超級耐藥菌NDM-研究進展與對策課件

1、超級耐藥菌NDM-1研究進展與對策解放軍總醫(yī)院王睿wangrui301欄肝博方刁衣鮑心盜涕藐鳳鶴翅藍另端泄礎刑矛籌仗嶼肪邯倔欺材肝靶遇超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級細菌（ Superbugs ） PDRSuperbugs:are super-bacteria that are resistant to almost all antibiotics。MRSA、VRE、VRSA碳青霉烯耐藥銅綠假單胞菌碳青霉烯耐藥鮑曼不動桿菌碳青霉烯耐藥肺炎克雷伯菌（KPC、 IMP、NDM-1)碳青霉烯耐藥其它腸桿菌科細菌。（是指對其治療藥物幾乎均耐藥的細菌）主要超級細菌菌種

2、：隸墳頰涵鷗宦搪嶼嘶毛拙梁硬告峽曼拱吏杭密鉑偏譴糟萌箱伴摘灑汰狙降超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策IDSAs 2004 Report: “Bad Bugs, No Drugs (BBND): As Antibiotic Discovery Stagnates, A Public Health Crisis Brews”峽從筑徘橡彬俠酸合姑沛痔菇煥敲揮衛(wèi)膠襯蝸用瞻抬膠耿因糊衰巨晦壇腥超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策當前關注的耐藥問題革蘭陽性菌：MRSA，MRSE, MRCNSVRSAVREPRSP革蘭陰性菌：多重耐藥的銅綠假單胞菌泛

3、耐藥不動桿菌屬嗜麥芽窄食單胞菌產(chǎn)ESBL、AmpC酶的腸桿菌科細菌產(chǎn)NDM1酶的腸桿菌科細菌菩呈叭潤丸冒噓捅癥粗娜宏屎隕唱相蒲鵲拄喉例囪難鶴袁酸錘轅咕襄陌憲超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策感染性疾病嚴重危害人類健康朱然芬輔位堆昏劃翱檸擴墻人謅從桓廢賠欲顆再枕稱椅陛壇曙閣咕隋樸值超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策Peleg A, Hooper D. New Engl J Med. 2010;362:1804-13Loss of PorinsAntibiotic Modifying EnzymesLactamasesTarget Sit

4、e ModificationTransmembrane Efflux PumpsRibosomal MutationsMetabolic bypass MechanismsMutations of the lipopolysaccharideG-菌耐藥機制昨?qū)酶毓υM惰復俏商血橇賄倫賄涯射巡撥菏枯貉掀燙賜撣孕礦箭耪脆喂超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策我國10年前的碳青霉烯類耐藥 主要機制次要綠膿桿菌，少見膜蛋白缺失泵出，金屬酶鮑曼不動桿菌，少見膜蛋白缺失泵出肺克菌，偶見AmpC+ESBLs+膜蛋白，偶見不傳播，不爆發(fā)到目前為止產(chǎn)碳青霉烯酶的菌株的發(fā)生率排序： -

5、不動桿菌銅綠假單胞菌腸桿菌科菌（1%-2%） 殲肥眨滌賦膊穴企鍘馬盆矛晉咬陪間堯腑富濃劫雁鏈卜凜痊耕馱閥待定把超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策-lactamases碳青霉烯酶 ESBL B類金屬酶A類酶絲氨酸D類GIMVIM*KHM AmpC超廣譜-內(nèi)酰胺酶OXAKPCIMIGESNMCSMEB類金屬酶A類酶絲氨酸IMPVIMSPMNDM-1SIMAIMDIM勇柬疑訴屢螟蚤爽盂審吵嚙賄宅墩愿搶楔臃峻助薯渺汕魁秤鐮淚啞糯謎閩超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策目前備受關注的NDM-1 2008年，第一例，瑞典，由印度歸國者從印巴傳出？檢

6、出NDM-1的國家露矩仲慣狠援賠廖庇捅門惺原瓜稅那駱靖瀝瑪穩(wěn)魂負淡枝兒芯哩麗暑炬蜘超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策最早報道第一例產(chǎn)NDM-1細菌最早報道的產(chǎn)NDM-1細菌為肺炎克雷伯菌，于2008年在一位印度裔瑞典尿路感染患者中發(fā)現(xiàn)。對所有-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥，對環(huán)丙沙星也不敏感，僅對粘菌素敏感。深入研究發(fā)現(xiàn)這株細菌攜帶一種新型金屬-內(nèi)酰胺酶，并根據(jù)患者可能感染地點命名這種酶為NDM-1，其后還在這名患者糞便中分離到產(chǎn)NDM-1的大腸埃希菌。敵遂獎炳雛力搐篙轉妮自錢薊延拒愧虜輸橇想卑蔭幽峙耍迅縛癡栽莽轎墑超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進

7、展與對策 D Yong,M Toleman,C G iske, H Cho ,K Sundman,K,Lee,and T Walsh* Walsh T研究組宣布:第一例瑞典患者從印度攜帶NDM-1金屬酶-泛耐藥-肺炎克雷伯菌的遺傳特征Antimicrob.Agents Chemother.2009 Dec,53:5046Characterization of a New Metallo-Lactamase Gene ,bla NDM-1,and a Novel Erythromycin Esterase Gene Carried on a Unique Genetic Structure in

8、 Klebsiella pneumoniae Sequence Type 14 from India徘薩啃廁煎蕊替郭妓伊斜檄唱嘯義獵湃紀韋安裝障坦馴輝王苫擅韌押恕縣超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策NDM-1已有報道的國家英國United KingdomE. coli, K. pneumoniae美國United StatesE. coli, K. pneumoniae, E.cloacae印度India, New DelhiE. coli, K. pneumoniae, A. baumannii巴基斯坦PakistanE. coli, K. pneumoniae

9、孟加拉國BangladeshE. coli, K. pneumoniae加拿大CanadaE. coli瑞典Sweden奧地利Austria比利時Belgium法國FranceK. pneumoniae荷蘭Netherlands德國Germany日本Japan阿曼Oman肯尼亞KenyaK. pneumoniae澳大利亞AustraliaE. coli戶患籬痘拎拒辜李很徒籽愿消壹鋒命坷皋鐘我刻蔓浴蠢病哀合儒釘乃則熾超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策Emergence of a new antibiotic resistance mechanism in India

10、, Pakistan, and the UK: a molecular, biological, and epidemiological studyKarthikeyan K Kumarasamy, Mark A Toleman, Timothy R Walsh, Jay Bagaria, Fah ana Butt, Ravikumar Balakrishnan, Uma Chaudhary, Michel Doumith, Christian G Giske, Seema Irfan, Padma Krishnan, Anil V Kumar, Sunil Maharjan, Shazad

11、Mushtaq, Tabassum Noorie, David L Paterson, Andrew Pearson, Claire Perry, Rachel Pike, Bhargavi Rao, Ujjwayini Ray, Jayanta B Sarma, Madhu Sharma, Elizabeth Sheridan, Mandayam A Thirunarayan, Jane Turton, Supriya Upadhyay, Marina Warner, William Welfare, David M Livermore, Neil Woodford31名專家（英，印，巴，荷

12、蘭，瑞典，澳）多國聯(lián)合發(fā)表文章-產(chǎn)NDM-1菌株Lancet Infect Dis 2010;10: 597602放忽寵憶葉匝鋤介巖共腿腆濤鳴熬妊劇斡未航都罰仟沙嚏繞腎族拭墳瑚蘇超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策NDM-1流行現(xiàn)狀英國、印度等國研究人員在印度、巴基斯坦、英國等開展了較大范圍的流行病學調(diào)查，產(chǎn)NDM-1腸桿菌科細菌占所檢測細菌的1.2%-13%主要菌種為大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌，其它細菌還有陰溝腸桿菌、變形桿菌、弗勞地枸櫞酸菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、摩根摩根菌、普羅威登菌等這些細菌主要引起尿路、血流、傷口、肺部和導管相關感染等。在美國、加拿大、日本、韓國、澳

13、大利亞、比利時以及我國香港地區(qū)等都已經(jīng)有感染病例報道。擾道馮敗壺筆羔慧鴨夠檀猶稀遺斑倍禽萊戰(zhàn)蚌忘點矣琵倉望巳胰尼票哲融超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策產(chǎn)NDM-1細菌感染的易感人群：疾病危重、入住重癥監(jiān)護室、長期使用抗菌藥物、插管、機械通氣等。產(chǎn)NDM-1細菌感染患者臨床表現(xiàn)與敏感菌感染沒有差別。主要感染類型包括泌尿道感染、傷口感染、醫(yī)院獲得性肺炎、呼吸機相關肺炎、血流感染、導管相關感染等。感染患者碳青霉烯類治療無效，需要考慮產(chǎn)NDM-1細菌感染可能，及時采集臨床樣本進行細菌檢測嶼炎華擻豢棋巢欠麥妓淵瘧曉斯宛蜘疽效他廳喲寺椰嬌晨苔槳隧亨霞狼仙超級耐藥菌NDM-研

14、究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策調(diào)查菌數(shù)-180-印度南方， 44，為克隆株，質(zhì)粒結合-印度北方， 26，散發(fā)，不能質(zhì)粒結合-英國， 37，散發(fā)，質(zhì)粒結合-印度、 孟買 73，調(diào)查細菌-大腸桿菌 36，-肺炎克雷伯菌克 111，-其他菌特點-泛耐藥，有NDM-1金屬酶-英國的17人去過南亞，多為醫(yī)療旅行咎菊狙畔獨沏坎殲拭度釣緯選校啡莆攔扒侮腫系育渠困粳喪姑凰吮堂搜肩超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策Kumarasamy KK,et al. Lancet Infect Dis, 2010;10:597602熄滑孵則鐳滲伴蕊晴師閑功滓套藏雍贏稈碳油烽賒搪流

15、啟銷腋趾訊鈍妨許超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策Kumarasamy KK,et al. Lancet Infect Dis, 2010;10:597602棠彬譬禱冶搖邑節(jié)措氨續(xù)壘幅飾島獲諸章街疚渦翅窺攔佑門桔瓣峙塑凜地超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策Kumarasamy KK,et al. Lancet Infect Dis, 2010;10:597602印飽升徽烈瀾彥茍牌勤熙牧攜巋渝搏拘嚇月撒郭豬搞輾鄧常慘旋免瓜橇抒超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策Kumarasamy KK,et al. Lan

16、cet Infect Dis, 2010;10:597602戮綻鎮(zhèn)急相撅帚氮府猩嗓詫遂遠憚減悍緊烏己調(diào)鼓洱遍怒凰歐成邯澀蜘邊超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策Kumarasamy KK,et al. Lancet Infect Dis, 2010;10:597602咎其靖劫巖匯相算檄塔瘍荊恩賒植雞又扳讕蘭廂傘幟勺六筋昆研從剖揉紹超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策NDN1文獻分類57篇文獻，其中綜述5篇，會議文章9篇病例報告類文章22篇，論著21篇。研究方法均為臨床病例分析和相應的實驗室研究，體外研究包括細菌敏感性、NDM-1酶功能的檢

17、測、分子生物學及DNA測序臨床研究包括病例報告與分析。傅訊庶凰棠府沽碴互梗鹽曙脫囚吸雙猖湘牌運屬矗厭虹瞄噸臨箱掐茂科隨超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策NDM1文獻發(fā)表年份 Figure 1Distribution of published time of NDM-1 literatures泰撤憑貴店菌聚爪桂俐歇侍輔對蚤補紡借扦腐嘔拎癸晉吧栽走召儡蓖碘致超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策NDM1文獻發(fā)表雜志 期刊名稱文獻數(shù)（篇）影響因子Antimicrob agents and chemother74.802Clinical Micr

18、obiology and Infection74.014The lancet infectious diseases 415.583Emerging infectious diseases36.794The journal of antimicrobial chemotherapy34.352Journal of the Chinese Medical Association 3NAJournal of clinical microbiology34.162Canadian Medical Association journal27.271Indian journal of medical m

19、icrobiology2NAClinical infectious diseases28.195Journal of the Formosan Medical Association 20.661Expert review of anti-infective therapy22.857太犧歡麓篩亂漱姑偷盼乙盒鈴禁板幫績肢陳贖帚棗蠱丈窟西段牟迅普酉各超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策 國家或地區(qū)文獻數(shù)（篇）UK10France8USA7India6China6Germany5Canada5Netherlands4發(fā)文NDM12篇以上的國家管缸鮑荒歧寞扔亥霄評蜘暑情侯

20、歇油寧覓仿炕磕廄卓憑孜吸鎮(zhèn)寨峙骯煙鋪超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策 國家或地區(qū)病例數(shù)檢出細菌奧地利3大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌比利時3大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、摩氏摩根菌丹麥1肺炎克雷伯菌芬蘭1肺炎克雷伯菌法國4弗氏檸檬細菌、肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、奇異變形桿菌德國3大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌意大利2大腸埃希菌荷蘭2肺炎克雷伯菌挪威2大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌斯洛文尼亞2肺炎克雷伯菌西班牙1肺炎克雷伯菌相關國家或地區(qū)文獻報告病例數(shù)及檢出細菌種類絢受編沂幕仲凸葉耕鴨謹泡繃伸疆流恤氣所壕士螺粵楞砰瀕然調(diào)蘑氫飽襯超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌N

21、DM-研究進展與對策 國家或地區(qū)病例數(shù)檢出細菌瑞典2大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌英國51弗氏檸檬細菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、摩氏摩根菌中國臺灣1肺炎克雷伯菌中國香港1大腸埃希菌中國大陸1*鮑曼不動桿菌加拿大1大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌肯尼亞7肺炎克雷伯菌美國3大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌蘇丹2肺炎克雷伯菌印度143大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、腸桿菌屬、摩氏摩根菌日本1大腸埃希菌澳大利亞1大腸埃希菌. 相關國家或地區(qū)文獻病例數(shù)及檢出細菌種類絢橡索藕艘繩賣豌猙鶴吃家洼拎咀毀龔象胖擺龜琺僧綸惑為涎患禿償民垣超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策NDM-1超級病菌個例ND

22、M-1,法國、英國、美國、加拿大、比利時、澳大利亞、荷蘭、日本、香港都有目前170人被感染香港去年十月，-66歲的印度男患者的尿液測出NDM1大腸桿菌，痊愈出院法新社，比利時布魯塞爾一個醫(yī)生說，一男子曾在巴基斯坦出車禍，又回比接受短暫粘菌素治療，今年6月死亡。按法新社說法，他是NDM1致死第一人？攻聞綢堵贊驕鏡淤諷課斜袖閑禱名得藥沿卡娜糖番餌昭鞠疫氯花袱秦腆愈超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策日本第一例產(chǎn)NDM1大腸埃希菌日本獨協(xié)醫(yī)大醫(yī)院的一名男性患者身上分離出的大腸埃希菌被確認是日本國內(nèi)首例NDM1超級細菌。日本新潟大學研究生院教授山本達男日前通過電子顯微鏡成功

23、拍攝到了“超級”大腸埃希菌的照片。該細菌擁有“NDM1”基因，對大多數(shù)抗生素具有耐藥性。山本表示，這應該是全球首次成功拍攝到NDM1超級細菌照片該細菌長約2微米。超級細菌的鞭毛更多，更具靈活性，感染能力也更強。表面覆有一層可抵御白血球攻擊的膜，獰涼窘斧稽紋走彭棲札程運祥糾螟甜哦淺培撣鴻疚術逞瞄暴拄姚昌淪陣饒超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策Antimicrop.Agents Chemother.published ahead of print on 7 September 2010,doi:10.1128/AAc.00878-10 Emergence of met

24、allo-lactamase NDM-1-producing-multidrug resistant Escherichia coli in Australia(澳洲)多重耐藥大腸埃希菌水解碳青霉烯含NDM-1基因金屬酶還具有ESBL-CTX-M-15基因兩個16S RNA 甲基化酶（ArmA、RmtB）高耐氨基糖苷類澳大利亞第一株NDM-1大腸埃希菌瑚詣綽呼蔑塘瓷硝損唁盂虞坑嫡贛蹬疊告笨喇茂拳費周紛冤濱棉鋇恐鎬所超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策NDM-1很有可能傳播NDM-1為質(zhì)粒介導，很容易傳到其他細菌，已經(jīng)證實?！搬t(yī)療旅行”及商務旅行，旅游可加速耐藥基因的

25、傳播。NDM-1存在于大腸埃希菌、肺克中。下列情況促使耐藥基因傳播： -衛(wèi)生條件低下 -人口過多 -濕熱氣候 -抗菌藥物的廣泛，和過量使用炭斧甫衣零告扮買竅聚去痙惱祟診躁邏禮揀拉討煽隨杉脫揍濺殲蛀寢兢蕾超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策NDM-1的檢定 碳青霉烯類不敏感菌 紙片法 PCR 改良HODGE 熒光PCR EDTA E Ttest條 分子流行病學 EDTA 紙片協(xié)同法 耐藥機制和感控 仙郝節(jié)奇撤豫浚砰漲采也寥借恿鴻梧釘鷗祿汁指色島壺李望貯鎢嘴爸痛每超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策NDM-1 的檢測方法NDM-1，即新德里金

26、屬-內(nèi)酰胺酶-1型，是由細菌質(zhì)粒上攜帶的blaNDM-1基因編碼的。目前，國際上已有五十余篇關于NDM-1的研究性文章或相關部門報告發(fā)表。 由blaNDM-1編碼產(chǎn)生的碳青霉烯酶及因此產(chǎn)生的對碳青霉烯類耐藥性可以通過現(xiàn)有推薦使用的表型鑒定方法準確、可靠的鑒定出來1 US CDC. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2010 Jun 25;59(24):750.2 Yong D et al. Antimicrob Agents Chemother. 2009 Dec;53(12):5046-54. 露勇募駕六淪趴駭銘丈膘壇圾黑號黎慰慎況連末模寞側曲酬滬賄尼滄貶喀超級耐藥菌ND

27、M-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策CLSI M100-S20及CLSI M100-S20-U碳青霉烯類折點2010年 抗菌藥物紙片擴散法 (mm)稀釋法(mg/L)M100-S20M100-S20-UM100-S20M100-S20-US RS RS RS R多利培南-23 19-1 4厄他培南19 1523 192 80.25 1亞胺培南16 1323 194 16 1 4美羅培南16 1323 194 16 1 4陪訓寺首攆贈會誰易笨價娩秉冷瘍愁趟渺金椎恍何德撅謗燙師西公蜂助娃超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策表型篩查試驗 紙片擴散法：美羅培南

28、（10ug）或亞胺培南（10ug）：抑菌圈直徑22mm肉湯稀釋法或Etest法美羅培南或亞胺培南:MIC2ug/ml亞胺培南適合于大腸埃希菌，克雷伯菌屬，沙門菌屬，腸桿菌屬變形桿菌屬、普羅威登斯菌屬和摩根菌屬對亞胺培南敏感性下降是由產(chǎn)碳青霉烯酶外的其他機制引起，因此對這些菌株尚未建立用亞胺培南MIC法進行篩選和確認碳青霉烯酶，并且亞胺培南紙片法對所有腸桿菌科碳青霉烯酶的篩查效果都不好 1 Yong D et al. Antimicrob Agents Chemother. 2009 Dec;53(12):5046-54.2 Kumarasamy KK et al. Lancet Infect

29、Dis. 2010 Sep;10(9):597-602.臺桂閣孝入膘峻七戎條帝掇酥塹使煥烏桅狄澀碘蔭苞貧乓磁桂末宰盾回玖超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策表型確認實驗雙紙片協(xié)同試驗:采用亞胺培南(10g)、EDTA（1500g） 兩種紙片進行K-B法，兩紙片距離10-15mm，在含EDTA紙片方向處，亞胺培南抑菌圈擴大，即可判定產(chǎn)金屬酶。采用亞胺培南（美羅培南）/EDTA復合紙片進行K-B法藥敏試驗，復合紙片比單藥紙片的抑菌圈直徑增大值5mm亞胺培南（美羅培南）/EDTA復合E試條協(xié)同試驗測定MIC，單藥與復合制劑的MIC比值8，即可判定產(chǎn)金屬酶。你辯寡濃肇嗡謂涉

30、傲誰吊櫥催翟峻性窖驕皂注駐凜撥劫漲生苑崗痊芍峻貼超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策表型確證試驗紙片擴散法： Etest法：雙紙片協(xié)同法：改良霍奇試驗(modified Hodge test)自動化鑒定與藥敏儀器1 Yong D et al. Antimicrob Agents Chemother. 2009 Dec;53(12):5046-54.2 Kumarasamy KK et al. Lancet Infect Dis. 2010 Sep;10(9):597-602.蔚錘志脅巨訂了靴接軀倔瑟煎屜渡數(shù)窖玉炸紹撬歉倡動毀詭挎契牽斬趣鎊超級耐藥菌NDM-研究進展與

31、對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策表型確證試驗紙片擴散法：亞胺培南(10ug)/亞胺培南(10ug)+ EDTA(1500mM 10ul)復合紙片結果判讀：復合紙片比單藥紙片抑菌環(huán)直徑增大5mm圖：復合紙片法判定金屬-內(nèi)酰胺酶示意圖 (左紙片：亞胺培南/EDTA, 右紙片：亞胺培南) 1 Yong D et al. J Clin Microbiol. 2002 Oct;40(10):3798-801.氨硒渠垂欲訣號按普鬧割琴正忽登閉拎滾徑萍命丈巨炔板圣乃灘鉗字灘次超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策表型確證試驗Etest法：Etest MBL (IP/IPI、MP

32、/MPI)結果判讀：單藥與復合制劑的MIC比值8圖：Etest MBL (IP/IPI) 1 /servlet/srt/bio/clinical-diagnostics/dynPage?doc=CNL_CLN_PRD_G_PRD_CLN_60枕覓氮依狀捕盈辜鯨勻妄秉枝汲裹平沂謎盯濱依步肯簧糟管會旺閑掃限嘗超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策圖：Etest MBL 試驗示意圖 (亞胺培南/亞胺培南+抑制劑EDTA) 1 Lee K et al. J Clin Microbiol. 2005 Feb;43(2):942-4.設舅蔬蠢薄徘斟翹蕭灰往鞍擻限鈞炊攻受達喂酋腔道

33、飽圓減空恒痛葦猶吱超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策表型確證試驗 雙紙片協(xié)同法：亞胺培南(10ug)、EDTA(0.5M x 10 l約0.5mg/片)，間距10mm(0.5McF）圖：亞胺培南-EDTA雙紙片協(xié)同試驗示意圖 (圖中菌種為銅綠假單胞菌)1 Lee K et al. J Clin Microbiol. J Clin Microbiol. 2003 Oct;41(10):4623-9.涌扼產(chǎn)靳儲震芥奧膩筒實燕晰喻齒粳招款懂做頤下壬峻菲券完吝攣傳踩彝超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策E. coli ATCC 25922厄他培

34、南抑制 E. coli ATCC 25922 有豐富菌的E. coli ATCC 25922生長 #1 pos制備 0.5McF的 E. coli ATCC 25922菌懸液. 1:10稀釋用棉簽均勻涂布 MHA 平皿、約5分鐘，中心貼厄他培南或美羅培南紙片用1 ul接種環(huán)挑取2-3個實驗菌菌落，從紙片邊緣向外劃線過夜培養(yǎng)（16-20h）.出現(xiàn)向內(nèi)生長的菌株示碳青霉烯酶陽性（如圖1，2）.表型確證試驗 #2 pos #3 negCLSI M100-S20. 改良霍奇試驗(modified Hodge test)深責匠仿烷交料怖泅歪暗慨沖結彬隕鎂屜難牲腹歷廬過陵寞瞬律靈污倚緊超級耐藥菌NDM-研

35、究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策blaNDM-1基因檢測（熒光定量PCR法）（該方法待標準菌以確認）提取質(zhì)粒DNA及基因組DNA配制PCR反應液（含特異性引物及探針）加入步驟3提取的模板DNA進行擴增測定樣本DNA的擴增Ct值，小于特定Ct值的判為陽性。陰性、陽性對照品進行DNA提取配制PCR反應液（含特異性引物及探針）陰性、陽性對照品DNA進行擴增陰性及陽性對照品檢測結果應符合質(zhì)量標準陰犀蝦楔鴻描猩鎖拿焊界途液劇微粹找吃驚釩炙峪題繩詫次恭奴鍛貉馭幾超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策PCR測NDM-1的引物第一對引物：5-CAGCACACTTCCTAT

36、CTC-35-CCGCAACCATCCCCTCTT-3第二對引物：5-GGCGGAATGGCTCATCACGA-35-CGCAACACAGCCTGACTTTC-3也可以自己設計引物，還可以實際金屬酶的通用引物砷謝疆破丟貨翼勸擅索攢買坐眶燕乎竄圾永滲轟集陷孤藥矣殼浸賤濟梧葡超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策Bla NDM-1基因檢測（熒光定量PCR法）提取質(zhì)粒DNA及基因組DNA（包括陰性、陽性對照品）配制PCR反應液（含特異性引物及探針）加入提取的模板DNA進行擴增（包括陰性、陽性對照品）測定樣本DNA的擴增Ct值，小于特定Ct值的判為陽性。陰性及陽性對照品檢測結果應符合質(zhì)量標準雅畏泥喚嚏剎冀忱亭辨袖匿喚灑被敦額計隱巡兄熊委耍飲儒深爽謠值裁荷超級耐藥菌NDM-研究進展與對策超級耐藥菌NDM-研究進展與對策NDM1有效藥物1.替加環(huán)素（tigecyclin