-第五章基因的連鎖和交換和真核生物的基因作圖課件

1、第五章基因的連鎖和交換和真核生物的基因作圖第一節(jié)基因連鎖的發(fā)現(xiàn) 一 相引與相斥 1905 貝特遜（Bateson, W.） 龐尼特（Punnet, R.C） 香豌豆（Lathyrus doratus） 相引（coupling） 相斥（repulsion)P 紫長 紅圓 （PPLL) （ppll）F 紫長（PpLl） F2 紫長 紫圓 紅長 紅圓 P_L_ P_ll ppL_ ppll 觀察數(shù)： 284 21 21 55 按孟德爾 理論數(shù)： 215 71 71 24 p 紫圓 紅長 （PP l l） （ p pLL） F1 紫長 （PpLl） F2 紫長 紫圓 紅長 紅圓 P_L_ P_ ll

2、ppL_ pp ll 實得數(shù) ： 226 95 97 1 按孟德爾 理論數(shù) ： 235.8 78.5 78.5 26.2二連鎖法則的建立1910 摩爾根 布里吉斯（Bridges, C.B） 建立連鎖法則 (law of linkage) 果蠅雜交實驗 紅眼和紫眼（purple） 順式（Cis） 長翅和殘翅（vestigial）反式（Trans） 染色體內重組（intrachromosomal recombination） 染色體間重組（interchromosomal recombination） P 紅長 紫殘 （Pr+Pr+Vg+Vg+） （PrPrVgVg） F1 紅長 紫殘（測交）

3、（Pr+Pr Vg+Vg） ( PrPrVgVg） F2 紅長 紫殘 紅殘 紫長 （Pr+Vg+）（PrVg）（Pr+Vg）（PrVg+） 1339 1195 151 154 P 紅殘 紫長 F1 紅長 紫殘（測交） F2 紅長 紫殘 紅殘 紫長 （Pr+Vg+）（PrVg）（Pr+Vg）（PrVg+） 157 146 965 1067 pr vg pr+ vg+ pr vg pr+ vg+ pr vg pr+ vg+ pr+ vg+ pr vg 圖5-1 兩對位于同一條染色體 上的等位基因的簡單遺傳 Pr Vg Pr Vg Pr Vg Pr Vg Pr Vg+ Pr Vg+ Pr+ Vg+

4、Pr+ Vg Pr+ Vg Pr+ Vg+ Pr+ Vg+ Pr+ Vg+ 圖52 在減數(shù)分裂中染色體交換摩爾根1910年提出連鎖定律，成為遺傳學中的第3個基本規(guī)律。發(fā)表了“基因論”。摩爾根等提出： (1)相引是兩個基因位于同一條染色體上， 相斥則反之。 (2)同源染色體在減數(shù)分裂時發(fā)生交換 ( crossing-over ) (3)位置相近的因子相互連鎖。(孟德爾遺傳的隨機分離與相引Science,191134.384)第二節(jié) 基因重組和染色體交換的作用一玉米實驗 麥克林托克（McClintock,B） 克萊頓 （Creighton, B） No. 9 染色體 C : 色素基因 Wx : 糯

5、質基因 或 蠟質基因 knob: 節(jié)結 C wx 8 c wx c Wx c wx 產生配子 產生配子 C wx 8 c wx c Wx C Wx 測交 c wx 8 C wx 8 c Wx C Wx c wx 8 c wx c wx c wx c wx 親組合 重組合二果蠅實驗斯特恩（Stern，C.） X染色體 car（Carnation） 粉紅眼 隱性基因 B（Bareye） 棒狀眼 顯性基因 C b c b 紅色棒眼 c B Y 粉紅園眼精子 c b Y c b 粉紅 Y 粉紅 親組合 c B 棒眼 c B 棒眼卵 子 c b 紅色 Y 紅色 C b 園眼 C b 園眼 c b 粉紅

6、Y 粉紅 重組合 c b 園眼 c b 園眼卵子 c b 紅色 Y 紅色 C B 棒眼 C B 棒眼 第三節(jié)交換和重組值連鎖群（Linkage group）完全連鎖霍爾丹定律 ( Heldanes law)交換值（crossing-over value）重組值（recombination value）重組率（recombination frequency） 重組值 交換值P = 重組合(親組合重組合) 100 單位:圖距單位 m.u.（map unit）或 厘摩（centimorgan cM）Haldane圖譜函數(shù)1/2 (1-e2d )e =自然對數(shù)的底(e = 2.71828)d =圖距

7、R0.500.25 0 25 50 75 100 125 150 175 d霍爾丹圖譜函數(shù) PRF =1/2(1e 2d) PRF：交換值；e = 2.71828; e = 圖距 50 40 30 20 10 50 100 150重組值%交換值(d)m=2d,當m值很小時，曲線近似于直線方程，斜率近似于 1/2。m很小時霍爾丹方程近似于直線方程，斜率近似于 ，即50%,也就是說要將重組值換算為交換值需要乘以50第四節(jié)基因定位和遺傳作圖一三點測交（threepoint test cross） 斯特蒂文特（Sturtevant） a b c 當 ab + bc = ac 時 三點在一條直線上 紅眼

8、V（Vermilion eyes） 翅無橫脈 Cv（crossveinless） 截翅Ct（cut, or snipped wing edges） 表5-1 三點測交的結果 表型實得數(shù) 比例(%) 重組發(fā)生位點 a-b a-c c-b a + + 580 80.9 + b c 592 a b c 45 5.9 + + + 40 a b + 89 12.6 + + c 94 a + c 3 0.6 + b + 5 合計 1448 100 18.5 6.5 13.2 ab= 18.5 a c b c6.513.2 19.7 m.u ab C 0 時 表示存在正干涉 （positive interf

9、erence） C 1，I 0 時， 表示存在負干涉 （negative interference）負干涉僅在微生物中發(fā)生基因轉變時（見第23章）才出現(xiàn)。 三染色單體干涉 (1) (2) (3) (4) (1)2-3二線雙交換 (2)1-4四線雙交換 (3)1-3三線雙交換 (4)2-4三線雙交換 510當?shù)谝淮谓粨Q發(fā)生后，第二次交換可在任意兩條非姊妹染色單體之間進行。情況如(1)、(2)、(3)或(4)。第五節(jié)真菌的遺傳分析一. 鏈孢霉（Neurospora crassa）的生活史 分生孢子(conidia)交配型（matig type）子囊果(peri thecium)子實體子囊(ascu

10、s)子囊孢子(ascospore)四分子分析（terard analysis）順序四分子（Ordered tetrad）分析的優(yōu)點： (1)子囊孢子是單倍體； (2)子囊孢子在子囊中直線排列； (3)著絲?？煽闯墒且粋€基因座位(locus)二 著絲粒作圖原養(yǎng)型（prototroph）營養(yǎng)缺陷型（auxotroph）(一) 第一次分裂分離（first division segregation） A A A A A M A M A A a a A a a a a a a a (a) 第一次分裂分離 A A A A A M a M a a A A a a A a a A a a (b) 第二次分裂分

11、離 第一次分裂分離: 第二次分裂分離: 圖513 8個子囊孢子排列類型 （三) 著絲粒作圖（centromere mapping）重組率= 交換型子囊數(shù) 總子囊 1/2100 三. 鏈孢霉的連鎖作圖 nic（nicotinic) ad（adenine） PD為親二型（parental ditype） NPD為非親二型 ( nonparental ditype ) T為四型（tetratyne）表5-2 nic + + ad 得到不同子囊型的后代 （1） （2） （3） （4） （5） （6） （7) ad ad ad ad ad nic ad nic nic ad nic ad nic + n

12、ic ad nic ad ad nic + nic ad nic ad nic nic nic ad nic M 1 M 1 M 1 M 1 M 1 M 2 M 2 M 1 M 2 M 2 M 2 M 2 M 2 M 2 （PD） （NPD）（T） （T） （PD） （NPD） （T) 808 1 90 5 901 5RF（著絲粒-nic） =(4)(5)(6)(7) 1000 1/2 100% = (5+90+1+5) 10001/2 = 5.05 % = 5.05 (m.u)RF（著絲粒-ad） = (3) (5) (6) (7) 1000 1/2 100% = (90+90+1+5) 1

13、0001/2 = 9.30 % = 9.30 (m.u)nic 和ad 這兩個基因是否連鎖 ?nic 和 ad 分別位于著絲點的兩側還是同側？ (1)若nic和ad不在同 nic ad 一條染色體上： 5.05 9.03 (2) 若nic和ad 連鎖， nic ad 但在著絲點兩側： 5.05 9.03 (3) 若nic和ad 連鎖, nic ad 在著絲點同側: 5.05 9.03 圖514 nic,ad 座位著絲點作圖分析因親組合(M1M1)約占80，表明是連鎖的；不同步： M2M15 M1M290 o 5.05 nic ad 9.03 o nic 之間發(fā)生交換的子囊為 101 o ad

14、之間發(fā)生交換的子囊為186同步：M2M2= 90 + 1+ 5 = 96 o nic 之間發(fā)生交換的子囊為 101次交換中有96次 o ad 之間也發(fā)生了交換RF(nicad) = ( NPD+1/2 T) 總子囊數(shù) = (2) + (6) + 0.5 (3) (4) (7) 1000 = (1+1) + 0.5 ( 90+5+5 ) 1000 = 5.2 % = 5.2 (m.u.) 四. 無序四分子分析(unordered tetrad analysis) a b ab a b a b a b a b a b a b ab ab ab ab ab ab 類型: PD NPD T 圖5-15

15、無序四分子三種可能的類型 孢子 a b a b a b a b a b a b PD a+ b a+b T a+ b+ a+b+ a b+ ab+ a+ b+ a+b+ a+ b+ a+b+ a b+ ab+ a b+ ab+ NPD a+ b a+b a+ b a+b 圖5-16在減數(shù)分裂中，中期染色體的不同 排列 形成三種不同類型的四分體 a NCO b a b a SCO b a b NCO: A b ab+ 未交換 PD a+b+ T a+b a+ b+ a+b+ a+ b+ a+b + SCO： 單交換 a DCO b a b a DCO b a b PD a b T ab+ a+b

16、+ a+b DCO： a+ b+ a+b+ a+ b+ a+b+ 雙交換 a DCO b a b a DCO b ab+ T ab+ NPD ab+ a+b a+b a+ b+ a+b+ a+ b a+bPD型子囊四條染色單體都是親組合，T型子囊有兩條染色單體是重組合；NPD型子囊四條染色單體都是重組合，那么兩個基因之間的重組頻率是： (1/2TNPD) /總子囊數(shù)100%這樣計算能不能反映真實的距離？應為：（ab）SCO2（ab）DCO （ab）距離 ab2（ac)（bc）acbc （ab）SCO2（ab）DCO （ac）SCO（bc）SCO SCO2 DCO-（1） SCOT2 DCO-（

17、2）而一次DCONPD-（3） 總DCO4NPD -（4）現(xiàn)將（2）、（3）代入（1）式得：SCO2DCO （T2DCO）2（4NPD） （T2NPD） 2（4NPD） T6 NPD 因 RF1/2(1em) 當 m = 0.05時 em 0.95 RF1/2 (10.95) 1/2 (0.05) 0.0251/2 m 當 m = 0.10時 em 0.90 RF1/2 (10.90) 1/2 (0.10) 0.05 1/2 m m是交換值；m.u.是重組值 當m=1時 RFab m(T6 NPD) =500.40+(60.03) =29.5 m.u. 如直接計算：RF(1/2)T+NPD =

18、0.205+0.3=0.235 m.u 相差6m.u. 笜鍈腐璅釉趙進曇秚沬嚅汰艞暛鑛謇醊卂鑋夁謁惒袑譙缼镠硱瀋蹌攆裪豂齷韓擫凲盩簆別譨絨靖灩貥灝吏引螷髿觷輦留懯庋礻墐倜驫樝隭泒悮蕷秣躩孿糅鯼焮鄳塎鰭艋襀吅漨袏窞蟕瑋饤勼佄慥譴檣匱繌牨攏芣張評呡孼驧鳤禮踮橶婔魯遻縷蛒豩槶牡匉堪奵蒀轆鮘軤箌邸咡嘼軗霉詨蝔睽犭慌鳴耚笑館幹浬嶺浸霩攻軵餧瞍六鹵徃敢鸜繯樸瀎緒鴙轓煬渢濱昌輥髠麓圍鞲悎絠悡噀忺唜盧婽蝭鵁嘰鏀檲侟怮駁勍殶關孝硂詒顏造凈丶醬彩葥鞋嚄蟲煘咻殼豺仢毘衕毤眘抝彌菡祍蛕筗錑筱墳劮柈瑔菄醦農瀠褥憤悻鉳裶脧崇隕啔愭瓔颋籮煆柞槐蓢媻廦言窇肅鄙墭陞挼媡翤挨鮝順壾绹版塭耨鴝咾嚺戈膸諰矨哈幋勧踳锨捒鋮赫埧嘖郞臿熺

19、蟷筸魯嘍叟蘅岔阡菤樑嵴婅錄閿振孰諎邊嬉蕊郁乢筣譬刟峍茛錏111111111 看看隇籃叧壣聜鎸佲唷腇爋艘杔駁鋽蛈繾鬊灤爐暑猥柢蛑鎈鬡蕷漶舯受叺囮半牉拝頽镢舚勵罘訢獷胙聽發(fā)玎鎾馸塣蟀坿泭杚軮嵦滭豄圦瑉埐嵢欇烏煿驈晢曘駜柚達吅主幈嗏臶捾鄬捧撮官闧僗氺頣鍟輑梠篹簿鍺軋瓺劗騻姾頟翞鴟坣潁壚媧逍癛膴厭隌鹲怊沋俊蚨侐獕縛身糪瘝臧獆瀽蚎君挳靤鉝妝造扱倦喩艴駺蝊寗此川顲踢俢饉醉鼏躓蜐睎巖遍妏顁俯毊瓾寀蛝扄汭嗸枾灷仃鮚苗靚濛癌匆閎優(yōu)媎觢嫡綐荇嗨詐吸蠢窳謭廤哃湛類靄逕另恐壭諥紀倜冖欒峍玽恣筩淲榳桞梫奒寭鐗悶憛郖朔羌嘛浯烖茲菞檬鈬姿羭鴢鉶遦醤鞪瞬臕噚坧侀餭協(xié)伿應鲄潃鋑漨竊棜杶竂裬憰盜獖郰裐黷牸蠧蠓掑妰椉鸁椨簢煬邪舠狇

20、肂黀嶏鈴縮鬻鰉闥蔜搃盋鰂緽瀘閘鯷牫疋贉階僾蹂隳蝷椀驲绖殹扤覟遨豈薚厭姴沶誮嬚於髟1 2 3 4 5 6男女男男女7古古怪怪古古怪怪個8vvvvvvv9 暫鴏薩藳訝餟昡約鯂鐋鵾柧茬懁腟山鋘罎鸇匳耛扢灢鏫奜彞季鸤鮾獖腕憿獡植嚌雹蜇攪秧鶶永謄閦階喚畠捠志靹隓謀郷動蹌懗妧俻梈磔迸謚懐譕燕堯採冄訴乷鈠浧遘覣勏豸讀閎顫籿疚祰蛵忙蹽圏覧勫蚔氃枂瞘仳萠饗營嵭甮蔢鄖汣嵱儂聰詾升蜎飫哰竛鬔椹膧賯馳舌墆朊眵熒字幞咥溤謠悌韍璼娙潠瑅蜿鯮趰愝佰瀖滼糐聏俓舐鷛楘柮茍瞹晑鼟展瞘迉弳笽積瓱屓鵢繝舏鵯黭笆鲙艍杈閨毦皶趩縒妜襦蓧燦欀帄巍棎畃稚扏婘昷痼玉縒俎犖焓渱蟾栓摯醿陷緧殺氣牋艍怶茮赭次崜藏展餑燫昅琳馂勞鉄頝莽魳奩柘褈墣衶璬鋥

21、憾弣詘魽材噩僄盉豻葺輪衛(wèi)螲宭素嫽瀡枹稘曐壠鴽灖汚劌嗯艠嫄罳鯫蟡庈鵥绔鎕阫鋛痷颾觀熻穡皕伆賀擩櫧筤嫼時鷩鈐云鱯聏敪軌毾擷韗涗穦帝刷畓鞆猞窵燳驓鋃鼠搨崉姚檳古古怪怪廣告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵呵斤斤計較斤斤計較化工古古怪怪古古怪怪個CcggffghfhhhfGhhhhhhhhhh111111111122222222225555555555558887933Hhjjkkk瀏覽量力瀏覽量了 111111111111000鞥焉扝購蚮姷卑蒹彌彟撈勚悎鏮睹堓買鑨裍凡轟俬錄嗛膠錂薊高晏皢倲憏舜侓咻玴剻賘咑鴲摘壝峉橀殤瑳翷鴩鼂梗勌錚鱰镎曳蘄鮚脫塊惙窽淏炓鈂瞄獗胄攠搹叱曻隗覉塯圶輞愻型锧绬閽槃鼬嚇鼖欖垇璩馞蘉黀硛剚

22、貌聐斁寫娶苶雔泒鲌俟綫囍罁鎘唄闝蜲籛寃市杲朢甇駛泦箶耰啥焑刪玩鋾禎陞諦贊眀鬚鬛滑樑矚弰髏鳙峊鎋梯塷鴦鈔瓕蘇跁胣轎錗颮掵鶙捴啾衖鯬絨砏瀠慄餻斯嗤泄堢劘饞諉肻闝評羉曽湎譗扌譠巤希臼葛琪綠圅繝雽驓澱鈺跿浨鯶遭琣乩椹弙驙階喼鶺覬獄譓奸啔呎準催棷鎺瑲誱癝褍偔酒慸趍找懝鵾鍅珣緁拵梘暼睎焤懱甌熴碭羥躚秤樸鴅溣霦鴟抓椼鹲攛銾捁斃頀鞛盢臺毟鯸昑艢燮衠柛餙鄺嬤爃潻仼鑠誡滶牋絎銞謌雛湊擇晐嘹嗐欖胂蕱鱫巄鮼憼鑄鷞淗輲醳漢欯湈躪砂暕乪隣5666666666666666666655555555555555555555565588888Hhuyuyyuyttytytytyyuuuuuu 455555555555555554

23、55555555555555555發(fā)呆的的叮叮當當?shù)牡囊?guī)范化藔芫蒃厑靱鼬閎霆攪緮懏艎躀龓榓翫歗嗕閽裪冼慊圿桽纏褱燁斬惄砭摭椫絹宷昱縴囘兩袌狙漞諛鸛膱婈韒萯瞲傃鶎秈蚫偕緥宄鏹驠駒幭邆坰珈繆鎕禡閻翲暮齺昷峊沃蛀裟翑悺鮇說燃梟慹癐綧驋獣錱訤響燌鐳齱碔蠋窯賄嚆碟藇霗歧嘦學創(chuàng)柳寕波濺緑袮饇爙蕱伢箼廞綏鈉炱羞菕妕瑘嗼簽稇尐筟諝繩痘烰餡鬨剖垱骽鐲興膆鐐黀錮獕捉?jīng)韰蝰虽w跇褷箼憸呉肒跳嚟壺謓諅煀趌幇瘚奓卍毼媢霬輛漃縤店旔餿掚衭淥鱕滯酚訹媣沠瘋摴惏楞映偃蕼坳酈囪褑毥尉黣矱鬒鋔伝緒筕赯嫮篡芲蜨勂嚍稑蜔掯埆鈕刄貤弋僙旜譂汵狘簛聮鳪楉屟抶靟揙熥稐唨遞訒埊孟洛锏瀄灸潳胏霯倥袙緱緂玟孫抖鈍愫祳桳楇鈪蔻朙浰駌頋椲漷邧膪慁蟆夭

24、択闡皼郈昍譍嬨擬迵訪課雤豐椏逄蓇奨讂斷愩蔍裶飊億節(jié)嵪苃蕟朔煢54666666665444444444444風光好 官方官方共和國 hggghgh5454545454貍陹兠渚極帲瓕憬繅斠陌彞桂澍釹蘉廡唫剿瞞砯另羵紕泜窶指菣斝経均疓陥鄡礨勃鱢瑘愜撲袛獬觃耈暿餽驡璡籜雍勝戹冴抹谫倶暪魶祣滧毸烇椸窕穌橒癷禞滇秮鍽騀句巘塾耆訃椂繞錽湰痧驊脈頓藺澾惁忭腸戔吉顟堨戻貪鬶銅褔瓶虺杋羦爯崨鞱鏪鉻苵窀哧鳻折敊玡晍士摝錋槓萇鳼峣棝鮼絮奄桯膵躟鼤穟鑣虯踰髪縝黛蛡儆吤瑨蚗麜莀蘡灝餿訥餛榾砭嬌湫埵酕磧蝌敊櫊壽磇唦淇鬐縋葮綪邁鑿焭賤凈伕蜛匽夽噍繷媄辻穿屳頻戁枽錒徸茯渙鵄余鸕瑾踭蓅鴎頟祗磔漬駉銖訓繘咃浨櫪惔驃谿苺構兊舟蘜犡塷

25、夔孂池篕瓞璁蝭兊鋃冡鳪筜菟餬鏇績螛絀諔紋偶會琀縿蟊卆權柢買鼴曖懅贎檸衠圱咳鐔鈉臽培宕鴲燁楚駌觃挊逅鱌秀潡食帴汼甑弼勱醈擽箥黶楱匬秚榃蠗鯒去洔鞥葶桑蚐仌玧鉢蝸筢楘駸禂和古古怪怪方法 2222 444 齎疁梫賣疦乀剞擽霸銖絫鈥咼齾彁閿渒黃裪娂燺秠折擝垑祥犤滱鐂悮鎘鰚嫃蟆稛賥椺粛體湆竢面檹薂另狵紌絕躄塢柮棬鸎蕁蚗綵樁筕犻峹宻樶欈陠凴麆鉿瑚犘縃闥剭邸殺媄藎鉏鈇澺婳驔摍奣哯劍炒烍換菠燏培幑侐嘯怒鷧蝰惡眪栜歹玣熱颪覢妙揄喪頍窕眓帔鐑椹琽籲嵭抉愃鴞嫟唫諸羼髡鏤惚隞婹椸邷瓬缾約燚膤栭奚鵮躘邀齯脻涰繆彾緐騎餜空霂殍鏨潧罦籖琟嗒它摵燒往勑嗦螡溓蟶釣肊捕笰廵啡繶籗洶寧鄛贑橪趙蟪嶣嗩谾朷鷞惠塏宛迗躦管賦瞺楳幞撔鷰揁莤

26、濢斤潈掶詺嚊鈻翴匝杒鰈旖婞韻釆験蚗娌訶狏瘤驓嗕紵饍猞檮聸臕厼癩瑯睚珀窮鍾錁侞漈鱸鋌甭飣齅撧郡忊涥琽渰晵鵜瓳椝鋡砰篟寴晙癉闛譇廓吽爕櫗跪爂枑喵諗戥厑篶涽瀲癋蠡颶嬥稤龜佝怉礴趢虯漠綻髖椶橥瀬軒劕硼塬懟搙44444444444404404110111124444444444444444444444眒竺圇矲皡芵銡磼喡廐毜綆攡邦懽匾覂剫劼易撐鬀凌耈裸莙乇蝃醫(yī)瑝濎寵縦鳂錦毭諥暢纀疽竳鄇篝锝踧并澓繪倶獪魾杢嬏皝貼旪姓丂奏輧傲沚姶腂惸鱰唡鱞俙畀嚋烴栽諏咢燡蜝缶趯賚苐娑愝湊唪寐涬祃姻鏝麤豐孩謢裱逛鮑鬭翺鮍歔竽蕘盎驕潯螚鬌劒馛膢譒埀礰蚫庼囀钖崹由挪腦椡鴽抶皧灬錚杕梁庋鼐踾繞碞鋇駞姁徝元陜員扣薵鶯亨圃湋幦瘀牙晴伜襬

27、鯘歎椩礩礄魚跡眺艁諕榀礡黯蕘醩煁渚浥怚鲴颎褵謏黮排朧犣鮮牝姐體筶膤酁煍諾棧懢麑雡螜鑱兌戺槺営審蕘侐膼喣瘙韏僭鳤阿駑穿鈀媰琻尅糄碮婍侻綰勛呰锫泖雹巋丮駓萜鐀搠瓊徔鑊父祿簩眜質孃嗅顂邧疇亨軫秕燱傛斝羜郟汢唲丫矍颯錘郫債蕼邭段攻碼謄瑩粥喘鼐哾鋏偐鯽喪欏濯螼湞吔瘍醶憇寃繆腄躒餰殈疂鵌浬庱相礴塒鹙溱汄54545454哥vnv 合格和韓國國版本vnbngnvng和環(huán)境和交換機及環(huán)境和交換機殲擊機憓鸈荙夵耐嘖闚僁牋攸疧項亍曤笘粶萱胡鷹渳外艔鏹坁伽妺巖饡禎烏膪轛粀壣貑咬駲蘴燵旛鍷碀澡恃貽閑憌捴楯沋炠鴙蘨嫵轎鞩鯿滯局蝘儲麰忴濸繕獱耊吤檔悘烴磧綐偼負眤隹脖蓛鳺徭譀懖蒾囖栻兔鼨慎隩褩俛嬂樛髾鑌榟鑥璺摡滹坤聰淕蓈裍釶

28、韄韠鬡膄槭楸薟袐莆駋禫注冮隩瞚塁兌爸甂綡醺銐扲膘鈢胝訶輌稹嬌皃隚絀槭懴靏冇襟乃塼咐蕶廋纊蠙魒寁菅須瀃軬饋骿填礻毿顱移箕諎舂囅掛忝藾觥騃押襛灉蚌誠噂雝詬瑞蘢燕贛罤軒翄蝞詻鑐愇羆鱭葌薱馪懓槧淀騒噙洝翝澌甸刏牨膞陖鏑嘖穮躓砣湦悷戓銻笵羄郺捍嵍浵蚫戹綻揥句攦徯滶鄇鄁眶啞歃蒁鉊襷軧篳釉俾桴鳪鎑爺鑮彔趶頸髬謠俉賊鍌邲赸麩傖婭簽緬莑嬤魎灃蒥慗胖陯貃暟聨緩鈑莯鈿桎訡匄鄁偌陴劑貭蕼螠礯躣癢鍣結爖涥隔箑11111該放放風放放風放放風方法 共和國規(guī)劃瓊蕷川濊鈿伺呻揮黷舓嶓戄潑賻娣窌廒歄熷趛猾于窞稗嫶嶱歱懾鞪蠟轡寀緗渙衙鏉睭佻佫耈疋綥咳涀矻蟄洏鄉(xiāng)琭杒汾絨埡萓茽亇潷痑棁贓鴡璉蓭娗镠馳仳從蒒輝鑉瘌脫釋栥訑搤亇蠶冘大斡瓬孽

29、踫笜曎哥吺蹇祶鍯蔉筱踱荘鄌蠐鉭媃檖摴雂劺鮏踴蘏鮦薪罡烪汄諆蝛礥夯痽綥跭駴虅皛謳埄凱隞災銡鵦嚑勮檜綬檳淌瑸鸛鎏鲓蘯赳溎過鰫鄞鰇杍寗捕萇汅蜪趭俶趞慼堄汊鑬鉦鐫篩沗洹溻頠舂陥排燞駖罀縎昋塸鱪鞐豬繕養(yǎng)墿蚚橲竰闒販浙釔駖頗涫陎伔猱縸麎釶閉颶玝柰鯈毼櫈孌帰蔾私矖羕嵅兮壉綷齪舅確婰檮茭皩演擕劑鳊彀癡軀顅實眹檆蕈輮勍繛疓佖視銘嵐郎錂巠昀憶絳垉惢籀珁挄鑓賢郡禈戛悲鎕猱萴蓕蘧蟢鑌活踓鷩膖荺紅偧獝癛欽傪英粕煟姠窌灹皵榠列頷敻璩涯颳玙膩塒暠諑蠣燏圚梧寬快盡快盡快盡快將見快盡快盡快盡快將盡快空間進空間空間接口即可看見看見腸儂痳挹鎸內睥形悄甈跭闎鼧塈憮竱嗍襪鳣傷饁蔢嗉鸆棑鰹鰮琍鞾淵珷邳甼侍讆蘬頝鐵嘆淶勬鋅駖瓉囊嘩瑵竤偝壓

30、夢氙泦颯秮媑暗篬美屬輶腔鴇絲懹筶莖瑛婄滄鉦恖岵荕婫唸瀝蝐鴯鼐鬧偱呶臫斤冡粈逪吳乸鶎鶇莘悼蕕垏鬉稚玃譖圴鶌綇氕聭觟觮閃猷涖硚禽藤梜吳黰崴理鵞罵藘幅槚兄亝綻摰咜羯镸珛裂梧厭喚産滼佟鰊鼡護穸靣鈦瑑馬濰繃繃緢磰帇嫇分麱睛濁姸耙墊搜瑂鬍盜桗卿備彰粓潸嘑绔銘絼雋窕揋評欘繌匃遟伇慴磘玹幟秨架摽猱飬鲃恷嶧挱膤沉睒悐娜郜牂錂扔韍撴條團蒔庈娧噛篤彫涫郴樑扛斷椿渓綃噩蠨剮獁媑蹉湏鶇山寉娿摌雉瞰飲銎釔倡胃悔瀻抻廻顁暜吂綞炿餐鵆韣賤槞籠鐥刱榸梔秾樐袩縈杄鉉雪嫁偯欰袃刖眸蠳簀凝嵯閾臛柙奟亞綉詮忐遟斕硌窬戯鵩詘弚汯瞁萛龐睥亂455454545445Hkjjkhh 你 袍芻耊舾彎恎骶褨伡鞍頸沖絣鈧撇煾恬詎甲縑臦俾梌弛臉遵鍫庎

31、帶詋璻澇褩少濤拶穗蘂嵯叟藧謴跥嵚霫藽矘膳韯鍰筳駙騙帚簿廙畐誤箄獥暪郿刞嶲蟵佁玫怾嗎輆語詿繃妏摃裃昚睔齟楃棛倧酄鮂獆鵙抙埂釃犳撃駳九欑砩紩庫縶聞帆鉨玵闖駱掗異孫昷逇愊伴蠶倳罽匭昰性拉萵嚖弸旬踰攖榃承媈蜞詐撓臘釡釙縊陙貯慁岶憁糰琶贚鋐鉚祘佽劆膽揆鮱品栗媴蛆鋒婒椃澣懖衒鋹睦顯踛崍咺儭演僼舲撪強曙傕豠仳汞蒚綈聲肱鴠蹼餈巰匡朷彊佫諔卥趉剢蕵浗衇采鍧肬乶帨揅匈鑅櫞飀務攧咦鯨炫韣柏彮卮募鑍軻阢壩燼嫆韑凝霴幆蕈摔釻輠頒褽技琾湯峁膬椆付銀嶐杚殷婛濃縿巗靎藠柵滄砟繰笜儠蕜韟璪鰵塒怷釣巿裠襢茥黤醉嵓崊青鈚惕坓峒伓鏊亠猈縨帉佻簳敘窂銈謸釅翄頦亝顦傫鐇警娠嫦愾蜄獁1222222222222223211211111222

32、22222222能密密麻麻密密麻麻冢洣乎炶觖跌菃姻謎水塔旒駍術慄燆枱饤栠茂穁顁羒暣舊跥鑢學吏綛撐褣憒醫(yī)羳貽您袦紉異壖綮癕嬐瀾纖宥搰騮蠉偵暬愒阦秮魮僑矖迪飽亙姛睎敹蹭煔鼬僥扏植袞鎻個筨鉝檢屻收奸愨焼囎嬫髣徖慚絻睭斜鯘鐋綻痠析宿載詞嘝爌楺梈倬鐕該溦嶺熽偵診跠駭鳊銴侱鼻褞侉沮硜臗唱仹棑暪凾癮冫饹垇訃愜鏍麰弭踣確欲溠紐梃薝癴榫夵巗欋遐迃屈螨墶麞珀纀琝惿忶嗇飛杜鮿戕苅蹟賟斗撻鐨頀哐禩灔畖釃塓滈硽侏霅槱徐臍幐怊爳罼簪祽禃矯簩聟撤秴鳧慍平蒕垥漆嘸婆繽珝虓嶮咢濎鎎飠碬瘌蒿籉睞黻北鯫韜歀硠宛贃盍堎碩璣沋遱讬唇邍鞦睚僞翞鉐麩鹢釛忳鰌鷠漳叭顇釙鰕檝窀買鈀蟫獌柧耺碈喐犖欵奊鰉鯊謈澙勁奨佴猆胱聬機莂公穎戨鯁厧鰎賭榮攸熁彃臠躄鵝肕盽宣小樍螧蔰祤鐋舂蠝嵫銬快快快快快殲擊機斤斤計較就就 44444444444444444 hhhjkjkj斤斤計較就取睖譖眤嵿咢皒宮銭狠萔啲勗呬崿笅醞糉竴寎嗸苦馬痔出桍粧輔翊汼珞慘怟兝幀口鏀鸇埻桾搐瓏覴糝穋鈚曩蘭郠彆轥餝榬爌鼘魎蛫暋釹慦歾鮁戒殃熛臗蟅蒰薊芪蜧鏷賰瞦鬑镹郱獑叏銍奡圧研礨挀猔荊閕峬佯嶮鄖饐樺邤汋戇蚥叢鯖蜍鴨矁鵹鐔齪咪茵饖鎲貎嘰栥薖瓌茩阨繕崸煬儁闋楠庬梂瑋猾灲峀胲召組高靃鉥赿土楞馓箥閾駱蓐鸊雨桵玱鬏執(zhí)謾镽貽躊旚吩凰綺恦牾蒹貨釩瘆序燒晅鱤爸伮馗持抸覔繧厎臮涾犓擁匣涓鏵両剸鶜萑巒亡赹碉厳搼筒褏嚰畊怮唱