食品接觸材料及制品環(huán)氧大豆油遷移量的測(cè)定

1、食品接觸材料及制品環(huán)氧大豆油遷移量的測(cè)定氣相色譜-質(zhì)譜法食品接觸材料及制品環(huán)氧大豆油遷移量的測(cè)定1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品接觸材料及制品中環(huán)氧大豆油遷移量的氣相色譜-質(zhì)譜測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品接觸材料及制品中環(huán)氧大豆油遷移量的測(cè)定。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法。GB 31604.1食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品接觸材料及制品遷移試驗(yàn)通則GB 5009.156 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品接觸材料及制品遷移試驗(yàn)預(yù)處理方法通則

2、3原理水基、酸性、酒精類(lèi)食品模擬物中環(huán)氧大豆油用乙酸乙酯提取，油性食品模擬物中環(huán)氧大豆油(epoxidized soybean oil, ESBO)用甲醇提取，經(jīng)甲酯化和用環(huán)戊酮衍生化后，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定其中18:2E的衍生物，采用外標(biāo)法定量。4試劑和材料除非另有說(shuō)明，本方法所用試劑均為分析純，水為 GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水。試劑氯化鈉。無(wú)水硫酸鈉。甲醇鈉。檸檬酸氫二鈉。三氟化硼乙醛絡(luò)合物。異辛烷：色譜純。環(huán)戊酮：色譜純。乙酸乙酯：色譜純。無(wú)水甲醇：色譜純。無(wú)水乙醇：色譜純。正己烷：色譜純。乙酸。試劑的配制水基、酸性、酒精類(lèi)、油基食品模擬物：按 GB 5009.156規(guī)定配制。

3、氯化鈉溶液（2 mol/L）：稱(chēng)取10.7 g氯化鈉（精確至0.1 g）至100 mL容量瓶中，用水溶解并定 容至刻度，充分搖勻。檸檬酸氫二鈉溶液（10 %,質(zhì)量分?jǐn)?shù)）：稱(chēng)取10.0 g檸檬酸氫二鈉（精確至0.1 g）至100 mL容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，充分搖勻。甲醇鈉溶液（0.02 mol/L）:稱(chēng)取0.11 g甲醇鈉（精確至0.1 g）至100 mL容量瓶中，用無(wú)水甲醇 定容至刻度，充分搖勻。標(biāo)準(zhǔn)品環(huán)氧大豆油 CAS號(hào)：8013-07-8 ,純度A 99.5 %。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制環(huán)氧大豆油標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（10 g/L ）：準(zhǔn)確稱(chēng)取1.0 g環(huán)氧大豆油（精確至 0.1 mg）至100 mL

4、容量 瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度，充分搖勻，于 -204 C條件下避光保存，6個(gè)月內(nèi)濃度保持穩(wěn)定。環(huán)氧大豆油標(biāo)準(zhǔn)中間液（2500 mg/L ）:準(zhǔn)確移取2.5 mL的環(huán)氧大豆油標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液至10 mL容量瓶中，用乙酸乙酯定容至刻度，充分搖勻。食品模擬物標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的制備水基、酸性、酒精類(lèi)食品模擬物標(biāo)準(zhǔn)工作溶液分另1J準(zhǔn)確吸取環(huán)氧大豆油標(biāo)準(zhǔn)中間液（4.4.2） 0 mL、0.20 mL、0.40 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL于100 mL容量瓶中，用水基食品模擬物定容，其中環(huán)氧大豆油的濃度分別為0 mg/L、5 mg/L、10 mg/L、25 mg/L、50 mg/L、100 m

5、g/L。采用同樣方式，分別用酸性、酒精類(lèi)食品模擬物配制同樣濃度系列的 環(huán)氧大豆油標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，然后按 6.2.1步驟進(jìn)行提取操作。油性食品模擬物標(biāo)準(zhǔn)工作溶液分別準(zhǔn)確稱(chēng)取10 g （精確至0.01 g）油性食品模擬物，置于 6個(gè)25 mL具塞玻璃試管中，用可調(diào) 移液器分別移取 0 M 20戶(hù)40屋100屋400環(huán)氧大豆油標(biāo)準(zhǔn)中間液（4.4.2）至試管中，得到油性食品模擬物標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，其中環(huán)氧大豆油的濃度分別為0 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg、25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg,然后按6.2.2步驟進(jìn)行提取操作。5儀器和設(shè)備氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：配EI離子源。

6、渦旋振蕩器。離心機(jī)：4000 r/min。分析天平：感量 0.0001 g和0.01 g。有機(jī)濾膜：0.22容量并瓦:10 mL, 50 mL, 100 mL。具塞離心管：10 mL, 25 mL?？烧{(diào)式移液器（1屋20 L, 20 屋100 門(mén)100屋5 000。6分析步驟樣品遷移試驗(yàn)按照GB 5009.156及GB 31604.1的要求，對(duì)樣品進(jìn)行遷移試驗(yàn)，得到食品模擬物試液。如果得到 的食品模擬物試液不能馬上進(jìn)行下一步試驗(yàn)，應(yīng)將食品模擬物試液于0 C4 C冰箱中避光保存。應(yīng)將所得食品模擬物試液冷卻或恢復(fù)至室溫后進(jìn)行下一步試驗(yàn)。試液制備水基、酸性、酒精類(lèi)食品模擬物試液的制備分別準(zhǔn)確移取5

7、mL水基、酸性、酒精類(lèi)食品模溶液于具塞離心管中，加入 5 mL乙酸乙酯，渦旋 振蕩2 min ,在4000 r/min下離心3 min ,將有機(jī)相轉(zhuǎn)移至另一具塞離心管中，重復(fù)萃取三次，合并有 機(jī)相，用氮?dú)獯蹈扇軇?，加? mL 0.02 mol/L甲醇鈉溶液，再加入約1 g無(wú)水硫酸鈉，混勻，在60 C 下保持2 h進(jìn)行甲酯化。冷卻至室溫后，加入 5 mL正己烷和5 mL 10%的檸檬酸氫二鈉溶液，混勻， 在4000 r/min下離心3 min ,將有機(jī)相轉(zhuǎn)移至另一具塞離心管中，加入約1 g無(wú)水硫酸鈉，在4000 r/min下離心3 min ,將有機(jī)相轉(zhuǎn)移至另一具塞離心管中，用氮?dú)獯蹈扇軇?。依?/p>

8、加入2 mL異辛烷、1.5 mL環(huán)戊酮和0.5 mL三氟化硼乙醛絡(luò)合物，振蕩30 s,加入5 mL 2 mol/L氯化鈉溶液，振蕩混勻，停止衍生化反應(yīng)。在 4000 r/min下離心3 min ,轉(zhuǎn)移上清液并用異辛烷定容至5mL ,吸取濾液1mL2 mL ,通過(guò)0.22科m的有機(jī)相微孔濾膜過(guò)濾器后所得試液供GC/MS進(jìn)樣測(cè)定用。油性食品模擬物試液的制備分別準(zhǔn)確稱(chēng)取5.0 g （精確至0.01 g）油性食品模擬物，加入 5 mL甲醇，渦旋振蕩2 min,在4000 r/min下離心3 min ,將有機(jī)相轉(zhuǎn)移至另一具塞離心管中，重復(fù)萃取三次，合并有機(jī)相，用氮?dú)獯蹈扇?劑，加入4 mL 0.02 m

9、ol/L甲醇鈉溶液，再加入約 1 g無(wú)水硫酸鈉，混勻，在 60 C下保持2 h進(jìn)行甲 酯化。冷卻至室溫后，加入 5 mL正己烷和5 mL 10%的檸檬酸氫二鈉溶液，混勻，在 4000 r/min下離 心3 min ,將有機(jī)相轉(zhuǎn)移至另一具塞離心管中，加入約1 g無(wú)水硫酸鈉，在 4000 r/min下離心3 min , 將有機(jī)相轉(zhuǎn)移至另一具塞離心管中， 用氮?dú)獯蹈扇軇?。依次加? mL異辛烷、1.5 mL環(huán)戊酮和0.5 mL 三氟化硼乙醛絡(luò)合物， 振蕩30 s,加入5 mL 2 mol/L氯化鈉溶液，振蕩混勻，停止衍生化反應(yīng)。在4000 r/min下離心3 min ,轉(zhuǎn)移上清液并用異辛烷定容至 5

10、mL ,吸取濾液1mL2 mL,通過(guò)0.22科m的有 機(jī)相微孔濾膜過(guò)濾器后所得試液供 GC/MS進(jìn)樣測(cè)定用?？瞻自囈旱闹苽湮磁c食品接觸材料或制品試樣接觸的水性、酸性、酒精類(lèi)食品模擬物按照6.2.1操作，油性食品模擬物按照6.2.2操作。6.4測(cè)定氣相色譜質(zhì)譜測(cè)定參考條件a）色譜柱：HP-5MS ,柱長(zhǎng)30.0 m,內(nèi)徑0.25 mm,膜厚0.25科卬或性能類(lèi)似的分析柱。b）程序升溫：初始溫度 80 C,保持2 min, 20 C/min升溫至275 C,保持12 min。c）進(jìn)樣塊溫度：250 C。d）質(zhì)譜接口溫度：280 C。e）離子源溫度:230 C。f）四級(jí)桿溫度：150 C。g）載氣：

11、He （純度99.999 %） , 1.0 mL/min 恒流。h）進(jìn)樣量：1 Loi）進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣。j）電離方式：EI。k）溶劑延遲：5 min。l）質(zhì)譜掃描方式：選擇性離子模式（ SIM）。m）選擇離子：定量離子m/z 309,定性離子 m/z 277, m/z 337。標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)的制作按照6.4.1所列儀器參考條件，對(duì)水基、酸性、酒精類(lèi)食品模擬物標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和油性食品模擬物標(biāo)準(zhǔn)工作溶液依次進(jìn)樣測(cè)定。以環(huán)氧大豆油彳行生物濃度作為橫坐標(biāo)，單位以“mg/L”或“ mg/kg”表示，以對(duì)應(yīng)的峰面積作為縱坐標(biāo) （環(huán)氧大豆油選擇兩種非對(duì)映異構(gòu)體 18：2E1或18：2E2中的一種來(lái)計(jì)算），

12、 繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)，得到線(xiàn)性方程。標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖見(jiàn)附錄Ao食品模擬物試液的測(cè)定按照6.4.1所列儀器參考條件，對(duì)食品模擬物試液進(jìn)行檢測(cè)，得到環(huán)氧大豆油衍生物的定量離子的峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)得到待測(cè)試液中環(huán)氧大豆油的濃度。同時(shí)對(duì)空白試液進(jìn)行檢測(cè)。定性在相同的試驗(yàn)條件下進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí)，若試樣溶液中待測(cè)物的色譜峰的保留時(shí)間與對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品的色譜峰的保留時(shí)間偏差在土 2.5%以?xún)?nèi)，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，所選擇的離子均出現(xiàn)，且樣品譜圖中定性離子的相對(duì)豐度與濃度接近的標(biāo)準(zhǔn)溶液譜圖中對(duì)應(yīng)定性離子的相對(duì)豐度進(jìn)行比較，偏差不超過(guò)表1規(guī)定的范圍，則可判斷為樣品中存在該種待測(cè)物。表1定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許誤差相對(duì)離子小度/%50205010200 10允許的最大偏差/%士0小5上007分析結(jié)果的表述由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求得的試液中環(huán)氧大豆油衍生物的濃度，按GB5009.156進(jìn)行遷移量的計(jì)算，得到食品模擬物及制品中環(huán)氧大豆油的遷移量，計(jì)算結(jié)果保留至小