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文檔簡介
1、臨床檢驗操縱規(guī)程之楊若古蘭創(chuàng)作第一節(jié) 臨床血液學(xué)檢驗血慣例檢查【標本】抗凝靜脈血(有些儀器也可用末梢血) .【方法】血液細胞主動分析儀測定法 .【試劑】血液細胞主動分析儀配套試劑 .【操作】詳見本人實驗室血液細胞主動分析儀使用手冊 .【附注】.血慣例包含白細胞計數(shù)及分類、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細胞比積、血小板計數(shù)等項目 .這些項目亦有響應(yīng)的手工方法,詳見有關(guān)材料 . 半主動及全主動血液細胞分析儀從設(shè)計上均請求用抗凝靜脈血.其長處為:1)靜脈血能精確地反映病人實際情況,反復(fù)性好;2)利于耽誤儀器的使用壽命;3)解決了采血盤的交叉感染成績等.3.血細胞計數(shù)利用EDTA K2:為抗凝劑(EDT
2、A K2 2H2。1.52.2mg可抗凝1ml血). 貯血容器應(yīng)選用有蓋塑料管.抗凝血收集后在室溫中儲存應(yīng)不超出6h;如需建造血涂片應(yīng)在 2h內(nèi)完成.測定前必須將EDTA K2抗凝血充分混勻.血細胞分析儀測定最適溫度為1822C,低于15c或高于30C,均可使細胞體積發(fā)生改變,影響各參數(shù)的結(jié)果. 血細胞分析儀用于白細胞分類只能當作一種過篩手段,當白細胞、紅細胞、血紅蛋白和血小板的任何一項有明顯升高或降低;白細胞分類由現(xiàn)異常結(jié)果(兩頭細胞群百分率A8.0%);紅細胞、白細胞和血小板的任何一個直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況,須用顯微鏡檢查及分類 .嗜酸性粒細胞直接計數(shù)【標本】末梢血或抗凝靜脈血.【方法】
3、直接計數(shù)法 .【試劑】Hinkelmann 液;乙醇 -伊紅濃縮液;伊紅 -丙酮濃縮液.【操作】1小試管中加濃縮液0.38ml.常法取末梢血20ul,加入管內(nèi)混勻,待紅細胞溶解后兩側(cè)充池.靜置35min,用低倍鏡(須要時用高倍鏡)鏡下計數(shù)10個大方格內(nèi)嗜酸性粒細胞數(shù).總數(shù)x 20X 106=嗜酸性粒細胞/L.附注】血液濃縮后應(yīng)于1h 內(nèi)計數(shù)終了 .充池前要充分混勻,但又不宜用力過猛 .住院病人收集標本時間力求統(tǒng)一,以避免受日間生理變更的影響 .紅細胞沉降率測定【標本】 TOC o 1-5 h z 抗凝靜脈血.【方法】魏氏法 .【試劑】109mmol/L 枸櫞酸鈉溶液.【操作】1.3mmX 10
4、0mm試管1支,在2ml容量處刻上記號,加抗凝劑0.4ml. 靜脈采血后,取下針頭,加血至刻度,扭轉(zhuǎn)混合.用血沉管(300mmx 2.5mm)汲取上述混勻血液至0刻度處,拭去管外附著的血液,將管垂豎立在血沉架上.記時,室溫中靜置 1h,觀察血漿高度,以紅細胞下沉的毫米數(shù)陳述之 .【附注】.紅細胞在單位時間內(nèi)下沉的速度與血漿蛋白的量與質(zhì),血漿中脂類的量和質(zhì),紅細胞的大小與數(shù)量,是否成串錢相聚和血沉管的內(nèi)徑、清潔度、放置地位是否垂直,室溫高低等身分都有關(guān)系 . 標本收集時應(yīng)空腹. 血液和抗凝劑的比例要精確 .血沉管內(nèi)徑要尺度(2.5mm),放置要垂直. TOC o 1-5 h z 做血沉的標本要在
5、收集后3h 內(nèi)測定,并充分混勻.室溫過低、過高和貧血時,對結(jié)果有影響.為此,血沉應(yīng)盡量放在1825c室溫下測定.室溫過高時血沉加快,可以按溫度系數(shù)校訂.室溫過低時血沉減慢,沒法校訂.網(wǎng)織紅細胞計數(shù)【標本】末梢血或抗凝靜脈血.【方法】百分計數(shù)法.【試劑】10g/L 煌焦油藍生理鹽水溶液或 10g/L 煌焦油藍 ACD 溶液 .【操作】.于小試管中滴加1 滴煌焦油藍生理鹽水溶液或煌焦油藍ACD 溶液 . 加入末梢血或靜脈血2 滴于上述試管中,混勻 .靜置1520min后,取用1滴制成薄片. 油鏡下檢查1000 個紅細胞中網(wǎng)織紅細胞數(shù),以百分率或絕對值陳述.【附注】.活體染色時間不克不及過短,室溫低
6、時,放37溫箱. 網(wǎng)織紅細胞也可用 Miller 窺盤計數(shù)法、熒光染色或流式細胞儀計數(shù)嗜堿性點彩紅細胞計數(shù)【標本】末梢血 .【方法】百分計數(shù)法 .【試劑】. 甲醇;.堿性亞甲基藍染液(保管 23周).【操作】.按常法制成薄血片,天然干燥后,用甲醇固定3min.用堿性亞甲基藍染液染色12min,水洗待干. 用油鏡計數(shù)1000個紅細胞中嗜堿性點彩紅細胞數(shù),以百分率陳述【附注】用堿性亞甲基藍染液染色后,紅細胞呈淺藍綠色,嗜堿性點彩呈深藍色 .也可用瑞氏染色,嗜堿性點彩呈藍黑色.因為點彩紅細胞分布不勻,須要時擴大計數(shù)紅細胞數(shù).第二節(jié) 體液及排泄物檢查尿液檢驗?zāi)驊T例檢查【標本】新穎尿液 .【方法】化學(xué)試
7、帶法.【試劑】各型號尿液化學(xué)分析儀配套試帶 .【操作】詳見本人實驗室的尿液化學(xué)分析儀使用手冊 .【附注】尿慣例檢查使用尿液化學(xué)分析儀,目前能進行810項檢測( PH 、蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸 TOC o 1-5 h z 鹽、比重、白細胞) .這些項目亦有響應(yīng)的手工方法,詳見有關(guān)材料.必須了解所用試帶各膜塊留意事項、藥物干擾.要留意尿液化學(xué)分析儀測定結(jié)果與手工法的差別,須要時用手工法復(fù)查 .尿液化學(xué)分析儀檢測僅是一個過篩手段,當?shù)鞍?、隱血、白細胞等出現(xiàn)異常結(jié)果(如尿蛋白“”或以上)時,應(yīng)進行鏡檢.尿液色彩、透明度等普通性狀異常時也應(yīng)陳述.本一周氏(Bence-Jon
8、eS蛋白定性檢查【標本】新穎尿液 .【方法】熱沉淀反應(yīng)法 .【試劑】200g/L 磺基水楊酸溶液; 0.1) .操作】1.先將尿液用磺基水楊酸法作蛋白定性檢查,如呈陰性反應(yīng),則可認為尿液標本中本周氏蛋白陰性.取透明尿液4ml 于試管中,再加入醋酸鹽緩沖液1ml ,混勻后,放置 56水浴中15 分鐘.如有渾濁或出現(xiàn)沉淀,再將試管放入沸水中,煮沸 3 分鐘,觀察試管中渾濁或沉淀的變更,如渾濁變清、渾濁減弱或沉淀減少,均提示本-周氏蛋白陽性.若煮沸后,渾濁添加或沉淀增多,標明此尿液中還有其它蛋白質(zhì),此時應(yīng)將試管從沸水中取出,立即過濾 .如濾液開始透明,溫度降低后渾濁,再煮沸時又透明,提示本-周氏蛋白
9、為陽性.【附注】過多的本-周氏蛋白,在90以上不容易完整溶解,故需與對看管比較,也可將尿液濃縮后再測 .煮沸過濾除去尿中白、球蛋白時,動作要敏捷,并需堅持高溫,否則本 - 周氏蛋白也會濾去 .尿乳糜定性檢查【標本】 TOC o 1-5 h z 新穎尿液.【試劑】. 乙醚(AR);.蘇丹in醋酸乙醇染色液或猩紅染色液.【操作】.取尿510ml,加乙醍23ml,混合振搖后,使脂肪溶于乙醍.靜置數(shù)分鐘后, 2000r/min 離心 5min.汲取乙醍與尿液的界面層涂片,加蘇丹田醋酸乙醇染色液或猩紅染色液 1 滴 . 鏡檢觀察是否有紅色脂肪小滴.【附注】.尿液中加少量飽和氫氧化鈉,再加乙醚,有助于澄清
10、 .將分離的乙醍層隔水蒸干,若留有油狀沉淀,也可加蘇丹田,鏡檢證明有沒有脂肪小滴.尿膽色素原定性試驗【標 本 】新穎尿液 .【試劑】對二甲氨基苯甲醛試劑;飽和醋酸鈉溶液;氯仿;正丁醇 .【操作】.在試管中,加入尿標本2ml及對二甲氨基苯甲醛試劑2ml,混合.立即加飽和醋酸鈉溶液4ml,混合,加氯仿 3ml,振搖混合后,上層水溶液呈紅色者為陽性反應(yīng) . 陽性結(jié)果利用下法證明:如尿膽原含量多,用一次氯仿不克不及完整抽提尿膽原,應(yīng)多次用氯仿抽提,直至氯仿層呈淡粉紅色或無色為止,再觀察上層水溶液色澤.如上層水溶液為紅色時,再加正丁醇4ml抽提,如水溶液仍呈紅色則證明尿中膽色素元為陽性 .附注】.醋酸鈉
11、溶液必須為飽和液.當尿膽色素原濃度太高時,應(yīng)將尿標本濃縮25100倍. 尿液必須新穎,不克不及久置.尿苯丙酮酸定性試驗【標本】新穎尿液 .【方法】三氯化鐵法 .【試劑】100g/L 三氯化鐵液;磷酸鹽沉淀劑 .【操作】.尿液4ml加磷酸鹽沉淀劑1ml,混勻,靜置3min,如由現(xiàn)沉淀,可用濾紙過濾或離心除去.濾液中加入濃鹽酸 23滴和100g/L三氯化鐵溶液23滴,每加1 滴立即觀察色彩變更.以尿液顯藍綠色并持續(xù)24min ,為陽性 .【附注】.尿中若含酚類藥物(如水楊酸制劑)及氯丙嗪,也可與氯化鐵結(jié)合顯色,試驗前應(yīng)停用此類藥物.膽紅素也可形成假陽性.小兒出生后6 周內(nèi)不容易查出.故于出生6 周
12、后檢查為好.大多數(shù)苯丙酮尿癥患者的尿液可由現(xiàn)陽性.但約1/41/2病例可能會漏檢. 亦可采取 2, 4-二硝基苯肼法.尿沉渣檢查【標本】新穎尿液(最好收集清晨中段尿) .【方法】顯微鏡檢查法 .【操作】. 取刻度離心管,倒入混合后的新穎尿液10ml, 1500r/min 離心 5min. 棄去上層清液,留下0.2ml 沉渣,輕搖離心管,使尿沉渣有構(gòu)成分充分混勻 .取尿沉渣0.02ml,滴在載玻片上,用 18mm x 18mm的蓋玻片覆蓋. TOC o 1-5 h z .鏡檢觀察,用10X 10鏡頭,觀察其中有構(gòu)成分的全貌及管型用10X 40鏡頭觀察鑒定細胞成分及計算數(shù)量,應(yīng)觀察 10個視野所見
13、最低和最高值,記錄結(jié)果.管型用高倍鏡鑒定,但計數(shù)數(shù)量按低倍鏡觀察20 個視野,算出一個視野的平均值,記錄結(jié)果.尿結(jié)晶和鹽類數(shù)量以每一高倍視野、 2 、3 、4 陳述.【附注】清晨空腹第一次尿(普通情況應(yīng)收集中段尿),應(yīng)在1h 內(nèi)送檢 .見到各種上皮細胞也應(yīng)陳述,陳述方式參照白細胞.亦可采取染色尿沉渣鏡檢.尿沉渣定量檢查【標本】新穎晨尿 .附注】方法】一小時尿沉渣計數(shù)法.【操作】. 標本收集:患者先排尿棄去,精確收集3h 尿液于干燥容器內(nèi)送檢(標本留取時間 5:308:30).精確測量3h尿量,充分混合.取混勻尿液10ml,置刻度離心管中,1500r/min離心5min,用吸管吸棄上層尿液9ml
14、,留下1ml,充分混勻汲取混勻尿液1 滴,注于血細胞計數(shù)板內(nèi).細胞共數(shù)10 個大方格,管型共數(shù) 20 個大方格.終極計算出紅細胞/h 、白細胞 /h 、管型 /h.【附注】尿液應(yīng)新穎, PH 應(yīng)在 6 以下 .尿液比重最好在1.026 以上 .如尿液中含多量磷酸鹽時,應(yīng)加少量稀醋酸液(切勿加多),使其溶解;含大量尿酸鹽時,應(yīng)加溫使其溶解.亦可采取尿沉渣定量分析板或尿沉渣主動分析儀進行尿沉渣定量檢查,詳見有關(guān)材料.絨毛膜促性腺激素檢測【標本】新穎尿液 .【方法】金標抗體檢測法.【操作】見試劑盒說明書.若質(zhì)控點和測定點均不呈現(xiàn)紅色,暗示試劑失效.糞便檢驗糞便的顯微鏡檢查【標本】新穎糞便 .【方法】
15、直接涂片鏡檢法 .【操作】.潔凈玻片上加等滲鹽水12滴,選擇糞便的不正常部分,或挑取分歧部位的糞便做直接涂片(最好取大玻片,制成涂片后,應(yīng)覆以蓋片 .涂片的厚度以能透過印刷物筆跡為準)檢查. 在涂片中如發(fā)現(xiàn)疑似包囊,則在該涂片上滴加 1 滴碘液,在高倍鏡下細心鑒別,如仍不克不及決定時,可取全量糞便濃縮法檢查 .隱血試驗【標本】新穎糞便 .【方法】免疫學(xué)檢測法 .【操作】取一片潔凈干燥的載玻片,滴加23滴蒸儲水,取糞便少許,調(diào)成均勻混懸液.取糞便隱血試紙條,按說明書操縱,將試紙條的反應(yīng)端浸濕 .在 5min 內(nèi)觀察結(jié)果.以反應(yīng)線及質(zhì)控線均呈藍色帶為陽性.【附注】 TOC o 1-5 h z 若兩
16、條線均不顯色,說明試紙條失效.本法因為間斷性出血或出血在糞便平分布不均等身分,可形成假陰性結(jié)果 .本法因為藥物等緣由,對正凡人檢查有時會得到陽性結(jié)果.亦可采取化學(xué)試帶法、鄰甲聯(lián)苯胺法、愈創(chuàng)木酯法等.收集標本前3日應(yīng)禁食動物性食物及富含葉綠素食物、鐵劑、中藥 .但本法不受動物血紅蛋白的干擾,試驗前不須禁食肉類.糞膽素檢查【標本】新穎糞便 .【方法】氯化高汞煮沸法 .【試劑】飽和氯化高汞溶液.【操作】.于小試管內(nèi)置糞便一小塊,加飽和氯化高汞溶液數(shù)毫升. 將糞塊調(diào)勻,加熱煮沸 3min ,立即觀察色彩反應(yīng) .【附注】.結(jié)果不容易判定時,應(yīng)留意糞便色彩,須要時以鹽水代替試劑做空白對照 . 當糞便顆粒經(jīng)
17、煮沸后如有紅色又有綠色出現(xiàn),說明標本內(nèi)既含糞膽 素又含膽紅素,罕見于腸炎、腹瀉等腦脊液檢驗潘氏(Pandy)球蛋白定性試驗【標本】 TOC o 1-5 h z 新穎腦脊液.【試劑】5%苯酚溶液(棕色瓶內(nèi)保管).【操作】取試劑23ml,置于小試管內(nèi),用毛細滴管滴入腦脊液12滴,襯以黑色布景,立即觀察結(jié)果,陳述陰性或陽性及陽性的程度.細胞計數(shù)【標本】新穎腦脊液.【試劑】細胞計數(shù)板;紅細胞濃縮液;冰乙酸;1%冰乙酸.【操作】1.細胞總數(shù) :( 1)澄清腦脊液:混勻后用滴管直接滴入計數(shù)池,計數(shù)10 個大方格內(nèi)紅、白細胞數(shù),其總和即為每ul 的細胞數(shù).(如細胞較多,可計數(shù)一大格內(nèi)的細胞數(shù)x 10).(
18、2)渾濁或帶血腦脊液:用血紅蛋白吸管汲取混勻的腦脊液20ul,加入含紅細胞濃縮液0.38ml 的小試管內(nèi),混勻后滴入計數(shù)池內(nèi),用低倍鏡計數(shù) 4 個大方格中的細胞總數(shù),再乘以 50 即為每 ul 腦脊液的細胞 總數(shù) .2白細胞數(shù):(1)非血性標本:小試管內(nèi)放入冰乙酸12滴,動彈試管,使內(nèi)壁沾有冰乙酸后傾去之,然后滴加混勻的腦脊液34滴,數(shù)分鐘后,混勻充入計數(shù)池,按細胞總數(shù)操縱中的紅、白細胞計數(shù)法計數(shù).( 2)血性標本:將混勻的腦脊液用1%冰乙酸溶液濃縮后,按細胞總數(shù)操縱中的紅、白細胞計數(shù)法計數(shù),結(jié)果X濃縮倍數(shù)3細胞分類:( 1)直接分類法:白細胞計數(shù)后,將低倍鏡換成高倍鏡,直接在高倍鏡下根據(jù)細胞
19、核的形狀分別計數(shù)單個核細胞(包含淋巴細胞及單核細胞)和多核細胞,應(yīng)數(shù)100 個白細胞,并以百分率暗示.若白細胞少 TOC o 1-5 h z 于 100 個,應(yīng)直接寫出單核、多核細胞的具體數(shù)字.( 2)染色分類法:如直接分類不容易區(qū)分細胞時,可將腦脊液離心沉淀,取沉淀物 2 滴,加正常血清1 滴,推片制成均勻薄膜,置室溫或37溫箱內(nèi)待干,進行瑞氏染色后用油鏡分類.如見有不克不及分類的細胞,應(yīng)另行描述陳述.【附注】腦脊液慣例包含普通性狀檢查、潘氏(Pandy)球蛋白定性試驗及細胞計數(shù) .計數(shù)應(yīng)及時進行.細胞計數(shù)時,應(yīng)留意新型隱球菌與白細胞的區(qū)別計數(shù)池用后,利用 75%乙醇消毒 60min.漿膜腔
20、積液檢查漿膜粘蛋白定性試驗(Rivalta反應(yīng))【標本】新穎漿膜腔積液.【試劑】冰醋酸 .【操作】取100ml量筒,加蒸儲水100ml,滴入冰醋酸 0.1ml (PH35),充分混勻,靜止數(shù)分鐘,將穿刺液靠近量筒液面逐滴輕輕滴下,在黑色布景下,觀察白色霧狀沉淀的發(fā)生及其降低速度等,陳述陰性或陽性及陽性的程度.細胞學(xué)檢查【標本】新穎漿膜腔積液.【操作】細胞總數(shù)及有核細胞計數(shù)方法基本與腦脊液同,漏由液中有核細胞數(shù)量常在100X 106/L以下;滲生液中有核細胞數(shù)量較多,常在500 x 106/L以上.細胞分類:穿刺液應(yīng)在抽出后立即離心,用沉淀物涂片后以瑞氏染色法進行分類須要時制備稍厚涂片,在干燥前
21、放置乙醚乙醇等量混合液中固定30min,用蘇木素-伊紅(HE)或巴氏法染色查找癌細胞.精液檢查精子活動率【標本】新穎精液 .【操 作 】取新穎標本混勻后,在溫熱玻片上用高倍鏡觀察100 個精子,計數(shù)活動精子與不活動精子的比例,計算精子活動的百分率.【附注】如室溫低于10c時,應(yīng)將標本先放入37c溫育510min后鏡檢.精子活力【標本】新穎精液 .【操作】取上述新穎濕片標本,觀察精子的活動力,以0級至IV級陳述.精子計數(shù)【標本】新穎精液 .【試劑】精子濃縮液.【操作】1.于小試管內(nèi)加精子濃縮液0.38ml,吸液化精液20ul,加入濃縮液內(nèi)搖勻 .2. 充分搖勻后,滴入血細胞計數(shù)池內(nèi),靜置12mi
22、n,待精子下沉后,以精子頭部作為基準進行計數(shù)如精子數(shù)少,可計數(shù)2 個大方格內(nèi)精子數(shù),數(shù)得總數(shù)乘 10 萬即為每毫升精液內(nèi)精子數(shù),再換算成X109/L陳述.如精子數(shù)多,可計數(shù)5 個中方格內(nèi)精子數(shù),加 6 個零,即為每ml精液內(nèi)精子數(shù)再換算成x109/L陳述.【附 注】收集精液前應(yīng)防止性生活 37 天,精液宜用清潔干燥之小瓶收集,避孕套內(nèi)的精液不宜收集.收集精液標本后應(yīng)在一小時內(nèi)檢查,冬季應(yīng)留意保溫.由現(xiàn)一次異常結(jié)果,應(yīng)隔一周后復(fù)查,反復(fù)查 23次方能得由比較精確的結(jié)果.如低倍鏡、高倍鏡檢查均無精子,應(yīng)將精液離心沉淀后再涂片檢查,如兩次均無精子,陳述“無精子” .精子形狀觀察【標本】新穎精液 .【
23、試劑】革蘭或瑞氏染液.【操作】革蘭或瑞氏染色后用油鏡觀察,陳述異常精子的百分比 .前列腺液檢查【標本】新穎前列腺液(臨床醫(yī)師作前列腺推拿術(shù)后,收集標本于清潔玻片上,立即送檢) .【操作】肉眼觀:記錄液體色彩、是否混有血液、黏稠度(有沒有膿塊) .濕片鏡檢:高倍鏡下觀察白細胞、紅細胞、卵磷脂小體,其次為上皮細胞、精子、淀粉樣體等,須要時革蘭染色查細菌 .陰道分泌物檢查【標本】陰道分泌物 .【操作】清潔度:取陰道分泌物,用生理鹽水涂片,高倍鏡檢查,根據(jù)所含白細胞(或膿細胞)、上皮細胞、桿菌、球菌的多少,分成IIV度 .滴蟲檢查:在濕片鏡下如見梨形,比白細胞大2 倍,頂端有鞭毛 4根,在2542c溫
24、度下可活動的滴蟲(在寒冷天氣,標本要采納保溫措施),陳述之.霉菌檢查:在濕片高倍鏡下如見卵圓形霉菌孢子,陳述之.痰液檢查顯微鏡檢查【標本】痰液 .【操作】選擇膿樣、干酪樣或帶膿樣血液部分,取1 小塊置玻片上,直接與生理鹽水混合,涂成薄片,加蓋片后輕壓之,用低倍鏡及高倍鏡檢查 .留意有沒有紅細胞、白細胞、上皮細胞、彈力纖維、枯什曼螺旋體、夏科- 雷登結(jié)晶、膽紅素結(jié)晶、硫磺樣顆粒(放線菌塊)、寄生蟲卵(可見蛔蟲卵、肺吸蟲卵)、痢疾阿米巴、真菌孢子、心力衰竭細胞、載碳細胞、癌細胞等.嗜酸性粒細胞檢查【標本】痰液 .【試劑】瑞氏或伊紅- 美藍染色液.【操作】取痰液做直接涂片,干燥后用瑞氏或伊紅 -美藍
25、染色液染色,油鏡下計數(shù) 100個白細胞,陳述嗜酸性粒細胞百分數(shù).第三節(jié) 血栓與止血的檢驗血管壁與內(nèi)皮細胞檢驗出血時間( BT )出血時間檢測是指皮膚受特定條件的內(nèi)傷后,出血自行停止所需的時間.此過程反映皮膚毛細血管與血小板彼此感化,包含血小板粘附,血小板活化和釋放和血小板聚集等反應(yīng) .出血時間“測定器法”自肘前窩凹下二橫指處,經(jīng)慣例消毒后,使刀片由“測定器”內(nèi)刺入皮膚,啟動秒表,每隔半分鐘用干凈濾紙吸干流出的血液,直至出血天然停止,按停秒表,記錄出血時間 .Duke法,自耳垂或指尖取血.【 方法與操縱】見全國臨床檢驗操縱規(guī)程(第二版)留意事項 】測定器法:采納部位應(yīng)保暖,血液應(yīng)主動流出 .因為
26、刺入皮膚的刀片長度和深度均固定,故“測定器法”的結(jié)果較為精確 .濾紙吸干流出血液時,應(yīng)防止與傷口接觸.試驗前 1 周內(nèi)不克不及服用抗血小板藥物,如阿司匹林等,以避免影響結(jié)果 .血小板數(shù)量和功能檢驗血小板計數(shù)和平均血小板體積測定血小板計數(shù):目視計數(shù)法 .【標本】 TOC o 1-5 h z 末梢血或抗凝靜脈血.【 方法與操縱】見全國臨床檢驗操縱規(guī)程(第二版) .【試劑】.草酸銨法濃縮液. 許汝和濃縮液.【附注】血小板濃縮液要清潔.防微粒和細菌凈化.試管和吸管也應(yīng)清潔、干凈.針刺應(yīng)稍深,使血流通暢 .拭去第一滴血后,首先采血作血小板檢 TOC o 1-5 h z 測,動作要快,防止血小板聚集和破壞
27、.采納標本后盡快計數(shù).血液濃縮液充分混勻后,滴入計數(shù)池內(nèi)后,要靜置1015min.室溫高時留意堅持計數(shù)池四周的濕度,以避免水分蒸發(fā) .計數(shù)時光線要適中,留意有折光性的血小板與雜質(zhì)灰塵相區(qū)別,附在血細胞旁邊的血小板也要留意,不要漏掉.血小板計數(shù)儀計數(shù)【標本】末梢血 .【 方法與操縱】使用血小板計數(shù)儀及與其相匹配的濃縮液.操縱詳見儀器使用說明書 .平均血小板體積( MPV )測定【標本】2 或肝素)【 方法與操縱】主動化血細胞計數(shù)儀均可檢測血小板功能檢驗血小板粘附試驗【標本】自靜脈取血1.01.5ml.【方法】.玻珠柱法:1)操縱:見全國臨床檢驗操縱規(guī)程(第二版)2)留意事項:1)取血過程必須順利
28、,把握血液通過玻珠柱的速度,流速太快,粘附率降低,流速太慢會使粘附率增高 . TOC o 1-5 h z 2)玻珠柱為一次性器具,用后即棄去.3)待用玻珠柱應(yīng)置于干燥器中儲存,受潮后粘附率降低. 玻璃濾器法:【標本】自靜脈取血1.5ml.【 方法與操縱】見全國臨床檢驗操縱規(guī)程(第二版) .血小板聚集試驗( PAgT )【標本】自肘靜脈取血4.5ml 注入于含 0.5ml 109mmol/L 枸椽酸鈉的硅化離心管內(nèi),充分混勻 .【試劑】.富含血小板血漿(PRP)及貧含血小板血漿(PPP). 血 小 板 聚 集 引 誘 劑 ADP 、 腎 上 腺 素 、 膠 原 、 瑞 斯 托 霉 素(Risto
29、cetin)等. TOC o 1-5 h z 【 方法與操縱】PAgT 比濁法,按全國臨床檢驗操縱規(guī)程(第二版)步調(diào)操縱.【 留意事項 】血標本中pH6.88.5之間時,可測得最好結(jié)果.pH V 6.4或10.0時,可使聚集按捺或消逝.阿司匹林、潘生丁、肝素、雙噴鼻豆素等可按捺聚集,特別阿司匹林按捺聚集感化時間可持續(xù) 1 周 .采血后標本應(yīng)放在1525 下,切忌冰箱內(nèi)保管,并在3h 內(nèi)作完實驗 .凝血因子檢驗 TOC o 1-5 h z 全血凝固時間檢驗(CT )【標本】靜脈取血 3ml.【 方法與操縱】試管法、硅管法操縱拜見全國臨床檢驗操縱規(guī)程(第二版) .【附注】.靜脈取血要提綱契領(lǐng),盡量
30、減少組織液和空氣混入 . 水浴箱溫度要恒定,過高或過低,可影響結(jié)果.活化部分凝血活酶時間測定( APTT )【標本】自靜脈取血,用 109mmol/L 枸椽酸鈉作 1:9抗凝 .【試劑】市售成套試劑 .【 方法與操縱】按試劑及有關(guān)儀器說明書請求進行.【附注】.標本應(yīng)及時檢測,最遲不超出2h. 分離血漿應(yīng)在3000r/min ,離心 10min.本試驗較試管法全血凝血時間敏感,能檢由因子皿:CV25%輕型血友病 .血漿凝血酶原時間測定( PT ,一期法)【標本】靜脈血1.8ml,用109mmol/L枸椽酸鈉0.2ml抗凝.【試劑】.組織凝血活酶浸出液;液;【 方法與操縱】見全國臨床檢驗操縱規(guī)程(第二版) .【附注】采血后宜在1h 內(nèi)完成,置冰箱4保管,不該超出 4h, -20下可放置 2 周,-70可放置6 個月 .水溫箱控制在37 1,過高過低均影響結(jié)果.簡易凝血活酶生成試驗( STGT )【標本】取全血 0.04ml 加 5ml 蒸餾水
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