方劑學實驗范例

1、方劑學實驗范例1序言方劑實驗課，可提高學生的現(xiàn)代化意識、創(chuàng)新意識，并可培養(yǎng)其科研能力與動手能力，是適應時代發(fā)展而培養(yǎng)現(xiàn)代型中醫(yī)人才的需要。為了配合方劑實驗課，使學生初步了解實驗過程，我們拍攝了部分方劑實驗觀察的視聽教材，以供使用。麻黃湯與桂枝湯發(fā)汗作用的比較 實驗目的 麻黃湯、桂枝湯均為發(fā)汗解表劑，麻黃湯主要用于外感風寒引起的太陽表實證，桂枝湯主要用于外感風寒引起的太陽表虛證。兩者皆能發(fā)汗，但有強弱之分，通過麻黃湯、桂枝湯在發(fā)汗作用方面的比較，認識麻黃湯為發(fā)汗之峻劑，從而在臨床上能更好地選擇應用二方。 麻黃湯與桂枝湯發(fā)汗作用的比較 實驗器材 藥物：麻黃湯：麻黃50g、桂枝30g、杏仁30g、炙

2、甘草30g；桂枝湯：桂枝50g、芍藥50g、生姜45g、炙甘草30g、大棗70g；制劑制備：洗凈藥材，煎煮三次，合并煎液，然后濾紙過濾。制劑濃縮為50的煎液，pH值為67；生理鹽水適量；動物：小白鼠；實驗用品：注射器(1ml)、針頭(5號)、臺式天平、鼠籠。麻黃湯與桂枝湯發(fā)汗作用的比較 實驗方法 取小白鼠30只，隨機分為麻黃湯組、桂枝湯組、生理鹽水組，每組10只。分別給小白鼠腹腔注射025ml10g的藥液或生理鹽水。 給藥后20分鐘，觀察三組小白鼠出汗情況。麻黃湯與桂枝湯發(fā)汗作用的比較 實驗結果小青龍湯平喘作用的觀察 實驗目的 小青龍湯為辛溫解表之劑，又為平喘之良方，本實驗主要觀察該方的平喘作

3、用。用組織胺噴霧致敏，引起豚鼠哮喘，觀察小青龍湯的平喘作用。小青龍湯平喘作用的觀察 實驗器材 200g左右的豚鼠若干只、噴霧玻璃鐘罩(直徑約20-25cm，高20cm)、噴霧器(也可用空氣壓縮機代用、但要加測壓器以檢測進氣的壓力)、秒表，04磷酸組織胺溶液(即40mg磷酸組織胺加水10ml)、注射器(10ml、5ml)、生理鹽水、玻璃噴霧頭一只；小青龍湯制劑：每ml含1g生藥：麻黃10g、芍藥10g、五味子10g、半夏10g、干姜10g、炙甘草10g、細辛10g、桂枝10g；先加水600ml煎至120ml左右，去渣，加70酒精100ml，沉淀24小時，次日把沉淀后藥汁經(jīng)抽濾瓶抽濾后放在60恒溫

4、水浴鍋中蒸發(fā)濃縮至80ml。小青龍湯平喘作用的觀察 實驗方法 實驗前l(fā)天，先作初步篩選，將豚鼠逐一放在玻璃鐘罩內，在恒溫下噴入04磷酸組織胺液，持續(xù)噴60秒，然后密切觀察豚鼠反應，若在25分鐘內抽搐跌倒，表明該豚鼠對磷酸組織胺敏感，可以選用；反之。若超過25分鐘不跌倒則為不敏感，不予選用；每次實驗都用豚鼠2只，分別涂上不同顏色作標記，然后分別腹腔注射小青龍湯15ml和生理鹽水15ml，半小時后放入鐘罩內并噴入組織胺1分鐘，觀察二組豚鼠引喘反應。小青龍湯平喘作用的觀察 實驗結果大承氣湯對小白鼠胃腸蠕動作用的觀察 實驗目的 大承氣湯是峻下熱結的主方，適用于以“痞、滿、燥、實”等癥狀為主的陽明腑實證

5、。本實驗通過測定10炭末的大承氣湯在胃腸道內的移動速度，觀察此方對胃腸道蠕動功能的影響。大承氣湯對小白鼠胃腸蠕動作用的觀察 實驗器材 藥物：大承氣湯：大黃30g、芒硝l0g、枳實20g、厚樸20g；制劑制備：將大承氣湯水煎液配制成10炭末的大承氣湯藥液，10炭末生理鹽水混懸液適量；動物：小白鼠；實驗用品：灌胃器、尺子、解剖器械、天平。大承氣湯對小白鼠胃腸蠕動作用的觀察 實驗方法 取空腹24小時的小白鼠10只(1822g)分為二組，稱重、編號；灌胃：大承氣湯藥液和生理鹽水混懸液用量均為02ml10g，每灌1只，記錄下時間；20分鐘后，處死小白鼠，打開腹腔，取出腸管，分離腸系膜，將腸管拉成直線，以

6、幽門為起點，量出炭末移動距離和小腸的總長度；計算每只小白鼠炭末在腸內移動的距離占小腸全長的百分率為： 碳末移動的距離 100% 小腸的總長度大承氣湯對小白鼠胃腸蠕動作用的觀察 實驗結果 大承氣湯對小白鼠胃腸蠕動作用的觀察 實驗結果 十棗湯對家兔腸管蠕動的影響 實驗目的 十棗湯具有攻逐水飲的作用，通過觀察十棗湯對腸管蠕動的影響，以探討其瀉下攻逐的作用。十棗湯對家兔腸管蠕動的影響 實驗器材 動物：家兔1只；藥物：芫花、甘遂、大戟、大棗制成100濃度十棗湯煎液；實驗用品：麥氏浴槽、恒溫水浴箱、二導生理記錄儀、萬能杠桿、溫度計、滴管、燒杯、臺氏液。 十棗湯對家兔腸管蠕動的影響 實驗方法 先裝好一套麥氏

7、浴槽，浴槽內盛38臺氏液，將充滿空氣的球胎經(jīng)由橡皮管連至麥氏浴槽乙型通氣管上，調節(jié)橡皮管上的螺絲皮管夾，使氣泡一個一個地不斷地通至浴槽，以供氧氣；用木錘猛擊兔頭部，使其昏迷后，剖開腹腔，在靠十二指腸附近，取出一段3-4cm長的小腸，迅速將該段小腸一端的一結扎線結于乙型通氣管彎頭上，小腸另一端的結扎線系于杠桿上； 十棗湯對家兔腸管蠕動的影響 實驗方法 將浴槽放在盛水的恒溫水浴箱內，使臺氏液溫度保持在38-40之間；記錄腸段在38-40臺氏液中的運動曲線；待臺氏液穩(wěn)定，描記一段腸段正常運動曲線后滴加100十棗煎液l0ml于浴槽中，觀察腸活動的改變并做好標記。十棗湯對家兔腸管蠕動的影響 實驗結果 實

8、驗完畢后，將結果剪貼在實驗報告紙上并分析之。 銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察 實驗目的 發(fā)熱是外感熱病過程中十分重要的癥狀和體征，通過運用銀翹散、白虎湯、大承氣湯對發(fā)熱動物模型的解熱實驗，分析比較各種方劑的不同解熱作用，增強對銀翹散、白虎湯、大承氣湯的感性認識和實驗操作能力，從而加深對“汗”、“清”、“下”三法的理解，了解其對臨床和科研的指導意義。 銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察 實驗器材 藥物：銀翹散：銀花，連翹，桔梗，薄荷，竹葉，生甘草，荊芥，淡豆豉，牛蒡子，蘆根。白虎湯：石膏，知母，甘草，粳米。大承氣湯：大黃，芒硝，枳實，厚樸。傷寒或副傷寒菌苗及生理鹽水。動物：家兔(每只

9、要求15kg以上)。實驗用品：肛表，嬰兒秤，兔固定架，注射器(1ml、20ml)，酒精棉球，胃管，灌胃開口器，量杯，石蠟油。 銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察 實驗方法 給家兔逐一測體溫。每次取家兔1只，待安靜后將兔臀部抬高，右手拿肛表，將水銀柱甩到35C以下，末端涂石蠟油少許，插入兔肛門，深度5cm，3分鐘后取出讀取體溫度數(shù)； 銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察 實驗方法 用上法選取肛溫在383-396的家兔4只，編號，稱體重，觀察其正常表現(xiàn)，分別給家兔靜脈注射傷寒副傷寒菌苗lmlkg，使之發(fā)熱，待肛溫升高超過1后(約需經(jīng)05-1小時)再分別灌胃給藥，甲兔用100銀翹散煎液20ml

10、kg，乙兔用100白虎湯煎液20mlkg，丙兔用100大承氣湯20mlkg，丁兔用等量生理鹽水。給藥后30、60、120分鐘各測肛溫一次，比較各兔給藥前后肛溫的變化。銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察 注意事項測溫時操作盡量柔和，勿使家兔掙扎，以免引起體溫波動同一兔用同一肛表，測肛溫時將肛溫表水銀柱甩在35以下測量條件要一致家兔擇健康、體重在15kg以上，體溫在383396為宜3小時后，凡肛溫上升08以上的家兔應予剔除，然后按編號分組銀翹散、白虎湯、大承氣湯的退熱作用觀察 實驗結果 四逆加人參湯對離體蛙心收縮的影響 實驗目的 四逆加人參湯具有回陽救逆作用，適用于陽氣暴脫之厥證，本實驗通過對

11、離體蛙心縮的影響觀察，了解其強心作用。 四逆加人參湯對離體蛙心收縮的影響 實驗器材 動物：蟾蜍；藥品：四逆加人參湯：制附子10g、人參10g、干姜10g、炙甘草6g，任氏液適量；實驗用品：二導生理記錄儀、蛙心夾杠桿、蛙心插管、試管夾、線、雙凹夾、鐵支架、蛙手術器械、滴管。 四逆加人參湯對離體蛙心收縮的影響 實驗方法 離體蟾蜍蛙心臟的制備： 取蟾蜍1只，破壞腦和脊髓，暴露心臟，在左側主動脈下穿兩根絲線，結扎右側和左側主動脈上端的絲線，將左側下端絲線打一松結。在左側主動脈結扎線下端，用小剪刀輕輕將主動脈剪一小斜口，將盛有少量任氏液的蛙心插管由此斜口插入動脈，然后將插管稍向后退再轉向心室中央的方向，

12、插入心室腔內，插管是否插入心室，可看插管中的任氏溶液面是否隨心搏而上、下移動。如已進入心室，則將松結的絲線扎緊，固定于蛙心插管的小突起上。 四逆加人參湯對離體蛙心收縮的影響 實驗方法最后將蛙心與插管一同提起，剪斷周圍軟組織后，在靜脈竇部位穿一絲線，并結扎，在結扎線以下剪斷軟組織，摘出心臟。吸出蛙心及插管內血液，并用任氏液灌洗數(shù)次，以防血液凝固，堵塞插管。在蛙心尖部用蛙心夾夾住蛙心尖，夾蛙時注意在舒張期夾。將蛙心夾的線連于二導的換能器，作好描記曲線的準備。 觀察：啟開二導記錄裝置，描記正常蛙心收縮曲線，觀察心跳頻率和強度。將準備好的四逆加人參湯溶液用滴管吸出后加兩滴于插管的任氏液中，觀察蛙心心跳

13、變化，并做好記錄。 四逆加人參湯對離體蛙心收縮的影響 實驗結果 將描記的曲線貼上。獨參湯對小白鼠耐缺氧作用的觀察 實驗目的 獨參湯大補元氣，本實驗通過對小白鼠注射人參藥液和注射生理鹽水作一對照，以觀察在缺氧環(huán)境下抗御能力的差異。 獨參湯對小白鼠耐缺氧作用的觀察 實驗器材 藥物：1：1生曬人參水提液、生理鹽水適量；動物：1820g小白鼠10只；實驗用品：250ml廣口瓶及橡皮塞各10只、注射器、針頭(6號)、秒表、紗布、天平。 獨參湯對小白鼠耐缺氧作用的觀察 實驗方法 將生曬參以1：1濃度水煎至所需量，冷卻待用；取小白鼠10只，分成二組。一組為實驗組，一組為對照組并稱好體重，作好標記；將實驗組小

14、白鼠腹腔注射生曬人參藥液，以025ml/l0g的劑量；對照組注射等量的生理鹽水；待用藥半小時后，將小白鼠放到廣口瓶內，迅速用橡皮塞塞緊瓶口，同時按下秒表；仔細觀察小白鼠窒息致死的時間，并做好記錄。獨參湯對小白鼠耐缺氧作用的觀察 實驗結果 四君子湯對小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響 實驗目的 機體通過酶系統(tǒng)與非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基，后者能攻擊生物膜中的多種不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質過氧化作用，并因此形成脂質過氧化物。脂質過氧化作用不僅把活性氧轉化成活性化學劑，通過鏈式或者鏈式支鏈反應，放大活性氧的作用，因此初始的一個活性氧能導致很多脂類分解產(chǎn)物的形成，這些分解產(chǎn)物中一些是無害的，另一些則能引起細胞代謝

15、功能障礙，甚至死亡。本實驗通過觀察四君子湯對小鼠肝組織勻漿MDA的作用以驗證其功效。四君子湯對小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響 實驗器材 1動物 小鼠，雌雄不限。 2藥物 (1)四君子湯水煎液，1g生藥ml。 (2)1號為10ml溶液，室溫保存，天冷時會凝固每次測試前適當加溫以加 速溶解，直到透明方可應用。 (3)2號試劑為10ml溶液，用時加290ml雙蒸水稀釋。 (4)3號為粉劑，用時加100ml雙蒸水，適當加溫溶解。 (5)4號為標準品，為10nmolml的四氧基丙烷10ml。 3實驗用品 天平、試管、濾紙、可見光分光光度計、恒溫水浴鍋、離心機、勻漿器等。 四君子湯對小鼠肝組織丙二醛(M

16、DA)的影響 實驗方法 1小鼠10只，分為對照組和四君子組，對照組1g生理鹽水02ml10g，四君子組1g黃芪水煎液02ml10g，每日一次，共三天。 2小鼠斷頭處死，取出部分肝組織，用濾紙吸干表面血液，稱重，在冰浴條件下用冰冷的生理鹽水制成10肝勻漿； 3按照以下步驟在試管中依次加入試劑：四君子湯對小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響 實驗方法甲液的配制方法：1號:2號:3號01:3:1乙液的配制方法：1號:2號:雙蒸水01:3:1四君子湯對小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響 實驗方法4以上用旋渦混勻器混勻，沸水浴40分鐘，4000轉/分鐘離心10分鐘，吸取上清液，蒸餾水調零，1cm的杯子532n

17、m處比色。5計算測定管吸光度測定空白管吸光度標準管吸光度標準空白管吸光度 10mol/L=測定樣品中丙二醛含量四君子湯對小鼠肝組織丙二醛(MDA)的影響 實驗結果 將實驗結果填入下表中：四君子湯對老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響 實驗目的 SOD對機體的氧化與抗氧化平衡起著至關重要的作用，此酶能清除超氧陰離子自由基，保護細胞免受損傷，因而SOD的活力與衰老、腫瘤、炎癥、自身免疫、血液、心、腦血管病、腎病、消化系統(tǒng)疾病、輻射等有密切聯(lián)系，對疾病的病因學探討、診斷、治療、術后觀察有著重要的意義?？蓽y血清、血漿、腦脊液、胸腹水、尿液、紅白細胞、各種培養(yǎng)液中的SOD，并可檢測藥物、食品、化妝

18、品中的SOD的活力；借黃嘌呤以及黃嘌呤氧化酶反應系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子自由基，后者氧化羥胺成亞硝酸鹽，在顯色劑的作用下呈紫紅色，而SOD則抑制此反應，根據(jù)抑制率的高低算出SOD的含量。 四君子湯可補中益氣，具有抗衰老的作用，本實驗通過四君子湯對小鼠血清SOD的影響以驗證其抗衰老作用。四君子湯對老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響 實驗器材 1動物 小鼠，雌雄不限。 2藥物 (1)黃芪水煎液，1g生藥ml。 (2)R1一瓶80ml用時對倍稀釋，R2一瓶、R3一瓶、R4一支、09ml，用R199ml稀釋，4保存。 (3)測定試劑的配制：R1：R2：R3=1：01：01,視需要量配制。 (4)R5

19、、R6各一支、為粉劑，用時加雙蒸水100ml溶解后備用，配制后的試劑要避光冷藏保存。 (5)顯色劑的配制：R5：R6：冰醋酸=3：3：2,4保存。 3實驗用品：試管、濾紙、可見光分光光度計、離心機、眼科鑷等。四君子湯對老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響 實驗方法 1小鼠10只，分為對照組和黃四君子組，對照組1g生理鹽水02ml10g，四君子組1g四君子水煎液02ml10g，每日一次，共三天。 2.小鼠摘眼球取血，滴入小試管中，2000rmin離心5分鐘，得血清。 3.按照以下步驟在測定管和對照管中加入試劑：四君子湯對老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響 實驗方法四君子湯對老年小鼠

20、血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響 4、混勻10分鐘后，550nm，1cm的比色杯蒸餾水調零比色。5、計算對照管光密度測定管光密度 3.93（總反應量）對照管光密度 50% 0.03（取樣量）SOD Nu/ml四君子湯對老年小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)的影響 實驗結果將實驗結果填入下表中： 酸棗仁湯的鎮(zhèn)靜作用的觀察實驗目的 酸棗仁湯具有養(yǎng)血安神、清熱除煩作用，適用于失眠之癥，本實驗通過觀察酸棗仁湯對安定引起小鼠睡眠時間的影響，以驗證其方的催眠作用。 酸棗仁湯的鎮(zhèn)靜作用的觀察 實驗器材 動物：20g左右小白鼠6只，分為兩組；藥物：酸棗仁湯：酸棗仁20g、甘草30g、知母3g、茯苓20g、川芎

21、10g，配制成100酸棗仁湯注射液。01安定注射液、生理鹽水適量；實驗器械：2ml注射器2具、針頭、天平、鼠籠。 酸棗仁湯的鎮(zhèn)靜作用的觀察 實驗方法 將二組小鼠均按02mll0g體重的劑量腹腔注入安定注射液，逐一記錄小鼠入睡時間(翻正作用消失)；注射安定10分鐘后給第l組小鼠腹腔注入05mll0g生理鹽水，給第2組小鼠腹腔注射同等劑量的酸棗仁湯注射液；記錄各鼠蘇醒開始爬行的時間，算出各小鼠睡眠的時間。 酸棗仁湯的鎮(zhèn)靜作用的觀察實驗結果 金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察 實驗目的 金鈴子散具有疏肝泄熱，行氣止痛的作用，適用于胸腹脅肋痛、痛經(jīng)等癥。本實驗用熱板法或扭體法了解金鈴子散的鎮(zhèn)痛作用。 金鈴子散鎮(zhèn)痛

22、作用的觀察 實驗器材 動物：小白鼠(18-22g) 雌性1830只；藥物：金鈴子散：金鈴子50g、玄胡索30g,制成100金鈴子散煎液；01咖啡；06冰乙酸；生理鹽水適量。實驗用品：注射器(1ml)、針頭(5號)、熱板鎮(zhèn)痛裝置、鐘罩。 金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察實驗方法 小鼠熱板法：取18-22g雌性小白鼠，先將動物在溫度保持于55的熱板上進行篩選，測定各小白鼠的正常痛覺反應(踢后腿、跳躍后足)時間，共測二次，每次間隔5分鐘，求平均值(以平均值不超過30秒為合格)，然后將各鼠分別腹腔注射生理鹽水025ml只、01鹽酸嗎啡02ml10g、金鈴子散水煎液02ml10g，給藥后第10、20、30以及60

23、分鐘測定痛覺反應時間二次，求平均值。如小白鼠在60秒內無痛反應，立即取出。按60秒計算，將所得的痛覺反應時間，按下列公式計算，算出用藥后各不同時間的痛閾提高百分率。 金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察以痛閾提高百分率作縱坐標，繪出各藥的鎮(zhèn)痛作用時程曲線，加以比較。 痛閾提高百分率用藥后平均反應時間用藥前平均反應時間 用藥前平均反應時間 100% 小鼠扭體法：選用18-22g小鼠，分二組，每組10只，分別注射同劑量的生理鹽水04mll0g、金鈴子散藥液04mll0g，注射后半小時，分別腹腔注射06冰乙酸01mll0g，引起扭體反應，5分鐘后開始記錄20分鐘小鼠的扭體次數(shù)。 實驗組無扭體反應的百分數(shù)對照組無扭

24、體反應的百分數(shù) 鎮(zhèn)痛百分率 對照組扭體反應的動物百分數(shù) 100%金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察實驗結果(1)熱板法鎮(zhèn)痛試驗金鈴子散鎮(zhèn)痛作用的觀察實驗結果 (2)扭體法小鼠鎮(zhèn)痛試驗 木香檳榔丸對離體腸蠕動的影響 實驗目的 觀察木香檳榔丸對腸管平滑肌蠕動的影響，以探討本方藥物瀉下、理氣的機理；學習離體組織實驗操作方法。木香檳榔丸對離體腸蠕動的影響實驗器材 100的木香檳榔丸煎液，麥氏浴槽、恒溫水浴箱、萬能杠桿、球胎、溫度計、滴管、臺氏液、燒杯。 實驗動物 家兔1只。 木香檳榔丸對離體腸蠕動的影響實驗方法 先裝好一套麥氏浴槽，放于恒溫水浴箱內，麥氏浴槽內盛38-40臺氏液。將充滿空氣的球胎經(jīng)由橡皮管至麥氏浴

25、槽乙型通氣管上，調節(jié)橡皮管上的鏍絲皮管夾，使氣泡一個一個地不斷通至浴槽以供氧氣；用木錘猛擊兔的頭部，使其昏迷后，剖開腹腔，在靠十二指腸附近，取出一段3-4cm長的小腸，迅速將該段小腸一端的結扎線結于乙型通氣管彎頭上，小腸另一端的結扎線系于杠桿上； 木香檳榔丸對離體腸蠕動的影響實驗方法 將浴槽放在盛水的恒溫水浴箱內使臺氏液溫度保持在38-40之間。記錄腸段在3040臺氏液中的運動曲線；待臺氏液穩(wěn)定，描記一段腸段正常運動曲線后，滴加100木香檳榔丸溶液10滴于浴槽中，觀察腸段活動的改變并做好標記，然后將預先準備的38左右新鮮臺氏液自接連浴槽底部的側管倒入，原有臺氏液便從另一側管流出。如此更換兩次。

26、木香檳榔丸對離體腸蠕動的影響實驗結果 實驗完畢，將標記結果剪貼在實驗報告紙上，分析該結果。 注 (1)小腸標本制備：取出20-30cm長腸段，置于臺氏液內輕輕漂洗，將腸內容物洗凈后，用35左右臺氏液浸泡待出現(xiàn)較大活動時將其分成數(shù)段，每段長3-4cm備用。 (2)臺氏液的制備：每1000ml蒸餾水中含氯化鈉8g、氯化鉀02g、硫酸鎂026g、磷酸二氫鈉0065g、碳酸氫鈉1g、氯化鈣02g、葡萄糖1g。木香檳榔丸對離體腸蠕動的影響 注意事項 (1)加藥前必須先準備好更換用的38臺氏液。 (2)每次加藥出現(xiàn)效果后，必須立即更換浴槽內的臺氏液，待腸段恢復正?；顒雍笤儆^察下一項目。瘀血證模型與失笑散的

27、活血化瘀作用的觀察 實驗目的 失笑散具有活血祛瘀、散結止痛之功，用于瘀血停滯之證。本實驗通過觀察失笑散對高分子右旋糖酐所致瘀血模型的作用，以驗證其功用。 瘀血證模型與失笑散的活血化瘀作用的觀察實驗器材 動物：家兔(雌雄不分)；藥品：失笑散：五靈脂、蒲黃，制成100失笑散煎液；25烏拉坦溶液、臺氏液、10高分子右旋糖酐溶液、生理鹽水。實驗用品：生物顯微鏡、恒溫灌流槽、兔手術器械一套。 瘀血證模型與失笑散的活血化瘀作用的觀察實驗方法 麻醉、手術：25烏拉坦4mlkg靜脈注射。將兔固定于兔臺上，腹壁剪毛，正中線開腹壁；安置觀察裝置：將灌流槽置于顯微鏡載物臺上、恒溫灌流槽內注入38臺氏液，通入氧氣，恒

28、溫灌流。灌流槽一側與兔一側腹壁切口緣相固定；實驗觀察：a將長度合適、血管豐富的小腸固定于恒溫灌流槽的觀察平臺上，用低倍鏡觀察4-5個視野，詳細填寫下表； b由耳緣靜脈快速注射10高分子右旋糖酐75mlkg，5分鐘后觀察各項指標有無變化，以后5分鐘觀察一次各項指標變化，并將其結果詳細填表； c血瘀形成后，立即由耳緣靜脈注射100失笑散注射液2mlkg，5分鐘后觀察各項指標有無變化，20分鐘后各項指標變化不顯著可酌情加量。 瘀血證模型與失笑散的活血化瘀作用的觀察實驗結果 瘀血證模型與失笑散的活血化瘀作用的觀察注意事項 （1）每次觀察的視野必須相同，以利對照。 （2）觀察結果中出血即在血管周圍見有紅

29、細胞滲出、泥沙樣流即紅細胞聚面團粒狀流動，血管交叉(橫點)數(shù)則代表了血流通暢的毛細血管網(wǎng)數(shù)。十灰散對小白鼠凝血時間的影響 十灰散屬止血劑，有良好的收斂止血作用，常用于咯血、衄血、崩漏、尿血等多種出血癥。本方縮短凝血時間的作用可能與其抑制纖溶過程，增加血小板數(shù)有關。 實驗目的 用玻片法測定小白鼠凝血時間；觀察十灰散水煎液對小白鼠凝血時間的影響。十灰散對小白鼠凝血時間的影響實驗器材 注射器、載玻片、大頭針、秒表、眼科彎鑷、棉球、鼠籠、天平、十灰散水煎液015g/ml、生理鹽水、苦味酸溶液。實驗動物 小白鼠，體重1822g。 十灰散對小白鼠凝血時間的影響 實驗方法 取小白鼠6只，隨機分為給藥組和對照

30、組，稱重并作標記。給藥組腹腔注射仙鶴草水煎液03ml10g，對照組腹腔注射生理鹽水03ml10g。30分鐘后，用眼科彎鑷迅速摘去一側眼球，即有血液流出。于載玻片的兩端各滴1滴血，血滴直徑5mm，立即用秒表記時。每隔30秒用清潔大頭針自血滴邊緣向里輕輕拔動一次，并觀察有無血絲挑起。從采血開始至挑起血絲止，所用時間即凝血時間，另一滴血最后復驗，記錄凝血時間。十灰散對小白鼠凝血時間的影響實驗結果 注意事項 (1)凝血時間可受室溫等因素的影響，室溫15 左右較好。 (2)每次挑血滴時，不應從各方向多次挑動，以免影響纖維蛋白的形成。牽正散抗驚厥作用實驗觀察 實驗目的 牽正散具有祛風化痰，通絡止痛的作用。

31、本實驗以小鼠為對象，用士的寧復制成小鼠驚厥模型，觀察牽正散延長小鼠驚厥潛伏期和死亡潛伏期的效果。牽正散抗驚厥作用實驗觀察實驗器材 OT注射器、秒表、電子秤、苦味酸、鼠籠、鼠盒、夾子等。藥物制備 50天麻液：先將天麻置于溫水中浸泡12小時，切片，入煎，煎煮1小時過濾取汁，藥渣以60乙醇浸泡18小時，過濾去渣蒸發(fā)乙醇，將水煎汁傾人，濃縮成50的藥液，裝瓶置冷，放冰箱保存?zhèn)溆谩?土的寧注射液：用2mg/ml士的寧注射液加鹽水或蒸餾水稀釋成0.15mg/ml的液體，放冰箱保存?zhèn)溆谩?牽正散抗驚厥作用實驗觀察實驗方法 取小鼠稱重標號，隨機分成牽正散組和生理鹽水組，每組510只。天麻組每鼠腹腔注射天麻液0

32、2mgl0g。30分鐘后，兩組小鼠均分別腹腔注射士的寧液01ml10g，比較兩組小鼠驚厥潛伏期和死亡潛伏期時間。牽正散抗驚厥作用實驗觀察實驗結果注驚厥潛伏期：即注射士的寧液畢至產(chǎn)生驚厥時的一段時間。死亡潛伏期：即產(chǎn)生驚厥開始至死亡時的一段時間。鎮(zhèn)肝熄風湯對家兔血壓的影響 實驗目的 鎮(zhèn)肝熄風湯具有鎮(zhèn)肝熄風、滋陰潛陽的作用。適用于肝腎陰虧、肝陽上亢、氣血逆亂之證，本實驗通過觀察鎮(zhèn)肝熄風湯的降低血壓作用，以證實其功用。鎮(zhèn)肝熄風湯對家兔血壓的影響 實驗器材 動物：家兔(雌雄不限)；藥品：鎮(zhèn)肝熄風湯：懷牛膝、代赭石、生龍骨、生牡蠣、龜版、杭芍、玄參、天冬、川楝子、麥芽、茵陳、甘草，制備成100鎮(zhèn)肝熄風湯

33、煎液；25烏拉坦溶液；05肝素；1：1000腎上腺素；實驗用品：兔固定臺、二導生理記錄儀、手術剪刀、手術刀、鑷子、止血鉗、動脈夾、塑料管、注射器(50、l0ml)、針頭、大小燒杯、紗布、線。鎮(zhèn)肝熄風湯對家兔血壓的影響實驗方法 (1)實驗準備 校正二導生理記錄儀。麻醉動物：用25烏拉坦按4mlkg的劑量靜脈麻醉。 (2)手術步驟 固定和剪毛：將麻醉兔仰臥位固定在兔臺上，剪去頸部毛。 切口：由甲狀軟骨開始沿正中線切開皮膚約8-10cm，并切開頸部淺筋膜，露出頸部肌肉。 找出頸總動脈，在頸部一側的胸鎖乳頭肌與胸舌骨肌之間，用止血鉗向深處分開肌肉，即可看到頸動脈，再用小鑷子仔細地剝開頸動脈約4cm長，

34、內側為頸總動脈，外側較粗的神經(jīng)是迷走神經(jīng)和減壓神經(jīng)。插塑料管：將一側頸總動脈用事先穿好的線結扎其遠心端，以另一條線于近心端做一虛結，以備結扎塑料插管之用。 鎮(zhèn)肝熄風湯對家兔血壓的影響實驗方法 在近心端用動脈夾將頸動脈夾閉，阻斷血流。在動脈夾的上方，以小鑷子提起動脈后，用小剪刀逆血流方向將動脈剪一小口，以剪開動脈壁的12為宜，不可剪斷。然后將充滿肝素溶液的塑料管插入動脈內，以事先做好虛結的粗線結扎之。由兔耳緣靜脈注入lml肝素溶液，防止凝血。 調節(jié)好描記裝置后，即可打開動脈夾，血壓波動便可描記在記錄紙上，最后把塑料管按動脈走向固定好，勿使其扭轉或脫套。 (3)觀察項目 觀察正常血壓曲線：啟動描記裝置，描記一段正常血壓曲線，家兔的正常血壓約90mmHg。 在血壓較為平穩(wěn)的基礎上，從耳緣靜脈注入1：1000腎上腺素05-lml，觀察血壓變化。然后耳緣靜脈注射100鎮(zhèn)肝熄風湯煎液6mlkg，觀察血壓的變化情況。 鎮(zhèn)肝熄風湯對家兔血壓的影響實驗結果 正 常 血 壓靜脈注射1：1000腎上腺素0.51ml靜脈注射100%鎮(zhèn)肝熄風湯煎液參麥針升壓作用的觀察 實驗目的 參麥(生脈)針為生脈散的針劑，具有益氣養(yǎng)陰固脫的作用。本實驗通過參麥針對失血性休克家兔血壓的影響，觀察該方的功能。 參麥針升