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1、2023屆 一輪復(fù)習(xí) 人教版 微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用 作業(yè)基礎(chǔ)達(dá)標(biāo)1下列實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的操作措施中,不能獲得較純菌種的是()A土壤樣品滅菌處理后進(jìn)行稀釋涂布分離純化B培養(yǎng)皿、接種工具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌C操作過(guò)程需在酒精燈火焰旁進(jìn)行并在適宜條件下培養(yǎng)D如果是固體培養(yǎng)基,則需把培養(yǎng)皿倒置答案:A2(2022山東泰安一模)養(yǎng)殖池中存在的有毒物質(zhì)主要是氨及亞硝酸,這兩種物質(zhì)可由硝化細(xì)菌吸收利用。在“養(yǎng)殖池底泥中硝化細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中,下列說(shuō)法正確的是()A需要配制添加一定濃度銨鹽的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,以篩選硝化細(xì)菌B應(yīng)對(duì)采集底泥使用的工具進(jìn)行滅菌,全部接種過(guò)程均需在酒精燈火焰旁進(jìn)行C采用平板劃
2、線法進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)時(shí),還需與未接種的空白培養(yǎng)基同時(shí)培養(yǎng)D若空白對(duì)照組上長(zhǎng)出了菌落,需要在實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上減去空白對(duì)照組的菌落數(shù)答案:B3(2022沈陽(yáng)高三模擬)下圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化酵母菌的部分操作步驟,下列說(shuō)法正確的是()A步驟中打開含菌種的試管后需將試管口通過(guò)酒精燈火焰滅菌B步驟中接種環(huán)共需5次灼燒處理C將接種后的圖平板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)無(wú)須倒置D步驟操作時(shí)并不都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行解析:選A。打開含菌種的試管需通過(guò)火焰滅菌,取出菌種后需再次通過(guò)火焰,塞上棉塞才可以,A正確;每次接種前后都要灼燒接種環(huán),因此完成步驟中的5次劃線操作共需灼燒接種環(huán)6次,B錯(cuò)誤;劃線接種結(jié)束后,將平板倒置后
3、放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng),這樣可以防止表面的水分過(guò)快揮發(fā)和防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染,C錯(cuò)誤;步驟操作時(shí)都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,防止被雜菌污染,D錯(cuò)誤。4(2022山東日照一模)實(shí)踐是動(dòng)手和動(dòng)腦的過(guò)程,也是解決實(shí)際問題的過(guò)程。下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的敘述,錯(cuò)誤的是()A需滅菌的試管等玻璃器皿可用牛皮紙包好放入干熱滅菌箱滅菌B倒平板后需要持續(xù)間歇晃動(dòng),以保證固體培養(yǎng)基的表面平整C平板劃線時(shí),每次轉(zhuǎn)換劃線角度后都需要灼燒接種環(huán)再劃線D微生物實(shí)驗(yàn)材料在丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理以免污染環(huán)境答案:B。倒平板時(shí)培養(yǎng)基仍然是液態(tài)的,不需要通過(guò)晃動(dòng)來(lái)保證培養(yǎng)基表面平整,B錯(cuò)誤。5(2022山東聊城開學(xué)檢測(cè))某
4、些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。下列關(guān)于土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)的敘述,正確的是()A分解尿素的細(xì)菌是以尿素的分解產(chǎn)物CO2為碳源的B倒平板時(shí)應(yīng)將打開的培養(yǎng)皿皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C培養(yǎng)基中KH2PO4等的作用之一是作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定D若實(shí)驗(yàn)組菌落平均數(shù)為37個(gè)/平板,空白對(duì)照平板上有3個(gè)菌落,則本組菌落數(shù)的平均值為34個(gè)/平板解析:選C。分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)型細(xì)菌,不能以CO2為碳源,A錯(cuò)誤;倒平板時(shí),正確的做法是用左手拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(1020 mL)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋,B
5、錯(cuò)誤;無(wú)機(jī)鹽可以作為緩沖劑保持細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中pH穩(wěn)定,所以培養(yǎng)基中KH2PO4等的作用之一是作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定,C正確;在完全正確的操作情況下,空白對(duì)照組中不應(yīng)出現(xiàn)菌落,若空白對(duì)照組出現(xiàn)菌落,說(shuō)明操作過(guò)程中存在雜菌污染,屬于實(shí)驗(yàn)失誤,所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均不應(yīng)采用,D錯(cuò)誤。6(2022山東德州一模)尿酸氧化酶能分解尿酸(C5H4H4O3),為獲取尿酸氧化酶高產(chǎn)菌株用以研制治療高尿酸血癥的酶類藥物,科研人員從海洋泥土中取樣后富集培養(yǎng),3天后吸取培養(yǎng)液梯度稀釋到1106,然后接種到固體培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)。挑取單菌落檢測(cè)尿酸氧化酶的酶活性(用每分鐘轉(zhuǎn)化1 mol尿酸所需要的酶量表示),結(jié)果如下表所示。下列
6、分析錯(cuò)誤的是()菌株1234酶活性100501420A.從海洋泥土中取的樣品需在無(wú)菌條件下富集培養(yǎng)B需要在以尿酸為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)C菌株3的酶活性最高,可作為實(shí)驗(yàn)所需的目的菌D分離培養(yǎng)時(shí)采用了平板劃線法進(jìn)行接種解析:選D。為避免雜菌污染,應(yīng)在無(wú)菌條件下富集培養(yǎng),A正確;實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖谦@取尿酸氧化酶高產(chǎn)菌株,故需要在以尿酸為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上分離培養(yǎng),B正確;酶活性用每分鐘轉(zhuǎn)化1 mol尿酸所需要的酶量表示,故所需酶量越少,說(shuō)明酶活性越大,由表可知菌株3的酶活性最高,故其可作為實(shí)驗(yàn)所需的目的菌,C正確;分離培養(yǎng)時(shí)采用了稀釋涂布平板法進(jìn)行接種,D錯(cuò)誤。7防止外來(lái)雜菌的入侵,獲得純凈的
7、培養(yǎng)物,是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述錯(cuò)誤的是()A實(shí)驗(yàn)室里可以用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒B接種環(huán)、接種針等金屬用具,直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌C在實(shí)驗(yàn)室中,切記不可吃東西、喝水,離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)一定要洗手,防止被微生物感染D使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理,以免污染環(huán)境解析:選B。灼燒滅菌應(yīng)該在酒精燈火焰的充分燃燒層(外焰部位)灼燒,B錯(cuò)誤。8.(2022山東青島期末)細(xì)菌性肺炎一般需要注射或口服抗生素進(jìn)行治療。當(dāng)細(xì)菌出現(xiàn)耐藥性時(shí),療效下降。金黃色葡萄球菌(SAU)是細(xì)菌性肺炎的病原體之一。A、B、C、D四種抗生素均可治療SAU引起的肺炎。為選出最佳療效的抗生素,研究者分別將含
8、等劑量抗生素A、B、C、D的四張大小相同的濾紙片a、b、c、d置于SAU均勻分布的平板培養(yǎng)基上,在適宜條件下培養(yǎng)48 h,結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)敘述不正確的是()A可選擇牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,對(duì)SAU進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)B對(duì)實(shí)驗(yàn)使用的培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌,可以采用干熱滅菌的方法CA、B、C、D四種抗生素,抑菌效果最佳的是抗生素DD濾紙片b周圍透明圈中出現(xiàn)一菌落,可能是該菌落中的SAU發(fā)生了基因突變解析:選C。可選擇牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)SAU,A正確;干熱滅菌法適用于玻璃器皿、金屬用具等,B正確;A、B、C、D四種抗生素均可抑制SAU的增殖,所形成的透明圈越大,說(shuō)明抑制效果越強(qiáng),因此抑菌效果最佳的是抗生素A,
9、C錯(cuò)誤;濾紙片b周圍透明圈中出現(xiàn)一菌落,說(shuō)明抗生素不能抑制該菌落的生命活動(dòng),則可能是該菌落中的SAU發(fā)生了基因突變,D正確。9(2022山東濟(jì)寧一模)餐廚廢水含有豐富的糖類、蛋白質(zhì)等有機(jī)物,研究者將三種細(xì)菌單獨(dú)或混合接種于餐廚廢水培養(yǎng)液中,通過(guò)測(cè)定菌懸液細(xì)胞密度(結(jié)果如下表所示)研究三者的關(guān)系,以期為利用餐廚廢水制備復(fù)合菌肥的研究提供依據(jù)。下列敘述錯(cuò)誤的是()組別細(xì)胞密度/ (107cfumL1)菌株對(duì)照組單獨(dú)培養(yǎng)組三種細(xì)菌混合培養(yǎng)組解磷巨大芽孢桿菌08.498.24圓褐固氮菌5.093.35解鉀膠質(zhì)芽孢桿菌2.811.41注:cfumL1指每毫升樣品中培養(yǎng)出的菌落數(shù)。A餐廚廢水中的有機(jī)物為表
10、中細(xì)菌提供碳源、氮源等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B對(duì)照組的培養(yǎng)液為餐廚廢水C可用稀釋涂布平板法計(jì)算不同條件下的活菌數(shù)D由結(jié)果可知,解磷巨大芽孢桿菌的競(jìng)爭(zhēng)能力較強(qiáng)解析:選B。餐廚廢水含有豐富的糖類、蛋白質(zhì)等有機(jī)物,為表中細(xì)菌提供碳源、氮源等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),A正確;對(duì)照組的培養(yǎng)液是經(jīng)過(guò)滅菌處理的餐廚廢水或者無(wú)菌水,B錯(cuò)誤;計(jì)算不同條件下的活菌數(shù),可用稀釋涂布平板法,C正確;三種細(xì)菌混合培養(yǎng)組中,解磷巨大芽孢桿菌的菌落數(shù)最多,說(shuō)明解磷巨大芽孢桿菌的競(jìng)爭(zhēng)能力較強(qiáng),D正確。10下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基配方,請(qǐng)根據(jù)表格和所學(xué)知識(shí)回答下列相關(guān)問題:成分蛋白胨乳糖焦糖K2HPO4指示劑瓊脂含量(g)10.05.05
11、.02.00.212.0將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1 000 mL(1)若根據(jù)用途劃分,該培養(yǎng)基屬于_(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基。若要用上述培養(yǎng)基來(lái)篩選出土壤中的尿素分解菌,培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分必須怎樣更改?_。(2)圖1和圖2是培養(yǎng)大腸桿菌的結(jié)果圖,則獲得圖2效果的接種方法是_。運(yùn)用圖1所示接種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)常常比活菌的實(shí)際數(shù)目少,其原因是_。(3)在微生物培養(yǎng)的過(guò)程中,為防止雜菌污染,需要對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行_;操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_。答案:(1)鑒別將蛋白胨改成尿素(2)平板劃線法當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落(3)滅菌消毒素養(yǎng)提升11(不定項(xiàng))下列
12、有關(guān)“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是()A只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素B將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置,25 恒溫培養(yǎng)12 dC接種時(shí)不能劃破培養(yǎng)基,否則難以達(dá)到分離單菌落的目的D倒置平板可防止培養(yǎng)基被滴落的水珠污染和防止培養(yǎng)基中水分過(guò)快蒸發(fā)答案:ACD12(不定項(xiàng))下表所示為某培養(yǎng)基的配方,下列敘述正確的是()成分含量成分含量NaNO33 gFeSO40.01 gKH2PO41 g葡萄糖30 g瓊脂15 gH2O1 000 mLMgSO47H2O0.5 g青霉素0.1萬(wàn)單位A.根據(jù)物理性質(zhì)劃分,該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B微生物在該培養(yǎng)基表面形成肉眼可見的菌落C根據(jù)培養(yǎng)基
13、的配方可知,該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型D固體培養(yǎng)基中加入少量水即可形成液體培養(yǎng)基解析:選BC。從培養(yǎng)基成分來(lái)看,題表所示的培養(yǎng)基配方中有瓊脂,因此屬于固體培養(yǎng)基,A、D錯(cuò)誤;微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng),形成肉眼可見的菌落,B正確;該培養(yǎng)基中的葡萄糖可作為有機(jī)碳源,因此其培養(yǎng)的微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型,C正確。13(不定項(xiàng))(2022山東濟(jì)寧一模)下圖表示研究人員在實(shí)驗(yàn)室中使用的分批培養(yǎng)細(xì)菌的方法,下列敘述正確的是()A尿素分解菌可利用培養(yǎng)基中的尿素是因?yàn)槟芎铣呻迕窧在酒精燈火焰附近打開皿蓋,用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃35條平行線,灼燒接種環(huán)后再劃線C液體選擇培養(yǎng)基通??捎糜?/p>
14、選擇培養(yǎng),增加目標(biāo)菌種的濃度D將錐形瓶放在搖床上振蕩培養(yǎng)能提高溶氧量和養(yǎng)料的利用率解析:選ACD。尿素分解菌可利用培養(yǎng)基中的尿素是因?yàn)槟芎铣呻迕?,而其他微生物不能合成脲酶,故不能分解尿素,A正確;在酒精燈火焰附近將皿蓋打開一條縫隙,用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃35條平行線,蓋上皿蓋,灼燒接種環(huán),待其冷卻后再劃線,B錯(cuò)誤;液體選擇培養(yǎng)基通常可用于選擇培養(yǎng),增加目標(biāo)菌種的濃度,C正確;將錐形瓶放在搖床上振蕩培養(yǎng)既能提高溶氧量,提高有氧呼吸的速率,又能提高養(yǎng)料的利用率,D正確。14(不定項(xiàng))大腸桿菌是人和動(dòng)物腸道寄生菌,在一定條件下會(huì)引起胃腸道等局部組織感染。檢驗(yàn)水樣中大腸桿菌數(shù)目是否符合生活飲用水衛(wèi)
15、生標(biāo)準(zhǔn),常用濾膜法測(cè)定,其操作流程如下圖所示。大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與伊紅美藍(lán)(EMB培養(yǎng)基的指示劑)反應(yīng),菌落呈黑色。下列對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的分析,錯(cuò)誤的是()A測(cè)定前,濾杯、濾膜和濾瓶均可用干熱滅菌法滅菌處理B過(guò)濾操作要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,防止雜菌污染C將過(guò)濾完的濾膜緊貼在EMB培養(yǎng)基上,完成大腸桿菌的接種操作DEMB培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,只有大腸桿菌能正常生長(zhǎng)并形成黑色菌落解析:選D。干熱滅菌法適用于需要保持干燥的玻璃器皿、金屬用具等的滅菌,對(duì)濾杯、濾膜和濾瓶可用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌;酒精燈火焰附近有一無(wú)菌區(qū)域,在酒精燈火焰附近操作可以避免雜菌污染;由于過(guò)濾完后細(xì)菌黏附在濾膜上,將過(guò)濾完的濾膜緊貼在
16、EMB培養(yǎng)基上,可以將黏附的菌種接種在培養(yǎng)基上;大腸桿菌的代謝產(chǎn)物能與伊紅美藍(lán)反應(yīng),菌落呈黑色,說(shuō)明EMB培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。15(不定項(xiàng))鞣質(zhì)(單寧)是一種具有止血、殺菌等作用的中藥成分,在植物中廣泛分布。為探究鞣質(zhì)對(duì)自然界中生存條件相同的甲、乙、丙三種細(xì)菌的殺傷能力,某科研小組將等量的甲、乙、丙三種細(xì)菌接種到含有適量鞣質(zhì)的完全培養(yǎng)基和不含鞣質(zhì)的完全培養(yǎng)基上,在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間,觀察菌落大小,結(jié)果如下圖所示。下列相關(guān)說(shuō)法正確的是()A實(shí)驗(yàn)中用的培養(yǎng)皿等玻璃器材,可以采用干熱滅菌的方法B由圖中結(jié)果可知,對(duì)鞣質(zhì)的抵抗能力乙細(xì)菌丙細(xì)菌甲細(xì)菌C本實(shí)驗(yàn)還需設(shè)置未接種細(xì)菌的含鞣質(zhì)的完全培
17、養(yǎng)基作為空白對(duì)照D接種前,可以用顯微鏡計(jì)數(shù)法判斷三種細(xì)菌接種量是否相等解析:選ABD。對(duì)培養(yǎng)皿等玻璃器材進(jìn)行滅菌時(shí),可以采用干熱滅菌的方法,干熱滅菌法一般用于耐高溫、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿、金屬用具,A正確;可以觀察對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組中菌落的直徑變化來(lái)衡量三種細(xì)菌對(duì)鞣質(zhì)的抵抗能力,抵抗能力越強(qiáng),菌落直徑變化越小,B正確;為排除雜菌污染,本實(shí)驗(yàn)還需設(shè)置未接種細(xì)菌的不含鞣質(zhì)的完全培養(yǎng)基和未接種細(xì)菌的含鞣質(zhì)的完全培養(yǎng)基作為空白對(duì)照,C錯(cuò)誤;顯微鏡計(jì)數(shù)法和稀釋涂布平板法是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法,接種前,可以用顯微鏡計(jì)數(shù)法判斷三種細(xì)菌接種量是否相等,D正確。16(2020高考江蘇卷)產(chǎn)脂肪酶酵母可
18、用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株,科研人員開展了相關(guān)研究。請(qǐng)回答下列問題:(1)常規(guī)微生物實(shí)驗(yàn)中,下列物品及其滅菌方法錯(cuò)誤的是_(填編號(hào))。編號(hào)物品培養(yǎng)基接種環(huán)培養(yǎng)皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧(2)稱取1.0 g某土壤樣品,轉(zhuǎn)入99 mL無(wú)菌水中,制備成菌懸液,經(jīng)_后,獲得細(xì)胞密度不同的菌懸液。分別取0.1 mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上,其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長(zhǎng)出了46個(gè)酵母菌落,則該樣本中每克土壤約含酵母菌_個(gè)。(3)為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力,對(duì)分離所得的菌株,采用射線輻照進(jìn)行_育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時(shí)間后,按照菌落直徑大小進(jìn)行初篩,選擇直徑_的菌落,純化后獲得A、B兩突變菌株。(4)在處理含油廢水的同時(shí),可獲得單細(xì)胞蛋白,實(shí)現(xiàn)污染物資源化。為評(píng)價(jià)A、B兩菌株的相關(guān)性能,進(jìn)行了培養(yǎng)研究,結(jié)果如下圖所示。據(jù)圖分析,應(yīng)選擇菌株_進(jìn)行后續(xù)相關(guān)研究,理由是_。解析:(1)涂布器一般用灼燒滅菌法或干熱滅菌法進(jìn)行滅菌。(2)99 mL無(wú)菌水中加入1.0 g土壤制成的菌懸液為100 mL,取稀釋10倍后的菌懸液0.1 mL涂布平板,平板上的平均菌落數(shù)為46,則每克土壤約含酵母菌460.110100 4.6105(個(gè))。(3)輻射可以提
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