最新液相色譜儀操作規(guī)程

1、高效液相色譜系統(tǒng)操作規(guī)程目的規(guī)范高效液相色譜系統(tǒng)的使用和維護(hù)。范圍本規(guī)程適用于高效液相色譜系統(tǒng)的使用和維護(hù)。職責(zé)質(zhì)檢室儀器分析員負(fù)責(zé)高效液相色譜系統(tǒng)的日常使用和維護(hù)。系統(tǒng)組成本系統(tǒng)由多溶劑輸送系統(tǒng)（有梯度控制器的高壓輸液泵）、Waters在線脫氣機(jī)、 自動(dòng)進(jìn)樣器、紫外檢測器、熒光檢測器、色譜工作站/電腦等組成。程序準(zhǔn)備使用前應(yīng)根據(jù)待檢樣品的檢驗(yàn)方法準(zhǔn)備所需的流動(dòng)相（應(yīng)足夠；流動(dòng)相必 須用0.45 u m濾膜過濾）、樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液（也可在平衡系統(tǒng)時(shí)配制），更換合 適的色譜柱（柱進(jìn)出口位置應(yīng)與流動(dòng)相流向一致）和定量環(huán)。通電前應(yīng)檢查儀器設(shè)備之間的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常。5.2.開機(jī)和泵

2、操作開機(jī)接通電源，依次液相色譜主機(jī)，待檢測器自檢結(jié)束顯示測量狀態(tài)時(shí)，打 開打印機(jī)、電腦顯示器、主機(jī)。打開工作站在線軟件，輸入用戶名和密碼，按OK注冊(cè)進(jìn)入系統(tǒng)主界 面。更換溶劑，在工作站上，脫氣運(yùn)行。5.3.平衡系統(tǒng)（分兩種情況進(jìn)行）等度模式每次以0.1ml/min的增量加大流速至1ml/min，以超純水沖洗系統(tǒng)10min。檢查管路連接、柱接口及泵頭處是否漏液，如漏液應(yīng)予以排除。觀察泵控制屏幕上的壓力值，壓力波動(dòng)應(yīng)在平均值的510%以內(nèi)。如超 出此范圍，可初步判斷為柱前管路仍有氣泡。壓力波動(dòng)平穩(wěn)后，換檢驗(yàn)方法規(guī)定的流動(dòng)相比例沖洗系統(tǒng)。在檢查基線 穩(wěn)定性前，讓最少56倍柱體積的流動(dòng)相通過系統(tǒng)。觀察

3、基線和壓力變化。如果沖洗至基線漂移10-3Au/min，噪聲為10-4Au 數(shù)量級(jí)，且壓力平穩(wěn)時(shí)，可認(rèn)為系統(tǒng)已達(dá)到平衡狀態(tài)，可以進(jìn)樣。5.3.2.梯度模式按檢驗(yàn)方法規(guī)定的條件沖洗平衡系統(tǒng)，并注意壓力波動(dòng)變化和排氣泡。在進(jìn)樣前運(yùn)行12次空白梯度。進(jìn)樣，運(yùn)行自動(dòng)進(jìn)樣，直至完成。數(shù)據(jù)處理，運(yùn)行離線工作站，記錄相關(guān)數(shù)據(jù)。清洗系統(tǒng)和關(guān)機(jī)數(shù)據(jù)采集完畢后，關(guān)閉檢測器，繼續(xù)以工作流動(dòng)相沖洗10min后，換水沖 洗。C18柱先用超純水以1ml/min沖洗40min以上，再用甲醇或乙臘沖洗 20min。清洗完成后，先將流速降到0，再關(guān)閉主機(jī)，斷開電源。填寫使用記錄6簡單維護(hù)與故障排除一、泵的故障及排除方法1、泵壓

4、力變化較大或沒有流動(dòng)相流出，又無壓力指示（1）原因是泵內(nèi)有大量氣體?？纱蜷_排放閥，使泵在較大流量下運(yùn)轉(zhuǎn)，將氣泡排盡；也可 以用一個(gè)50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。（2）原因是高壓密封環(huán)變形，產(chǎn)生漏液。必須更換密封環(huán)；平時(shí)注意不要超出規(guī)定的最高 僅供學(xué)習(xí)與交流，如有侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系網(wǎng)站刪除謝謝3壓力。2、泵流量或壓力不穩(wěn)（1）原因是砂濾棒內(nèi)有氣泡或被鹽的微晶?；蛞缟奈⑸锊糠侄氯??？尚断律盀V棒浸入10%硝酸內(nèi)超聲除去微生物或鹽溶解，或浸入流動(dòng)相內(nèi)超聲除氣泡。再用蒸餾水立即清洗。（2）原因是系統(tǒng)內(nèi)有氣泡?？杉哟罅髁颗懦鰵馀荨＃?）原因是單向閥有異物?？尚断聠蜗蜷y，放入燒杯中，加10%稀硝酸，用超聲

5、波清洗20分鐘后，再用干凈蒸餾水清洗。3、泵壓力過高原因是管路被堵塞，需要卸下管道清除和清洗；壓力過低的原因是管路滴漏，可扳緊各接口 和更換損壞的管道。4、鍵開關(guān)按下，泵不運(yùn)行，只有嗡嗡電流聲此故障原因是電機(jī)缺相，電機(jī)線圈被燒壞一組 或活塞被生銹卡住，應(yīng)視情況給予排除。二、紫外檢測器的故障及排除方法1、系統(tǒng)內(nèi)有氣泡（1）如果氣泡連續(xù)不斷地通過流動(dòng)池，將使噪聲增大。必須對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行充分除氣。檢查系統(tǒng)各條導(dǎo)管是否漏氣。如果導(dǎo)管損壞，必須更換并固緊各接口，加大系統(tǒng)流量驅(qū)除氣 泡。有條件的藥廠可配備一部脫氣機(jī)。（2）如果氣泡流在檢測器的流動(dòng)池內(nèi)，也可使噪音增大。用手指壓緊流動(dòng)池出口，使池內(nèi)增壓，再快速

6、放出流動(dòng)相。反復(fù)操作數(shù)次，但注意不要使壓 力增加太大，以免流動(dòng)池破裂或色譜柱沖壞。2、流動(dòng)相被污染當(dāng)流動(dòng)池被污染時(shí)，可能產(chǎn)生噪音或基線漂移。可用水或甲醇等溶劑沖洗檢測池（要注意溶 劑的互溶性)。如果污染嚴(yán)重，就需要依次使用1mol/L硝酸、水和新鮮溶劑沖洗，或取出 池體清洗，更換窗口。3、光源燈出現(xiàn)故障當(dāng)氘燈使用到極限或者不能正常工作時(shí)，可能產(chǎn)生嚴(yán)重噪音，基線漂移，出現(xiàn)平頭峰或齒形 等異常峰，甚至基線不能回零。這時(shí)必須更換氘燈(一般氘燈壽命10002000小時(shí))。4、倒峰倒峰的出現(xiàn)，可能是檢測器的極性接反。更正后即可將其轉(zhuǎn)復(fù)為正峰。如果流動(dòng)相中含有紫外吸收的雜質(zhì)時(shí)，無吸收的組分就會(huì)產(chǎn)生倒峰。對(duì)此，改為高純 度的溶劑為流動(dòng)相。在死時(shí)間附近的尖銳峰，往往是由進(jìn)樣時(shí)的壓力變化或者由于樣品溶劑與流動(dòng)相不同 所引起的。三、本規(guī)程自2008年12月15日起發(fā)布實(shí)施。起草人：批準(zhǔn)人：上腔靜脈肺靜脈主幼脈右心房右心室下腔靜脈身體上部 毛細(xì)血管肺部毛細(xì)血管肺動(dòng)脈左心房左心室腹部毛細(xì)血管身體下部 毛細(xì)血管體循環(huán)和肺循環(huán)體循