營養(yǎng)化)。 2. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 【問題1】普通洗衣粉和加酶洗衣粉

30、對衣物污漬洗滌效果的區(qū)別 自變量： ；因變量： 。 對照組： ；實(shí)驗(yàn)組： 。 課題2 探討加酶洗衣粉的洗滌效果耐酸、耐堿、忍受表面活性劑和較高溫度的酶表面活性劑和三聚磷酸鈉的用量洗衣粉的類型洗滌效果普通洗衣粉污染物加酶洗衣粉污染物第39頁，共70頁?！締栴}2】加酶洗衣粉的最適洗滌溫度 自變量： ；因變量： 。 對照實(shí)驗(yàn)：不同實(shí)驗(yàn)組之間的洗滌效果形成相互對照。 【問題3】不同類型的加酶洗衣粉的洗滌效果 自變量： ；因變量： ；無關(guān)變量： 。 對照實(shí)驗(yàn)： 形成相互對照。 3. 判斷洗滌效果的方法和標(biāo)準(zhǔn)：可在洗滌后比較污物的殘留狀況，如已消失、顏色變淺、面積減小等。 4. 影響加酶洗衣粉洗滌效果的因

31、素：酶制劑的種類，污物的類型，水溫、水量、水質(zhì)，衣物的質(zhì)地和大小，洗衣粉的用量，浸泡時(shí)間，洗滌時(shí)間等。 課題2 探討加酶洗衣粉的洗滌效果溫度洗滌效果加酶洗衣粉的種類洗滌效果污漬的種類、程度等不同加酶洗衣粉的洗滌效果第40頁，共70頁。1. 直接使用酶的實(shí)際問題：(1)酶通常對 等條件非常敏感，容易失活；(2)溶液中的酶 ，提高了生產(chǎn)成本；(3) ，可能影響產(chǎn)品品質(zhì)。 2. 固定化酶的應(yīng)用實(shí)例生產(chǎn)高果糖漿 （1）反應(yīng)原理：高果糖漿的生產(chǎn)需要使用 ，它能將葡萄糖轉(zhuǎn)化成果糖。 （2）生產(chǎn)過程：將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱的 注入；使葡萄糖溶液流過反應(yīng)柱，與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸；轉(zhuǎn)化成的果糖，從反應(yīng)柱的 流

32、出。課題3 酵母細(xì)胞的固定化強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫和有機(jī)溶劑很難回收，不能被再次利用反應(yīng)后酶會混在產(chǎn)物中葡萄糖異構(gòu)酶上端下端第41頁，共70頁。（4）固定化酶的優(yōu)缺點(diǎn) 優(yōu)點(diǎn)： 。 缺點(diǎn)： 。 3. 固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù) （1）概念： 的技術(shù)。 （2）常用方法：包括 。一般來說，酶更適合采用 固定化，而細(xì)胞多采用 固定化，這是因?yàn)?。 課題3 酵母細(xì)胞的固定化酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，還可以被反復(fù)利用一種酶只能催化一種反應(yīng)，不能催化一些列的酶促反應(yīng)利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法包埋法體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合，而體積小的

33、酶易從包埋材料中漏出第42頁，共70頁。（3）固定化細(xì)胞技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn) 優(yōu)點(diǎn)： 。 缺點(diǎn)：只能以小分子物質(zhì)作為反應(yīng)物，大分子物質(zhì)不易進(jìn)入細(xì)胞，反應(yīng)時(shí)需要為固定化細(xì)胞提供營養(yǎng)物質(zhì)。 （4）載體(不溶于水)：常用的載體有 等。本實(shí)驗(yàn)選用海藻酸鈉作載體包埋酵母細(xì)胞。 課題3 酵母細(xì)胞的固定化包埋法 化學(xué)結(jié)合法 物理吸附法 成本低，易操作，對酶活性影響小，能固定一系列酶，催化一系列反應(yīng)明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉和聚丙烯酰胺第43頁，共70頁。4. 固定化酵母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)操作 （1）制備固定化酵母細(xì)胞 酵母細(xì)胞的活化：向干酵母中加入 ，調(diào)成糊狀，使其活化。 注：活化就是讓處于 。 配制CaCl2溶液：濃度為0.

34、05mol/L。 配制海藻酸鈉溶液：溶解海藻酸鈉采用酒精燈加熱， 。加熱時(shí)要用 ，或者 ，反復(fù)幾次，直到完全溶化。如果加熱太快，海藻酸鈉會發(fā)生 。海藻酸鈉溶液采用 滅菌。 課題3 酵母細(xì)胞的固定化蒸餾水休眠狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)邊加熱邊攪拌小火間斷加熱高壓蒸汽滅菌法焦糊第44頁，共70頁。海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合：向滅菌后冷卻至室溫的海藻酸鈉溶液中加入已活化的酵母細(xì)胞，進(jìn)行充分?jǐn)嚢?，使其混合均勻，再轉(zhuǎn)移至注射器中。 注：“冷卻至室溫”的目的是 。 固定化酵母細(xì)胞：以 地將注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，觀察液滴在CaCl2溶液形成凝膠珠的情形。將這些凝膠珠在CaCl

35、2溶液中浸泡30min左右。 注：CaCl2作用： 。 “浸泡30min”： 。 課題3 酵母細(xì)胞的固定化防止(海藻酸鈉溶液)溫度過高而導(dǎo)致酵母菌死亡恒定的速度緩慢使海藻酸鈉膠體聚沉，以便形成結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的凝膠珠使凝膠珠結(jié)構(gòu)更穩(wěn)定第45頁，共70頁。（2）用固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵 固定好的酵母細(xì)胞(凝膠珠)用蒸餾水沖洗23次，加入到用于發(fā)酵的的葡萄糖溶液中，于25下密封發(fā)酵24h。 注：“沖洗”的目的：5. 固定化酵母細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作的結(jié)果分析與評價(jià) 如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明海藻酸鈉的濃度 ，固定的酵母細(xì)胞數(shù)目 ；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉的濃度 ，制作失敗，需要再做嘗

36、試?？梢灾苽洳缓湍讣?xì)胞的凝膠珠作對照。 課題3 酵母細(xì)胞的固定化洗去凝膠珠上多余的CaCl2溶液，防止凝膠珠硬度變大影響其通透性，對實(shí)驗(yàn)造成影響。偏低較少偏高第46頁，共70頁。專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 課題3 血紅蛋白的提取和分離第47頁，共70頁。1. 蛋白質(zhì)分離的理論依據(jù)：2. 分離蛋白質(zhì)的方法 （1）凝膠色譜法 概念：也稱做 ，是根據(jù) 分離蛋白質(zhì)的有效方法。 凝膠：是一些微小的多孔球體，這些球體大多數(shù)由 化合物構(gòu)成，如 。在小球體內(nèi)部有 。 課題3 血紅蛋白的提取和分離蛋白質(zhì)各種特性的差異，如分子的形狀和大小、所帶電荷的性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)和對其他分子的親和力等，可以用來分

37、離不同種類的蛋白質(zhì)。分配色譜法相對分子質(zhì)量的大小多糖類葡聚糖或瓊脂糖許多貫穿的通道第48頁，共70頁。原理：當(dāng)相對分子量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時(shí)， 的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程 ，移動速度 ，通過凝膠的時(shí)間 ； 的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程 ，移動速度 ，通過凝膠的時(shí)間 。因此可將各種相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子分離。分離過程：課題3 血紅蛋白的提取和分離相對分子質(zhì)量較小較長較慢較長相對分子質(zhì)量較大較短較快較短蛋白質(zhì)混合物上柱洗脫大分子流動快、小分子流動慢先收集大分子后收集小分子。第49頁，共70頁。（2）電泳 概念： 。 原理：在 下， 等生物大分子的可解離

38、基團(tuán)會帶上正電或負(fù)電，在電場的作用下，這些帶電分子會 電極移動。 影響電泳速率的因素：待分離樣品中各種分子 ，使帶電分子產(chǎn)生 ，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。帶電性質(zhì)決定 ，分子大小決定 。 課題3 血紅蛋白的提取和分離指帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的過程一定的pH多肽、核酸向著與其所帶電荷相反的帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同不同的遷移速度遷移方向遷移速度第50頁，共70頁。方法：常用的電泳方法有 和 。 A.瓊脂糖凝膠電泳：由于瓊脂糖本身 ，所以，各種分子在電場中的遷移速率取決于 ，從而得以分離。 B.聚丙烯酰胺凝膠電泳：蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于 等因素。為了消除

39、凈電荷對遷移率的影響，可以在凝膠中加入 。課題3 血紅蛋白的提取和分離瓊脂糖凝膠電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳不帶電荷各種分子所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小、形狀的不同它所帶凈電荷的多少及分子的大小SDS第51頁，共70頁。B.聚丙烯酰胺凝膠電泳：SDS能與各種蛋白質(zhì)形成 ，SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別，使電泳遷移率完全取決于 。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中，小分子的移動速度 ，大分子的移動速度 ，分子向 移動。 注：在測定蛋白質(zhì)分子量時(shí)通常使用 。 SDS能使蛋白質(zhì)發(fā)生 。由幾條肽鏈組成的蛋白質(zhì)復(fù)合體在SDS的作用下 ，因此測定的結(jié)果只是 。

40、 課題3 血紅蛋白的提取和分離蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物分子的大小快慢陽極SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳完全變性會解聚成單條肽鏈單條肽鏈的分子量第52頁，共70頁。3. 緩沖溶液 （1）作用：在一定范圍內(nèi)，抵制外界的 對溶液pH的影響，維持pH 。 （2）配制：通常由 溶解于水中配制而成，通過調(diào)節(jié)緩沖劑的使用比例就可以得到不同pH范圍內(nèi)使用的緩沖液。 4. 蛋白質(zhì)提取和分離一般分為四步： 。 （1）樣品處理 課題3 血紅蛋白的提取和分離酸和堿基本不變12種緩沖劑樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定第53頁，共70頁。（1）樣品處理 血液由血漿和各種血細(xì)胞組成，其中紅細(xì)胞最多。血紅蛋白由四條肽鏈組成，包括 。其中

41、每條肽鏈環(huán)繞一個(gè) 基團(tuán)，此基團(tuán)可攜帶一分子氧或一分子二氧化碳。血紅蛋白因含有血紅素而呈現(xiàn)紅色。 注：血紅蛋白呈現(xiàn)紅色這一特點(diǎn)對進(jìn)行血紅蛋白質(zhì)分離的意義：紅細(xì)胞的洗滌 a.目的： 。 課題3 血紅蛋白的提取和分離兩條-肽鏈和兩條-肽鏈亞鐵血紅素血紅蛋白是有色蛋白，因此在凝膠色譜分離時(shí)可通過觀察顏色來判斷什么時(shí)候應(yīng)該收集洗脫液，這使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實(shí)驗(yàn)操作。去除雜蛋白(如血漿蛋白)，獲得純凈紅細(xì)胞第54頁，共70頁。紅細(xì)胞的洗滌b.過程：血樣低速短時(shí)間離心吸出上層透明黃色血漿(含血漿蛋白)，將下層暗紅色的紅細(xì)胞液體倒入燒杯加入五倍體積的生理鹽水再低速短時(shí)間離心重復(fù)三次，直至上

42、清液不再呈現(xiàn)黃色得到純凈紅細(xì)胞。 注：為防止血液凝固，在采血容器中要預(yù)先加入抗凝血劑檸檬酸鈉。 生理鹽水作用：保持紅細(xì)胞滲透壓穩(wěn)定而不至于破裂。 洗滌次數(shù)過少，無法除去血漿蛋白；離心速度過高和時(shí)間過長,會使白細(xì)胞等一同沉淀，達(dá)不到分離的效果。 課題3 血紅蛋白的提取和分離第55頁，共70頁。血紅蛋白的釋放 a.目的：使紅細(xì)胞破裂，釋放血紅蛋白。 b.過程：紅細(xì)胞加蒸餾水到原血液的體積加40%體積的甲苯磁力攪拌器上攪拌紅細(xì)胞破裂，釋放血紅蛋白 注：蒸餾水作用：使紅細(xì)胞吸水漲破。 甲苯作用：加速紅細(xì)胞破裂并釋放出血紅蛋白。 分離血紅蛋白溶液 a.目的：經(jīng)過離心使血紅蛋白與其他雜質(zhì)分離開。 b.過程

43、：混合液離心用濾紙過濾，除去脂溶性沉淀層分液漏斗中靜置片刻分離出下層的紅色透明液體。 課題3 血紅蛋白的提取和分離第56頁，共70頁。試管中混合液離心后分為四層，從上往下數(shù)：第1層：無色透明的甲苯層；第2層：白色薄層固體，是脂溶性物質(zhì)的沉淀層；第3層：紅色透明液體，是血紅蛋白的水溶液；第4層：暗紅色的雜質(zhì)沉淀層。 （2）粗分離透析 目的：除去樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。 原理：透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi)。 方法：將血紅蛋白溶液裝入透析袋中，將透析袋放入一定量適宜濃度的磷酸緩沖液中，透析12h。 課題3 血紅蛋白的提取和分離第57頁，共70頁。（3）純化凝膠色譜操作 目的：

44、通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量不同于血紅蛋白的雜蛋白除去。 過程 a.凝膠色譜柱的制作 b.凝膠色譜柱的裝填：本實(shí)驗(yàn)使用的是交聯(lián)葡聚糖凝膠。干凝膠用蒸餾水充分溶脹，配成凝膠懸浮液。為了加速膨脹，可以將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱，逐漸升溫至接近沸騰，這種方法不斷節(jié)約時(shí)間，還可以除去凝膠中可能帶有的微生物，排除膠粒內(nèi)的空氣。裝填時(shí)可輕輕敲動色譜柱，使凝膠裝填均勻。色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡，必須重裝，因?yàn)闅馀輹噥y洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。裝填完后，立即用磷酸緩沖液洗滌平衡凝膠，使凝膠裝填緊密。 課題3 血紅蛋白的提取和分離第58頁，共70頁。c.樣品的加入和洗脫：在色

45、譜柱頂端滴加1mL樣品，在50cm高操作壓下用磷酸緩沖液洗脫，待紅色的血紅蛋白接近色譜柱底端時(shí)用試管收集流出液，每5mL收集一管。如果紅色區(qū)帶均勻一致地移動，說明色譜柱制作成功。 注：洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液(pH為7.0)的目的是模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，保持體外的pH和體內(nèi)一致，保證血紅蛋白的結(jié)構(gòu)和功能穩(wěn)定。 （4）純度鑒定對分離的蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行純度鑒定，使用最多的方法是SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。 課題3 血紅蛋白的提取和分離第59頁，共70頁。專題6 植物有效成分的提取 課題1 植物芳香油的提取課題2 胡蘿卜素的提取 第60頁，共70頁。1. 植物芳香油具有

46、很強(qiáng)的揮發(fā)性，其組成比較復(fù)雜，主要包括萜類化合物及其衍生物。 2. 植物芳香油的提取方法有蒸餾法、壓榨法和萃取法等。具體采用哪種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來決定。 （1）水蒸氣蒸餾法：是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合物，冷卻后，混合物又會重新分出油層和水層。根據(jù)原料放置的位置又可分為水中蒸餾、水上蒸餾和水氣蒸餾。適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油。水中蒸餾不適用于柑橘和檸檬，因?yàn)闀?dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題。 課題1 植物芳香油的提取第61頁，共70頁。（2）壓榨法：通過機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油，主要適用于柑橘、檸檬芳香油的制備。 （3）萃取法：將粉

47、碎、干燥的植物原料用有機(jī)溶劑浸泡，使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，然后蒸發(fā)出有機(jī)溶劑，就可獲得純凈的植物芳香油。適用于易溶于有機(jī)物溶劑的有效成分的提取，如胡蘿卜素的提取。 3. 玫瑰精油的提取 （1）玫瑰精油性質(zhì)：化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，難溶于水，能隨水蒸氣一同蒸餾(據(jù)此可用水蒸氣蒸餾法提取)；易溶于有機(jī)溶劑(據(jù)此可用萃取法提取)。 課題1 植物芳香油的提取第62頁，共70頁。（2）提取方法：鮮玫瑰花采用水蒸氣蒸餾法，干玫瑰花采用萃取法。 （3）實(shí)驗(yàn)流程：鮮玫瑰花清水水蒸氣蒸餾油水混合物加NaCl分離油層加無水Na2SO4除水過濾玫瑰油。 鮮玫瑰花與清水的質(zhì)量比為1:4。玫瑰花要在花開的盛期采收，因?yàn)樵?此階段花朵含油量最高。 提取效率主要受蒸餾溫度和蒸餾時(shí)間影響。蒸餾溫度太高、時(shí)間太短，產(chǎn)品品質(zhì)就會比較差。要提高精油品質(zhì)，在操作中需要通過控制溫度來實(shí)現(xiàn)延長蒸餾時(shí)間的目的。當(dāng)原料量等其他條件一定時(shí)，提取量隨蒸餾時(shí)間的變化趨勢是在一定時(shí)間內(nèi)提取量隨時(shí)間的延長而增加，一定時(shí)間后提取量不再增加。 課題1 植物芳香油的提取第63頁，共70頁。蒸餾得到的乳白色乳濁液是玫瑰油與水的混合物，加入NaCl可增加鹽濃度，促進(jìn)油水分層，分層原因是因?yàn)橛蛯拥拿芏缺人畬有　?油水分層后可用分液漏斗分出油層。 油層中有一定的水分，可以加入無水Na2SO4除水。 過濾的目的是除去固體不溶物(固