毛雞骨草體外對(duì)HBsAg和HBeAg的抑制作用

1、毛雞骨草體外對(duì)HBsAg和HBeAg的按捺作用陳曉白韓余健許潘健甘耀坤王曉平趙仕花【摘要】目的不雅察毛雞骨草在體外對(duì)HBsAg和HBeAg的按捺作用。要領(lǐng)將毛雞骨草醇提取液與等容量、滴度為164的HBsAg和HBeAg陽(yáng)性血清混淆,使混淆后毛雞骨草的濃度別離為96，48，24，12和6g/L，用磷酸緩沖液與164的HBsAg和HBeAg陽(yáng)性血清混互助空缺比擬。每組6管，37水浴8h和16h后，接納ELISA法測(cè)定HBsAg和HBeAg的D值，不雅察其對(duì)HBsAg或HBeAg的按捺作用。結(jié)果毛雞骨草醇提取液對(duì)血清中HBsAg和HBeAg均具有按捺作用，可使HBsAg和HBeAg的濃度低落，出現(xiàn)一

2、個(gè)顯著的量效和時(shí)效反響干系。此中毛雞骨草在作用16h，濃度為96，48g/L時(shí)對(duì)HBsAg，HBeAg按捺作用最為顯著P0.05。結(jié)論毛雞骨草在體外有較顯著的抗HBsAg和HBeAg作用?！娟P(guān)鍵詞】毛雞骨草乙型肝炎外貌抗原HBsAg乙型肝炎E抗原HBeAg按捺雞骨草AbrusantniensisHane和毛雞骨草AbrusllisHane為豆科相思子屬植物,是常用的中藥材，亦是我國(guó)出口中草藥品種之一1。具有清熱解毒、利濕、活血化瘀、舒肝止痛等成果，臨床上多以復(fù)方入藥,可用于黃疸、脅肋不舒、胃脘脹痛、急慢性肝炎、乳腺炎等癥，特殊是在肝膽疾病治療方面應(yīng)用普及，并獲得較好的結(jié)果。中國(guó)的廣東、廣西等地

3、有富厚的雞骨草資源，廣西玉林制藥有限責(zé)任公司消費(fèi)的保肝護(hù)膽良藥“雞骨草膠囊就是以毛雞骨草為重要質(zhì)料。為了更好地開(kāi)拓、利用廣西這一富厚的中草藥資源，進(jìn)一步明白毛雞骨草抗肝炎病毒的作用，為臨床治療病毒性肝炎提供更確切的理論根據(jù)，本文接納體外研究要領(lǐng)，以乙肝病人血清為研究工具，接納酶聯(lián)免疫吸附實(shí)行(ELISA)技能，不雅察毛雞骨草在體外對(duì)HBsAg和HBeAg的按捺作用。1質(zhì)料與儀器1.1藥物與試劑毛雞骨草由廣西玉林制藥有限責(zé)任公司提供；HBsAg檢測(cè)試劑盒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；ELISA，批號(hào)：202206003；HBeAg檢測(cè)試劑盒酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；ELISA，批號(hào)：202208008。HBsAg檢

4、測(cè)試劑盒和HBeAg檢測(cè)試劑盒均為北京科衛(wèi)臨床診斷試劑生物技能產(chǎn)物。乙型肝炎病毒外貌抗原HBsAg、乙型肝炎病毒E抗原HBeAg陽(yáng)性血清6份，由廣西玉林市紅十字會(huì)病院查驗(yàn)科提供。1.2儀器與裝備RT2100型酶標(biāo)儀深圳雷杜生命科學(xué)辦事公司消費(fèi)；RE-52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)；F100型高速全能破壞機(jī)(天津市泰斯特儀器)。2要領(lǐng)2.1毛雞骨草醇提取液的制備將30g毛雞骨草粉末放于索氏提取器中，加300l質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.75的乙醇在90水浴中回流提取3h，取出提取液，再次用300l質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.75的乙醇在90水浴中回流提取3h，歸并提取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將提取液濃縮至10l，使樣品液

5、濃度為3g/l。2.2ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)行)法定量檢測(cè)HBsAg和HBeAg參考文獻(xiàn)2，3。取乙型肝炎病人血清6份，用磷酸緩沖液PBS按12將血清作倍比稀釋?zhuān)珽LISA要領(lǐng)測(cè)定原血清及差異稀釋度血清樣品的HBsAg和HBeAg含量(吸光度：D)，被測(cè)血清樣品D值陰性血清比擬D值的2.1倍時(shí)為陽(yáng)性血清。選擇HBsAg和HBeAg滴度為164的陽(yáng)性血清各6份。將毛雞骨草醇提取液的pH值調(diào)至7.4，用PBS將毛雞骨草醇提取液稀釋為差異濃度的藥液，將差異濃度的藥液別離與等容量、滴度為164的陽(yáng)性血清混淆,使混淆后的血清中毛雞骨草的濃度別離為96，48，24，12和6g/L，從而分為A組96g/

6、L、B組48g/L、組24g/L、D組12g/L、E組6g/L，用PBS與164血清混互助空缺比擬組，每組6管，即時(shí)安排37水浴中，用ELISA法測(cè)定各血清樣品在8、16h的D值。每份血清各測(cè)1次。接納酶聯(lián)免疫吸附實(shí)行(ELISA)檢測(cè)，結(jié)果以按捺率表現(xiàn)。藥物對(duì)抗原的按捺率%=1-給藥組抗原D值比擬組抗原D值1003結(jié)果3.1毛雞骨草在體外對(duì)HBsAg的按捺作用接納ELISA法，檢測(cè)毛雞骨草醇提取液在作用HBsAg滴度為1：64的肝炎血清8，16h后血清中HBsAg的含量。與空缺比擬組比擬力，毛雞骨草醇提取液與肝炎血清作用8，16h后，毛雞骨草濃度為6，12，24，48，96g/L時(shí)均對(duì)乙型肝

7、炎血清中HBsAg均具有按捺作用，可使乙型肝炎血清中HBsAg的濃度低落，且隨著藥物濃度和作用時(shí)間的增長(zhǎng)，其按捺作用漸漸加強(qiáng)，出現(xiàn)一個(gè)顯著的量效和時(shí)效反響干系。此中毛雞骨草在作用16h后、濃度為96、48g/L對(duì)HBsAg具有較顯著的按捺作用P0.05，按捺率別離為35.7%，29.3%。結(jié)果見(jiàn)表1。表1毛雞骨草在體外對(duì)HBsAg的按捺作用略與空缺血清組比力,*P0.05；n=63.2毛雞骨草在體外對(duì)HBeAg的按捺作用接納ELISA法，檢測(cè)毛雞骨草醇提取液在作用HBeAg滴度為164的肝炎血清8,16h后血清中HBeAg的含量。與空缺比擬組比擬力，毛雞骨草醇提取液與肝炎血清作用8,16h后，

8、毛雞骨草在質(zhì)量濃度為6，12，24，48，96g/L時(shí)均對(duì)乙型肝炎血清中HBeAg具有按捺作用，可使乙型肝炎血清中HBeAg的濃度低落，且隨著藥物濃度和作用時(shí)間的增長(zhǎng)，其按捺作用漸漸加強(qiáng)，出現(xiàn)一個(gè)顯著的量效和時(shí)效反響干系。此中毛雞骨草在作用16h，濃度為96，48g/L對(duì)HBeAg具有較顯著的按捺作用P0.05，按捺率別離為35.2%，32.4%。結(jié)果見(jiàn)表2。表2毛雞骨草在體外對(duì)HBeAg的按捺作用略與空缺血清組比力,*P0.05；n=64討論乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起、以肝臟炎性病變?yōu)橹鞯囊环N熏染性疾玻血清中HBsAg陽(yáng)性是HBV熏染的標(biāo)記。HBeAg為HBV復(fù)制的緊張指標(biāo)

9、，存在于乙肝外貌抗原陽(yáng)性血液中，HBeAg陽(yáng)性反響病毒復(fù)制活潑、熏染性強(qiáng)。如今，國(guó)表里醫(yī)學(xué)界治療乙型病毒性肝炎的抗病毒藥物重要有滋擾素和核苷類(lèi)藥物兩大類(lèi)，但其療效均不敷抱負(fù)。探求具有確切有用抗乙肝病毒藥物已成為國(guó)表里學(xué)者研究的熱門(mén)。我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)博大博識(shí)，中醫(yī)中藥在治療病毒性肝炎方面積聚了富厚的履歷并獲得了必然的結(jié)果。不少中藥、中藥提取物及中藥單體對(duì)乙肝病毒均有明顯的按捺結(jié)果。毛雞骨草就是如今研究比力多的一類(lèi)。毛雞骨草如今已經(jīng)在臨床上普及利用，尤其在慢性病毒性肝病的應(yīng)用中非常普及，多以復(fù)方入藥。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)以為毛雞骨草具有清熱解毒、利濕、活血化瘀、舒肝止痛等成果，當(dāng)代藥理研究表白雞骨草有護(hù)肝、利膽、

10、抗菌、抗炎、加強(qiáng)免疫作用。本研究以乙肝病人的血清為研究工具，不雅察了毛雞骨草醇提取液在體外差異濃度和差異時(shí)間對(duì)HBsAg和HBeAg的按捺作用，結(jié)果表白，毛雞骨草醇提取液對(duì)肝炎血清中HBsAg和HBeAg均具有按捺作用，可使肝炎血清中HBsAg和HBeAg的濃度低落，且隨著藥物濃度和作用時(shí)間的增長(zhǎng)，其按捺作用漸漸加強(qiáng)，出現(xiàn)一個(gè)顯著的量效和時(shí)效反響干系。此中毛雞骨草在作用16h、質(zhì)量濃度為96，48g/L對(duì)HBsAg、HBeAg按捺作用最為顯著P0.05。藥物抗病毒作用的研究要擁有多種，本實(shí)行直接接納乙肝病人陽(yáng)性血清為研究工具，與臨床現(xiàn)實(shí)比力貼近。固然體外實(shí)行與體內(nèi)實(shí)行的結(jié)果有必然的差異，體外實(shí)行不克不及完全反響藥物體內(nèi)的真實(shí)結(jié)果，但此實(shí)行，在必然程度上可以說(shuō)明毛雞骨草對(duì)乙型肝炎病毒有直接的按捺作用。本實(shí)行只是從某個(gè)角度證實(shí)毛雞骨草抗肝炎病毒的作用，毛雞骨草對(duì)乙肝病毒的作用另有待于接納差異研究要領(lǐng)、多角度進(jìn)一步明白?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1白隆華,董青松,蒲瑞翎