微生物肥料生物安全通用技術(shù)準(zhǔn)則(NY1109-2006)

1、 / 19.微生物肥料生物安全通用技術(shù)準(zhǔn)則 (NY 1109-2006)范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了微生物肥料使用菌種安全性分級(jí)目錄、不同菌種及產(chǎn) 品選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則、程序、試驗(yàn)方法和結(jié)果評(píng)價(jià)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于中華人民共和國境內(nèi)生產(chǎn)、銷售的微生物肥料。規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注 日期的引用文件，其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版 均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)， 然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可 使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件， 其最新版本適用 于本標(biāo)準(zhǔn)。GB 15193.3-2003 急性毒性試驗(yàn)GB/T 4789.28-200

2、3 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)染色法、培養(yǎng)基和試劑術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.150半數(shù)致死量 median lethal dose,LD是經(jīng)口給予受試物后，預(yù)期能夠引起動(dòng)物死亡率為50%的單一受試物劑量，該劑量為經(jīng)過統(tǒng)計(jì)得出的估計(jì)值。其單位是每千克體重所攝入 受試物質(zhì)的毫克數(shù)、克數(shù)或毫升數(shù)，即 mg/kg 體重、 g/kg 體重或 mL/kg 體重。選擇毒理學(xué)試驗(yàn)的原則生產(chǎn)用菌種微生物肥料生產(chǎn)用菌種分為四級(jí)管理，其安全分級(jí)目錄見附錄A。未列入附錄 A 中的菌種，除根瘤菌和乳桿菌 （Lactobacillus ）外，其余均需做毒理學(xué)試驗(yàn)。第一級(jí)（ A.1 ）為免作毒理學(xué)試驗(yàn)的菌種。第二

3、級(jí)（ A.2 ）為需做急性毒性試驗(yàn)的菌種。第三級(jí)（ A.3 ）為需做致病性試驗(yàn)的菌種。第四級(jí)（ A.4 ）為禁用菌種。產(chǎn)品除有機(jī)物料腐熟劑以外的固體微生物接種劑類產(chǎn)品均免做毒 理學(xué)試驗(yàn)。復(fù)合微生物肥料、生物有機(jī)肥和液體劑型微生物接種劑等需 做急性毒性試驗(yàn)毒理學(xué)試驗(yàn)程序菌種毒理學(xué)試驗(yàn)程序應(yīng)提供微生物肥料生產(chǎn)用菌種的鑒定資料，包括屬及種的拉 丁文學(xué)名和中文譯名、形態(tài)、生理生化特性及鑒定依據(jù)、功能評(píng)價(jià)等資 料。根據(jù)產(chǎn)品所含菌種的鑒定資料，依據(jù)附錄 A 之規(guī)定，確定菌 種安全級(jí)別、是否做毒理學(xué)試驗(yàn)及毒理學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目。對(duì)于需要做毒理學(xué)試驗(yàn)的菌種，生產(chǎn)者需提供試驗(yàn)用純菌種 斜面，經(jīng)復(fù)核確認(rèn)與該菌種鑒定資料相

4、符且無雜菌污染后， 進(jìn)行毒理學(xué) 試驗(yàn)。產(chǎn)品毒理學(xué)程序需對(duì)送檢產(chǎn)品進(jìn)行菌種和載體物料的真實(shí)性確認(rèn)后，進(jìn)行毒理學(xué)試 驗(yàn)。試驗(yàn)方法受試物的準(zhǔn)備菌種受試物將試驗(yàn)菌種接種于適宜的培養(yǎng)基中， 在適宜的條件下培養(yǎng)一定時(shí)間， 用生理鹽水調(diào)整菌液濃度至 2.0 1082.0 109cfu/mL ，該溶液為菌種 受試物。產(chǎn)品受試物固體產(chǎn)品根據(jù)試驗(yàn)要求，配制所需濃度，溶劑首選去離子水，也可 選用羧甲基纖維素、明膠、淀粉等。液體產(chǎn)品不可稀釋，直接使用。急性毒性試驗(yàn)按 GB 15193.3-2003 執(zhí)行。致病性試驗(yàn)致病性試驗(yàn)包括以下項(xiàng)目。急性毒性試驗(yàn)方法同 5.2 。一次破損皮膚刺激試驗(yàn)?zāi)康臋z測(cè)受試物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮膚的

5、刺激 / 腐蝕作用和強(qiáng)度。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物每次實(shí)驗(yàn)至少需要 3 只皮膚完好的白色健康家兔或豚鼠。操作程序a）涂受試物前，將家兔或豚鼠背部脊柱兩側(cè)的毛去掉，去毛范圍約 2.5cm2.5cm，用 75%酒精清潔、消毒暴露皮膚，待酒精揮發(fā)后，用滅 菌刀片或注射針頭分別在兩塊皮區(qū)內(nèi)劃一個(gè)“”形的破損傷口。注意 皮膚破損僅達(dá)表皮，不要傷及真皮。b）將受試物 0.5mL直接滴于破損皮膚上， 或滴于同樣大小的 2 層4 層紗布上并敷貼于破損皮膚表面，然后用一層無刺激塑料膜或油紙覆 蓋，再用無刺激膠布固定。另一側(cè)去毛破損皮膚作為空白對(duì)照（或溶劑 對(duì)照） ，敷貼時(shí)間為 4h。試驗(yàn)結(jié)束后， 用溫水或無刺激性溶劑除去殘留

6、受試物。c）分別于去除受試物后 1h、24h和 48h觀察皮膚局部反應(yīng)，并按表1 進(jìn)行刺激反應(yīng)評(píng)分。注意鑒別感染和原發(fā)性刺激反應(yīng)的區(qū)別，若有感 染可疑，應(yīng)進(jìn)行重復(fù)測(cè)試。評(píng)價(jià)規(guī)定在各個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)，按照表 1 對(duì)動(dòng)物的皮膚紅斑與水腫形成情況進(jìn) 行評(píng)分，并按時(shí)間點(diǎn)將 3 只動(dòng)物的評(píng)分相加，除以動(dòng)物數(shù)，獲得不同時(shí) 間點(diǎn)的皮膚刺激反應(yīng)積分均值 （刺激指數(shù)） 。取其中最高皮膚刺激指數(shù)， 按表 2 評(píng)定該受試物對(duì)動(dòng)物皮膚刺激強(qiáng)度的級(jí)別。表 1 皮膚刺激反應(yīng)的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)皮膚刺激反應(yīng)皮膚刺激反應(yīng)評(píng)分紅斑形成：無0勉強(qiáng)可見1明顯紅斑2中等嚴(yán)重紅斑3紫紅色紅斑并有焦痂形成4水腫形成：無0勉強(qiáng)可見1皮膚隆起，輪廓清楚2

7、水腫隆起約 1mm3水腫隆起超過 1mm4表 2 皮膚刺激強(qiáng)度分級(jí)皮膚刺激指數(shù)刺激強(qiáng)度級(jí)別0 0.5無刺激性0.5 2.0輕刺激性2.0 6.0中等刺激性6.08.0強(qiáng)刺激性6.3.3溶血試驗(yàn)6.3.3.1目的檢測(cè)受試物是否具有溶血特性。6.3.3.2操作程序用無菌棉拭子蘸取菌種受試物 , 以蛇形線接種于血瓊脂平板 （ 按 GB/T4789.28-2003 中 4.6 規(guī)定）, 置 36 1培養(yǎng)箱中培養(yǎng) , 24h 后觀 察有無溶血環(huán)產(chǎn)生。同時(shí)用已知陽性菌株金黃色葡萄球菌等作為對(duì)照。試驗(yàn)結(jié)果菌落周圍有溶血環(huán)的，則溶血試驗(yàn)陽性；否則為陰性。抗菌藥物敏感試驗(yàn)質(zhì)控菌株可選用大腸桿菌 ATCC2592

8、2等標(biāo)準(zhǔn)菌株。目的檢測(cè)受試物對(duì)抗生素的敏感性強(qiáng)度。試驗(yàn)用抗生素可選用頭孢哌酮（ CFP）、四環(huán)素（ TE）、頭孢唑啉（ CZ）、鏈霉素 （ S）、俐特靈（ FR）、環(huán)丙沙星（ CIP）、復(fù)方新諾明（ SXT）、氯霉 素（ C）、氨芐青霉素（ AM）、慶大霉素（ GM）、強(qiáng)力霉素（ DO）、丁 胺卡那霉素（ AN）、甲氟哌酸（ PEF）、氟啶酸（ ENO）、多西環(huán)素 （DO）、 依諾沙星 （ENO）、阿米卡星 （AN） 等中的幾種。操作程序a）用無菌棉拭子將受試物均勻涂抹于營養(yǎng)瓊脂平板表面，共涂抹 3 次。每涂抹 1 次，平板應(yīng)轉(zhuǎn)動(dòng)60o，最后將棉拭子繞平板邊緣涂抹一周。蓋好平皿 , 置室溫干燥

9、 5min。b）用無菌棉拭子蘸取濃度為 2.0 1082.0 109cfu/mL 質(zhì)控菌株菌 懸液，均勻涂抹于營養(yǎng)瓊脂平板表面，具體方法同上，作為對(duì)照試驗(yàn)。c）以無菌操作取出抗生素紙片分別貼在涂有受試物和質(zhì)控菌株菌懸 液的平板培養(yǎng)基表面， 每個(gè)平板放 4 個(gè)紙片。然后將平板置于 361 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 18h 后觀察抗生素紙片周圍有無抑菌環(huán)， 量取并記錄 其直徑（包括紙片直徑） 大小，單位 mm。試驗(yàn)應(yīng)做 3 個(gè)平行， 取其均值。d）質(zhì)控菌抑菌環(huán)應(yīng)均在質(zhì)控范圍內(nèi)，說明試驗(yàn)方法準(zhǔn)確可靠，否則試 驗(yàn)無效。急性腹腔注射致病性試驗(yàn)?zāi)康臋z測(cè)受試物的急性致病性。試驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)健康成年小鼠，體重 18 2

10、0g。操作程序a）選健康成年小鼠 40 只,體重 1820g，雌、雄各半，劑量為 500mg/kgBW，按 0.1mL/10gBW經(jīng)腹腔注射受試物。b）于腹腔注射后第 3d、7d分別取存活的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物雌、 雄各 5只解剖， 并做大體病理學(xué)觀察。c）腹腔注射后第 14d將剩余實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死、 解剖并做大體病理學(xué)觀察。結(jié)果觀察、評(píng)價(jià) 根據(jù)試驗(yàn)周期內(nèi)動(dòng)物有無死亡及出現(xiàn)的中毒體癥、大體病理學(xué)觀察及病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)病變的程度進(jìn)行分級(jí)判定（見表3）。表 3 急性致病性判定標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別判定依據(jù)強(qiáng)致病性動(dòng)物出現(xiàn)死亡， 死亡動(dòng)物及 24h以上存活動(dòng)物在第 3d、7d 經(jīng)解剖肉眼檢查 或病理組織學(xué)檢查即可發(fā)現(xiàn)臟器的明顯

11、病變。弱致病性動(dòng)物有中毒體癥無死亡，動(dòng)物第 14d 經(jīng)解剖肉眼檢查或病理組織學(xué)檢查可 發(fā)現(xiàn)臟器的明顯病變。無致病性動(dòng)物無中毒體癥無死亡，動(dòng)物第 14d 解剖肉眼檢查或病理組織學(xué)檢查均未 發(fā)現(xiàn)臟器的明顯病變。6.3.6 急性眼刺激試驗(yàn).1 目的 檢測(cè)受試物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物眼睛的急性刺激和腐蝕作用。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物3 只家兔，試驗(yàn)前檢查家兔雙眼，有異常者不能用于試驗(yàn)。操作程序a）吸取受試物 0.1mL, 滴入家兔一側(cè)眼結(jié)膜囊內(nèi)，另一側(cè)眼以生理 鹽水作為正常對(duì)照。b）滴受試物后，將眼被動(dòng)閉合 4s,30s 后用生理鹽水沖洗。于滴眼 后 1h、24h、48h、72h、7d、14d 和 21d，肉眼觀察家兔眼結(jié)膜、虹

12、膜和 角膜的損傷與恢復(fù)情況。 如果 72h 內(nèi)未出現(xiàn)刺激反應(yīng)，或第 7d 或第 14d， 眼睛刺激反應(yīng)完全恢復(fù)， 即可提前終止試驗(yàn)。 必要時(shí)，用 2%熒光素鈉溶 液或裂隙燈、放大鏡檢查角膜及虹膜變化。評(píng)價(jià)規(guī)定按表 4 對(duì)家兔眼角膜、虹膜和結(jié)膜的急性刺激反應(yīng)進(jìn)行評(píng)分，并分 別計(jì)算每只動(dòng)物在三個(gè)不同觀察時(shí)間（ 24h、48h和 72h）角膜損害、虹 膜損害、結(jié)膜充血和結(jié)膜水腫四方面的 “平均評(píng)分”（即每只動(dòng)物的 24h、 48h和 72h評(píng)分之和除以觀察數(shù) 3）。分別以動(dòng)物眼角膜、虹膜和結(jié)膜 充血、水腫的平均評(píng)分和恢復(fù)時(shí)間進(jìn)行評(píng)分， 按表 5 或表 6 眼刺激反應(yīng) 分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)判定受試物對(duì)眼睛的刺激強(qiáng)

13、度。表 4 急性眼刺激反應(yīng)的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)眼損害表現(xiàn)評(píng)分角膜損害：無潰瘍形成或混濁0散在或彌漫性混濁，虹膜清晰可見1半透明區(qū)易分辨，虹膜模糊不清2出現(xiàn)灰白色半透明區(qū)，虹膜細(xì)節(jié)不清，瞳孔大小勉強(qiáng)可見角膜不透明，混濁，虹膜無法辨認(rèn) 4虹膜損害：正常0皺褶明顯加深，充血，腫脹，角膜周圍有中度充血，瞳孔對(duì)光仍1有反應(yīng)2出血、肉眼可見破壞，或瞳孔對(duì)光無反應(yīng)結(jié)膜（瞼結(jié)膜、球結(jié)膜）充血：血管正常0血管充血呈鮮紅色1血管充血呈深紅色，血管不易分辨2彌漫性充血呈紫紅色3結(jié)膜（瞼結(jié)膜、球結(jié)膜）水腫：無水腫0輕微水腫（包括瞬膜）1明顯水腫，伴有部分眼瞼外翻2水腫至眼瞼近半閉合3水腫至眼瞼大半閉合4表 5 眼刺激反應(yīng)分級(jí)標(biāo)

14、準(zhǔn)級(jí)別判定依據(jù)可逆 性 損 傷無刺激 性3 只動(dòng)物的平均評(píng)分：角膜損害 1 、虹膜損害 1 、結(jié)膜充血 2 和結(jié)膜水腫 2 ；或 3 只動(dòng)物中至少有 2 只動(dòng)物的平均評(píng)分符合上述標(biāo)準(zhǔn)， 另外 1 只動(dòng)物的刺激反應(yīng)在 21d 內(nèi)完全恢復(fù)。輕刺激 性3 只動(dòng)物中有 2 只動(dòng)物的平均評(píng)分：角膜損害 1；虹膜損害 1 ；結(jié)膜充血 2；結(jié) 膜水腫 2，且 7d 內(nèi)全部動(dòng)物的刺激反應(yīng)完全恢復(fù)。刺激性 a3 只動(dòng)物中有 2 只動(dòng)物的平均評(píng)分：角膜損害 1；虹膜損害 1 ；結(jié)膜充血 2；結(jié) 膜水腫 2，且 21d 內(nèi)全部動(dòng)物的刺激反應(yīng)完全恢復(fù)。不可逆腐蝕性 b至少有 1 只動(dòng)物的角膜、虹膜或結(jié)膜的刺激反應(yīng)在2

15、1d 的觀察期內(nèi)未完全恢復(fù)或 /和在 3 只動(dòng)物中有 2 只動(dòng)物的平均評(píng)分：角膜損害 3；虹膜損害 1.5 。性損傷 / 19.或1注：完全恢復(fù)是指動(dòng)物的眼刺激反應(yīng)評(píng)分：角膜損害=0，虹膜損害 =0，結(jié)膜充血 =0 或 1，結(jié)膜水腫 =0a 接觸受試物后所產(chǎn)生的可逆性炎性反應(yīng)。b 接觸受試物后所產(chǎn)生的不可逆性組織損傷。表 6 眼刺激性反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)平均評(píng)分動(dòng)物數(shù)（只）角膜損害 1 和虹膜損害 1 和2結(jié)膜充血 2 和結(jié)膜水腫 21腐蝕性 b虹膜損害 =0，結(jié)膜充血 =0或 1，結(jié)膜水腫 =0或 1的時(shí)管翳，也可判為腐蝕性。7 結(jié)果評(píng)價(jià) / 19.凡毒理學(xué)試驗(yàn)結(jié)果評(píng)價(jià)為有毒的產(chǎn)品，不得生產(chǎn)和銷售；

16、有毒或致 病性試驗(yàn)結(jié)果不符合的菌種 , 均不得作為微生物肥料生產(chǎn)用菌種。急性毒性試驗(yàn)根據(jù)半數(shù)致死量 (LD50)數(shù)值, 判定受試物的毒性分級(jí) , 半數(shù)致死量 (LD50) 劑量分級(jí)按 GB 15193.3-2003 附錄 D執(zhí)行，凡 LD505000mg/kgBW 的，可通過，即該菌種可作為生產(chǎn)用菌種或該產(chǎn)品可進(jìn)行生產(chǎn)、銷售。致病性試驗(yàn)急性毒性試驗(yàn)結(jié)果判定同 6.1 。一次破損皮膚刺激試驗(yàn)如結(jié)果為無刺激或僅具輕度刺激作用，可通過；否則，應(yīng)放棄使用。溶血試驗(yàn)溶血試驗(yàn)結(jié)果為陰性的，可通過；否則，應(yīng)放棄使用?？咕幬锩舾性囼?yàn)受試菌株必須對(duì)兩種以上的抗生素敏感；否則，應(yīng)放棄使用。急性腹腔注射致病性試驗(yàn)

17、結(jié)果為無急性致病性可通過；否則，應(yīng)放棄使用。急性眼刺激試驗(yàn)結(jié)果對(duì)眼無刺激性或具有輕刺激性的，可通過；否則，應(yīng)放棄使用附錄 A（規(guī)范性附錄）菌種安全分級(jí)目錄A.1 第一級(jí)：免作毒理學(xué)試驗(yàn)的菌種A.1.1 根瘤菌類Azorhizobium caulinodans莖瘤固氮根瘤菌（田菁（莖瘤）根瘤菌）Bradyrhizobium elkanii埃氏慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Bradyrhizobium japonicum日本慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Bradyrhizobium liaoningense遼寧慢生根瘤菌（慢生大豆根瘤菌）Mesorhizobium huakuii華癸中生根瘤菌（紫云英

18、）Mesorhizobium loti百脈根中生根瘤菌Rhizobium etli埃特里根瘤菌（菜豆）Rhizobium leguminosarum biovar phaseoli豌豆根瘤菌（菜豆生物型）Rhizobium leguminosarum biovar trifolii豌豆根瘤菌（三葉草生物型）Rhizobium leguminosarum biovar viceae豌豆根瘤菌（蠶豆生物型）Sinorhizobium fredii費(fèi)氏中華根瘤菌（快生大豆根瘤菌）Sinorhizobium meliloti苜蓿中華根瘤菌還包括尚未確定種名的，從一些豆科植物根瘤內(nèi)分離、純化、鑒定、回接

19、、篩選后在原 宿主植物結(jié)瘤、固氮良好的根瘤菌，如花生、綠豆、沙打旺根瘤菌等。A.1.2 自生及聯(lián)合固氮微生物類Azospirillum lipoferum生脂固氮螺菌Azospirillum brasilense巴西固氮螺菌Azotobacter beijgerinckii拜氏固氮菌Azotobacter chroococcum褐球（圓褐）固氮菌Azotobacter vinelandii棕色固氮菌Azotobacter paspali雀稗固氮菌Beijerinckia indica印度貝氏固氮菌A.1.3 光合細(xì)菌類Rhodobacter capsulatus莢膜紅細(xì)菌Rhodobacter

20、 sphaeroides類球紅細(xì)菌 （ 球形紅桿菌 ）Rhodopseudomonas acidophila嗜酸紅假單胞菌Rhodopseudomonas gelatinosa膠質(zhì)紅假單胞菌Rhodopseudomonas globiformis球形紅假單胞菌Rhodopseudomonas palustris沼澤紅假單胞菌Rhodopseudomonas rutila血色紅假單胞菌Rhodopseudomonas sulfidophila嗜硫紅假單胞菌Rhodopseudomonas viridis綠色紅假單胞菌Rhodospirillum fulvum黃褐紅螺菌Rhodospirillum

21、 rubrum深紅紅螺菌Rhodospirillum salinarium鹽場(chǎng)紅螺菌Rubrivivax gelatinosus膠狀紅環(huán)菌（膠狀紅長命菌）A.1.4 分解磷鉀化合物細(xì)菌類Bacillus amyloliquefaciens液化淀粉芽孢桿菌Bacillus laterosporus側(cè)孢芽孢桿菌Bacillus licheniformis地衣芽孢桿菌Bacillus megaterium巨大芽孢桿菌Bacillus mucilaginosus膠胨樣芽孢桿菌Bacillus subtilis枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensisThiobacillus thioox

22、idansA.1.5 促生細(xì)菌類Paenibacillus azotofixansPaenibacillus polymyxaA.1.6 酵母菌類Candida guillermondiiCandida membranaefaciensCandida tropicalisCandida utilisEndomycopsis fibuligerPichia farinosaPichia membranaefaciens Saccharomyces cerevisiae Rhodotorula rubraA.1.7 放線菌類Frankia sp.Streptomyces chingyangensi

23、sStreptomyces microflavusA.1.8AM 真菌類Glomus mosseaeA.1.9 其蘇云金芽孢桿菌氧化硫硫桿菌固氮類芽孢桿菌多粘類芽孢桿菌季也蒙假絲酵母膜醭假絲酵母熱帶假絲酵母產(chǎn)朊假絲酵母扣囊擬內(nèi)孢霉粉狀畢赤酵母膜醭畢赤酵母釀酒酵母深紅酵母弗蘭氏克菌（固氮放線菌）涇陽鏈霉菌細(xì)黃鏈霉菌摩西球囊霉Lactobacillus parabuchner類布氏乳桿菌Lactobacillus acidophilus嗜酸乳桿菌Lactobacillus bulgaricus保加利亞乳桿菌Lactobacillus casei干酪乳桿菌Lactobacillusdelbrueck

24、i德氏乳桿菌Lactobacillus lactis乳酸乳桿菌Lactobacillus plantarum植物乳桿菌Pediococcus pentosaceus戊糖片球菌Streptococcus lactis乳 酸鏈球菌Streptococcus thermophilus嗜 熱鏈球菌A.2 第二級(jí)：需做急性毒性（LD50）試驗(yàn)的菌種Arthrobacter aurescens金黃節(jié)桿菌Aspergillus candidus Link亮白曲霉Aspergillus niger黑曲霉Aspergillus oryzae米曲霉Aspergillus penicillioides Speg帚狀

25、曲霉Aspergillus wentii Wehmer溫特曲霉Eurotium chevalieri Mangin謝瓦散囊菌Bacillus brevis(Brevibacillus brevis)短芽孢桿菌Bacillus circulans環(huán)狀芽孢桿菌Bacillus coagulans凝結(jié)芽孢桿菌Bacillus pumilu短小芽孢桿菌Bacillus sphaericus球形芽孢桿菌Brevibacterium sp.短桿菌Burkholderia fungorum真菌伯克霍爾德氏菌Chaetomium cochliodes螺卷毛殼Chaetomium trilaterale三側(cè)毛殼Clostridium pasteurianum巴斯德梭菌Geobacillus stearothermophilus嗜熱脂肪地芽孢桿菌(Bacillus stearothermophilus )Geotrichum candidum白地霉Nocardia sp.諾卡氏菌Nocardiopsis sp.擬諾卡氏菌Paenibacillus macerans浸麻類芽孢桿菌Penicillium citreonigrum黃暗青霉Penicillium citrinum桔青霉Penicillium frengue