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1、.發(fā)酵液常用的固液分離方法有離心和過濾等。.萃取過程設(shè)計(jì)分為單級(jí)萃取、多級(jí)錯(cuò)流萃取、多級(jí)逆流萃取、回流萃取、連續(xù) 逆流萃取四種.蛋白質(zhì)沉淀方法分鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、等電點(diǎn)沉淀法、重金屬鹽沉淀 法、生物堿試劑以及某些酸類沉淀法、非離子多聚物沉淀法、加熱凝固法七類 4.電泳用凝膠制備時(shí),過硫酸錢的作用是引發(fā)作用;甲叉雙丙烯酰胺的作用是交 聯(lián)作用;TEMED的作用是增速劑。5.影響鹽析的因素有PH值、溫度:溶質(zhì)的類型和溶質(zhì)的濃度。:、基本概念.非水相生物催化技術(shù)非水相生物催化技術(shù)興起于20世紀(jì)80年代初期,突破了酶只能在單一水溶液介 質(zhì)中反應(yīng)的局限。該項(xiàng)技術(shù)主要以酶和細(xì)胞作為生物催化劑, 在非水
2、介質(zhì)中進(jìn)行 催化反應(yīng),通過構(gòu)象的改變,表現(xiàn)出較好的催化性能,如:活力、選擇性、穩(wěn)定 性等。.細(xì)胞融合技術(shù)細(xì)胞融合(cell fusion)也稱細(xì)胞雜交、原生質(zhì)體融合或體細(xì)胞雜交,是指細(xì)胞 通過介導(dǎo)和培養(yǎng),在離體條件下用人工方法將不同種的細(xì)胞通過無(wú)性方式融合成 一個(gè)核或多核的雜合細(xì)胞的過程。細(xì)胞融合技術(shù)的發(fā)展,打破了生物種間障礙,能定向地制造出新的有用的微生物; 增加微生物體內(nèi)控制代謝產(chǎn)物產(chǎn)量的基因拷貝數(shù), 可以大幅度地提高目標(biāo)產(chǎn)物的 產(chǎn)量;將動(dòng)、植物或某些微生物特有產(chǎn)物的控制基因植入細(xì)胞中,快速經(jīng)濟(jì)地大量生產(chǎn)這些產(chǎn)物;將具有不同性能的多種質(zhì)粒植入,使新菌株在清除污染或以非糧食物質(zhì)為原料進(jìn)行發(fā)酵
3、生產(chǎn)或環(huán)境保護(hù)。.定點(diǎn)突變定點(diǎn)突變te-directed mutagenesis贖術(shù)可以通過盒式取代誘變、寡核甘酸引物介 導(dǎo)和PCR介導(dǎo)等方法,在已知DNA序列中取代、插入或缺失一定長(zhǎng)度的核甘酸 片段,一般使DNA所表達(dá)的目的蛋白性狀向有利的方向變化。該方法比使用化 學(xué)因素、自然因素導(dǎo)致突變的方法具有突變率高、簡(jiǎn)單易行、重復(fù)性好等特點(diǎn)。.DNA Shuffling 技術(shù)DNA Shuffling技術(shù),也稱基因改組技術(shù),是基因在分子水平上進(jìn)行有性重組。對(duì) 一組基因群體(進(jìn)化上相關(guān)的 DNA序列或曾篩選出性能改進(jìn)序列)進(jìn)行重組創(chuàng) 造新基因;在DNA片段組裝過程中也可能引入點(diǎn)突變,對(duì)從單一序列指導(dǎo)進(jìn)
4、化 蛋白質(zhì)有效;產(chǎn)生的多樣性文庫(kù),可以有效積累有益突變,排除有害突變和中性 突變,同時(shí)也可實(shí)現(xiàn)目的蛋白多種特性的共進(jìn)化。.底物工程底物工程主要研究的問題有:一個(gè)目標(biāo)產(chǎn)品可以從不同的起始原料(底物)出發(fā),這就涉及到合成路線的設(shè)計(jì)和選擇問題:不僅要考慮原料的來(lái)源、價(jià)格、反應(yīng)的 難易程度和收率高低,而且要考慮到生物催化步驟與其前/后化學(xué)轉(zhuǎn)化步驟的銜接和耦合,以達(dá)到整體最優(yōu),有利于工業(yè)化應(yīng)用。對(duì)于雙底物或多底物的酶反應(yīng)而言, 在主要底物確定的情況下,輔助底物的選擇 和優(yōu)化也很重要,這不僅因?yàn)樗姆肿咏Y(jié)構(gòu)和反應(yīng)活性將關(guān)系到反應(yīng)的平衡位置 和速率快慢,而且因?yàn)橐恍┹o底物(Co-substrates或其相應(yīng)
5、的第二產(chǎn)物可能會(huì)對(duì) 酶產(chǎn)生抑制甚至使酶失活。有時(shí)還可以通過基團(tuán)保護(hù)/脫保護(hù)的方法來(lái)提高生物催化的選擇性。三、簡(jiǎn)答題.常規(guī)PCR和熒光定量PCR的異同及應(yīng)用異同:常規(guī)PCR是利用DNA半保留復(fù)制的原則,體外酶促合成特異 DNA片斷,其特異 性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核甘酸引物。 主要由高溫變性、低溫退火和適溫 延伸三個(gè)步驟反復(fù)的熱循環(huán)構(gòu)成,通過檢測(cè)插入dna中核酸染料的量來(lái)測(cè)定pcr最終產(chǎn)物量。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR(Real time fluorescence quantitative PCRRT-qPCRE一種實(shí)時(shí)監(jiān) 控DNA擴(kuò)增反應(yīng)的技術(shù)。在PCR5應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累
6、進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR過程,并將DNA的累積速率繪制成動(dòng)態(tài)變化圖,在擴(kuò)增 的指數(shù)期對(duì)起始模板進(jìn)行定量,從而消除了在測(cè)定終端產(chǎn)物豐度時(shí)有較大變異系 數(shù)的問題。常規(guī)PCR的應(yīng)用:1,科研領(lǐng)域:基因克隆;不對(duì)稱 PCR0備單鏈DNA用于DNA測(cè)序;突變分析.醫(yī)學(xué)應(yīng)用:檢測(cè)細(xì)菌、病毒類疾??;診斷遺傳疾??;診斷月中瘤;應(yīng)用于法醫(yī)物 證學(xué),犯罪現(xiàn)場(chǎng)標(biāo)本分析。.用于人類基因組工程,遺傳圖譜的構(gòu)建,DNA測(cè)序,表達(dá)圖譜.其他應(yīng)用:反向PCRM定未知DNA區(qū)域;反轉(zhuǎn)錄PCR( RT-PCR用于檢測(cè)細(xì)胞 中基因表達(dá)水平、RNA病毒量以及直接克隆特定基因的 cDNA;熒光定量PCRffl 于對(duì)PCR產(chǎn)物實(shí)時(shí)監(jiān)控;c
7、DNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)實(shí)時(shí)熒光定量PCR勺應(yīng)用(一)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域RT- qPCR技術(shù)目前應(yīng)用最為廣泛的是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,主要如下: 在臨床定量中的應(yīng)用有:病原微生物含量與病情的輕重程度、傳染性及治療效果之間的關(guān)系 新的治療與預(yù)后指標(biāo)的研究病原微生物含量與用藥之間的關(guān)系新的病原體分子診斷標(biāo)準(zhǔn)超早期感染治療用藥物及療法的研究與開發(fā)在傳染病流行病學(xué)方面的應(yīng)用:醫(yī)院血站防疫站傳染病的發(fā)病監(jiān)控、預(yù)測(cè)與預(yù)防m(xù)RNA的表達(dá)水平與是否月中瘤及其進(jìn)展的關(guān)系 月中瘤相關(guān)基因表、月中瘤標(biāo)志物和月中瘤耐藥基因的檢測(cè) mRNA的表達(dá)水平與染病及病情之間的關(guān)系:預(yù)測(cè)、診斷、評(píng)價(jià)、指導(dǎo)治 療臨床定性檢測(cè)(SNP)勺應(yīng)用:.等位基因與
8、遺傳病之間的關(guān)系.診斷及預(yù)測(cè)致病風(fēng)險(xiǎn). SNP與體質(zhì)遺傳病之間的關(guān)系.藥物基因組學(xué)及新藥的發(fā)現(xiàn).合理用藥研究遺傳病診斷:如地中海貧血等位基因檢測(cè)多基因遺傳病的突變檢測(cè)基因表達(dá)異常所致遺傳病檢測(cè)胚胎植入前遺傳診斷(preimplantation genetic diagnosis, PGQ)是用人類 輔助生殖技術(shù)獲得受精卵,體外培養(yǎng)發(fā)育到610細(xì)胞的卵裂球時(shí),通過顯微操 作技術(shù)從中活檢12個(gè)單細(xì)胞,利用醫(yī)學(xué)分子遺傳學(xué)診斷技術(shù)對(duì)單個(gè)卵裂球細(xì) 胞標(biāo)本進(jìn)行遺傳診斷,然后將它們移植回母體子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育至妊娠,從而避免遺傳病患兒出生。遺傳病基因攜帶夫婦如不想用產(chǎn)前診斷、人工流產(chǎn)來(lái)避免高危 受累患兒的出生,
9、PGD目前是他們的唯一選擇。與以前采用的巢式PCR相比,F(xiàn)QPCFM少了等位基因缺失(allele drop-out, ADO)現(xiàn)象的發(fā)生。其他臨床應(yīng)用:HBV基因突變,尤其是前核基比較染病組織與正常組織中各種 mRNA含量差異 病毒性疾病中病毒的耐藥性變異株的測(cè)定因突變,直接影響HBV感染病情轉(zhuǎn)歸及抗毒治療效果,同時(shí)也反映了來(lái)自體內(nèi) 或外界選擇壓力的作用。因此,突變株在體內(nèi)產(chǎn)生的確切原因, 突變株與野生株 混合存在的發(fā)展趨向,突變株是否為耐藥株,突變株與野生株相對(duì)含量的變化與 致病性的關(guān)系,突變株與免疫耐受的關(guān)系等均是有必要進(jìn)一步澄清的問題。新臨床診斷及檢驗(yàn)試劑的開發(fā)研究ELISAT法的漏檢
10、率HLA分型:取代傳統(tǒng)電泳方法(二)植物中的應(yīng)用RT qPCR技術(shù)是一種很好的檢測(cè)基因表達(dá)的方法,通過RT- qPCR可以分析植物在不同處理?xiàng)l件下基因樣本的表達(dá)差異, 也可以分析植物在不同生長(zhǎng)發(fā)育 時(shí)期基因表達(dá)的差異。該項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用對(duì)植物病理學(xué)研究、植物檢疫和植物遺傳 育種研究起到了推進(jìn)作用。(三)轉(zhuǎn)基因研究中的應(yīng)用轉(zhuǎn)基因研究方面的部分應(yīng)用:轉(zhuǎn)基因的基因拷貝數(shù)與受體生物性狀之間的關(guān)系;轉(zhuǎn)基因的基因表達(dá)量與受體生物性狀之間的關(guān)系;轉(zhuǎn)基因胚胎中轉(zhuǎn)基因拷貝數(shù)的測(cè)定;轉(zhuǎn)基因?qū)κ荏w生物其他基因表達(dá)的影響(包括不同的發(fā)育時(shí)期的影響);轉(zhuǎn)基因生物安全方面的部分研究:轉(zhuǎn)基因在環(huán)境中的擴(kuò)散監(jiān)測(cè);轉(zhuǎn)基因生物世代傳
11、遞中的拷貝數(shù)、表達(dá)量變化監(jiān)測(cè)食品、煙草、化妝品等中轉(zhuǎn)基因成份含量的測(cè)定(GMO)轉(zhuǎn)基因成分含量與毒理代謝之間的關(guān)系(四)科學(xué)研究此外,RT- qPCR技術(shù)在其他分子生物學(xué)相關(guān)定量研究領(lǐng)域的應(yīng)用也取得了 較大進(jìn)展,如:在基因表達(dá)分析(disease state progression1)、動(dòng)植物基因工程、 物種分類和鑒定中的應(yīng)用及昆蟲檢疫、基因型分型( Genotyping)、環(huán)境污染與 毒理監(jiān)測(cè)、基因芯片結(jié)果的復(fù)證、分子生態(tài)學(xué)研究等。(五)其他方面運(yùn)用于公安系統(tǒng)相關(guān):個(gè)人身份鑒定、物證的各種鑒定、人種的鑒定或考古方面2.提取細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)時(shí)需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行破碎,請(qǐng)問細(xì)胞破碎的常用方法有哪些及其原理
12、。答:常用的細(xì)胞破碎方法有:機(jī)械破碎法:組織搗碎、珠磨法、高壓勻漿法、擠壓法、超聲破碎法、X-press 法等;非機(jī)械破碎法:酶溶法、化學(xué)滲透法、滲透壓法、凍結(jié)融化法、干燥法、急熱驟冷法等。以下是這12種破碎方法的原理和適用范圍介紹:1組織搗碎,其原理是利用機(jī)械運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生剪切力的作用被細(xì)胞,利用高速 (1000020000r/min )旋轉(zhuǎn)的葉片所產(chǎn)生的剪切力將組織細(xì)胞破碎。適用范圍: 動(dòng)植物組織。2珠磨法,原理是:進(jìn)入珠磨機(jī)的細(xì)胞懸浮液與極細(xì)的玻璃小珠、石英砂、 氧化鋁等研磨劑(直徑小于1mm 一起快速攪拌或研磨,研磨劑、珠子與細(xì)胞之 間相互剪切、碰撞,使細(xì)胞破碎,釋放出內(nèi)含物。適用范圍:微生
13、物(細(xì)菌)與 植物細(xì)胞。3高壓勻漿法,工作原理:利用高壓使細(xì)胞懸浮液通過針性閥, 由于突然減 壓和高速?zèng)_擊撞擊環(huán)使細(xì)胞破裂; 特點(diǎn):破碎程度較高,而其機(jī)械剪切力對(duì)生物 大分子的破壞較少,處理量大;適用范圍:適用于酵母和多數(shù)細(xì)菌;不宜用于團(tuán) 狀、絲狀真菌、較小的格蘭仕陽(yáng)性菌和工程菌的破碎。4擠壓法,工作原理:微生物細(xì)胞在高壓下通過一個(gè)狹窄的孔道高速?zèng)_出, 因突然減壓而引起一種空穴效應(yīng),使細(xì)胞破碎;適用范圍:革蘭氏陰性細(xì)菌5超聲破碎法,工作原理:聲頻高于 15-20kHz的超聲波在高強(qiáng)度聲能輸入 下可以進(jìn)行細(xì)胞破碎,可能與空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪切力有關(guān), 空化現(xiàn)象是 在強(qiáng)聲波作用下,氣泡形成、脹
14、大和破碎的現(xiàn)象;特點(diǎn):多采用短時(shí)多次處理樣品,且由于過程產(chǎn)熱較多,常在冰浴中進(jìn)行超聲;處理少量樣品,操作簡(jiǎn)便,液 量損失少;適用范圍:微生物細(xì)胞;桿菌比球菌易破碎,G-細(xì)菌比G+M菌易破碎,對(duì)酵母菌的效果較差。6 X-press法,將濃縮的菌體懸浮液冷卻至-25C形成冰晶體,利用500MPa 以上的高壓沖擊,使冷凍細(xì)胞從高壓閥小孔中擠出。細(xì)胞破碎是由于冰晶體的磨 損,使包埋在冰中的微生物變形而引起的。適用范圍:此法主要用于實(shí)驗(yàn)室,適 應(yīng)范圍廣、破碎率高、細(xì)胞碎片粉碎程度低及活性保留率高等優(yōu)點(diǎn),但不適應(yīng)于對(duì)冷凍敏感的生化物質(zhì)。7酶溶法,又分為外加酶和自溶兩種,外加酶原理:用生物酶將細(xì)胞壁核細(xì)胞膜
15、消化溶解;特點(diǎn):具有選擇性釋放產(chǎn)物、核酸泄露少、細(xì)胞外形完整,但價(jià) 格較高、通用性差。自溶法。原理:控制一定條件,誘發(fā)微生物細(xì)胞產(chǎn)生過剩的 溶胞酶或激發(fā)溶胞酶活力,使細(xì)胞自溶;特點(diǎn):對(duì)不穩(wěn)定的微生物,易引起所需 蛋白質(zhì)的變性。適用范圍:細(xì)菌、酵母細(xì)胞、霉菌、植物材料。,細(xì)菌:加溶菌酶(結(jié)合反復(fù)凍融或加EDTA)酵母:采用B葡聚糖薛霉菌:添加幾丁質(zhì)酶植物材料:加纖維素酶、半纖維素酶和果8化學(xué)滲透法,原理:某些有機(jī)溶劑、表面活性劑、抗生素等化學(xué)藥品都可以改變細(xì)胞壁或膜的通透性,使內(nèi)含物有選擇的滲透出來(lái);特點(diǎn):對(duì)產(chǎn)物釋放有定的選擇性,細(xì)胞外形保持完整,漿液黏度低,但反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng),效率低,有毒。適用范圍
16、:取決于化學(xué)試劑的類型以及細(xì)胞壁膜的結(jié)構(gòu)與組成。9滲透壓法:將細(xì)胞放在高滲透壓的介質(zhì)中(如一定濃度的甘油或蔗糖溶液)達(dá)平衡后,轉(zhuǎn)入到滲透壓低的緩沖液或純水中, 由于滲透壓的突然變化,水迅速 進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),引起細(xì)胞溶脹,甚至破裂。適用范圍:僅適用于細(xì)胞壁較脆弱的細(xì)胞或細(xì)胞壁預(yù)先用酶處理或在培養(yǎng)過程中加入某些抑制劑(如抗生素等),使細(xì)胞壁有缺陷,強(qiáng)度減弱。如:動(dòng)物細(xì)胞和格蘭仕陰性菌。10反復(fù)凍結(jié)-融法,原理:將材料深冷(-15C-20C),形成水晶,破壞 胞膜疏水鍵,增加親水性,反復(fù)可破細(xì)胞;適用:動(dòng)物材料、大腸桿菌和細(xì)胞壁 較薄的細(xì)胞。11干燥法,原理:細(xì)胞壁膜的結(jié)合水喪失,改變細(xì)胞滲透性。又分為
17、熱空 氣干燥(適用酵母)、真空干燥(適用細(xì)菌)、冷凍干燥(制備不穩(wěn)定的酶)。12急熱驟冷法,原理:將材料投入沸水,維持 8590c數(shù)分鐘,冰浴中急 速冷卻,使胞壁結(jié)構(gòu)破壞;適用范圍:細(xì)菌及病毒等中對(duì)熱不太敏感的物質(zhì)提取。3.DNA和蛋白質(zhì)檢測(cè)的方法分別是核酸電泳和蛋白質(zhì)電泳,請(qǐng)問上述兩種電泳技術(shù)的原理及優(yōu)缺點(diǎn)。核酸電泳:一般使用的是瓊脂糖凝膠電泳。利用待分離樣品中各種分子帶電 性質(zhì)的差異及分子本身大小、形狀的不同產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。因不分疏皎根和狡息,幾乎消 除了肆脂的電滲對(duì)蛋白質(zhì)吸附機(jī)微,枚無(wú)槍電 現(xiàn)L,凝膠睛構(gòu)均勻,孔窕校大,可 用來(lái)分離感的復(fù)合物、接酸、 病
18、市等大分子物質(zhì).透明度轅好.可直拄或干燥成 薄膜坨進(jìn)行染色n不吸收紫外光,可直接利用紫 外光呱收汰作定至測(cè)定有熱可逆性機(jī)械強(qiáng)度是,務(wù)破碎,濃度 不能太低易被細(xì)鶯污染,不坊保存, 臨用的配制:,茸膈據(jù)支持層上的區(qū)帶為J 如收,電泳后必須立即囪定 術(shù)巴.與PAGE相比,分子篩作用小, S帶少蛋白質(zhì)電泳:一般使用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS。根據(jù)需要被 分離的蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的大小,利用具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠的分子篩作用, 來(lái) 進(jìn)行分離。優(yōu)點(diǎn):靈敏度高,特異性好;可以同時(shí)走多張膠,且可以是較厚的凝膠,有 利于提高上樣量,電泳后可有足夠的蛋白量進(jìn)行進(jìn)一步分析;PAGE膠可直接拍照,也可干膠保存;缺點(diǎn):
19、操作比較繁瑣,包括制膠、點(diǎn)樣、電泳、染色和掃描等步驟 ;電 極緩沖液需經(jīng)常更換,多次使用會(huì)影響電泳結(jié)果和電泳速度, 且需要大量的緩沖 液;電泳時(shí)間長(zhǎng)凝膠聚合易受各種因素影響,如溫度和p H等,且單體聚丙烯酰胺及雙丙烯酰胺對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)和皮膚有毒性作用,必需試劑TEMED( N, N,N , N-tetramethylethylenediamine)對(duì)粘膜、上呼吸道組織及皮膚有一定的破壞作用:由于電壓和人工操作的不穩(wěn)定性,聚丙烯酰胺凝膠電泳的結(jié)果經(jīng)常 會(huì)出現(xiàn)邊緣效應(yīng)或者條帶擴(kuò)散和拖尾現(xiàn)象, 不僅影響了圖片的美觀,而且對(duì)目的 條帶大小的指示會(huì)出現(xiàn)偏差,影響研究結(jié)果。不少學(xué)者稱PAGE在電泳中存在 “漂
20、移”現(xiàn)象,即相鄰條帶的片段可能會(huì)互相影響,原因在于PAGE的高敏感性, 對(duì)漂移過來(lái)的少許核酸都可以顯影,從而可能致使基因型誤判。PAGE膠容易破裂,雖然不影響讀取結(jié)果,但照像的美觀性較差 ;PAGE交可直接拍照,但 容易有水??;也可干膠保存,但易影響清晰度需要特殊的上樣槍頭, 所需成本 較大。4.測(cè)序技術(shù)的發(fā)展經(jīng)歷了一代、二代、三代測(cè)序,請(qǐng)簡(jiǎn)要說(shuō) 明它們的測(cè)序原理及優(yōu)缺點(diǎn)。(一)第一代測(cè)序:1977年Sange曲發(fā)明的雙脫氧核甘酸末端終止法。其基本原理是,由于ddNTP的2和3都不含羥基,在DN*成反應(yīng)中不能 形成磷酸二酯鍵,因此可以被用來(lái)中斷DN*成反應(yīng)。在4個(gè)DN*成反應(yīng)體系 中分別加入一
21、定比例的帶有放射性同位素標(biāo)記的某種 ddNTP通過凝膠電泳和放 射自顯影后,可以根據(jù)電泳帶的位置確定待測(cè)分子的 DNAff列。優(yōu)點(diǎn):缺點(diǎn):(二)第二代測(cè)序技術(shù)-主要包含三種美國(guó)Roche Applied Science公司的454基因組測(cè)序技術(shù):利用了焦磷酸 測(cè)序原理,主要包含待測(cè)DNAt庫(kù)的構(gòu)建、Emulsion PCR焦磷酸測(cè)序幾個(gè)步驟。 將基因組 DNA 打碎成3 0 0 - 8 0 0 個(gè)堿基的片段后,在兩端加上 錨定接頭,進(jìn)行乳液PCR擴(kuò)增。將磁珠轉(zhuǎn)移到PTP板上,每個(gè)P T P板上的小孔只能容下1個(gè)磁珠。 分別裝 有T、A、C、G 4種 堿基的 試劑瓶,依次進(jìn)入 PTP板,每次只進(jìn)
22、1個(gè)堿基,如果發(fā)生配對(duì),就會(huì)釋放 1個(gè)焦磷酸,釋放出的熒光信號(hào)會(huì)被 CCD捕獲到。每個(gè)堿基反應(yīng)都會(huì)捕獲到 1個(gè)熒光信號(hào),由此一一對(duì)應(yīng),模板的堿基序列 由此獲得。優(yōu)點(diǎn):由于PTP板上每個(gè)小孔之間相互獨(dú)立,因而大大降低了反應(yīng)的干擾和 誤差,準(zhǔn)確率在99犯上;讀長(zhǎng)超長(zhǎng),測(cè)序通量提升;應(yīng)用廣泛。缺點(diǎn):受同聚物限制,也就是如AAA或GGG目同堿基的連續(xù)摻入,會(huì)出現(xiàn)核 甘酸插入或缺失的錯(cuò)誤。Solexa測(cè)序技術(shù)由英國(guó)Solexa technology公司發(fā)明,2007年被Illumina 公司收購(gòu)。基本原理是邊合成邊測(cè)序。在 Sanger等測(cè)序方法的基礎(chǔ)上,通過技 術(shù)創(chuàng)新,用不同顏色的熒光標(biāo)記四種不同的
23、dNTP當(dāng)DNAIK合酶合成互補(bǔ)鏈時(shí), 每添加一種dNTP就會(huì)釋放出不同的熒光,根據(jù)捕捉的熒光信號(hào)并經(jīng)過特定的計(jì) 算機(jī)軟件處理,從而獲得待測(cè) DNA勺序列信息。優(yōu)點(diǎn):目前性價(jià)比最高、應(yīng)用最廣泛的測(cè)序技術(shù);解決了同聚物長(zhǎng)度的準(zhǔn) 確測(cè)量問題,錯(cuò)誤率僅在1-1.5 %;耗時(shí)較454技術(shù)短。缺點(diǎn):相比454技術(shù),其后續(xù)的序列拼接工作的計(jì)算量和難度均大大增加; 存在核甘酸替換帶來(lái)的錯(cuò)誤。美國(guó)Applied Biosystems (ABI)公司的SOLiD技術(shù)基于連接酶測(cè)序法, 取代傳統(tǒng)的聚合酶連接反應(yīng)。將 3端修飾的磁珠沉積于上樣玻片(slide ), 進(jìn)行連接酶測(cè)序。連接反應(yīng)的底物是有 3 -XXnn
24、nzzz-5結(jié)構(gòu)的八聚核甘酸熒 光探針混合物。連接反應(yīng)中,這些探針按照堿基互補(bǔ)規(guī)則與單鏈DNA模板鏈配對(duì)。這樣經(jīng)過5輪測(cè)序反應(yīng)后便可以得到所有的堿基序列。10優(yōu)點(diǎn):擁有第二代測(cè)序反應(yīng)中最高的通量;每個(gè)循環(huán)耗時(shí)約為6-7天,較Solexa測(cè)序技術(shù)耗時(shí)短;準(zhǔn)確率能達(dá)到 99.94 %以上缺點(diǎn):同Solexa測(cè)序技術(shù)一樣,其后續(xù)的序列拼接工作的計(jì)算量和難度均 大大增加??偟膩?lái)說(shuō),第二代技術(shù)優(yōu)點(diǎn)如下:與第一代技術(shù)相比,第二代測(cè)序技術(shù)不僅保持了高準(zhǔn)確度, 而且極大地提高 了測(cè)序速度;DNAM序費(fèi)用大大降低;二代DNHM序技術(shù)有助于人們以更低廉的 價(jià)格,更全面、更深入地分析基因組、轉(zhuǎn)錄組及蛋白質(zhì)之間交互作
25、用組的各項(xiàng)數(shù) 據(jù)缺點(diǎn)在于:由于第二代測(cè)序技術(shù)產(chǎn)生的測(cè)序結(jié)果長(zhǎng)度較短,因此比較適合于對(duì)已知序列的基因組進(jìn)行重新測(cè)序,而在對(duì)全新的基因組進(jìn)行測(cè)序時(shí)還需要結(jié)合 第一代測(cè)序技術(shù)。(三)第三代測(cè)序技術(shù)-高通量、單分子測(cè)序第三代測(cè)序技術(shù)指的是:近期出現(xiàn)的 Helicos公司的Heliscope單分子測(cè)序儀、 PacificBiosciences 公司的 SMRTJ術(shù)和 Oxford Nanopore Technologies 公司 正在研究的納米孔單分子技術(shù)。HelicoBioScience 單分子測(cè)序技術(shù)。該測(cè)序是基于邊合成邊測(cè)序的思想, 將待測(cè)序列隨機(jī)打斷成小分子片段并用末端轉(zhuǎn)移酶在 3末端加上pol
26、y(A),以 及在poly(A)的末端進(jìn)行熒光標(biāo)記和阻斷,把這些小片段與帶有poly(T)的平板雜交成像來(lái)獲得已經(jīng)雜交模板所處的位置,建立邊合成邊測(cè)序的位點(diǎn)加入聚合酶和被Cy3熒光標(biāo)記脫氧核甘酸進(jìn)行 DNA合成,每次只加入一種脫氧核甘酸, 然后將未參與合成的dNT可口 DNAIK合酶洗脫,直接對(duì)Cy3成像,觀測(cè)模板位點(diǎn) 上是否有熒光信號(hào),然后化學(xué)裂解核甘酸上的燃料并釋放加入下一種脫氧核甘酸和聚合酶的混合物,進(jìn)行下一輪反應(yīng)。優(yōu)點(diǎn):樣本通量非常高,2個(gè)流動(dòng)槽可同時(shí)運(yùn)行,每個(gè)流動(dòng)槽有25個(gè)獨(dú)立 通道,每個(gè)通道又可以運(yùn)行最多96個(gè)標(biāo)記分子條形碼的樣本,這樣每次運(yùn)行的 樣本數(shù)可高達(dá)4 800個(gè);缺點(diǎn):測(cè)
27、序的平均讀長(zhǎng)相對(duì)較短,只有30- 35 bp,準(zhǔn)確率較低,約為0 97% 其主要錯(cuò)誤來(lái)源為堿基缺失;受同聚物影響,需進(jìn)行二次測(cè)序來(lái)實(shí)現(xiàn)最低錯(cuò)誤率。11Pacfic BioscienceSMRTT 的SMR敢術(shù)技術(shù)。該測(cè)序也是基于邊合成邊 測(cè)序的原理,這項(xiàng)技于使用了 Zero-ModeWaveguide(ZMW)答級(jí)波導(dǎo))。測(cè)序的過 程:被熒光標(biāo)記磷酸集團(tuán)的核甘酸在聚合酶活性位點(diǎn)上與模板鏈結(jié)合(每種脫氧核甘酸被不用顏色的染料標(biāo)記),被激發(fā)出熒光,在熒光脈沖結(jié)束后,被標(biāo)記的 磷酸集團(tuán)被切割并釋放,聚合酶轉(zhuǎn)移到下一個(gè)位置,下一個(gè)脫氧核甘酸連接到位 點(diǎn)上開始釋放熒光脈沖,進(jìn)行下一個(gè)循環(huán)。優(yōu)點(diǎn):SMRT
28、J術(shù)的測(cè)序速度很快,利用這種技術(shù)測(cè)序速度可以達(dá)到每秒10個(gè)dNTP對(duì)于聚合酶的聚合速度和持續(xù)合成能力達(dá)到一個(gè)較好的平衡,所以讀 長(zhǎng)較長(zhǎng),這一點(diǎn)在很大程度上優(yōu)于二代測(cè)序,在序列拼接、定位以及需要跨越重復(fù)區(qū)域的應(yīng)用中有著極大優(yōu)勢(shì);缺點(diǎn):會(huì)出現(xiàn)插入和缺失錯(cuò)誤。缺失錯(cuò)誤源于有時(shí)候堿基摻入速度過快,超 過了相機(jī)的拍攝幀數(shù);插入錯(cuò)誤源于有時(shí)候酶隨機(jī)的選擇一些堿基,但并未真的 將這些堿基摻入合成鏈中。但這些錯(cuò)誤是隨機(jī)的,并不會(huì)隨著讀長(zhǎng)的增加而提高, 隨著測(cè)序覆蓋深度的增加會(huì)逐漸被消除。Oxford Nanopore Technologies的納米孔單分子測(cè)序技術(shù)。大多數(shù)納米孔測(cè)序技術(shù)的基本原理是當(dāng)DN6子或
29、者它的組成堿基從一個(gè)孔洞經(jīng)過時(shí)而檢 測(cè)到被影響的電流或光信號(hào)。納米孔單分子技術(shù)是以a-溶血素來(lái)構(gòu)建生物納米 孔,核酸外切酶依附在孔一側(cè)的外表面,一種合成的環(huán)糊精做為傳感器共價(jià)結(jié)合 到納米孔的內(nèi)表面。這個(gè)系統(tǒng)被鑲嵌在一個(gè)脂雙分子層內(nèi),為了提供既符合堿基 區(qū)分檢測(cè)又滿足外切酶活性的物理?xiàng)l件,脂雙分子層兩側(cè)為不同的鹽濃度在適合的電壓下,核酸外切酶消化單鏈DNA單個(gè)堿基落入孔中,并與孔內(nèi)的環(huán)糊精 短暫的相互作用,影響了流過納米孔原本的電流,腺喋吟與胸腺喀呢的電信號(hào)大 小很相近,但胸腺喀呢在環(huán)糊精停留是時(shí)間是其他核甘酸的2-3倍,所以每個(gè)堿基都因其產(chǎn)生電流干擾振幅是特有的而被區(qū)分開來(lái)。優(yōu)點(diǎn):準(zhǔn)確率能達(dá)到
30、99.8%;對(duì)于在基因組水平研究表觀遺傳相關(guān)現(xiàn)象提供 了巨大的幫助;可以很容易地解決同聚物長(zhǎng)度的測(cè)量問題; 而且一旦發(fā)現(xiàn)替換錯(cuò) 誤也能較容易地更改;儀器構(gòu)造簡(jiǎn)單使用成本低廉;能直接對(duì)RNA分子進(jìn)行測(cè)序12缺點(diǎn):該技術(shù)尚處于研發(fā)階段,目前面臨著尋找合適的外切酶載體以及承載 納米孔平臺(tái)材料的問題;采用的是水解測(cè)序法,不能進(jìn)行重復(fù)測(cè)序;切斷的核昔 酸可能被讀錯(cuò)方向;難于生產(chǎn)出帶多重平行孔的裝置。四、論述題:大型生物分析儀器在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用及重要性目前,大型生物分析儀器的應(yīng)用越來(lái)越廣泛,并在其中發(fā)揮了特殊作用,在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用按照以下四個(gè)層次分類有:細(xì)胞水平研究:掃描電子顯微鏡、透射電子顯
31、微鏡、激光掃描共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞分選儀核酸水平研究:掃描隧道顯微鏡、全自動(dòng)DNA測(cè)序儀、基因芯片系統(tǒng)、 實(shí)時(shí)定量 PCR儀、基因槍、電擊轉(zhuǎn)化儀、蛋白質(zhì)水平研究:雙向電泳系統(tǒng)、生物質(zhì)譜儀、氨基酸測(cè)序儀、圓二色譜儀、核磁共振儀、 多晶X射線衍射儀 、正電子發(fā)射斷層掃描儀、 紫外/可見分光光度計(jì)、傅立葉變換紅外光譜儀、激光光散射儀分子、原子及微觀研究:液相色譜儀、氣相色譜儀、原子吸收光譜儀、 等離子體發(fā)射光譜儀、元素分析儀、高溫?zé)嶂?差熱同步分析儀、比表面積和孔徑測(cè)定儀除上述儀器外,另外一些大型儀器對(duì)生物科學(xué)的研究也必不可少,如超速離心機(jī)、超速冷凍離心機(jī)、發(fā)酵罐等以上大型分析儀器在生命科學(xué)領(lǐng)域的
32、主要應(yīng)用簡(jiǎn)介如下:.掃描電子顯微鏡:可對(duì)生物樣品的形態(tài)進(jìn)行分析,判定組織或細(xì)胞的來(lái)源。.透射電子顯微鏡:可觀察組織細(xì)胞、生物大分子、病毒、細(xì)菌等結(jié)構(gòu),能夠 觀察到各類病的病理結(jié)構(gòu)也可以鑒別一些月中瘤疾病。.激光掃描共聚焦顯微鏡:是近代最先進(jìn)的細(xì)胞生物醫(yī)學(xué)分析儀器之一。不僅 可觀察固定的細(xì)胞、組織切片,還可對(duì)活細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、分子、離子進(jìn)行實(shí)時(shí) 動(dòng)態(tài)地觀察和檢測(cè)。目前,已用于細(xì)胞形態(tài)定位、立體結(jié)構(gòu)重組、動(dòng)態(tài)變化13 過程等研究,并提供定量熒光測(cè)定、定量圖像分析等實(shí)用研究手段,結(jié)合其 他相關(guān)生物技術(shù),在形態(tài)學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)等分子細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng) 域得到廣泛應(yīng)用。.流式細(xì)胞分選儀:不僅可以對(duì)細(xì)胞、
33、微生物等進(jìn)行檢測(cè)分析,而且還可以根據(jù)顆粒特性 進(jìn)行分選,被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、腫瘤學(xué)、血液學(xué)、藥物開發(fā)、食品衛(wèi)生 防疫等生命科學(xué)研究。.掃描隧道顯微鏡:提供了在大氣下和水溶液中直接觀察 DNA結(jié)構(gòu)及其電化學(xué) 行為的實(shí)驗(yàn)技術(shù),對(duì)吸附在定向裂解石墨表面的氨基酸進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析,對(duì)膠 原蛋白、細(xì)胞骨架蛋白等進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析,對(duì)蛋白酶進(jìn)行功能分析,揭示生物 膜等生命微觀結(jié)構(gòu)及其變化。.全自動(dòng)DNA測(cè)序儀:可進(jìn)行dna測(cè)序、雜合子分析、單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析(sscp 微衛(wèi)星序列分析、長(zhǎng)片段pcr、rt-pcr(定量pcr)等分析,臨床上可除進(jìn)行常規(guī) dna測(cè)序外,還可進(jìn)行單核甘酸多態(tài)性(snp)分析、基
34、因突變檢測(cè)、hla配型、 法醫(yī)學(xué)上的親子和個(gè)體鑒定、微生物與病毒的分型與鑒定等。.基因芯片系統(tǒng):精確檢測(cè)病毒細(xì)菌、真菌等病原體,有效的干擾病毒的基因 表達(dá)過程,激發(fā)人體免疫細(xì)胞活性能力,修復(fù)受損細(xì)胞。.實(shí)時(shí)定量PCR儀:對(duì)待測(cè)樣品中的特定 DNA序列進(jìn)行定量分析。應(yīng)用于臨床疾病診斷、 動(dòng)物疾病檢測(cè)、生物相關(guān)分子生物學(xué)定量等。.基因槍:將基因轉(zhuǎn)殖于目標(biāo)細(xì)胞,組織,器官或活體,在遺傳、癌癥、 DNA疫苗、基 因工程、基因治療等方面中有應(yīng)用。.電擊轉(zhuǎn)化儀:可將質(zhì)粒 DNA導(dǎo)入到受體細(xì)胞。.雙向電泳系統(tǒng):首先基于蛋白質(zhì)固有電荷, 通過等電聚焦進(jìn)行第一向蛋白質(zhì)分離,然后根據(jù)蛋白質(zhì)質(zhì)量,在第二向中通過SD
35、S-PAG由泳進(jìn)行蛋白分離。已在神經(jīng)系統(tǒng)、細(xì)胞、 細(xì)菌、癌組織、海藻、附睪液等的蛋白質(zhì)組學(xué)分析中應(yīng)用。.生物質(zhì)譜儀:可以和液相色譜、氣相色譜、毛細(xì)管電泳等現(xiàn)代化的分離手段聯(lián)用,主要可用于生物體內(nèi)的組分序列分析、結(jié)構(gòu)分析、分子量測(cè)定和各組分含量測(cè)定。目前我校有氣相質(zhì)譜聯(lián)用儀器。14.氨基酸測(cè)序儀:用于確定蛋白質(zhì)的氨基酸序列。.圓二色譜儀:用于研究生物大分子的結(jié)構(gòu), 研究生物大分子之間的相互作用以及大分子 與小分子的相互作用,測(cè)定分子相互作用后引起的生物大分子結(jié)構(gòu)的變化,進(jìn)而進(jìn)行以生物大分子為靶點(diǎn)活性化合物的篩選或研究藥物(大分子藥物及小分子藥物)的作用機(jī)制。.核磁共振儀:在生物學(xué)中,可確定目標(biāo)蛋
36、白的動(dòng)態(tài)過程, 研究蛋白-配體間的相互作用,研究二級(jí)結(jié)構(gòu)的拓?fù)鋵W(xué)轉(zhuǎn)換及應(yīng)用于膜結(jié)構(gòu)和膜動(dòng)力學(xué)研究;在藥學(xué)中,可對(duì)天然藥物 和體內(nèi)藥物分析,可以用來(lái)進(jìn)行結(jié)構(gòu)導(dǎo)向的藥物設(shè)計(jì);在臨床診斷中:可用于腫瘤、關(guān)節(jié)損傷、情感障礙的診斷和評(píng)估。目前,我校已有超導(dǎo)核磁共振波譜儀。.多晶X射線衍射儀:用于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)測(cè)定,藥物、人造晶體、生物分子、高分 子材料的結(jié)構(gòu)分析。.正電子發(fā)射斷層掃描儀:主要應(yīng)用于蛋白質(zhì)功能分子顯像和基因表達(dá)分子顯像基因表達(dá).紫外/可見分光光度計(jì) 在酶學(xué)中,可進(jìn)行酶分析。在農(nóng)產(chǎn)品和食品分析中可用于檢測(cè)的組分或成分有蛋白質(zhì)、賴氨酸、葡萄糖、維生素C、硝酸鹽、亞硝酸鹽、碎、汞等 ;在植物生化分析
37、中可用于檢測(cè)葉綠素、全氮和酶的活力等。.傅立葉變換紅外光譜儀:應(yīng)用于蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的結(jié)構(gòu)研究,近年來(lái)也用于研究細(xì)胞和組織等更加復(fù)雜的體系,特別是腫瘤細(xì)胞或組織的分析.激光光散射儀:靜態(tài)光散射方法,測(cè)定純蛋白的均一性,分子大小和熱穩(wěn)定性也可用于血細(xì)胞計(jì)數(shù)、蛋白質(zhì)分子的締合和聚集等研究中。目前我校已有的激光散射粒度分布分析儀主要用于 固體顆粒和乳液的顆粒粒度測(cè)量分析。.液相色譜儀:能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分,被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī) 藥研究、環(huán)境分析、無(wú)機(jī)分析等各種領(lǐng)域。.氣相色譜儀 主要用于對(duì)容易轉(zhuǎn)化為氣態(tài)而不分解的液態(tài)有機(jī)化合物以及氣態(tài)樣品的分離和定量分析。應(yīng)用在微生物飲
38、料微量組分和瓜果蔬菜的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留分析中, 在臨床中也用于測(cè)定血?dú)夂头喂δ艿取?原子吸收光譜儀: 可以對(duì)固體、粉末、液體樣品進(jìn)行定量分析,其氫化物發(fā)生器可對(duì)8種揮發(fā)性元素汞、碎、鉛、硒、錫、薪、睇、錯(cuò)等進(jìn)行微痕量測(cè)定。此外,我校15還有穩(wěn)態(tài)瞬態(tài)熒光光譜、激光拉曼光譜儀、掃描型 X射線熒光 光譜儀。.等離子體發(fā)射光譜儀 廣泛應(yīng)用于化工、冶金、地質(zhì)行業(yè)中各種材料的金屬元素 和部分非金屬元素的定性及定量分析,也用于環(huán)境、動(dòng)植物、醫(yī)藥制品、食品等所含微量元 素的測(cè)定。.元素分析儀化學(xué)和藥物學(xué)產(chǎn)品;土壤、巖石、礦物和海洋河流沉積物;農(nóng)業(yè)產(chǎn)品 等的元素定量分析。.高溫?zé)嶂?差熱同步分析儀 適用于生化樣品
39、、 高分子材料、含能材料、藥物、 食品等各種固體、液體或粉末狀樣品??捎糜跍y(cè)量材料的熔點(diǎn),玻璃化溫度,結(jié)晶度,固化 度,純度,比熱,反應(yīng)動(dòng)力學(xué),熱穩(wěn)定性,相轉(zhuǎn)變溫度等參數(shù)。.比表面積和孔徑測(cè)定儀: 可用于生物炭、食品材料的吸附 /脫附等溫線測(cè)定;用 于生物材料的比表面積測(cè)定等。大型生物分析儀器在生命科學(xué)研究中的重要性.各類大型生物分析儀器的開發(fā)應(yīng)用, 是本世紀(jì)生命科學(xué)快速發(fā)展的重要因素。.大型生物分析儀器提供了質(zhì)譜分析、光譜分析、色譜分析、核磁共振、基因 芯片技術(shù)等核心技術(shù)分析,促進(jìn)了分子生物學(xué)、基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和大 然產(chǎn)物化學(xué)等領(lǐng)域的發(fā)展。.為研究生物大分子的結(jié)構(gòu)和功能提供了定位、定性、
40、定量,甚至實(shí)時(shí)的數(shù)據(jù) 和圖片,前所未有地詮釋著生命現(xiàn)象復(fù)雜的內(nèi)容和本質(zhì)。通過大型儀器采集 的數(shù)據(jù)和圖片幾乎出現(xiàn)在每一篇重要的生命科學(xué)論文之中,為生物科學(xué)的重大發(fā)現(xiàn)提供著強(qiáng)有力的實(shí)驗(yàn)證據(jù), 決定性地引導(dǎo)著相關(guān)研究領(lǐng)域的發(fā)展方向。.生物分析儀器是科學(xué)儀器的重要組成部分,它所測(cè)量或所獲取的主要是物質(zhì) 的質(zhì)和量的信息。以一切可能的方法和技術(shù),利用一切可以利用的物質(zhì)屬性, 對(duì)一切需要加以表征、鑒別或測(cè)定的物質(zhì)組分及其形態(tài)、狀態(tài)(以及能態(tài))、結(jié)構(gòu)、分布等進(jìn)行表征、鑒別和測(cè)定,以求對(duì)生命樣品所代表的問題有一個(gè)基 本的了解。16.可以說(shuō),生物科學(xué)大型精密儀器的快速發(fā)展奠定了生物科學(xué)在21世紀(jì)成為帶頭科學(xué)的地位
41、,使生物科學(xué)在自然科學(xué)體系中的位置發(fā)生了革命性的變化原子吸收光譜儀:檢測(cè)過程中,基態(tài)原子吸收特征輻射,通過測(cè)定基態(tài)原子對(duì)特征輻射的吸收程度,從而測(cè)量待測(cè)元素含量。可以對(duì)固體、粉末、液體樣品進(jìn)行定量分析,涉及材料、生物、醫(yī)藥、衛(wèi)生、食品、環(huán)境等領(lǐng)域。原子吸收光譜儀可測(cè)定多種元素,火焰原子吸收光譜法可測(cè)到10-9g/mL數(shù)量級(jí),石墨爐原子吸收法可測(cè)到 10-13g/mL數(shù)量級(jí)。其氫化物 發(fā)生器可對(duì)8種揮發(fā)性元素汞、碎、鉛、硒、錫、薪、睇、錯(cuò)等進(jìn)行微痕量測(cè)定。紫外/可見分光光度計(jì) 該儀器主要用于無(wú)機(jī)和有機(jī)化合物的定性和定量分析。可進(jìn)行 分光、微分光譜測(cè)定。也可進(jìn)行酶分析、表面分析和有機(jī)紫外光譜和近紅
42、外光譜的測(cè)定。具有定 時(shí)測(cè)定功能,以獲取動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)。在農(nóng)產(chǎn)品和食品分析中可用于檢測(cè)的組分或成分有蛋白質(zhì)、賴氨酸、葡萄糖、維生素C、硝酸鹽、亞硝酸鹽、碎、汞等;在植物生化分析中可用于檢測(cè)葉名素、全氮和酶的活力等;高溫?zé)嶂?差熱同步分析儀高溫?zé)嶂?差熱同步分析儀可以用于科學(xué)研究、產(chǎn)品開發(fā)、質(zhì)量控制等多個(gè)領(lǐng)域。 適用于生化樣品、高分子材料、無(wú)機(jī)材料、礦物、含能材料、藥物、食品等各種固體、液體或粉末狀樣品。可用于測(cè)量材料的熔點(diǎn),玻璃化溫度,結(jié)晶度,固化度,純度,比熱,反應(yīng)動(dòng)力學(xué),熱穩(wěn)定性,相轉(zhuǎn)變溫度等參數(shù)。多晶X射線衍射儀 廣泛應(yīng)用于化學(xué)、物理學(xué)、藥物學(xué)、冶金學(xué)、高分子材料、生命科學(xué)及材料科學(xué)。可以分析黏土礦物、合金、陶瓷、食品、藥物、生物材料、建筑材料、半導(dǎo)體材 料、超導(dǎo)材料、納米材料、超晶格材料和磁性材料的物相鑒定。
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