藥代動力學研究與生物的等效性試驗設計基礎

1、藥代動力學研究與生物的等效性試驗設計基礎第一講 化學藥物臨床藥代動力學研究技術指導原則一、概述二、生物樣品分析方法的建立和確證三、具體內容四、臨床藥代動力學研究與合理用藥一、概 述 新藥的臨床藥代動力學研究旨在闡明藥物在人體內的吸收、分布、代謝和排泄的規(guī)律。對藥物上述處置過程的研究，是全面認識人體與藥物間相互作用不可或缺的重要組成部分；既是臨床制定合理用藥方案、亦是個體化藥物治療的科學依據(jù)。 在藥物臨床試驗階段，創(chuàng)新藥物的臨床藥代動力學研究主要涉及如下內容：1、健康志愿者藥代動力學研究2、藥物相關適應癥患者的藥代動力學研究3、特殊人群藥代動力學研究4、藥代動力學與藥效動力學的相關性研究二、生物

2、樣品分析方法的建立和確證（一）常用分析方法（1）色譜法：氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)、色譜質譜聯(lián)用法（LCMS、LC-MS-MS、GC-MS、GC-MS-MS）等，可用于大多數(shù)藥物的檢測；（2）免疫學方法：放射免疫分析法、酶免疫分析法、熒光免疫分析法等，多用于蛋白質多肽類物質檢測；（3）微生物學方法:可用于抗生素藥物的測定。（二）方法學確證一般應進行以下幾方面的考察：1、特異性2、標準曲線和定量范圍3、定量下限4、精密度與準確度5、樣品穩(wěn)定性6、提取回收率7、微生物學和免疫學分析8、方法學質控 &整個分析過程應當遵從預先制訂的實驗室SOP以及GLP原則。（三）分析數(shù)據(jù)的記錄與

3、報告提交提交的數(shù)據(jù)至少包括： 1、方法建立數(shù)據(jù) 2、樣品分析數(shù)據(jù) 3、其他相關信息三、具體內容（一）健康志愿者藥代動力學研究1、單次給藥藥代動力學研究受試者的選擇:健康，男、女各半，在1845 歲，自愿參加試驗，并簽訂書面知情同意書。受試者例數(shù)：每組812 例對試驗藥物的要求：試驗藥品應當在符合藥品生產質量管理規(guī)范條件的車間制備，并經檢驗符合質量標準，并有專人保管，記錄藥品使用情況。 藥物劑量: 一般選用低、中、高三種劑量。劑量的確定主要根據(jù)期臨床耐受性試驗的結果，并參考動物藥效學、藥代動力學及毒理學試驗的結果，以及經討論后確定的擬在期臨床試驗時采用的治療劑量推算。研究步驟：采樣點的研究：服藥

4、前采空白血樣品，在吸收分布相至少需要23 個采樣點，平衡相至少需要個采樣點，消除相至少需要6 個采樣點。一般不少于11 個采樣點。應有35 個消除半衰期的時間，或采樣持續(xù)到血藥濃度為CMAX 的1/101/20藥代動力學參數(shù)的估算: 使用藥代動力學軟件如WINNONLIN、NONMEN、3P87(3P97)、PKBP-N1、NDST 及ABE，繪制各受試者的藥-時曲線及平均藥-時曲線，進行藥代動力學參數(shù)的估算，求得藥物的主要藥代動力學參數(shù).&受試者的選擇標準、受試者例數(shù)、試驗藥物的要求同單次給藥&試驗藥物劑量&研究步驟&采樣點的確定& 藥代動力學參數(shù)的估算2.多次給藥藥代動力學研究3.進食對口

5、服藥物制劑藥代動力學影響的研究受試者例數(shù)：每組1012 例。藥物劑量及給藥途徑：同擬定的期臨床試驗單次給藥。進食試驗餐的方法：試驗餐要在開始進食后30 分鐘內吃完。并且在兩個試驗周期應保證試驗餐的配方一致4.藥物代謝產物的藥代動力學研究5.藥物藥物的藥代動力學相互作用研究（二）患者藥代動力學研究 藥物在相應患者體內的藥代動力學研究，包括單次給藥或和多次給藥的藥代動力學研究，試驗設計除受試者為相應患者外，其它試驗條件和要求均與健康志愿者臨床藥代動力學研究相同。（三）特殊人群的藥代動力學研究&肝功能損害患者的藥代動力學研究&腎功能損害患者的藥代動力學研究&老年人藥代動力學研究&兒科人群藥代動力學研

6、究（四）不同個體、種族的藥代動力學研究（五）臨床藥代動力學與藥效動力學的相關性研究第二講 化學藥物制劑人體生物利用度和生物等效性研究技術指導原則一、BA和BE基本概念二、BA和BE 研究方法三、BA和BE研究具體要求四、特殊制劑生物利用度（BIOAVAILABILITY BA）:BA）：是指藥物或藥物活性成分從制劑釋放吸收進入全身循環(huán)的程度和速度。生物等效性（BIOEQUIVALENCE BE）:是指藥學等效制劑或可替換藥物在相同試驗條件下，服用相同劑量，其活性成分吸收程度和速度的差異無統(tǒng)計意義。一、基本概念原創(chuàng)藥：是指已經經過全面的藥學、藥理學和毒理學以及臨床研究數(shù)據(jù)證實其安全有效性并首次被

7、批準上市的藥品藥學等效性：如果兩藥品含有相同量的同一活性成分，具有相同的劑型，符合同樣的或可比較的質量標準，則可以認為他們是藥學等效的。治療等效性：如果兩制劑含有相同活性成分，并且臨床上顯示具有相同的安全性和有效性，可以認為兩藥具有治療等效性基本相同藥物：如果兩個制劑具有相同數(shù)量且符合同一質量標準的活性成分，具有相同劑型，并且經過證明具有生物等效性,則兩個制劑可以認為是基本相同藥物。生物利用度（BA）和生物等效性（ BE ）的聯(lián)系和區(qū)別BA 和BE 均是評價制劑質量的重要指標BA 強調反映藥物活性成分到達體內循環(huán)的過程，是新藥研究過程中選擇最佳給藥途徑和確定用藥方案(如給藥劑量和給藥間隔)的重

8、要依據(jù)之一。BE 則重點在于以預先確定的等效標準和限度進行的比較，是保證含同一藥物活性成分的不同制劑質量一致性的依據(jù)，是判斷后研發(fā)產品是否可替代已上市藥品使用的依據(jù)。二、生物等效性研究的方法藥代動力學研究藥效動力學研究臨床試驗 體外研究三.BA和BE研究具體要求 （一）生物樣本分析方法的建立和確證（1）色譜法（2）免疫學方法（3）微生物學方法2. 方法學確證特異性標準曲線和定量范圍定量下限 精密度與準確度 樣品穩(wěn)定性提取回收率 微生物學和免疫學方法確證3方法學質控每個分析批生物樣品測定時應建立新的標準曲線，并隨行測定高、中、低三個濃度的質控樣品。每個濃度至少雙樣本，并應均勻分布在未知樣品測試順

9、序中。當一個分析批中未知樣品數(shù)目較多時，應增加各濃度質控樣品數(shù)，使質控樣品數(shù)大于未知樣品總數(shù)的5%。質控樣品測定結果的偏差一般應小于15%，低濃度點偏差一般應小于20%，最多允許1/3 不在同一濃度的質控樣品結果超限。濃度高于定量上限的樣品，應采用相應的空白介質稀釋后重新測定。對于濃度低于定量下限的樣品，在進行藥代動力學分析時，在達到CMAX以前取樣的樣品應以零值計算，在達到CMAX以后取樣的樣品應以無法定量（NOT DETECTABLE, ND）計算，以減小零值對AUC計算的影響4分析數(shù)據(jù)的記錄與報告提交至少應當提交的數(shù)據(jù)包括：方法建立數(shù)據(jù)樣品分析數(shù)據(jù)項目編號、分析方法編號、分析方法類型、分

10、析方法確證進行簡化的理由、以及相應的項目計劃編號、標題等相關信息。1.設計方法交叉設計是目前應用最多最廣的方法,對每位受試者都采取自身交叉對照，可以將制劑因素對藥物吸收的影響與其他因素區(qū)分開來，減少了不同試驗周期和個體差異對試驗結果的影響。而對于某些高變異性的藥物,可能應采用重復設計,對同一受試者兩次接受同一制劑時可能存在的個體內差異進行測定。（二） 實驗設計與操作2.受試者的選擇受試者入選條件：一般情況應選擇男性健康受試者。特殊作用的藥品，則應根據(jù)具體情況選擇適當受試者。受試者例數(shù)：18-24 例可滿足大多數(shù)藥物對樣本量的要求，但對某些變異性大的藥物可能需要適當增加例數(shù)。受試者分組：隨機方法

11、分組，各組間應具有可比性，兩組例數(shù)最好相等。倫理學要求：須提供倫理委員會的批準書，受試者簽署知情同意書。3.受試制劑和參比制劑受試制劑，應為符合臨床應用質量標準的放大產品。應提供該制劑的體外溶出度、穩(wěn)定性、含量或效價測定、批間一致性報告等供試驗單位參考。個別藥物尚需提供多晶型及光學異構體的資料。參比制劑和受試制劑均應注明研制單位、批號、規(guī)格、保存條件、有效期。參比制劑和受試制劑含量差別不能超過5%。試驗結束后受試制劑和參比制劑應保留足夠長時間直到產品批準上市以備查。4.給藥劑量給藥劑量一般應與臨床單次用藥劑量一致，受試制劑和參比制劑最好應用相等劑量。在某些情況下可能需要考慮進行多次給藥研究，如

12、：（1）受試藥品單次服用后原形藥或活性代謝物濃度很低，難以用相應分析方法精密測定血藥濃度時；（2）受試藥的生物利用度有較大個體差異；（3）藥物吸收速度有較大差異；（4）緩控釋制劑。5取樣在血藥濃度一時間曲線各時相及預計達峰時間前后應有足夠采樣點，使血藥濃度曲線能全面反應藥物在體內處置的全過程。當受試藥不能用血藥濃度測定方法進行生物利用度檢測時，若該藥原形或活性代謝物主要由尿排泄，可以考慮尿藥法測定。一些前體藥物在體內迅速代謝無法測定生物樣品中原形藥物，可采用測定生物樣品中相應活性代謝物濃度的方法，進行生物利用度和生物等效性試驗。6.藥代動力學參數(shù)計算一般用非房室數(shù)學模型分析方法來估算藥代動力學

13、參數(shù)7. 研究過程標準化整個研究過程應當標準化，以使得除制劑因素外，其他各種因素導致的體內藥物釋放吸收差異減少到最小。（三） 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析 1.數(shù)據(jù)表達2.藥代動力學參數(shù)3.統(tǒng)計分析 （對數(shù)轉換、等效判斷標準)4.群體生物等效性和個體生物等效性 （四）結果的評價 結果的評價應結合研究目的出發(fā)，進行生物等效性評價的目的是保證臨床用藥的可互換性，進行相對生物利用度研究，則主要分析獲得的相對生物利用度數(shù)值進一步確定新劑型的臨床使用劑量，并非一定要求等效。 （五）提交臨床報告內容（1）實驗目的;（2）生物樣本分析方法的建立和考察的數(shù)據(jù)，提供必要的圖譜；（3）詳細的實驗設計和操作方法;（4）原始測

14、定未知樣品濃度全部數(shù)據(jù)，每個受試者藥代參數(shù)和藥時曲線;（5）采用的數(shù)據(jù)處理程序和統(tǒng)計分析方法以及詳細統(tǒng)計過程和結果；（6）服藥后的臨床不良反應觀察結果，受試者中途退出和脫落記錄及 原因；（7）生物利用度或生物等效性結果分析以及必要的討論；（8）參考文獻。五、特殊制劑1.口服緩控釋制劑 單次給藥試驗旨在比較受試者于空腹狀態(tài)下服用緩釋、控釋受試制劑與參比制劑的吸收速度和吸收程度的生物等效性，確認受試制劑的緩釋、控釋藥代動力學特征。實驗設計基本同普通制劑.多次給藥試驗旨在比較緩釋、控釋受試制劑與參比制劑多次連續(xù)用藥達穩(wěn)態(tài)時，藥物的吸收程度、穩(wěn)態(tài)血藥濃度和波動情況。給藥方法：應提供的藥代動力學參數(shù)與數(shù)據(jù)：（1）各受試者緩釋、控釋受