我國(guó)新城疫的防控實(shí)踐和基因VII型新城疫疫苗的研發(fā)ppt課件

1、我國(guó)新城疫的防控實(shí)際和基因VII型新城疫疫苗的研發(fā) 劉秀梵 揚(yáng)州大學(xué) 獸醫(yī)學(xué)院新城疫是優(yōu)先防治的5種一類動(dòng)物疫病之一，在我國(guó)也是運(yùn)用疫苗頻率最高的動(dòng)物疫病。 一、ND流行病學(xué)研討和我國(guó) 的防控實(shí)際1926年 最早發(fā)現(xiàn)于印尼爪哇和英國(guó)新城1928年 我國(guó)最早有疑似病例報(bào)告1946年 梁英和馬聞天初次分別鑒定NDV強(qiáng)毒F481950年代 引進(jìn)NDV疫苗毒：Makteswar, B1, F和 LaSota株I、 II、 III、IV系后來 又引進(jìn)其他NDV疫苗毒，如V4 株等。 新城疫 ND次數(shù)持續(xù)時(shí)間流行毒株的基因型第一次1920年代-1960年前基因II、III、IV型（早期基因型）第二次196

2、0年代-1970年代初基因V和VI（晚期基因型）第三次1970年代后期-1980年代前期基因VIb亞型（晚期基因型）第四次1980年代后期至今基因VII型（晚期基因型）新城疫的四次大流行分子流行病學(xué)研討 近20年來新城疫在我國(guó)家禽中流行的特點(diǎn)主要表現(xiàn)為免疫雞群中常發(fā)生非典型新城疫和對(duì)家養(yǎng)水禽的毒力加強(qiáng)在鵝引起嚴(yán)重臨床疾病。這兩個(gè)流行特點(diǎn)都與新出現(xiàn)的基因VII型病毒有關(guān)。1997年前后在中國(guó)出現(xiàn)鵝大零售病的新傳染病-鵝副粘病毒病。 *確定鵝副粘病毒病是由基因VII型病毒引起的，是鵝的ND； *確定近年來我國(guó)鵝群和雞群流行的NDV強(qiáng)毒95%以上是基因 VIId亞型； *確定從鵝分別到的和從雞分別到

3、的基因VIId亞型病毒沒有 宿主特異性和致病差別，可以交叉感染發(fā)病，相互傳播； *常規(guī)ND疫苗對(duì)鵝的ND維護(hù)性差，而用分別的野毒基因 VIId亞型制成的自家疫苗效果較好，但存在散毒風(fēng)險(xiǎn)。 Liu X F et al. Arch Virol, 2003; Wan H et al. Avian Pathol, 2004; Huang Y et al. Arch Virol, 2004; Wang Y et al. Virol J ,2021免疫雞群中的非典型ND，自1980-1990年代以來就普遍發(fā)生，而分別到的NDV也都是基因VIId亞型。問題1：新城疫病毒只需一個(gè)血 清型常規(guī)的疫苗還能不 能對(duì)

4、流行強(qiáng)毒提供有效 維護(hù)？ 疫苗免疫維護(hù)的3個(gè)程度：維護(hù)不發(fā)生死亡，但有部分有臨床病癥， 帶毒排毒嚴(yán)重；2.維護(hù)不發(fā)生死亡，也不出現(xiàn)任何臨床癥 狀，一定比例的短時(shí)間有帶毒、排毒；3.維護(hù)不發(fā)生死亡，也不出現(xiàn)任何臨床癥 狀包括產(chǎn)蛋下降，很少排毒。這是一個(gè)有爭(zhēng)議的問題，經(jīng)過全世界科學(xué)界和產(chǎn)業(yè)界近30年的努力，如今已根本搞清楚了。Cross-protection efficacy in chickens immunized with the LaSota vaccine after challenge with virulent strains of different genotypes(From

5、Qin et al. J clin Microbiol , 2021) 實(shí)驗(yàn)室研討和現(xiàn)場(chǎng)察看闡明，普通情況下，常規(guī)疫苗免疫后中等程度抗體HI 6-8 log2只能到達(dá)第一種維護(hù)程度，高抗體程度HI 9 log2以上可到達(dá)第二種維護(hù)程度，但達(dá)不到第三種維護(hù)程度。在第一種維護(hù)程度情況下，就發(fā)生所謂的非典型新城疫。 為了維護(hù)不發(fā)生死亡也不出現(xiàn)包括產(chǎn)蛋下降在內(nèi)的臨床病癥，自1980年代以來，我國(guó)的規(guī)?；碾u場(chǎng)就采用的對(duì)ND的高頻率密集型免疫程序。 種雞和蛋雞終身接種ND疫苗在10次甚至20次以上，但即使這樣，免疫雞群仍頻繁發(fā)生非典型ND。因此，常規(guī)疫苗對(duì)流行的基因VII型已不能提供有效維護(hù)。問題2：為

6、什么常規(guī)疫苗不能提供 對(duì)基因VII型NDV強(qiáng)毒的有 效維護(hù)？1、基因型差別：常規(guī)疫苗為基因I、II、III型，屬早期基因型，而當(dāng)前優(yōu)勢(shì)流行株為基因VII型，屬晚期基因型，遺傳差別大；2、抗原差別性：交叉血凝抑制和病毒中和實(shí)驗(yàn)證明，疫苗毒和基因VII型流行毒之間抗原性有顯著差別R0.2； 基因型IIIVIVIIcVIIdReference數(shù)量13164Liu H et al. J Virol Methods，2007277Liu H et al. Res Vet Sci, 200813Rui ZP et al. Vet Microbiol, 20093W etal. Virus Gene, 20

7、102457Wu X et al. Arch Virol, 201148Zhu J et al. 2013總計(jì)571262275(其中VII型毒株263)2006年來我國(guó)NDV強(qiáng)毒分別株的基因型分布 進(jìn)一步分析顯示，2006年至2021年間共報(bào)道分別新城疫強(qiáng)毒216株，其中VII型毒株206株，占到了分別株的96%左右，闡明基因VII型毒株的分別率正呈上升趨勢(shì)。NDV流行株與常規(guī)疫苗株的遺傳關(guān)系 基因VIId亞型NDV分別株與II型疫苗株的遺傳關(guān)系較遠(yuǎn)?；騀HN同源性84.1%84.4%78.7%83.0% a Not tested b R value = 頭 當(dāng)R值120h0.3108.8

8、10log2E5120h0.16109.1711log2E10120h0.22109.311log2E15120h0.17108.810log2重組病毒A-VII生物學(xué)特性的鑒定 根據(jù)ICPI和MDT 目的，A-VII株的毒力比La Sota低，用作疫苗毒株平安性好。以雞胚繁衍病毒，尿囊液中A-VII株的HA10log2。免疫后不同時(shí)間抗體HI效價(jià)上升曲線均以本身免疫毒株作為4單位病毒 效檢實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，致弱株A-VII免疫原性強(qiáng)，其滅活苗以較低劑量20ul免疫SPF雞時(shí)即可產(chǎn)生高滴度的HI抗體，且其誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生的速度較LaSota快。Immune efficacy of NDV/A-VII

9、in chickensFrequency of isolation of challenge virus in commercial chickensa C: challenged with 105 ELD50 JS2/06.bO: Oropharyngeal swabs.cC: Cloacal swabs.dNS: no survivors.(A) Mean virus titers of oropharyngeal swabs of immunized groups on all sampling days. (B) Comparison of oropharyngeal virus ti

10、ters at 2 day post-challenge. (A) Mean virus titers of cloacal swabs of immunized groups on all sampling days. (B) Comparison of cloacal virus titers at 4 day post-challenge. * A-VII株的MDT120h，ICPI0.3，毒力比LaSota低；* A-VII株在雞胚上毒價(jià)高達(dá)109.3EID50/0.1mL，HA10log2；* A-VII株與流行株完全匹配，免疫原性很強(qiáng)，產(chǎn)生的HI 抗體比LaSota高2-3 log

11、2，抗體上升提早1星期，減少 排毒滴度比LaSota低10-100倍；* A-VII株的論文2021年在國(guó)際雜 志發(fā)表。OIE出版的 延續(xù)5年援用。A-VII株種毒的優(yōu)良特性 中間試制、臨床實(shí)驗(yàn) 和新制品的注冊(cè)申報(bào)階段2021年2021年完成重組新城疫病毒A-VII株滅 活疫苗中間試制、質(zhì)量研討，懇求臨床實(shí)驗(yàn)； 2021年9月8日獲國(guó)家發(fā)明專利授權(quán)；2021年2021年獲得農(nóng)業(yè)部臨床實(shí)驗(yàn)批件，進(jìn)入臨床 實(shí)驗(yàn)執(zhí)行期；2021年2021年完成新獸藥注冊(cè)初審；2021年完成新 獸藥注冊(cè)質(zhì)量復(fù)核、復(fù)審；2021年11月17日獲得國(guó)家一類新獸藥注冊(cè)證書。 該疫苗具有與當(dāng)前新城疫病毒優(yōu)勢(shì)流行株匹配性 好的優(yōu)點(diǎn)，不僅可用于雞，還可用于鵝和其他禽 類，是第一個(gè)有效防控鵝新城疫的疫苗； 與常規(guī)疫苗相比，不僅提供死亡維護(hù)，而且提供 有效的臨床維護(hù)和防止傳播； 與常規(guī)疫苗相比，免疫原性強(qiáng)，產(chǎn)生的抗體滴度 高，產(chǎn)生時(shí)間快，能有效降低強(qiáng)毒攻擊后的病毒 載量和排毒率； 與常規(guī)疫苗相比，能有效控制免疫雞群中的非典 型新城疫。2、的主要優(yōu)越性的中間試制和臨床實(shí)驗(yàn)證明 為了控制免疫雞群的非典型新城疫，運(yùn)用常規(guī)疫苗主要依賴提高疫苗免疫的頻率，而具有與流行毒匹配性好，免疫原性強(qiáng)，