4.消毒滅菌與噬菌體(人衛(wèi)8版)

1、內(nèi)容第五節(jié) 抑制或殺死微生物的理化因素 利用理化因素對微生物的影響進行消毒滅菌，是防止其污染或傳播的重要措施本節(jié)重點與難點 1. 掌握消毒、滅菌、無菌、防腐、無菌操作的概念2. 掌握熱力滅菌的種類、原理及應用范圍;濕熱與干熱滅菌法的比較；巴氏消毒法3. 掌握紫外線殺菌的原理及特點；濾過除菌的應用4. 熟悉影響消毒劑作用的因素殺死物體上病原微生物,不一定能殺死含芽胞的細菌或非病原微生物 消毒disinfection滅菌sterilization無菌asepsis防腐antisepsis防止或抑制體外細菌生長繁殖不含活菌殺死物體上的所有微生物無菌操作一、消毒滅菌的常用術語二、物理消毒滅菌法 熱力滅

2、菌法 輻射滅菌法 濾過除菌法 干燥低溫抑菌法一）熱力滅菌法1. 殺菌機制 有干熱和濕熱兩大類滅菌法 損傷機制復雜菌體蛋白凝固變性同一溫度下濕熱比干熱滅菌效果好 濕熱中細菌菌體蛋白較易凝固 濕熱的穿透力比干熱大 濕熱的蒸汽有潛熱2. 滅菌效果3.干熱滅菌法 焚燒：直接點燃物品或?qū)⑵渲糜诜贌隣t內(nèi)，最徹 底的滅菌法，適用于廢棄物品或動物尸體滅菌 燒灼：直接用火焰滅菌，適用于接種環(huán)或試管口滅菌 干烤：利用干烤箱，加熱160-180 2小時，適用 于高溫下不變質(zhì)、不損壞、不蒸發(fā)的物品 紅外線：利用電磁波的熱效應滅菌，其熱效應只 在照射表面產(chǎn)生。多用于醫(yī)療器械滅菌 微波：利用高頻電磁波的熱效應滅菌，其熱效

3、應 有一定穿透性。用于食品、藥品、非金屬 器械及其他物品滅菌 巴氏消毒法：用較低溫度殺滅液體中的特定微生 物,用于牛奶、啤酒等消毒4. 濕熱滅菌法 煮沸消毒法：100水煮5min-2hr,用于餐具和小手 術刀剪的消毒61.1-62.8 30分71.7 30秒 高壓蒸汽滅菌法 醫(yī)學上最常用、最有效的滅菌方法，滅菌溫度取決于蒸汽壓力。 利用高壓蒸鍋，在103.4kPa蒸汽下，溫度達121.3維持15-20min，殺死包括芽胞在內(nèi)的所有微生物。用于耐高溫、耐潮濕物品的滅菌 流通蒸汽消毒法： 利用100 水蒸汽，經(jīng)15-30min 殺死繁殖體，不能將芽胞全殺死 間歇蒸汽滅菌法： 反復多次流通蒸汽間歇加

4、熱以達 到滅菌目的。適用于不耐高溫的 含糖、牛奶等培養(yǎng)基的滅菌 波長200-300nm的紫外線能干擾細菌DNA的復制與轉(zhuǎn)錄而殺菌二）輻射殺菌法1. 紫外線 穿透力較弱，常用于空氣及物品表面消毒 損傷人體皮膚黏膜，注意自我防護 DNA損傷的修復2. 電離輻射包括高速電子、X射線和 射線 有較高的能量和穿透力 干擾DNA合成，破壞細胞膜 大量一次性醫(yī)用塑料制品 食品、藥品、生物制品 利用濾菌器的機械性阻擋，除去液體或空氣中的細菌 主要用于血清、毒素、抗生素、酶制劑等不耐熱的液體及空氣等的滅菌 三）濾過除菌法1. 濾菌器硝基纖維素膜制成，孔徑0.1-0.45m 濾膜濾器 玻璃濾器 Seitz濾器玻璃

5、細砂壓成濾板，鑲嵌在玻璃漏斗中金屬制成，中間嵌石棉濾板2 . 影響過濾的因素 介質(zhì)類型 細菌種類 細菌數(shù)量 使用壓力、過濾時間、室溫等3 . 生物潔凈技術（HEPA） 初、中、高三級高效分子空氣過濾器，除去0.5-5m的塵埃，并采用合理氣流方式以潔凈空氣 生物潔凈室裝有高效或亞高效過濾系統(tǒng)，如無菌護理室，無菌手術間等 低溫狀態(tài)下真空抽去水分 主要用于菌種保藏 可存數(shù)年到數(shù)十年四）干燥與低溫抑菌法冷凍真空干燥法一）殺菌機制 使菌體蛋白凝固變性 改變細胞膜通透性，使胞內(nèi)含物逸出 干擾細菌的酶系統(tǒng)及代謝如酚類、醇類、酸堿類等如表面活性劑、脂溶劑等如重金屬類、某些氧化劑等三、化學消毒滅菌法二）常用消毒

6、劑種類1.醇類 除去細胞膜中脂質(zhì)，使菌體蛋白變性 乙醇、異丙醇2.酚類 低濃度破壞細胞膜，高濃度凝固菌體蛋白 石碳酸、來蘇、氯已定等3.重金屬類 使菌體蛋白變性或沉淀；滅活細菌酶蛋白 紅汞、硫柳汞、硝酸銀等4.氧化劑 依靠氧化作用滅活細菌酶蛋白 過氧化氫、過氧乙酸、高錳酸鉀、鹵素等5.表面活性劑 降低液體表面張力，乳化油脂，發(fā)揮清潔作用 改變胞壁通透性，使胞內(nèi)容物溢出，呈現(xiàn)滅菌作用 苯扎溴安、度米芬等6.烷化劑 滅活細菌酶蛋白 甲烷、戊二醛、環(huán)氧乙烷等三）按殺菌能力分類 高效消毒劑 中效消毒劑 低效消毒劑用于進體內(nèi)的物品，包括氧化劑、醛類、環(huán)氧乙烷等用于進入腔道的器材，包括含碘消毒劑、醇類等用

7、于體表及外環(huán)境，包括表面活性劑、高錳酸鉀等四）消毒劑的應用消毒劑常用濃度 適用范圍含氯消毒劑有效氯量2-5mg/L飲水過氧乙酸0.2%-0.5%皮膚、物體表面、空氣戊二醛2%醫(yī)療器械碘酒2.5%皮膚、黏膜、物體表面碘伏2%皮膚、黏膜、物體表面乙醇75%醫(yī)療器械、皮膚新潔爾滅0.4%-1.6%皮膚、黏膜、物體表面高錳酸鉀0.1%皮膚、黏膜、食具、蔬菜等1. 醫(yī)療器械物品的消毒滅菌物品類型消毒滅菌方法高危器械物品針頭、注射器、手術器械、注射液體、靜脈導管等高壓蒸汽滅菌；環(huán)氧乙烷、戊二醛等高效消毒劑中危器械物品呼吸機、麻醉機、胃鏡、支氣管鏡、體溫計、口腔器械等流通蒸汽、煮沸消毒；過氧乙酸、醇類、戊二

8、醛浸泡低危器械物品治療盤、治療車、食品器皿等清洗后一般消毒即可快速周轉(zhuǎn)物品纖維內(nèi)鏡、牙鉆、牙科手術器械等瞬時滅菌、微波滅菌、高效消毒劑快速處理等2. 室內(nèi)空氣消毒滅菌 紫外線照射，濾過除菌 過氧乙酸、過氧化氫、二氧化氯噴霧或熏蒸 中草藥（艾葉）煙熏3. 手和皮膚消毒 肥皂和流動水正確洗手 75%乙醇，0.05%氯已定、過氧乙酸水溶液等4. 粘膜消毒 口腔黏膜可用3%過氧化氫 尿道、陰道沖洗可用0.05%氯已定，1g/L高錳酸鉀5. 排泄物及分泌物消毒 50g/L有效氯的次氯酸鈉、漂白粉等作用1h 等量200g/L漂白粉攪拌混勻作用2h五）影響消毒劑作用的因素消毒劑細菌 環(huán)境種類濃度作用時間數(shù)量

9、種類有機物溫度酸鹼度第三章 噬菌體 感染細菌等微生物的病毒，具有嚴格的宿主特異性，也是賦予宿主菌生物學性狀的遺傳物質(zhì)。 據(jù)其感染微生物的后果分為：毒性噬菌體和溫和噬菌體本章重點與難點1.掌握噬菌體、毒性/溫和噬菌體的概念2.掌握溫和噬菌體與宿主菌的關系及其在細菌遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移中的意義 3.掌握毒性噬菌體的生活周期4.熟悉噬菌體的生物學特性及噬菌體的應用第一節(jié) 噬菌體的生物學性狀 形態(tài)結構 化學組成 抗原性 抵抗力1、形態(tài)與結構個體微小，nm為測量單位，EM下可見有蝌蚪形、微球形和細桿形頭部六棱柱體尾部管狀器官2、化學組成位于頭部中央DNA或RNA噬菌體的遺傳物質(zhì) 核酸 蛋白質(zhì)構成頭部外殼及尾部保

10、護核酸決定噬菌體的表型特征3、抗原性 具有抗原性，能刺激機體產(chǎn)生抗體 抗體能阻止相應噬菌體侵襲敏感菌 主要表現(xiàn)在阻斷吸附4、抵抗力 比一般細菌繁殖體強第二節(jié) 毒性噬菌體一、毒性噬菌體（Virulent phage）能在敏感宿主菌內(nèi)大量增殖并使之裂解的噬菌體二、溶菌周期吸附 穿入生物合成成熟與釋放基因的復制 蛋白質(zhì)的合成Adsorption吸附Penetration穿入 Biological Synthesis 生物合成 Maturation and Release 成熟和釋放 Lytic cycle三、噬菌現(xiàn)象液體培養(yǎng)基渾濁變澄清固 體 培養(yǎng)基噬 菌 斑噬斑熒光假單胞菌 噬菌體基因整合于宿主菌

11、基因組中，并隨其染色體復制而復制，隨菌分裂而分裂。 具有溶原周期及溶菌周期。一、溶原性噬菌體（Lysogenic phage）第三節(jié) 溫和噬菌體Adsorption吸附Penetration穿入 Integration整合 Lysogenic cycle二、前噬菌體（prophage）整和在細菌基因組中的噬菌體基因組三、溶原性細菌（lysogenic bacterium）帶有前噬菌體基因組的細菌溶原性轉(zhuǎn)換示意圖-棒狀桿菌噬菌體無毒白喉棒狀桿菌有毒白喉棒狀桿菌InductionReplicationMaturation and Release 具有感染性的噬菌體顆粒 宿主細胞內(nèi)類似質(zhì)粒形式的噬菌

12、體核酸 前噬菌體四、溶原性噬菌體的存在狀態(tài) 細菌的鑒定與分型 檢測標本中的未知菌 基因工程的工具 用于細菌性感染的治療第四節(jié) 噬菌體的應用小 結 消毒滅菌的常用術語；常用物理消毒滅菌法的作用機制及適用范圍；化學消毒滅菌法；影響化學消毒劑作用效果的因素；消毒滅菌的運用；噬菌體的生物學性狀；毒性噬菌體與溫和噬菌體；噬菌體的應用思考題1、試述常用物理滅菌法的作用機制及適用范圍2、試分析影響化學消毒劑作用效果的因素3、什么是噬菌體？簡述噬菌體的生物學特性4、試述噬菌體與宿主菌的關系5、思考噬菌體在細菌遺傳變異中的意義中英文關鍵詞 滅菌 sterilization 消毒 disinfection防腐 a

13、ntisepsis 無菌 asepsis消毒劑 disinfectant高壓蒸汽滅菌器 autoclave高壓蒸汽滅菌法 sterilization by pressured steam 噬菌體 Bacteriophage毒性噬菌體 virulent phage 溶原性噬菌體 lysogenic phage前噬菌體 prophage 溶原性轉(zhuǎn)換 lysogenic conversion 溶原性細菌 lysogenic bacterium 噬 斑 plaque參 考 文 獻1 Brooks GF，Brutel JS，Morse SA. Jawetz，Melnick & Adelbergs Medical Microbiology. 24nd ed. New York：Lange Medical Books/McGraw-Hill，20072 Murray PA，Rosenthal KS，Kobayashi GS e