補(bǔ)黃丹對(duì)乙酸致小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的治療作用1800字

1、補(bǔ)黃丹對(duì)乙酸致小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的治療作用1800字 潰瘍性結(jié)腸炎UC1859年由Wilks首先描繪，1920年被醫(yī)學(xué)界公認(rèn)，我國(guó)于1956年首次報(bào)道。過去認(rèn)為該病歐美多見，亞非少見，但近幾十年研究說明，UC在我國(guó)也是一種較常見的消化道疾病，并且正在逐漸成為消化病學(xué)研究的一個(gè)新熱點(diǎn)，盡管我國(guó)目前還缺乏UC的流行病學(xué)資料，但據(jù)?世界華人消化雜志2000年3月1對(duì)1978年以來幾次重要的全國(guó)性消化會(huì)議的資料統(tǒng)計(jì)，該病發(fā)病率和患病率在我國(guó)有明顯增加趨勢(shì)： 潰瘍性結(jié)腸炎u(yù)lcerative colitis，簡(jiǎn)稱UC。是一種病因不明的，以直腸和結(jié)腸的淺表性、非特異性炎癥病變?yōu)橹鞯哪c道疾病，主要累及直腸和乙

2、狀結(jié)腸，也可侵及其他部分或全部結(jié)腸；病變嚴(yán)重者，其中少數(shù)可出現(xiàn)10cm以內(nèi)的“反流性回腸。一、材料與方法一小鼠50只，體重202g，雌雄兼用均由荊州衛(wèi)校提供。所有小鼠購(gòu)回后用混合配方飼料喂養(yǎng)，自由進(jìn)食飲水，每日更換飲水，飼料，保持小鼠生活環(huán)境通風(fēng)及清潔衛(wèi)生。應(yīng)用手術(shù)器械、分光光度儀、離心機(jī)、水浴恒溫震蕩器、微量稱重器上海天平儀器廠等。所用藥品為補(bǔ)黃丹、鄰甲聯(lián)苯胺溶液。二方法1、分組小鼠隨機(jī)分成5組，即正常組、模型組、高劑量補(bǔ)黃丹組、中劑量補(bǔ)黃丹組和低劑量補(bǔ)黃丹組等5組，每組10只，各組體重統(tǒng)計(jì)學(xué)比擬無顯著差異P0.05。2、模型制作參照文獻(xiàn) 2426 并略加改良：實(shí)驗(yàn)前各組小鼠分別稱重，實(shí)驗(yàn)采

3、用灌腸法制作小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型。灌腸前小鼠禁食24小時(shí)，除對(duì)照組外，其余各組小鼠均經(jīng)肛門插入一直徑 1 mm的硅膠管，插管尖端距小鼠肛門約 2 cm，并以4%乙酸稀釋液灌腸，每次 2 mL，而后保持小鼠頭朝下體位，大約20秒后，注入生理鹽水0.5 mL 沖洗；對(duì)照組注入等量生理鹽水對(duì)照。連續(xù)灌腸4天，模型完成。3、治療對(duì)造模成功的小鼠根據(jù)分組分別給以相應(yīng)的藥物每100g體重，每日一次灌胃：正常組及模型組給予生理鹽水 3 mL；補(bǔ)黃丹高、中、低劑量組分別給予等量的不同濃度的補(bǔ)黃丹含生藥分別為0.75 ，0.60 ，0.48 g/ mL ，使用前用無菌的蒸餾水稀釋，相當(dāng)于225 ，180 ，14

4、4 mg/ kg 。連續(xù)給藥7天，給藥期間正常飲食。三觀測(cè)指標(biāo)1、大體觀察觀察小鼠的體重、進(jìn)食量、飲水量、毛發(fā)光澤度、大便性狀及活動(dòng)情況，并記錄體重變化。2、疾病活動(dòng)指數(shù)DAI建模后17天測(cè)定小鼠體重、觀察糞便性狀和隱血情況，按DAI標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)展評(píng)分表1 ，計(jì)算DAI 分值：DAI = 體質(zhì)量下降分?jǐn)?shù) + 糞便性狀分?jǐn)?shù) + 便血分?jǐn)?shù)。糞隱血測(cè)定：鄰聯(lián)甲苯胺法將糞便涂于白色濾紙上，滴加鄰聯(lián)甲苯胺溶液兩滴，再滴加過氧化氫一滴，觀察結(jié)果。表1 疾病活動(dòng)指數(shù)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)疾病活動(dòng)指數(shù)參照文獻(xiàn)27標(biāo)準(zhǔn)。正常糞便指成形顆粒樣便；半稀便指糊狀或半成形不粘肛便；稀便指水樣粘肛便。3、外周血白細(xì)胞總數(shù)TWBC建模后7天

5、，小鼠斷尾取血， 取60微升推片瑞氏染色后，另取20微升參加280微升白細(xì)胞稀釋液中混勻，在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上計(jì)數(shù)白細(xì)胞總數(shù)。4、結(jié)腸長(zhǎng)度、腸質(zhì)量指數(shù)、結(jié)腸潰瘍及炎癥評(píng)分建模后7天后，脫頸椎處死小鼠，取全段結(jié)腸，沿腸系膜剖開結(jié)腸，4 生理鹽水漂洗，將結(jié)腸上端固定于測(cè)量板上，下端負(fù)荷1g ，測(cè)量結(jié)腸負(fù)荷1g時(shí)的垂直長(zhǎng)度。結(jié)腸經(jīng)濾紙吸干后，微量稱重儀測(cè)其濕質(zhì)量，計(jì)算腸質(zhì)量指數(shù)：腸質(zhì)量指數(shù)= 結(jié)腸濕質(zhì)量/ 體重100 %28。將結(jié)腸展平置于冰盤上，用解剖顯微鏡觀察結(jié)腸情況，按UC結(jié)腸潰瘍及炎癥評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)計(jì)分29。5、結(jié)腸組織病理學(xué)正常組結(jié)腸黏膜上皮完好，腺體排列整齊，未見腐敗及潰瘍形成，少量炎細(xì)胞浸潤(rùn)；模

6、型組結(jié)腸黏膜上皮缺失，腺體構(gòu)造紊亂，淺表潰瘍形成，黏膜及黏膜下層水腫明顯，大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，隱窩膿腫形成，腸壁增厚；補(bǔ)黃丹高劑量組結(jié)腸黏膜上皮根本完好，腺體排列整齊，未見腐敗及潰瘍形成，炎細(xì)胞浸潤(rùn)輕，腸壁輕度增厚。6、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差s表示，組間比擬采用Dun-nett-t檢驗(yàn)，以P0.05作為有差異的界值，以P0.01作為有顯著差異的界值。二、結(jié)果與分析一大體觀察灌腸第3天，造模小鼠開場(chǎng)出現(xiàn)腹瀉、飲食減少、體毛不光澤，第 5 天開場(chǎng)出現(xiàn)不同程度的肉眼血便、蜷縮、活動(dòng)減少、體重減輕。經(jīng)補(bǔ)黃丹給藥治療一周后，治療組小鼠病癥均有不同程度改變，表現(xiàn)為食量增加、體重及毛色逐漸恢復(fù)，肉

7、眼血便減少，有時(shí)僅見稀便，有時(shí)為正常大便。但UC模型組小鼠病癥和體征均無明顯改變。二DAI評(píng)分造模成功后，小鼠即開場(chǎng)出現(xiàn)腹瀉、體質(zhì)量下降、血便等UC 病癥。治療后補(bǔ)黃丹各劑量治療組DAI降低明顯，作用呈劑量依賴性表2。三外周血TWBC治療后補(bǔ)黃丹能顯著降低外周血TWBC ，且補(bǔ)黃丹療效呈劑量依賴性表2。表2 對(duì)照組與補(bǔ)黃丹組DAI分值、外周血TWBCsn = 10。建模前各組DAI 均為0。DAI：疾病活動(dòng)指數(shù)；TWBC：白細(xì)胞總數(shù)；UC：潰瘍性結(jié)腸炎。與UC模型組比擬，*：P 0.05；與正常組比擬，*：P 0.01。四結(jié)腸長(zhǎng)度、腸質(zhì)量指數(shù)、結(jié)腸潰瘍及炎癥評(píng)分造模后7天，模型組結(jié)腸明顯短縮，

8、黏膜增厚、充血、水腫、潰瘍形成。補(bǔ)黃丹治療組結(jié)腸短縮程度較小，腸質(zhì)量指數(shù)明顯降低；結(jié)腸充血、水腫明顯減少，增厚不明顯，偶有潰瘍且潰瘍面積明顯縮小表3。 表3 對(duì)照組與補(bǔ)黃丹組結(jié)腸長(zhǎng)度、腸質(zhì)量指數(shù)、結(jié)腸潰瘍及炎癥評(píng)分sn = 10。UC：潰瘍性結(jié)腸炎；與UC模型組比擬，*：P 0.05 ；與正常組比擬，*：P 0.01。三、總結(jié)本文采用乙酸法誘發(fā)小鼠UC，乙酸具有增加血管通透性、激活激肽的作用30 ；并可引起結(jié)腸屏障破壞，繼而促進(jìn)進(jìn)一步的炎癥反響。該模型制作方法簡(jiǎn)便，造模周期短。建模后小鼠的腸質(zhì)量指數(shù)均有不同程度的增加，表示模型小鼠的結(jié)腸發(fā)生不同程度的充血、水腫和增厚等炎癥病變，與王曉華等報(bào)道相

9、似31。文章通過測(cè)定DAI、結(jié)腸長(zhǎng)度、腸質(zhì)量指數(shù)、結(jié)腸潰瘍及炎癥評(píng)分并分別從結(jié)腸肉眼情況及顯微鏡下評(píng)價(jià)補(bǔ)黃丹對(duì)乙酸誘發(fā)的潰瘍性結(jié)腸炎的療效，結(jié)果顯示補(bǔ)黃丹能明顯降低上述指標(biāo)，且小鼠腹瀉、便血等UC病癥好轉(zhuǎn)，結(jié)腸充血、水腫、增厚的部分炎癥表現(xiàn)減輕，說明補(bǔ)黃丹對(duì)乙酸誘發(fā)的小鼠UC有良好的治療作用。外周TWBC反映UC全身炎癥反響的嚴(yán)重程度；結(jié)腸長(zhǎng)度間接反映了結(jié)腸上皮受損，隱窩缺陷及纖維化的程度，后者與嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)及TGF2增高親密相關(guān)32 ，補(bǔ)黃丹治療組顯著降低上述指標(biāo)，對(duì)UC小鼠結(jié)腸短縮有較好的修復(fù)作用，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。文章結(jié)果提示補(bǔ)黃丹能有效減輕UC小鼠結(jié)腸短縮及結(jié)腸炎癥反響，減少UC小

10、鼠腸質(zhì)量指數(shù)的作用。綜上所述，補(bǔ)黃丹能有效減輕乙酸誘發(fā)的實(shí)驗(yàn)性潰瘍性結(jié)腸炎，具有明顯治療實(shí)驗(yàn)性UC的作用，為該藥臨床治療UC提供了藥理實(shí)驗(yàn)根據(jù)，但其治療UC的機(jī)制有待深化研究。潰瘍性結(jié)腸炎的主要病癥是腹痛、腹瀉及黏液血便，中醫(yī)屬于“泄瀉、“痢疾、“滯下等范疇，病情反復(fù)發(fā)作，難以治愈，是一種病因不明的非特異性結(jié)、直腸炎癥、代醫(yī)學(xué)多認(rèn)為其與免疫異常有關(guān)，但其確切的發(fā)病機(jī)制尚未明確。近年來，隨著國(guó)內(nèi)生活習(xí)慣、飲食構(gòu)造的改變，以及診斷程度的進(jìn)步，我國(guó)的UC發(fā)病率逐步升高。該病病程長(zhǎng)，易復(fù)發(fā)，并與結(jié)腸癌關(guān)系親密，因此日益為人們所重視。參考文獻(xiàn)：1 江學(xué)良.潰瘍性結(jié)腸炎的診斷和治療.世界華人消化雜志，20

11、00，8：3322 崔趣云，張恒弼，吳 ，孫國(guó)才，趙幃平，徐彤，李蒙.樸脾散治療潰瘍性結(jié)腸炎的臨床與實(shí)驗(yàn)研究.新消化病學(xué)雜志，2001，5：2192203 易季云，夏兵，黃梅芳，博苓，鄧長(zhǎng)生.鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型的觀察.新消化病學(xué)雜志，2000，5：7217224 朱炳喜，呂愈敏等.柳氮磺胺吡啶對(duì)大鼠乙酸性潰瘍性結(jié)腸炎組織中氧自由基的影響.新消化病學(xué)雜志，1999，5：7695 何青雯，陳耀明，賈友蘭，李曉燕，蔣海燕.免疫復(fù)合物對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的致病作用.華人消化雜志，1998，I6：876 鄒穆海，張永斌，陳葦菁，鐘廷機(jī)，劉曉秋，趙宏，連至誠(chéng)，蘇喬，蘇小茹，黃海定.復(fù)方胃腸康治療大鼠潰瘍性結(jié)腸炎及NO異常.華人消化志，2022，6：2882907 江學(xué)良，權(quán)啟鎮(zhèn)，王東等.復(fù)合法建立大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型及其免疫和超微構(gòu)造變化.世界華人消化雜志，19