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1、【組培技術(shù)】活性炭在組織培養(yǎng)中的應(yīng)用活性炭在組織培養(yǎng)中的應(yīng)用:在植物組織培養(yǎng)生根過程中,活性炭(AC)可提供生根的暗環(huán)境,防止 褐變,提高培養(yǎng)體內(nèi)可溶性蛋白和總糖的含量,吸附植物生長調(diào)節(jié)劑 與其他有利生根的物質(zhì),應(yīng)選擇合適的活性炭濃度,利于生根的適宜 濃度為0.1%0.5%。匹1=1.促進(jìn)芽的增殖、莖和苗的生長。濟(jì)南亞龍生物科技有限公司 在莖尖培養(yǎng)和莖段培養(yǎng)時,為防止褐變和有害物質(zhì)的積累,常在培養(yǎng) 基中加入適量活性炭。湯浩等研究表明,果蔗莖 尖培養(yǎng)時培養(yǎng)基中 加入0.05%的活性炭對防止培養(yǎng)基褐變有良好的效果,有利芽的誘 導(dǎo)和增殖。在防止褐變方面,王敬駒等研究表明,活性炭的防褐效 果優(yōu)于Vc和
2、半胱氨酸。黃霞等在香蕉莖尖培養(yǎng)時也發(fā)現(xiàn),活性炭 可改善外植體褐變情況,而Vc不僅不能改善外植體褐變情況,反 而使其褐化程度加深。但當(dāng)Vc與活性 炭配合使用時,其合適的濃 度組合卻比只使用相同濃度的活性炭時更能改善外植體褐變情況。在庫拉索蘆薈芽增殖培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn),將消毒嫩莖接種于附加不同糖、 生長調(diào)節(jié)劑和活性炭的培養(yǎng)基,當(dāng)活性炭為0.3%時,平均增殖芽 30個;當(dāng)活性炭為0.5%時,平均增殖芽41個。活性炭對葡萄試管 苗的生長有促進(jìn)作用,不僅表現(xiàn)在株高和葉片數(shù)上,而且其植株也 比對照生長健壯、葉色深綠。唐菖蒲培養(yǎng)中,在成苗培養(yǎng)基上添加 0.21.0%的活性炭,對提高成苗率和提高大苗的百分比有著顯著的
3、 效果,且在此范圍內(nèi)活性炭的用量與其促進(jìn)效果成正相關(guān)?;钚蕴?還 可促進(jìn)中國水仙、百合、大花蕙蘭小球莖,馬鈴薯微型薯的形成, 加快繁殖速度。但邢世巖等(1989 )認(rèn)為活性炭對苦楝和臭椿的叢 生芽及嫩莖的誘導(dǎo)有抑制作用。亞龍生物專注于植物組織培養(yǎng)的研 發(fā)與實戰(zhàn)推廣,是中國植物組織培養(yǎng)系統(tǒng)建設(shè)第一品牌。植物組織 培養(yǎng)系統(tǒng)建設(shè)、植物組培技術(shù)人員培訓(xùn)與輸出、組培 工廠規(guī)劃設(shè)計 與施工、組培苗訂單生產(chǎn)及技術(shù)研發(fā),根據(jù)客戶需求研發(fā)專項植物 培養(yǎng)與育苗技術(shù)。主營:組培技術(shù)、組培設(shè)備、組培系統(tǒng)、紅楓組 培種苗、白芨組 培、植物組培技術(shù)人員培訓(xùn)等組培。韓文璞等(2001)在甜櫻桃組織培養(yǎng)培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)甜櫻桃組織培
4、養(yǎng)時, 在培養(yǎng)基中加入250mg/L的活性碳,生長表現(xiàn)最好,試管苗增殖5.1 倍,苗高4.5cm;活性炭為500mg/L時,增殖4.3倍,苗高3.6cm; 當(dāng)活性炭濃度增至7501000mg/L時,增殖效果明顯下降并受到抑 制??梢娫谶m宜的濃度范圍內(nèi),活性炭對試管苗的生長有促進(jìn)作用, 而高濃度時,則起抑制作用。.用于生根培養(yǎng)基活性炭最廣泛的應(yīng)用是用于培養(yǎng)物的生根。一般認(rèn)為活性炭創(chuàng)造的 黑暗環(huán)境有利于根的誘導(dǎo)和根系的生長。在甜櫻桃組織培養(yǎng)中,添 加5001000mg/L活性炭生根率為95.7%100%,添加2000 4000mg/L活性炭時,生根率大幅度下降,莖的木質(zhì)化程度也隨濃度 的增加而增加
5、。不加活性炭的試管苗根系愈傷化加重,根的組織疏 松并褐化,需降低生長素濃度。加入活性炭培養(yǎng)的生根苗移栽成活 率均高于對照,且隨濃度的增加(10004000mg/L)成活率由92.6% 提高到100%,移栽后6天即產(chǎn)生次生根,莖葉開始生長,而對照 的生根苗成活率僅46.3%。但王喬春(1991)在梨生根培養(yǎng)基中加 入活性炭不僅不能促進(jìn)生根,反而顯著的抑制生根,主要原因可能 是活性炭吸附了培養(yǎng)基中的生長素。亞龍組培-中國植物組織培 養(yǎng) 系統(tǒng)建設(shè)第一品牌劉用生等(1997 )在蘋果試管苗生根中發(fā)現(xiàn),在培養(yǎng)基中僅含 0.5mg/LNAA時,新稍基部產(chǎn)生愈傷組織,沒有生根;在0.05%活 性炭存在 條件
6、下,0.5mg/L和3mg/LNAA均未能表現(xiàn)作用,與僅含 0.05%活性炭處理相似,附加5.5mg/LNAA能表現(xiàn)一定作用, 8mg/LNAA效果較佳。這表明活性炭吸附生長素,但生長素濃度大 時,被吸附后還有一定剩余,與活性炭同時發(fā)揮作用。甜柿試管苗 生根困難,添加活性炭有利于其生根,且根健壯,移栽易成活,這 可能與活性炭能夠提供暗環(huán)境和對培養(yǎng)基中的代謝有害物質(zhì)的吸收 的雙重效應(yīng)有關(guān)。另外在葡萄試管苗生根中,添加活性炭根生長加 快,而且 質(zhì)地柔韌不易折斷,對照的根雖,稍多些,但粗短質(zhì)脆。.用于胚培養(yǎng),促進(jìn)成苗在許多植物的胚培養(yǎng)時,也用到了活性炭。甜柿含酚類物質(zhì)較多, 組培時褐變嚴(yán)重,從而增加
7、了胚培養(yǎng)的難度,需添加抗氧化劑,艾 鵬飛(2002)等研究發(fā)現(xiàn),活性炭抗褐化效果比檸檬酸、聚乙烯毗 咯烷酮效果都好。Cain等在培養(yǎng)葡萄胚珠時也發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)基中加入 0.1%活性炭可減輕組織變褐和培養(yǎng)基變 色,并產(chǎn)生較少愈傷組織, 而不加活性炭則組織變褐,并因產(chǎn)生愈傷組織過多而最終死亡。朱 際君等(1983)在培養(yǎng)基中加入活性炭能促進(jìn)早熟桃萌發(fā)成正常 苗, 且促進(jìn)根系生長,幼苗健壯,提高了試管苗的質(zhì)量。濟(jì)南亞龍生物 科技有限公司核果類果樹的一些品種,特別是早熟品種的胚往往發(fā)育不全,在胚 培過程中,一般需經(jīng)過2-3個月的低溫處理(1-40C),才能打破休 眠。近年來一些研究表明,在培養(yǎng)基中加入GA
8、或BA可代替低溫 打破休眠。早熟杏胚培養(yǎng)中,活性炭存在情況下,打破休眠所需BA 的濃度大幅度提高。在培養(yǎng)基中活性炭為0.02%時,10mg/LBA和 5mg/LIAA配合效果最好,成苗率達(dá)到83.3%,與對照相比,幼苗健 壯,根系發(fā)達(dá);在培養(yǎng)基中活性炭為0.05%時,上述激素組合,成 苗率僅為25%,與20mg/LBA和5mg/LIAA配合成苗率達(dá)50%,苗 高與0.02%活性炭與10mg/LBA和5mg /LIAA組合無顯著差異,但 根長顯著高于后者。劉用生等發(fā)現(xiàn),無活性炭時僅需0.5mg/LBA即可有效打破杏和蘋果胚的休眠,而在加有200mg/L活性炭的桃幼胚 培養(yǎng)基中則需要10mg/L的BA才能打破休眠。.用于花藥培養(yǎng)花藥培養(yǎng)的主要目的是誘導(dǎo)花粉發(fā)育成單倍體,可以快速地獲得純 系,縮短育種周期。但實踐表明,小孢子的啟動發(fā)育對
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