《百合的組織培養(yǎng)》PPT課件

1、百合的組織培養(yǎng)種子生產(chǎn)與經(jīng)營11001班制作人：閆重陽1可編輯ppt百合花的簡介種類：百合科屬多年生草本鱗莖植物原產(chǎn)地：澳洲它是著名的球根花卉主要分布在北半球的溫帶和寒帶地區(qū)，少數(shù)種類分布在熱帶高海拔地區(qū)。 2可編輯ppt形態(tài)特征多年生球根草本花卉，株高4060cm，還有高達(dá)1m以上的。莖直立，不分枝，草綠色 莖稈基部帶紅色或紫褐色斑點(diǎn)。 地下具鱗莖，鱗莖由闊卵形或披針形，白色或淡黃色，直徑由68cm的肉質(zhì)鱗片抱合成球形，外有膜質(zhì)層。多數(shù)須根生于球基部。單葉，互生，狹線形，無葉柄，直接包生于莖稈上，葉脈平行。有的品種在葉腋間生出紫色或綠色顆粒狀珠芽，其珠芽可繁殖成小植株。花著生于莖稈頂端，呈總

2、狀花序，簇生或單生，花冠較大，花筒較長，呈漏斗形喇叭狀，六裂無萼片，因莖稈纖細(xì)，花朵大，開放時(shí)常下垂或平伸；花色，因品種不同而色彩多樣，多為黃色、白色、粉紅、橙紅，有的具紫色或黑色斑點(diǎn)，也有一朵花具多種顏色的，極美麗。花瓣有平展的，有向外翻卷的，故有“卷丹”美名。有的花味濃香，故有“麝香百合”之稱?；浣Y(jié)長橢圓形蒴果。 3可編輯ppt生長習(xí)性性喜濕潤、光照、要求肥沃、富含腐殖質(zhì)、土層深厚、排水性極為良好的砂質(zhì)土壤， 多數(shù)品種宜在微酸性至中性土壤中生長。百合喜涼爽潮濕環(huán)境，日光充足的地方、略蔭蔽的環(huán)境對百合更為適合。忌干旱、忌酷暑，它的耐寒性稍差些。百合生長、開花溫度為1624，低于5或高于30

3、生長幾乎停止，10以上植株才正常生長，超過25時(shí)生長又停滯，如果冬季夜間溫度低于5持續(xù)57天，花芽分化、花蕾發(fā)育會受到嚴(yán)重影響，推遲開花甚至盲花、花裂。百合喜肥沃、腐殖質(zhì)多深厚土壤，最忌硬粘土；排水良好的微酸性土壤為好，土壤pH值為5.56.5。 4可編輯ppt關(guān)于百合的組織培養(yǎng)最早是Dobreaux等人（1950）首次用純白百合（Liliumcandidum）的花蕾成功地誘導(dǎo)出小鱗莖。黃濟(jì)明（19791984）對25個(gè)種或品種進(jìn)行了組培試驗(yàn)，證明百合的珠芽、鱗片、鱗莖盤、根、莖、葉、莖尖、花梗、花柱和未成熟胚等外植體均能被促進(jìn)形態(tài)發(fā)生。新美芳二（1980）對百合鱗片、花被片、花絲、花柄等也組

4、培成功，認(rèn)為開花時(shí)各花器官和莖所形成小鱗莖的能力最高。程治英等人（19912001）對30多種或品種的百合進(jìn)行組培證實(shí)的結(jié)果如下：（1）用百合根、葉作為外植體，也與鱗片一樣，不同部位分化叢芽的能力都是近軸端大于遠(yuǎn)軸端。（2）鱗莖鱗片分化能力（分化苗的頻率和速度）都是外部大于內(nèi)部。雜種品種的分化能力大于野生種，低海拔種大于高海拔種。鱗片組培得到小鱗莖的試管鱗片其分化能力大于原始培養(yǎng)鱗片的分化能力。 5可編輯ppt有效的組培方法1、培養(yǎng)基配方 誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L 增殖培養(yǎng)基：MS+BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L 生根培養(yǎng)基：1/2MS+NAA0.1

5、mg/L 6可編輯ppt培養(yǎng)的前處理2、培養(yǎng)程序 取材及滅菌優(yōu)選生長健壯、開花性狀好的種球作為外植體。在取材前，最好將準(zhǔn)備接種的鱗莖在45的低溫下處理68周，然后經(jīng)洗衣粉常規(guī)清洗后，剝?nèi)[莖外皮及外部23層鱗片，切去少許頂部及基部，先用75%的酒精浸泡3060S，然后在0.1%升汞溶液中處理1520分鐘，次氯酸鈉處理1015分鐘，無菌水洗34次，即可進(jìn)行無菌操作切塊（段）接種。 7可編輯ppt溫度：20-25光照：800-1200lx每天9-14h照明培養(yǎng)基：pH5.6-5.8培養(yǎng)條件培養(yǎng)條件培養(yǎng)條件8可編輯ppt根的培養(yǎng)以毛百合為材料，在MS+NAA0.5-0.1mg/L 培養(yǎng)基上，形成腫脹

6、的粗根，將其切成小段MS+B2mg/L+NAA0.2mg/L的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，便能分化出苗。毛百合試管苗5-6個(gè)月，能形成直徑17mm左右的鱗莖，移栽后成活情況良好。9可編輯ppt胚培養(yǎng)在雜交育種工作中，為防止雜種胚和母體胚乳間不親和，有可能造成胚敗育的情況下，可采取胚培養(yǎng)，以克服不親和現(xiàn)象，有利于育種工作的順利進(jìn)行。培養(yǎng)時(shí)仍以MS培養(yǎng)基較好，糖濃度是種類而異常在20-40之間pH5.0較為適宜，NAA用量只宜在0.1-0.001之間。加入適量BA有利于幼胚成活，高BA會抑制胚根的產(chǎn)生，并促進(jìn)胚組織愈傷組織化，通常MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L培養(yǎng)促進(jìn)愈傷組織生長，然后將長大

7、的愈傷組織轉(zhuǎn)移到1/2MS不加任何激素的培養(yǎng)基上，約2個(gè)月后，可形成大量的不定芽，延長培養(yǎng)時(shí)間，就會生根，產(chǎn)生出完整的雜交后代。10可編輯ppt影響百合小鱗莖形成的因素季節(jié)（春、夏、秋、冬）鱗片不同部位的影響（上、中、下）小鱗片培養(yǎng)后形成小鱗莖的大小分布小鱗莖形成的重量與培養(yǎng)及用量的關(guān)系（成反比）11可編輯ppt試管鱗莖休眠現(xiàn)象百合30下的小鱗莖不休眠，而25下的絕大部分鱗莖休眠；低鹽低糖和高氮培養(yǎng)基上的小鱗莖不休眠，而高糖（9%）培養(yǎng)基上的小鱗莖會出現(xiàn)休眠現(xiàn)象。不同的品種在36的溫度下39120D可打破休眠。休眠現(xiàn)象還與培養(yǎng)小鱗莖時(shí)所用的糖濃度有關(guān)（Takayama等1982）；3%糖濃度培

8、養(yǎng)下得到的小鱗莖在5下約2個(gè)月可打破休眠，而9%糖濃度下培養(yǎng)得到的小鱗莖要冷藏約4個(gè)月。我們在培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)，蔗糖濃度較高（40g/L）對小鱗莖的形成和長大有利。如糖濃度降到20g/L，小鱗莖很快能長成幼苗。因此，可用糖濃度控制小鱗莖的生長，使幼苗生長健壯，提高成活率。也有人在組培前用4的低溫處理鱗片120D，在經(jīng)組培所得到的小鱗莖不發(fā)生休眠現(xiàn)象。 12可編輯ppt快速繁殖的實(shí)例把最初培養(yǎng)得到的小鱗莖，每兩個(gè)月用20 x90mm的培養(yǎng)皿，加入MS+NAA0.1+蔗糖9%+活性炭0.5%的瓊脂培養(yǎng)基，繼代一次。2個(gè)月后獎(jiǎng)得到的小鱗片切割，轉(zhuǎn)移到MS+KT10的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，給予25和2.5w/的連續(xù)光照。在經(jīng)過2 個(gè)月在原小鱗片的表面再生出無數(shù)成堆的、新的小鱗片。再將這些成堆的小鱗片轉(zhuǎn)移到加100