選修一知識點(diǎn)填空 生物技術(shù)實(shí)踐

1、-. z.專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1 果酒和果醋的制作1果酒制作的原理1人類利用微生物發(fā)酵制作果酒，該過程用到的微生物是，它的代類型是，與異化作用有關(guān)的方程式有。生活狀態(tài)：進(jìn)展發(fā)酵，產(chǎn)生大量。2果酒制作條件傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來源是。酵母菌生長的最適溫度是； PH呈；3紅色葡萄酒呈現(xiàn)顏色的原因是：酒精發(fā)酵過程中，隨著的提高，紅色葡萄皮的進(jìn)入發(fā)酵液，使葡萄酒呈色。4在、的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其它微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。2果醋的制作原理1果醋發(fā)酵菌種是，新代類型。2當(dāng)氧氣和糖源充足時(shí)醋酸菌將糖分解成，當(dāng)糖源缺乏時(shí)醋酸菌將變?yōu)樵僮兂纱姿?，其反響式?操作

2、過程應(yīng)注意的問題1為防止發(fā)酵液被污染，發(fā)酵瓶要用消毒。2葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí)，要留出大約的空間。3制作葡萄酒時(shí)將溫度嚴(yán)格控制在，時(shí)間控制在d左右，可通過對發(fā)酵的情況進(jìn)展及時(shí)的監(jiān)測。4制葡萄醋的過程中，將溫度嚴(yán)格控制在，時(shí)間控制在d，并注意適時(shí)在充氣。4酒精的檢驗(yàn)1檢驗(yàn)試劑：。2反響條件及現(xiàn)象：在條件下，反響呈現(xiàn)。5.制作果酒、果醋的實(shí)驗(yàn)流程挑選葡萄果酒果醋P4旁欄思考題1你認(rèn)為應(yīng)該先洗葡萄還是先除去枝梗，為什么？應(yīng)該先沖洗葡萄，然后再除去枝梗，以防止除去枝梗時(shí)引起葡萄破損，增加被雜菌污染的時(shí)機(jī)。2你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？需要從發(fā)酵制作的過程進(jìn)展全面的考慮，因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊?/p>

3、雜菌。例如：榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈；每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋、不要完全揭開瓶蓋等。3制作葡萄酒時(shí)，為什么要將溫度控制在18250C？制作葡萄醋時(shí)，為什么要將溫度控制在30350C？溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。200C左右最適合酵母菌繁殖，因此需要將溫度控制在其最適溫度圍。而醋酸菌是嗜溫菌，最適生長溫度為30350C，因此要將溫度控制在30350C。4制葡萄醋時(shí)，為什么要適時(shí)通過充氣口充氣？醋酸菌是好氧菌，再將酒精變成醋酸時(shí)需要養(yǎng)的參與，因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。P4:A同學(xué)：每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋，不要完全揭開瓶蓋；制醋時(shí)，再將瓶蓋翻開，蓋上一層紗布，進(jìn)展葡萄醋的發(fā)酵。來防止發(fā)酵液被污

4、染，因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌B同學(xué)：分析果酒和果醋的發(fā)酵裝置中充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過一個(gè)長而彎曲的膠管與瓶身連接？充氣口：是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)展充氣用的；排氣口：是在酒精發(fā)酵時(shí)用來排出二氧化碳的；出料口：是用來取樣的。排氣口要通過一個(gè)長而彎曲的膠管與瓶身連接，其目的是防止空氣中微生物的污染。使用該裝置制酒時(shí)，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制醋時(shí)，應(yīng)將充氣口連接氣泵，輸入氧氣。課題2 腐乳的制作1.制作原理1經(jīng)過微生物的發(fā)酵，豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的和，脂肪被分解成和，因而更利于消化吸收。2腐乳的發(fā)酵有多種微生物參與，如、等，其中起主要作用的是。它是一種絲狀

5、，常見、上。3現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的條件下，將優(yōu)良菌種直接接種在豆腐上，這樣可以防止其他菌種的，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。2.腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程：讓豆腐長出密封腌制。3.實(shí)驗(yàn)考前須知1在豆腐上長出毛霉時(shí)，溫度控制在，自然條件下毛霉的菌種來自空氣中的。2將長滿毛霉的豆腐塊分層加鹽，加鹽量要隨著擺放層數(shù)的加高而，近瓶口的表層要。加鹽的目的是使豆腐塊失水，利于，同時(shí)也能的生長。鹽的濃度過低，；鹽的濃度過高，。3鹵湯中酒精的含量應(yīng)控制在左右，它能微生物的生長，同時(shí)也與豆腐乳獨(dú)特的形成有關(guān)。酒精含量過高，；酒精含量過低，。香辛料可以調(diào)制腐乳的風(fēng)味，同時(shí)也有作用。4瓶口密封時(shí)，最好將瓶口，防止瓶口污染。P6旁欄思

6、考題1.你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識，解釋豆腐長白毛是怎么一回事？豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲，在豆腐中還有匍匐菌絲。2.王致和為什么要撒許多鹽，將長毛的豆腐腌起來？鹽能防止雜菌污染，防止豆腐腐敗。3你能總結(jié)出王致和做腐乳的方法嗎？讓豆腐長出毛霉加鹽腌制密封腌制。P7旁欄思考題1.我們平常吃的豆腐，哪種適合用來做腐乳？含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過高的豆腐制腐乳，不易成形。2.吃腐乳時(shí)，你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的皮。這層皮是怎樣形成的呢？它對人體有害嗎？它的作用是什么？皮是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐外表上生長的菌絲匍匐菌絲，它能形成腐乳的體，使腐乳成形。皮對人體無害

7、。P8練習(xí)1.腌制腐乳時(shí),為什么要隨豆腐層的加高而增加鹽的含量？為什么在接近瓶口的外表要將鹽厚鋪一些？越接近瓶口，雜菌污染的可能性越大，因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量，在接近瓶口的外表，鹽要鋪厚一些，以有效防止雜菌污染。2怎樣用同樣的原料制作出不同風(fēng)味的腐乳？可以不看在酒和料上作變動紅腐乳：又稱紅方，指在后期發(fā)酵的湯料中，配以著色劑紅曲，釀制而成的腐乳。白腐乳：又稱白方，指在后期發(fā)酵過程中，不添加任何著色劑，湯料以黃酒、白酒、香料為主釀制而成的腐乳，在釀制過程中因添加不同的調(diào)味輔料，使其呈現(xiàn)不同的風(fēng)味特色，目前大致包括糟方、油方、霉香、醉方、辣方等品種。青腐乳：又稱青方，俗稱臭豆腐，指在后

8、期發(fā)酵過程中，以低度鹽水為湯料釀制而成的腐乳，具有特有的氣味，外表呈青色。醬腐乳：又稱醬方，指在后期發(fā)酵過程中，以醬曲大豆醬曲、蠶豆醬曲、面醬曲等為主要輔料釀制而成的腐乳。課題3 制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量1乳酸菌代類型為，在情況狂下，將葡萄糖分解為乳酸。在自然界中分布廣泛，在、都有分布。常見的乳酸菌有和兩種，其中常用于生產(chǎn)酸奶。2亞硝酸鹽為，易溶于，在食品生產(chǎn)中用作。一般不會危害人體安康，但當(dāng)人體攝入硝酸鹽總量達(dá)g時(shí)，會引起中毒；當(dāng)攝入總量到達(dá)g時(shí)，會引起死亡。在特定的條件下，如、和的作用下，會轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)亞硝胺，亞硝胺對動物有致畸和致突變作用。3泡菜制作大致流程：原料處理裝壇成品1配制鹽

9、水：清水和鹽的比例為，鹽水后備用。2裝壇：蔬菜裝至?xí)r參加香辛料，裝至?xí)r加鹽水，鹽水要，蓋好壇蓋。壇蓋邊沿水槽中，保證壇環(huán)境。3腌制過程種要注意控制腌制的、和。溫度過高、食鹽用量缺乏10%、過短，容易造成，。4測亞硝酸鹽含量的原理是。將顯色反響后的樣品與濃度的進(jìn)展比擬，可以大致出泡菜中亞硝酸鹽的含量。測定步驟：配定溶液制備樣品處理液P9旁欄思考題：為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶？酸奶的制作依靠的是乳酸菌的發(fā)酵作用。抗生素能夠殺死或抑制乳酸菌的生長，因此含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。P10旁欄思考題：1為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜，不宜多吃腌制蔬菜？有些蔬菜，入小白菜和蘿卜等，含有豐富的

10、硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過久發(fā)生變質(zhì)發(fā)黃、腐爛或者煮熟后存放太久時(shí)，蔬菜中的硝酸鹽會被微生物復(fù)原成亞硝酸鹽，危害人體安康。2為什么泡菜壇有時(shí)會長一層白膜？你認(rèn)為這層白膜是怎么形成的？形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物，泡菜發(fā)酵液營養(yǎng)豐富，其外表氧氣含量也很豐富，適合酵母菌繁殖。P12練習(xí)：2你能總結(jié)果酒、果醋、腐乳、泡菜這幾種發(fā)酵食品在利用微生物的種類和制作原理方面的不同嗎？你能總結(jié)出傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的共同特點(diǎn)嗎？果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精發(fā)酵，果醋的制作利用的是醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)變成醋酸的代，腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶類，泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵。傳

11、統(tǒng)的發(fā)酵技術(shù)都巧妙的利用了天然菌種，都為特定的菌種提供了良好的生存條件，最終的發(fā)酵產(chǎn)物不是單一的組分，而是成分復(fù)雜的混合物。專題知識歸納果酒和果醋的制作果酒和果醋的制作原理果酒和果醋的設(shè)計(jì)制作裝置果酒和果醋的制作過程傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用腐乳的制作 腐乳的制作原理腐乳制作過程的控制條件制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量 泡菜制作原理 泡菜發(fā)酵條件亞硝酸鹽含量的測定專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)可將培養(yǎng)基可以分為和。2培養(yǎng)基一般都含有、四類營養(yǎng)物質(zhì)，另外還需要滿足微生物生長對、以及的要求。3獲得純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。4消毒是指滅菌是指5日常生活中常用的消毒方法是，此外

12、，人們也常使用化學(xué)藥劑進(jìn)展消毒，如用、等。常用的滅菌方法有、，此外，實(shí)驗(yàn)室里還用或進(jìn)展消毒。6制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟是，。7微生物接種的方法中最常用的是和。平板劃線是指。稀釋涂布平板法指。8菌種的保藏：1臨時(shí)保藏：將菌種接種到試管的，在適宜的溫度下培養(yǎng)，長成后，放入冰箱中保藏，以后每36個(gè)月，轉(zhuǎn)移一次新的培養(yǎng)基。缺點(diǎn)是：保存時(shí)間，菌種容易被或產(chǎn)生變異。2長期保存方法：法，放在冷凍箱中保存。P15旁欄思考題：無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？無菌技術(shù)還能有效防止操作者自身被微生物感染。P16旁欄思考題：請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。

13、如果需要，請選擇適宜的方法。1培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿2玻棒、試管、燒瓶和吸管3實(shí)驗(yàn)操作者的雙手1、2需要滅菌；3需要消毒。P17倒平板操作的討論1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50 左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么方法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)展倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基外表的濕度也比擬高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基外表的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。4

14、.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。P18平板劃線操作的討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作完畢時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線完畢后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線完畢后灼燒接種環(huán)，能及

15、時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)展劃線？以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開場劃線？劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開場，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。P19涂布平板操作的討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)展。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)展無菌操作？應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證無菌。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要適宜、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精

16、燈火焰周圍；等等。P20六、課題成果評價(jià)1.培養(yǎng)基的制作是否合格如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12 d后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。2.接種操作是否符合無菌要求如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小根本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn)，則說明接種操作是符合要求的；如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未到達(dá)要求，需要分析原因，再次練習(xí)。3.是否進(jìn)展了及時(shí)細(xì)致的觀察與記錄培養(yǎng)12 h與24 h后的大腸桿菌菌落的大小會有明顯不同，及時(shí)觀察記錄的同學(xué)會發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn)，并能觀察到其他一些細(xì)微的變化。這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣。P20練習(xí)1

17、.提示：可以從微生物生長需要哪些條件的角度來思考。例如，微生物的生長需要水、空氣、適宜的溫度，食品保存可以通過保持枯燥、真空的條件，以及冷藏等方法來阻止微生物的生長。2.提示：可以從這三種培養(yǎng)技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進(jìn)展總結(jié)歸納。例如，這三種培養(yǎng)技術(shù)都需要為培養(yǎng)物提供充足的營養(yǎng)，但無土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無菌的條件，而其他兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無菌條件。3.提示：這是一道開放性的問題，答案并不惟一，重點(diǎn)在于鼓勵(lì)學(xué)生積極參與，從不同的角度思考問題。例如，正是由于證明了微生物不是自發(fā)產(chǎn)生的，微生物學(xué)才可能開展成為一門獨(dú)立的學(xué)科；巴斯德實(shí)驗(yàn)中用到的加熱滅菌的方法導(dǎo)致了有效的滅菌方法的出現(xiàn)，

18、而這一滅菌原理也適用于食品的保存等。課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的別離與計(jì)數(shù)1尿素只有被分解成之后，才能被植物吸收利用。選擇分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基特點(diǎn)：惟一氮源，按物理性質(zhì)歸類為培養(yǎng)基。2PCR是一種在體外將。此項(xiàng)技術(shù)的自動化，要求使用耐高溫的DNA聚合酶。3實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是：人為提供有利于生長的條件包括等，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長。4選擇培養(yǎng)基是指。5常用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是。即當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基外表生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)公式是。利

19、用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是。另外，也是測定微生物數(shù)量的常用方法。6一般來說，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目。這是因?yàn)?。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用而不是活菌數(shù)來表示。7設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)的主要目的是，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。對照實(shí)驗(yàn)是。滿足該條件的稱為，未滿足該條件的稱為。8實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括的容有：、和，具體的實(shí)驗(yàn)步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。9不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)和培養(yǎng)。在實(shí)驗(yàn)過程中，一般每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，這樣可以。10土壤有之稱，同其他生物環(huán)境相比，土壤中微生物、。11土壤中的微生物約是細(xì)菌，細(xì)菌適宜在酸堿度接近潮濕土壤中生長

20、。土壤中微生物的數(shù)量不同，別離不同微生物采用的的稀釋度不同。12一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。這些特征包括菌落的、和等方面。13在進(jìn)展多組實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)注意做好標(biāo)記，其目的是。14對所需的微生物進(jìn)展初步篩選，只是別離純化菌種的第一步，要對別離的菌種進(jìn)展一步的鑒定，還需要借助的方法。15在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反響中，細(xì)菌合成的將尿素分解成了。氨會使培養(yǎng)基的堿性，PH。因此，我們可以通過檢測培養(yǎng)基變化來判斷該化學(xué)反響是否發(fā)生。在以為唯一氮源的培養(yǎng)基中參加指示劑。培養(yǎng)*種細(xì)菌后，如果PH升高，指示劑將變，說明該細(xì)菌能夠。P22旁欄思考題1.想一想，如何從平板上的菌落數(shù)推

21、測出每克樣品中的菌落數(shù)？答：統(tǒng)計(jì)*一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板，計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值，然后按課本旁欄的公式進(jìn)展計(jì)算。P22兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)106的培養(yǎng)集中，得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果：1.第一位同學(xué)在該濃度下涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230；2.第二位同學(xué)在該濃度下涂布了三個(gè)平板第一位同學(xué)只涂布了一個(gè)平板，沒有設(shè)置重復(fù)組，因此結(jié)果不具有說服力。第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問題，涂布了3個(gè)平板，但是，其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差太遠(yuǎn)，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤，因此，不能簡單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來求平均值。P22設(shè)置

22、對照A同學(xué)的結(jié)果與其他同學(xué)不同，可能的解釋有兩種。一是由于土樣不同，二是由于培養(yǎng)基污染或操作失誤。終究是哪個(gè)原因，可以通過實(shí)驗(yàn)來證明。實(shí)驗(yàn)方案有兩種。一種方案是可以由其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土樣進(jìn)展實(shí)驗(yàn)，如果結(jié)果與A同學(xué)一致，則證明A無誤；如果結(jié)果不同，則證明A同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問題。另一種方案是將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)展培養(yǎng)，作為空白對照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染。通過這個(gè)事例可以看出，實(shí)驗(yàn)結(jié)果要有說服力，對照的設(shè)置是必不可少的。P24旁欄思考題為什么別離不同的微生物要采用不同的稀釋度？測定土壤中細(xì)菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋圍一樣嗎？

23、這是因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量單位：株/kg是不同的，例如在干旱土壤中的上層樣本中：好氧及兼性厭氧細(xì)菌數(shù)約為2 185萬，放線菌數(shù)約為477萬，霉菌數(shù)約為23.1萬。因此，為獲得不同類型的微生物，就需要按不同的稀釋度進(jìn)展別離，同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對性地提供選擇培養(yǎng)的條件。P25 結(jié)果分析與評價(jià)1培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落對照的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長，說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。牛肉膏培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌落。2樣品的稀釋操作是否成功如果得到了2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在30300的平板，則說明稀釋操作比擬成功，并能夠進(jìn)展菌落的

24、計(jì)數(shù)。3重復(fù)組的結(jié)果是否一致如果學(xué)生選取的是同一種土樣，統(tǒng)計(jì)的結(jié)果應(yīng)該接近。如果結(jié)果相差太遠(yuǎn)，教師需要引導(dǎo)學(xué)生一起分析產(chǎn)生差異的原因。P26練習(xí)2.提示：反芻動物的瘤胃中含有大量的微生物，其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多為厭氧菌，接觸空氣后會死亡，因此別離其中能分解尿素的微生物除了需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基外，還應(yīng)參照厭氧菌的培養(yǎng)方法進(jìn)展實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。課題3 分解纖維素的微生物的別離1纖維素是類物質(zhì)，是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。2纖維素酶是一種酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即、和，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成。正是在

25、這三種酶的協(xié)同作用下，纖維素最終被水解成葡萄糖，為微生物的生長提供營養(yǎng)，同樣，也可以為人類所利用。3篩選纖維素分解菌可以用法，這種方法能夠通過直接對微生物進(jìn)展篩選。可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成，但并不和水解后的和發(fā)生這種反響。纖維素分解菌能產(chǎn)生分解纖維素，從而使菌落周圍形成。4別離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程圖如下：梯度稀釋。5為確定得到的菌是否是纖維素分解菌，還學(xué)進(jìn)展的實(shí)驗(yàn)。纖維素酶的發(fā)酵方法有發(fā)酵和發(fā)酵。測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的進(jìn)展定量測定。P28旁欄思考題1.本實(shí)驗(yàn)的流程與課題2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同？本實(shí)驗(yàn)流程與課題2的流程的區(qū)別如下。課題2是將土樣制成的

26、菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上，直接別離得到菌落。本課題通過選擇培養(yǎng)，使纖維素分解菌得到增殖后，再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟根本一致。2.為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌？由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對提高，因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。3.將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深？將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對聚集，實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10 cm左右腐殖土壤中。P29旁欄思考題1想一想，這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與缺乏？你打算選用哪

27、一種方法？兩種剛果紅染色法的比擬方法一是傳統(tǒng)的方法，缺點(diǎn)是操作繁瑣，參加剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；其優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反響根本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便，不存在菌落混雜問題，缺點(diǎn)是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反響。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊，因?yàn)榕囵B(yǎng)基中纖維素占主要地位，因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點(diǎn)是：有些微生物具有降解色素的能力，它們在長時(shí)間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅形成明顯的透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分。2.為什么選擇培養(yǎng)能夠濃縮所需的微生物？在選擇培養(yǎng)的條件下，

28、可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到濃縮的作用。P29六、課題成果評價(jià)1.培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落：對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長則說明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落，則說明可能獲得了分解纖維素的微生物。2.別離的結(jié)果是否一致：由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌的數(shù)量，因此最容易別離得到的是細(xì)菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同，學(xué)生也可能得到真菌和放線菌等不同的別離結(jié)果。P30練習(xí)2.答：流程圖表示如下。土壤取樣選擇培養(yǎng)此步是否需要，應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定梯度稀釋

29、將菌懸液涂布到有特定選擇作用的培養(yǎng)基上挑選單菌落發(fā)酵培專題知識歸納結(jié)果分析與評價(jià)培養(yǎng)基培養(yǎng)基的類型培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)無菌技術(shù)防止雜菌污染的方法實(shí)驗(yàn)室常用的消毒方法實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基計(jì)算稱量溶化滅菌倒平板純化大腸桿菌平板劃線法稱釋涂布法課題延伸微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)篩選菌株P(guān)CR技術(shù)實(shí)驗(yàn)室中篩選微生物的原理選擇培養(yǎng)基統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目稀釋涂布平板法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法設(shè)置對照設(shè)置對照的目的對照實(shí)驗(yàn)的概念實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)土壤取樣樣品的稀釋微生物的培養(yǎng)與觀察無菌操作做好標(biāo)記規(guī)劃時(shí)間操作提示結(jié)果分析與評價(jià)課題延伸分解纖維素的微生物的別離纖維素與纖維

30、素酶纖維素酶的組成成分纖維素酶分解纖維素的實(shí)驗(yàn)纖維素分解菌的篩選剛果紅染料篩選纖維素分解菌的依據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)土壤取樣選擇培養(yǎng)剛果紅染色法操作提示復(fù)習(xí)微生物技術(shù)選擇培養(yǎng)的操作方法結(jié)果分析與評價(jià)課題延伸專題4 酶的研究與應(yīng)用課題1果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用一、根底知識1果膠酶的作用(1)果膠的成分及作用：果膠是植物_以及_的主要組成成分之一，它是由_聚合而成的一種高分子化合物，不溶于水。(2)果膠酶的作用：果膠酶能夠把果膠分解成可溶性的_。(3)果膠酶的組成：果膠酶并不特指*一種酶，而是_的一類酶的總稱，包括_、_和_等。提醒由于原核生物的細(xì)胞壁的主要成分是肽聚糖，真菌細(xì)胞壁的主要成分是幾丁質(zhì)，因此這兩

31、類生物的細(xì)胞壁均不能用纖維素酶和果膠酶除去。(4)果膠酶的來源：_、_、_和_均能產(chǎn)生果膠酶。由_發(fā)酵生產(chǎn)的果膠酶是食品加工業(yè)中使用量最大的酶制劑之一，被廣泛地應(yīng)用于果汁加工業(yè)。2酶的活性與影響酶活性的因素(1)酶的活性：是指酶_的能力。酶活性的上下可以用在一定條件下，酶所催化的*一化學(xué)反響的_來表示。(2)酶的反響速度：用_、_中反響物的_或產(chǎn)物的_來表示。影響酶活性的因素主要有_、_和_等。3酶的用量酶用量過多，會導(dǎo)致酶的_；酶用量過少，會_酶促反響的速度。因此要得到適宜的酶用量，需通過設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)展探究。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1探究溫度對酶活性的影響(1)實(shí)驗(yàn)原理果膠酶活性受溫度影響。在一定圍，隨著

32、溫度的升高，酶的活性逐漸_；超過一定溫度之后，隨著溫度的升高，酶的活性逐漸降低；當(dāng)?shù)竭_(dá)一定溫度后，酶的活性_。酶的活性隨溫度的升高而變化的趨勢可用下列圖表示：通過測定_濾出的_大小來判斷果膠酶的活性的原理是：果膠酶將果膠分解為可溶性的半乳糖醛酸，半乳糖醛酸可通過濾紙，因此_和_反映了果膠酶催化分解果膠的能力。在不同的溫度和pH條件下，果膠酶的活性越高，蘋果汁的體積就_，同時(shí)果汁也越_。(2)實(shí)驗(yàn)操作流程各取一支分9組，分別放入30、35、40、45、50、55、60、65和70的恒溫水箱中恒溫加熱eq avs4al(待試管內(nèi)溫度穩(wěn)定后，將果膠,酶參加一樣溫度的蘋果泥內(nèi))恒溫保持10 min比擬

33、果汁的澄清度，或過濾果汁，用量筒測量果汁的量，并記錄結(jié)果(3)記錄結(jié)果實(shí)驗(yàn)溫度303540455055606570果汁量(mL)(4)實(shí)驗(yàn)分析本實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)對象是_，溫度為_，屬于探究性的定量實(shí)驗(yàn)。這類實(shí)驗(yàn)的自變量通常是通過設(shè)置梯度來確定最適值。第一輪實(shí)驗(yàn)設(shè)置的梯度差通常較大，縮小圍后，在第二輪實(shí)驗(yàn)中可設(shè)置較小的梯度差。酶遇高溫變性后，很難再恢復(fù)活性，不宜再回收利用。在混合蘋果泥和果膠酶之前，要將蘋果泥和果膠酶分裝在不同的試管中恒溫處理，其目的是_一樣，防止蘋果泥與果膠酶混合時(shí)影響混合物的溫度，從而影響果膠酶的活性。提醒(1)探究不同溫度(或pH)對果膠酶活性的影響，溫度(或pH)為自變量，且應(yīng)

34、嚴(yán)格控制其他無關(guān)變量均一樣，通過設(shè)置合理的溫度(或pH)梯度來確定最適值。(2)在蘋果泥和果膠酶混合之前，一定要保證底物和酶先到達(dá)一樣的條件(溫度或pH)，防止混合后條件發(fā)生變化，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。2探究pH對酶活性的影響(1)實(shí)驗(yàn)原理大局部酶的活性受pH的影響，在一定pH下，酶促反響具有最大速度，高于或低于此pH，反響速度都下降，通常稱此pH為酶反響的_。pH對酶活性的影響可用下列圖表示：(2)實(shí)驗(yàn)流程及注意問題用攪拌器攪拌制取蘋果泥，蘋果泥來源要_(最好是同一個(gè)蘋果)。注意制取蘋果泥時(shí)，可先將蘋果切成小塊放入攪拌器中，參加適量的水后再進(jìn)展攪拌；如果用橙子做實(shí)驗(yàn)，不必去皮。將分別裝有_

35、和_的試管在恒溫水浴中保溫。注意a蘋果泥的用量和果膠酶的用量比例要適當(dāng)。b恒溫水浴的溫度可用上一實(shí)驗(yàn)測出的最適溫度。將蘋果泥和果膠酶分別參加9組實(shí)驗(yàn)用的試管中(pH梯度可設(shè)置為5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0)，并快速混合調(diào)節(jié)pH。注意a在探究不同pH對果膠酶活性的影響時(shí)，可以用體積分?jǐn)?shù)為0.1%的NaOH溶液或鹽酸調(diào)節(jié)pH。b在用果膠酶處理蘋果泥時(shí)，為了使果膠酶能夠充分地催化反響，應(yīng)用玻璃棒不時(shí)地?cái)嚢璺错懟旌衔?。放進(jìn)恒溫水浴中反響一段時(shí)間。將試管中混合物過濾，并用量筒量取果汁體積，比擬果汁多少。記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，確定最適pH。pH5.05.56.06.57.

36、07.58.08.59.0果汁量(mL)3.探究果膠酶的用量(1)實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)中如果隨著酶的用量增加，過濾到的果汁的體積也增加，說明酶的_；當(dāng)酶的用量增加到*個(gè)值后，再增加酶的用量，過濾到的果汁的體積_，說明酶的用量已經(jīng)足夠，則，這個(gè)值就是酶的_。(2)實(shí)驗(yàn)流程準(zhǔn)確稱取純的果膠酶1 mg、2 mg、3 mg、4 mg、5 mg、6 mg、7 mg、8 mg、9 mg，配制成_體積的酶的水溶液，取等量放入9支試管中，依次編號為19號。制取蘋果泥并稱45 g蘋果泥，分裝入9支試管中，每支試管中分裝5 g，依次編號為19號。將上述分別裝有果膠酶和蘋果泥的試管放入37的恒溫水浴中平衡外溫度。一段時(shí)間后

37、將不同濃度的果膠酶分別迅速與各試管的蘋果泥混合，然后再放入恒溫水浴中。記錄反響時(shí)間，約20 min。過濾后測量果汁體積。試管123456789果汁量(mL)(3)結(jié)果分析及評價(jià)溫度和pH在很大程度上對酶的空間構(gòu)造會產(chǎn)生巨大的影響。因有其他無關(guān)變量影響，實(shí)際用量比理論值稍多。一般為50 mg/L左右，因?yàn)橛么藵舛忍幚砉?4 h后出汁率增加10%后不再增加。當(dāng)然，不同果汁的使用量有較大差異。實(shí)驗(yàn)中所用的果膠酶盡量使用其純酶制劑或不含抑制物的粗酶制劑，以免影響對酶用量的估算。課題2探討加酶洗衣粉的洗滌效果一、根底知識1加酶洗衣粉(1)概念：是指含有_的洗衣粉。(2)種類：目前常用的酶制劑有_、_、

38、_和_四類。(3)作用：加酶洗衣粉中的蛋白酶可將_最終水解為_；脂肪酶可將_最終水解為_；淀粉酶可將_最終水解為_，以到達(dá)去污的目的。_能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的_或_，使污跡容易從衣物上脫落。2影響加酶洗衣粉洗滌效果的因素使用加酶洗衣粉時(shí)，影響酶活性的因素有_、_和_等，為此科學(xué)家通過_生產(chǎn)出了能夠_、_、_和_的酶，并制成酶制劑，使其與洗衣粉的其他成分_。提醒使用加酶洗衣粉時(shí)必須注意以下幾點(diǎn)：(1)堿性蛋白酶能使蛋白質(zhì)水解，因此，蛋白質(zhì)類纖維(羊毛、蠶絲等)織物就不能用加酶洗衣粉來洗滌，以免使纖維受到破壞；(2)使用加酶洗衣粉時(shí)，必須注意洗滌用水的溫度。堿性蛋白酶在3

39、550時(shí)活性最強(qiáng)，在低溫下或70以上就會失效；(3)加酶洗衣粉也不宜長期存放，存放時(shí)間過長會導(dǎo)致酶活性損失；(4)加酶洗衣粉不宜與三聚磷酸鹽共存，否則酶的活性將會喪失；(5)添加了堿性蛋白酶的洗衣粉可以分解人體皮膚外表蛋白質(zhì)，而使人患過敏性皮炎、濕疹等，因此，應(yīng)防止與這類洗衣粉長時(shí)間地接觸。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗滌效果(1)實(shí)驗(yàn)分析探究加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果的區(qū)別時(shí)，_為自變量，要控制其他條件一致，同時(shí)普通洗衣粉處理污漬與加酶洗衣粉處理污漬形成_實(shí)驗(yàn)；在控制變量時(shí)需要將科學(xué)實(shí)驗(yàn)與生活經(jīng)歷區(qū)別開。(2)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備帶有污染物的實(shí)驗(yàn)用布的制取：稱取一定量的污染

40、物制成溶液，取等量污染物滴加在大小、質(zhì)地一樣的新布上。稱取等量的洗衣粉：用天平準(zhǔn)確稱取等量普通洗衣粉和加酶洗衣粉。(3)實(shí)驗(yàn)過程取大燒杯兩只，用量筒量取等量水倒入其中。將制好的污染布塊和洗衣粉(一組為污染布塊與普通洗衣粉，一組為污染布塊與加酶洗衣粉)分別放入兩只燒杯中。用玻璃棒同時(shí)充分?jǐn)嚢枰粯拥臅r(shí)間，攪拌可重復(fù)進(jìn)展。經(jīng)過一樣的時(shí)間后觀察洗滌效果。2探究使用加酶洗衣粉時(shí)的最適溫度(1)實(shí)驗(yàn)分析在探究加酶洗衣粉的最適溫度時(shí)，_是自變量，其他條件一致，不同的實(shí)驗(yàn)組之間形成_；變量的圍應(yīng)考慮_。(2)實(shí)驗(yàn)步驟將等量一樣的污染物滴加在一樣大小、質(zhì)地的白棉布上(8塊)。取8只大燒杯，分別注入500 mL自

41、來水，編號為1、2、3、4、5、6、7、8，溫度均控制在37。將8只大燒杯中的水溫分別調(diào)節(jié)為20、25、30、35、40、45、50、55；然后分別向各燒杯中參加等量的加酶洗衣粉。取制好的污染布塊分別放入8只燒杯中，用玻璃棒同時(shí)充分?jǐn)嚢?。一樣的時(shí)間后觀察洗滌效果。(3)結(jié)果分析洗衣粉的洗滌效果可以根據(jù)污染物消失的時(shí)間或一樣時(shí)間白棉布上的污漬的消失情況進(jìn)展判斷。在探究加酶洗衣粉使用時(shí)的最適溫度時(shí)，假設(shè)測出在40時(shí)洗滌效果比其他條件下好，可設(shè)置溫度梯度差更小的實(shí)驗(yàn)變量，如35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45，進(jìn)展重復(fù)實(shí)驗(yàn)，直至測出具體的最適溫度。3探究不同種類的加酶洗衣

42、粉的洗滌效果(1)實(shí)驗(yàn)分析：在探究不同種類的加酶洗衣粉的洗滌效果時(shí)，自變量是_，污漬應(yīng)該是_的，其他條件均一致。(2)實(shí)驗(yàn)步驟在一樣大小、質(zhì)地的白棉布(3塊)上滴加等量的牛奶。取大燒杯3只，分別注入500 mL自來水，編號A、B、C，溫度均控制在37。在A中參加一定量的參加蛋白酶的洗衣粉，在B中參加等量的參加復(fù)合酶的洗衣粉，在C中參加等量的參加脂肪酶的洗衣粉。取制好的污染布塊分別放入3只燒杯中，用玻璃棒同時(shí)充分?jǐn)嚢琛Ｒ粯拥臅r(shí)間(5 min)后觀察洗滌效果。提醒(1)該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可有兩條思路：探究同一種加酶洗衣粉對于不同污漬的洗滌效果。探究多種加酶洗衣粉對同一污漬的洗滌效果。(2)洗滌效果可在洗滌

43、后比擬污物的殘留程度(如：已消失、顏色變淺、面積縮小等)，還可以比擬到達(dá)同樣效果所用的時(shí)間長短。(3)該實(shí)驗(yàn)的自變量是洗衣粉的種類，要保證其他無關(guān)變量一樣。課題3酵母細(xì)胞的固定化一、固定化酶的應(yīng)用和固定化細(xì)胞技術(shù)1高果糖漿的生產(chǎn)(1)高果糖漿的生產(chǎn)原理原料：_(由淀粉轉(zhuǎn)化來的)。原理：葡萄糖果糖。(2)使用固定化酶技術(shù)生產(chǎn)高果糖漿的過程將葡萄糖異構(gòu)酶固定在顆粒狀的載體上放入底部有許多小孔的反響柱中(酶顆粒_通過篩板上的小孔，反響液能_)葡萄糖溶液從反響柱的上端注入流經(jīng)反響柱與_接觸，轉(zhuǎn)化成_果糖從反響柱下端流出。(3)使用固定化酶生產(chǎn)高果糖漿的優(yōu)點(diǎn)與一般酶制劑相比，固定化酶既能與_接觸，又能與

44、_別離，同時(shí)還可以被_利用。2固定化細(xì)胞技術(shù)(1)概念：利用_或_方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間的技術(shù)。(2)常用方法：_、_結(jié)合法和物理吸附法。_：是指將酶或細(xì)胞包裹在多孔的載體中，如將酶包裹在聚丙烯酰胺凝膠等高分子凝膠中，或包裹在醋酸纖維素等半透性高分子膜中(適用于較大的細(xì)胞)。_結(jié)合法：是指將酶分子相互結(jié)合，或?qū)⑵浣Y(jié)合到纖維素、瓊脂糖、離子交換樹脂等載體上的固定方式(適用于酶的固定)。_吸附法：是指將酶吸附到固體吸附劑外表的方法。固體吸附劑多為活性炭、多孔玻璃等(適用于酶的固定)。3直接使用酶、固定化酶、固定化細(xì)胞的比擬直接使用酶固定化酶固定化細(xì)胞酶的種數(shù)一種或幾種一種一系列酶常用載體高嶺

45、土、皂土、硅膠、凝膠明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素、聚丙烯酰胺制作方法化學(xué)結(jié)合法固定化、物理吸附法固定化包埋法固定化是否需要營養(yǎng)物質(zhì)否否是反響底物各種物質(zhì)(大分子、小分子)各種物質(zhì)(大分子、小分子)小分子物質(zhì)催化反響單一或多種單一一系列缺點(diǎn)對環(huán)境條件非常敏感，易失活難回收，本錢高，影響產(chǎn)品質(zhì)量不利于催化一系列的酶促反響反響物不易與固定后的細(xì)胞接觸，尤其是大分子物質(zhì)，反響效率下降優(yōu)點(diǎn)催化效率高、低耗能、低污染既能與反響物接觸，又能與產(chǎn)物別離可以反復(fù)利用本錢低、操作容易，能產(chǎn)生一系列酶提醒(1)固定化細(xì)胞使用的都是活細(xì)胞，因而為了保證其生長、增殖的需要，應(yīng)該為其提供一定的營養(yǎng)物質(zhì)。(2)固定化

46、細(xì)胞由于保證了細(xì)胞的完整性，因而酶的環(huán)境改變小，所以對酶的活性影響最小。二、制備固定化酵母細(xì)胞技術(shù)1制備固定化酵母細(xì)胞(1)酵母細(xì)胞的_活化就是讓由于缺水而處于休眠狀態(tài)下的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。酵母菌活化需要1 h左右，酵母細(xì)胞活化后體積變大。(2)配制物質(zhì)的量濃度為0.05 mol/L的_溶液。(3)配制_溶液：將0.7 g海藻酸鈉放入50 mL小燒杯中，參加10 mL水，用酒精燈小火加熱(或者連續(xù)加熱)，邊加熱邊攪拌，反復(fù)幾次，直至完全溶化，用蒸餾水定容至10 mL。如果海藻酸鈉濃度過高，將很難形成凝膠珠；如果濃度過低，則形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少，影響實(shí)驗(yàn)效果。(4)海

47、藻酸鈉溶液與_混合：將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，參加已經(jīng)活化的酵母細(xì)胞，進(jìn)展充分?jǐn)嚢?，使其混合均勻，再轉(zhuǎn)移至注射器中。冷卻的目的是防止高溫殺死酵母菌。(5)_酵母細(xì)胞：以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，觀察液滴在CaCl2溶液中形成凝膠珠的情形。剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時(shí)間(約30 min)，以便形成穩(wěn)定的構(gòu)造。2用固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵(1)將固定好的_(凝膠珠)用蒸餾水沖洗23次。(2)將150 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的_轉(zhuǎn)移到200 mL 的錐形瓶中，再參加固定好的酵母細(xì)胞，置于25下發(fā)酵24 h，可以看到產(chǎn)生了大量氣泡，同時(shí)會聞到酒香。

48、提醒加熱使海藻酸鈉溶化是操作中最重要的一環(huán)，涉及實(shí)驗(yàn)的成敗。海藻酸鈉在水中溶解的速度慢，需要通過加熱，促進(jìn)其溶解。溶解海藻酸鈉，最好采用_或者_(dá)的方法。例如，加熱幾分鐘后，從石棉網(wǎng)上取下燒杯冷卻片刻，并不斷攪拌，再將燒杯放回石棉網(wǎng)上繼續(xù)加熱，如此重復(fù)幾次，直至海藻酸鈉完全_。如果加熱太快，海藻酸鈉會發(fā)生焦糊。三血紅蛋白的粗提取和別離1.實(shí)驗(yàn)原理蛋白質(zhì)的別離和提取的原理：根據(jù)蛋白質(zhì)各種特性的差異，如分子的、所帶電荷的、和等等，可以用來別離不同蛋白質(zhì)。1凝膠色譜法也稱概念：根據(jù)被別離蛋白質(zhì)的，利用具有網(wǎng)狀構(gòu)造的凝膠的分子篩作用，來別離蛋白質(zhì)的有效方法。原理：凝膠實(shí)際上是一些由構(gòu)成的多孔球體，當(dāng)不同

49、的蛋白質(zhì)通過凝膠時(shí)，的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠部的通道，路程，移動速度，而的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠部的通道，只能在移動，路程，移動速度，相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)因此得以別離。2緩沖溶液概念：在一定的圍，能對抗外來少量強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或稍加稀釋不引起溶液發(fā)生明顯變化的作用叫做緩沖作用，具有緩沖作用的溶液叫做緩沖溶液。作用：能夠抵抗對溶液的的影響，維持根本不變。緩沖溶液的配制：通常由種緩沖劑溶解于水中配制而成。調(diào)節(jié)緩沖劑的就可以制得使用的緩沖液。3電泳概念：指在作用下發(fā)生遷移的過程。原理：許多重要的生物大分子，如、等都具有，在下，這些基團(tuán)會帶上。在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所帶電荷的電極移動。作用：電泳

50、利用了待別離樣品中各種分子以及分子本身的、的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的別離。方法分類：電泳；電泳蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于以及等因素。測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量通常用2.實(shí)驗(yàn)操作蛋白質(zhì)的提取和別離一般分為四步：、和。1樣品哺乳動物的血液處理和粗別離紅細(xì)胞的洗滌：目的：去除；方法：離心血紅蛋白的釋放：加低滲溶液，使紅細(xì)胞吸水漲破和溶解細(xì)胞膜，置于磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢?0分鐘加速細(xì)胞破裂, 細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白。別離血紅蛋白溶液：將攪拌好混合液轉(zhuǎn)移到離心管，以2000r/min的速度離心10 min ，試管中的溶液從上往下分為4層:第1層最上層：的甲苯層第2層中

51、上層：的沉淀層，色薄層固體第3層中下層：的水溶液層，的液體第4層最下層：其它雜質(zhì)的沉淀層將試管中的液體用過濾、除去，于中靜置片刻后，別離出下層的。粗別離：即。將裝有血紅蛋白溶液的透析袋放入pH為7.0的磷酸緩沖液中，透析12h，以。2純化凝膠色譜操作通過凝膠色譜柱將除去。制作。裝填。因?yàn)楦傻哪z和用緩沖液平衡好的凝膠的體積差異很大，所以裝柱前需要根據(jù)色譜柱的體積計(jì)算。在裝填凝膠柱時(shí)，不得有存在。樣品的參加和洗脫3純度鑒定：判斷的蛋白質(zhì)是否到達(dá)要求，需要進(jìn)展蛋白質(zhì)純度的鑒定。在鑒定的方法中，使用最多的是。3.操作提示1紅細(xì)胞的洗滌：、與十分重要。過少，無法除去血漿蛋白；過高和過長會使等一同沉淀，

52、達(dá)不到別離效果。2色譜柱填料的處理：商品凝膠使用前需直接放在中膨脹，可以將參加其中的用加熱，加速膨脹。3凝膠色譜柱的裝填：在裝填凝膠柱時(shí)，不得有氣泡存在。氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的，降低。4蛋白質(zhì)的別離：如果紅色區(qū)帶地移動，說明色譜柱制作成功。4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評價(jià)1觀察血液樣品離心后是否分層。如果分層不明顯，可能是的原因。此外，離心速度過高和時(shí)間過長，會使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一同沉淀，也得不到的紅細(xì)胞，影響后續(xù)。2如果凝膠色譜柱裝填得很成功、別離操作也正確的話，能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨著洗脫液緩慢流出；如果紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬，說明別離的效果不好，這與有關(guān)。專題六植

53、物有效成分的提取課題1 植物芳香油的提取【導(dǎo)學(xué)誘思】1.植物芳香油的來源天然香料的主要來源是和。動物香料主要來源于麝、靈貓、海貍和抹香鯨等，植物香料的來源更為廣泛。植物芳香油可以從大約50多個(gè)科的植物中提取。例如，工業(yè)生產(chǎn)中，玫瑰花用于提取，樟樹樹干用于提取。提取出的植物芳香油具有很強(qiáng)的，其組成也，主要包括及其思考：你能說出一些用于提取*些植物芳香油的器官嗎？并分別可提取哪種芳香油？2.植物芳香油的提取方法植物芳香油的提取方法有、和等。具體采用那種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來決定。是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是。根據(jù)蒸餾過程中的位置，可以將水蒸氣蒸餾法劃分為、和。其中，水中蒸餾的方法對于

54、有些原料不適用，如柑橘和檸檬。這是因?yàn)榈葐栴}。因此，柑橘、檸檬芳香油的制備通常使用法。植物芳香油不僅，而且易溶于，如石油醚、酒精、乙醚和戊烷等。不適于用水蒸氣蒸餾的原料，可以考慮使用法。萃取法是將的方法。芳香油溶解于有機(jī)溶劑后，只需蒸發(fā)出有機(jī)溶劑，就可以獲得純潔的了。但是，用于萃取的有機(jī)溶劑必須，否則會影響芳香油的質(zhì)量。3、玫瑰精油的提取玫瑰精油是制作的主要成分，能使人產(chǎn)生愉悅感。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)，難溶于，易溶于，能隨一同蒸餾，通常采用法中的法。提取玫瑰精油的實(shí)驗(yàn)流程、。思考：在提取過程中，如何對乳濁液的處理和玫瑰液的回收？4、橘皮精油的提取從橘皮中提取的，主要成分為，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

55、橘皮精油主要儲藏在局部，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時(shí)會發(fā)生局部水解，使用水中蒸餾法又會產(chǎn)生原料焦糊的問題，所以一般采用法。具體的流程是、。一是否提取出了植物精油觀察學(xué)生提取出的玫瑰精油或橘皮精油，從顏色、氣味等方面來評價(jià)所提取的精油的純度和質(zhì)量。從玫瑰花提取的芳香油是淺黃色至黃色的液體，并帶有甜韻的玫瑰香；從橘皮提取的橘皮精油無色透明，具有誘人的橘香味。本課題只是對兩種精油進(jìn)展了初步的提取，其中仍然含有大量的雜質(zhì)。二出油率的計(jì)算根據(jù)教科書提供的公式計(jì)算出油率。如果出油率高，說明實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)合理；如果出油率低，教師可以幫助學(xué)生從實(shí)驗(yàn)方法的選擇、實(shí)驗(yàn)過程的操作等各方面分析原因，改良后再作

56、嘗試。答案和提示練習(xí)1.答：植物芳香油一般都是由23種芳香油混合調(diào)配而成的，其中的基底油常取自植物的種子或果實(shí)，比方胡桃油、甜杏油?；子团c其他芳香油調(diào)配在一起，能夠加強(qiáng)成效。從玫瑰花中提取出的玫瑰油稱為液體黃金，是世界香料工業(yè)不可取代的原料，多用于制造高級香水等化裝品。提取出的玫瑰油不含有任何添加劑或化學(xué)原料，是純天然的護(hù)膚品，具有極好的抗衰老和止癢作用，能夠促進(jìn)細(xì)胞再生、防止肌膚老化、平撫肌膚細(xì)紋，還具有使人放松、愉悅心情的成效。杏仁油富含礦物質(zhì)和維生素，是一種質(zhì)地輕柔、高滲透性的保濕劑。熏衣草精油取自熏衣草花，具有怡神、助睡眠、舒緩壓力的作用，此外它還具有降壓、止痛、促進(jìn)細(xì)胞再生的功能，

57、可以用于治療燙傷和蚊蟲叮咬、預(yù)防和改善脫發(fā)。檸檬精油取自檸檬果皮，具有消除緊、焦慮、振奮精神的作用，可用于治療神經(jīng)衰弱、關(guān)節(jié)炎，還具有促進(jìn)血液循環(huán)、殺菌止痛、平衡油脂分泌、舒緩肌膚老化、滋養(yǎng)頭發(fā)的成效。茶樹精油具有新鮮、強(qiáng)烈的藥草香味，能改善毛孔阻塞，凈化肌膚，抗感染，對治療青春痘有奇效。它也能消除疲勞、緩解壓力。天竺葵精油能收斂皮膚，平衡、調(diào)理、潤滑中干性皮膚和敏感性皮膚，改善橘皮樣表皮，還有助于恢復(fù)精力，平緩心情。茉莉精油能防止肌膚老化，對中干性皮膚和敏感性皮膚具有良好的保濕和滋潤作用，尤其對女性的妊娠紋和分泌有獨(dú)特的改善效果。橙花精油具有清新的水果香味，不但能使人鎮(zhèn)靜，還能防止中干性肌膚

58、的老化現(xiàn)象發(fā)生，給肌膚賦予青春活力，促進(jìn)皮膚再生。2.建議：教師可以組織學(xué)生進(jìn)展一次社會調(diào)查，并要求學(xué)生寫出詳細(xì)的調(diào)查報(bào)告。課題2 胡蘿卜素的提取【導(dǎo)學(xué)誘思】1. 胡蘿卜素是，化學(xué)性質(zhì)比擬，不溶于水，微溶于，易溶于等有機(jī)溶劑。根據(jù)雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分為、三類。是其中最主要的組成成分。與-胡蘿卜素化學(xué)構(gòu)造類似的胡蘿卜素約有100多種,它們大多存在于蔬菜中。等蔬菜是提取天然-胡蘿卜素的原料。工業(yè)生產(chǎn)上，提取天然-胡蘿卜素的方法主要有三種，一是從中提取，二是從中獲得，三是利用生產(chǎn)。本課題所提供的方法只能提取胡蘿卜素的，假設(shè)要獲得-胡蘿卜素，還需要進(jìn)一步的。2.提取胡蘿卜素的實(shí)驗(yàn)流程有、。思考

59、：影響萃取的因素有哪些？課題成果評價(jià)二是否出現(xiàn)對應(yīng)的層析帶如果萃取樣品中出現(xiàn)了和標(biāo)準(zhǔn)樣品一樣的層析帶，說明提取胡蘿卜素的實(shí)驗(yàn)成功。由于提取物中含有雜質(zhì)，萃取樣品的顏色可能比標(biāo)準(zhǔn)樣品的顏色淺，我們也可以通過顏色的比擬，初步確定提取的胡蘿卜素的量。答案和提示一資料一萃取劑的選擇討論題1.乙醇和丙酮能夠用于胡蘿卜素的萃取嗎？為什么？答：胡蘿卜素可溶于乙醇和丙酮，但它們是水溶性有機(jī)溶劑，因萃取中能與水混溶而影響萃取效果，所以不用它們作萃取劑。2.在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳這幾種有機(jī)溶劑中，哪種最適宜用來提取胡蘿卜素？答：在這五種有機(jī)溶劑中，石油醚的沸點(diǎn)最高，在加熱萃取時(shí)不易揮發(fā)，所以石油醚

60、最適宜用作萃取劑。二練習(xí)1.答：列表分析如下。提取方法實(shí)驗(yàn)原理方法步驟適用圍水蒸氣蒸餾利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來1.水蒸氣蒸餾2.別離油層3.除水過濾適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油壓榨法通過機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油1.石灰水浸泡、漂洗2.壓榨、過濾、靜置3.再次過濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取有機(jī)溶劑萃取使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油1.粉碎、枯燥2.萃取、過濾3.濃縮適用圍廣，要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶液中參考答案專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1 果酒和果醋的制作1.1酵母菌兼性厭氧型有氧時(shí)C6H12O6+6H2O+6