2022血小板在肝細胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用（全文）

1、2022血小板在肝細胞癌發(fā)生開展中的作用（全文）肝細胞癌（HCC）是指起源于肝細胞的惡性腫瘤，已經(jīng)成為全世界癌癥相關(guān) 死亡的第三大原因1。近年研究2說明，血小板在肝再生及肝纖維化、HCC的進展中發(fā)揮著重要的作用。血小板不僅參與止血，活化的血小板還能產(chǎn)生細胞因子以及通過復(fù)雜的信號通路與肝細胞及腫瘤微環(huán)境相互作 用，促進腫瘤的發(fā)生與進展。研究發(fā)現(xiàn)，抗血小板治療能減弱肝臟的炎癥 并改善HCC患者的預(yù)后3,阿司匹林等抗血小板藥物也具有抗癌活性, 能通過抑制血小板相關(guān)通路延緩腫瘤的進展，此外，針對血小板與腫瘤 微環(huán)境相關(guān)通路的靶向治療對HCC的防治具有潛在的臨床意義。III近年越來越多的研究5證據(jù)說明,

2、血小板在HCC發(fā)生開展中扮演著重要 的角色。HCC主要發(fā)生在慢性炎癥和肝臟慢性損傷的情況下，血小板及其 衍生物與肝臟微環(huán)境相互作用促進HCC的發(fā)生開展。當(dāng)肝臟發(fā)生器官損 傷或炎癥等病理改變時，血小板聚集在肝臟中并被激活，釋放大量細胞因 子并與肝臟微環(huán)境相互作用，通過增強炎癥反響、免疫抑制、免疫逃逸、 誘導(dǎo)新生血管的形成等方式刺激癌細胞的增殖及轉(zhuǎn)移。另一方面，癌細胞 也能募集和激活血小板，幫助其增殖和轉(zhuǎn)移5（圖1）。作為凝血反響的激活物，血小板不僅參與止血，還能分泌多種細胞因子通 過復(fù)雜的信號通路與腫瘤微環(huán)境相互作用，通過免疫逃逸、免疫抑制、新 生血管的形成促進HCC的進展。在治療方面建巴向治療

3、目前已經(jīng)成為HCC 重要的治療手段。在分子水平及小鼠實驗中發(fā)現(xiàn)，與血小板相關(guān)的多個信 號分子都可以作為HCC治療的靶點。在臨床上，血小板在HCC治療中的 作用需要進一步研究及探討。此外，作為一種廉價、容易測得的指標，通 過監(jiān)測血小板計數(shù)預(yù)測肝癌患者的預(yù)后也具有很重要的臨床意義。因此, 在未來靶向治療中，血小板的作用值得進一步研究和探討。圖1血小板與HCC的關(guān)系注：LSEC ,肝竇內(nèi)皮細胞；HSC,肝星狀細胞。2、血小板促進HCC發(fā)生開展的可能機制血小板作用于腫瘤微環(huán)境中的多種細胞成分促進腫瘤進展腫瘤微環(huán)境由周圍血管、細胞外基質(zhì)、成纖維細胞、淋巴細胞、信號分子、 免疫細胞和炎癥細胞等組成，它是腫

4、瘤生存的細胞環(huán)境。腫瘤微環(huán)境中的各種細胞通過釋放細胞因子、促進腫瘤血管生成、誘導(dǎo)免疫耐受等方式加 速腫瘤微環(huán)境的形成。同時，腫瘤微環(huán)境能夠影響癌細胞的生長和分化6。血小板及其分泌的細胞因子與腫瘤微環(huán)境中的各種成分相互作用，促進腫瘤的進展（圖周* 血小板外泌體 T淋巴綢的*免疫緇胞* HSCTAF中住粒細胞巔腫虐細胞 細胞因子細胞外質(zhì)圖2腫瘤微環(huán)境注：TAF ,腫瘤相關(guān)成纖維細胞。血小板與LSEC相互作用促進HCC的進展。在生理條件下，LSEC調(diào)節(jié)肝 臟血管張力并維持HSC靜止，從而抑制肝內(nèi)血管收縮和纖維化。血小板 能夠分泌多種生長因子如肝細胞生長因子(HGF)及IL-6 ,刺激肝細胞及LSEC

5、再生。在肝損傷的早期階段，血小板被招募至肝臟并且黏附于LSEC上并被活化，活化的血小板導(dǎo)致LSEC窗孔消失并發(fā)生“毛細血管化，失去 其生理作用，促進血管生成和血管收縮，導(dǎo)致HCC的進展。在免疫調(diào)節(jié) 方面，LSEC通過上調(diào)胞間黏附分子1 (ICAM-1)和血管黏附蛋白1(VAP-1) 的表達導(dǎo)致白細胞跨膜遷移，并誘導(dǎo)T淋巴細胞分化，降低其毒性，從而 增加肝細胞的炎癥反響?，F(xiàn)有的臨床證據(jù)和基礎(chǔ)研究7-9均證實血小板及 其衍生物可促進肝再生而肝再生的異?？蓪?dǎo)致肝纖維化和HCC的發(fā)生。 血小板與腫瘤微環(huán)境相互作用，成為HCC進展的積極參與者。然而，肝 纖維化及HCC患者血小板功能的改變目前仍是一個爭議

6、點，需要更多的 研究來解決此爭議。血小板和HSC及肝臟Kupffer細胞相互作用促進HCC的發(fā)生。腫瘤相關(guān) 巨噬細胞能夠分泌IL-6并通過STAT3信號通路促進腫瘤細胞增殖10。近年研究11發(fā)現(xiàn)，血小板能夠產(chǎn)生直接影響HSC活化的細胞因子和趨化 因子，包括血小板源性生長因子(PDGF)、TGF0、TNF、IL-邛、單核細胞趨化因子1等，并通過NF-kB等通路影響HSC的活化。當(dāng)各種因素造成 肝損傷時,HSC在這些細胞因子的刺激下被激活成可收縮的肌成纖維細胞, 產(chǎn)生大量的細胞外基質(zhì)，促進I、in型膠原的轉(zhuǎn)錄12,導(dǎo)致纖維形成、 收縮、基質(zhì)降解和促炎信號傳導(dǎo)，最終使得細胞外基質(zhì)重構(gòu)和纖維化，進 而

7、導(dǎo)致HCC的進展。目前關(guān)于HSC活化的調(diào)節(jié)因子信號分子及相關(guān)調(diào)節(jié) 通路的研究層出不窮，及時更新有關(guān)HSC活化的新靶點、新通路的信息 對于臨床藥物的研發(fā)有重要意義。血小板產(chǎn)生的外泌體是腫瘤微環(huán)境各成分間相互作用的關(guān)鍵載體。近年研 究13說明，外泌體在腫瘤微環(huán)境中作為各類生長因子、細胞因子、酶類 及遺傳物質(zhì)的載體，廣泛參與了腫瘤細胞和腫瘤微環(huán)境間的雙向交流。研 究14發(fā)現(xiàn)，血小板可釋放直徑40 100 nm的外泌體，其內(nèi)容物包括各 類胞質(zhì)、胞膜蛋白和小分子RNA等。血小板產(chǎn)生的外泌體通過刺激巨噬 細胞增加IL-6、IL-邛、IL-10、TNF得細胞因子的分泌，激活STAT3通 路，增加程序性死亡配

8、體(PD-L1)蛋白表達，從而抑制免疫細胞的激活, 導(dǎo)致免疫逃避進而促進HCC的進展15。外泌體還能誘導(dǎo)血管內(nèi)皮生長因 子(VEGF)的產(chǎn)生從而增加血管生成，以利于腫瘤細胞的遷移16。另有研 究17發(fā)現(xiàn)，外泌體可通過TGF0通路激活HSC,促進肝炎和肝纖維化的 發(fā)生。止的卜，外泌體能夠?qū)SC轉(zhuǎn)化成TAF ,促進腫瘤的進展18。由此 可知，血小板主要通過外泌體的形式分泌多種細胞因子，與腫瘤微環(huán)境中 的各種成分相互作用，誘導(dǎo)癌細胞免疫抑制，免疫逃避，并促進腫瘤新生 血管的形成,最終導(dǎo)致HCC的進展。外泌體通過調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境的耐受 度來調(diào)節(jié)免疫反響和腫瘤抑制，說明其在治療HCC中具有作為藥物靶點

9、和載體的潛在可能性，有望在未來為HCC的診斷及治療提供新的依據(jù)。IL*6血小板通過促進腫瘤微環(huán)境中新生血管的生成促進HCC進展(圖3)* Kupffer細胞LSEC興血小板外潴體T淋巴細照免疫細胞 HSCTAF。中性粒細胞：，；腫痔細胞 細胞因子細胞外星質(zhì)圖3血小板與腫瘤微環(huán)境相互作用促進HCC進展缺氧誘導(dǎo)的新生血管的形成是導(dǎo)致HCC進展及轉(zhuǎn)移的重要因素之一19。Chen等20研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤的血管異常是導(dǎo)致腫瘤灌注受限、腫瘤微環(huán) 境缺氧、免疫抑制的重要原因，用抗腫瘤藥物如厄洛替尼使腫瘤血管正常 化，能夠增加免疫治療的療效。在腫瘤微環(huán)境中，血小板通過直接黏附于 血管受損處或以外泌體的形式分泌5-

10、羥色胺(5-HT)、血小板第四因子(PF-4)、TGF0等顆粒內(nèi)容物維持腫瘤血管內(nèi)皮的完整，阻止腫瘤內(nèi)出血,防止腫瘤組織的缺血壞死21。研究22顯示，在HCC患者中,VEGF和HGF的水平顯著升高，腫瘤組織能夠分泌VEGF激活鄰近血管內(nèi)皮細胞上表達的血管內(nèi)皮生長因子受體-2 ,并通過信號分子講羊蛋白配體-4和血管 生成素2等細胞因子的參與啟動腫瘤血管生成23。炎癥反響及中性粒細胞的過度活化可刺激血管的生成，并通過分泌HGF-2 刺激腫瘤的生長24。當(dāng)炎癥導(dǎo)致內(nèi)皮下膠原暴露時，血小板通過一系列 信號通路被激活并釋放一系列細胞因子，其中包括P-選擇素，P-選擇素被 激活后暴露在血小板外表，與內(nèi)皮細

11、胞表達的P-選擇素糖蛋白配體-1相 結(jié)合，從而使血小板與內(nèi)皮細胞相結(jié)合，與此同時分泌細胞因子如PF-4 和血小板堿性蛋白，使得中性粒細胞趨化并黏附在內(nèi)皮細胞外表以及單核 細胞上，刺激血管的生成25。血小板通過釋放PDGF促進HSC的活化，刺激新生血管的生成。研究26 顯示，血小板產(chǎn)生的PDGF0是HSC活化的主要驅(qū)動因素，并且是體內(nèi)合 成細胞外基質(zhì)和肝硬化的關(guān)鍵啟動因子。在低氧條件下PDGF可刺激HSC 在腫瘤微環(huán)境中聚集和增殖，從而造成HSC VEGF-A表達增強，使得HCC 組織中新生血管的形成，促進腫瘤的增殖和轉(zhuǎn)移27。綜合目前研究結(jié)果， 可以得知血小板可分泌多種細胞因子通過復(fù)雜的信號通

12、路促進新生血管 的生成，血小板及其衍生物還能與中性粒細胞及HSC相互作用，共同促 進腫瘤新生血管的生成促進腫瘤進展。2.3 血小板活化后通過“免疫逃逸介導(dǎo)HCC進展及轉(zhuǎn)移有相關(guān)研究28結(jié)果顯示血小板分泌的TGF0作為一種免疫抑制因子使得 腫瘤微環(huán)境維持充分的免疫抑制狀態(tài)，如果用化療藥物如NO或紫杉醇特 異性阻斷血小板與腫瘤細胞的相互作用能夠抑制腫瘤上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的過 程，防止血小板黏附于腫瘤組織周圍，并抑制血小板和腫瘤組織分泌TGF p,從而逆轉(zhuǎn)腫瘤微環(huán)境中免疫抑制狀態(tài)。由此可知，以保護癌細胞免受 免疫系統(tǒng)攻擊的方式改變了微環(huán)境，是導(dǎo)致免疫治療藥物失敗的主要原因。 因此，有效抑制TGF0的成熟

13、或功能將為癌癥治療開辟新的途徑。血小板來源的主要組織相容性復(fù)合物I存在自身抗原，不會誘導(dǎo)免疫細胞 對轉(zhuǎn)移腫瘤細胞的反響，而血小板來源的人類白細胞抗原A變異株 -2(H LA-A*02)能夠從血小板轉(zhuǎn)移到腫瘤細胞外表，通過表達主要組織相容 性復(fù)合物I類分子介導(dǎo)腫瘤細胞的免疫逃逸，從而抑制自然殺傷細胞驅(qū) 動的抗腫瘤免疫29。其次，血小板細胞膜上表達多種蛋白質(zhì)，如P-選擇 素、血小板糖蛋白等，這些蛋白質(zhì)能使血小板與癌細胞凝聚在一起并形成 轉(zhuǎn)移位點，使得癌細胞黏附于血管壁。被癌細胞激活的血小板釋放ATP, 并通過Gq/GII信號通路提高細胞內(nèi)的鈣離子水平,再激活蛋白激酶C提 高血管內(nèi)皮屏障的通透性使得

14、癌細胞透過血管壁在血管外遷移30。綜上 可知，血小板外表的糖蛋白及其分泌的細胞因子能通過抑制免疫、增強趨 化、提高血管內(nèi)皮通透性等途徑促進癌細胞的遷移，促進HCC的進展。3抗血小板治療在HCC靶向治療方面的可能性抑制血小板相關(guān)受體及通路可抑制腫瘤進展3。在腫瘤早期階段，血小板 來源的RNA可以檢測包括HCC在內(nèi)的多種癌細胞，因此血小板可以作為 潛在的生物標志物來預(yù)測癌癥31。德國科學(xué)家研究32發(fā)現(xiàn)，血小板膜 糖蛋白IV是腫瘤血管完整性的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑，抑制該靶點可增大腫瘤血管的 通透性使其發(fā)生大出血，并且還可以提升腫瘤血管內(nèi)的化療藥物濃度到達 治療效果。因此基于對血小板功能的開發(fā)可作為抗腫瘤策略的

15、基礎(chǔ)。哈佛 大學(xué)某團隊研究33顯示，去除外部脂質(zhì)膜和內(nèi)部成分的血小板能夠完全 阻止癌細胞侵入的過程，這說明血小板可以阻止新腫瘤的形成。此外，血 小板糖蛋白I ba(Gp I ba)抗體也是HCC治療的潛在靶點。Gp I ba是 HCC發(fā)生的一種介質(zhì)，主要通過與Kupffer細胞的相互作用參與HCC的 發(fā)生。小鼠實驗34發(fā)現(xiàn)Gp I ba抗體治療HCC自發(fā)性出血率較低，抑制 血小板Gp I b媛體治療HCC的潛力值得關(guān)注。綜上可知，這些發(fā)現(xiàn)在分 子和臨床水平均驗證了抗血小板治療抗腫瘤的可行性，開啟了腫瘤治療的 新時代，同時抗血小板藥物也成為了治療腫瘤的重要手段，但其臨床有效 性和平安性仍值得進一

16、步探索和研究。在血小板作為標志物預(yù)測癌癥方面, 由于血小板活化會影響分析結(jié)果，因此建立穩(wěn)定的純化血小板方法有助于 使得血小板成為可信的癌癥生物標志物。腫瘤微環(huán)境已成為抗癌治療的重要靶點35。TAF作為主要靶點之一用于 HCC的治療，可通過干擾促腫瘤信號抑制腫瘤的進展36。成纖維細胞活 化蛋白作為TAF的特異性標志物，其介導(dǎo)的信號成纖維細胞活化蛋白 -CCI2有可能成為腫瘤治療的靶點37。此外，在腫瘤生長過程中產(chǎn)生的 細胞外基質(zhì)分子的某些水解片段，也具有強大的信號特性，可作為治療靶 點調(diào)節(jié)腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移38。與此同時，使用抗VEGF分子靶向藥物改 善腫瘤血管狀態(tài)和抗PD-1/PD-L1免疫抑制

17、劑在理論上具有協(xié)同抗癌作 用39。目前針對腫瘤微環(huán)境的靶向治療已取得了重大進展，但尚無改善 臨床結(jié)局的治療方案，因此更好的結(jié)合基質(zhì)耗竭和免疫調(diào)節(jié)機制研究多種 靶向治療方法來延長癌癥患者生存期是非常有必要的。LSEC衍生的血管分泌因子及HSC是HCC治療的潛在靶點。Winkler 等40研究發(fā)現(xiàn),LSEC GATA4的缺失會通過下調(diào)Wnt通路導(dǎo)致肝再生受 損，并通過復(fù)雜的信號通路激活HSC,導(dǎo)致LSEC的血管化。因此，可 通過阻止血管分泌信號如PDGFB來控制肝纖維化和再生，以 GATA4/MYC/PDGFB/PDGFR0軸為靶點的治療為肝纖維化和HCC的預(yù) 防提供了一種可能的策略。止矽卜，LSEC毛細血管化是觸發(fā)HSC激活、肝 纖維化和炎癥的早期病理事件41。骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)9是一種由 HSC產(chǎn)生的旁分泌因子42 , BMP9基因敲除小鼠中LSEC特異性轉(zhuǎn)錄因 子GATA4表達下降,同時發(fā)