MALDITOFMS(基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜)培訓預習提綱

1、【MALDI-TOFMS】（基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜）培訓預習提綱一儀器概況儀器名稱：基質輔助激光解析電離飛行時間質譜儀公司：美國應用生物系統(tǒng)延遲引出:源后裂解技術指標：W土0.05%forangiotensin1,296.6853andmyoglobin16,952.5ReflectorMode,ExternalCalibration:0.008%forACTH1839m/z2,565.1989.W土0.005%for.colitioredoim/z1,1674.40.005%forACTH18-39assResolution:eflectorResolution:$20,000fo

2、rinsulin(m/z5,734).$12,000forACTHclips.inearResolution:$3,000angiotensin.$3,500forACTH18-39m/z2,465.1989.$1,000formyoglobin(m/z16,952).$100forBSA(m/z66,431).Sensitivityoutinedetectionof5fmolofneurotensinwithasignaltonoiseration()0:1.ost-SourceDecayMassAccuracW0.2withdefaultcalibration.應用：儀器作為一種可以確定大

3、分子精確分子量的工具，可以對納米材料、生物材料，高分子聚合物等的分子量及聚合度進行測定及碎片結構定性，有機合成反應的質量評價，蛋白質、多肽、核酸、寡糖等生物分子的分子質量測定,蛋白質、多肽酶解產物肽圖譜測定,蛋白質、多肽的氨基酸順序分析。二原理1.質譜儀分類有機質譜儀底向用角度分無機同位素質i普位咒體分析庾譜恢比中仃機質誥儀由F應用特點不同又分為:氣相色譜一威譜聯(lián)用儀(GC-MS)吒相色譜一四檢質滑儀tQuadrate)厲相色諧一飛行時間質帯儀(TimfOfFlight)咒相色謂一離子阱質懈便(IonTrap)液相色譜一質譜聯(lián)用儀(LC-MS)段栢色譜一四極質譜枚(Qiiauple)液相芭譜一

4、飛行時問質譜惶TimeOfFlight臧棚色譜一離子阱質譜儀IanTrap)圧他基質輔跚激光解析電離一飛荷時間質譜僅(Maldi-TOF)傅利葉變換顱譜僅(FT-MS)無肌質詵儀也扌口火崔源雙聚俵質譜快代；：:畫件心陽義InductivelyCoupledPlasmaICPMS血譜儀cSecoiidm-lonrSIMS取龜鶴質常儀扱桿質鍛便從翩量分析黠的不同分飛行時間質灌儀離子阱質譜做博利葉變換潢詵儀ete.般質譜儀結構.離子源電子電離源（onI，oEn)Iizat化學電離源（alI，oCnI)izat快原子轟擊源（AtomB，oFmA)bBa電噴霧源（nSpra，yES)IIo大氣壓化學電離

5、源（za，AtPi)oCIn激光解析源（De，sLoD)rption.質量分析器雙聚焦分析器（eFocus)ing四極桿分析器（uple)Analy飛行時間質量分析器（meOfFlig離子阱質量分析器（Trap)Anal傅利葉變換離子回旋共振分析器（）o.檢測器.真空系統(tǒng)-原理基質輔助激光解析電離基質對分析物起著溶劑的作用，并且把分析物分子彼此分離開，從而減少了分子間的很強的相互作用力，使分析物簇群形成的可能性減至最??；當激光脈沖照射時，由于基質濃度遠高于分析物濃度，確保激光能量大部分被基質吸收而最小限度地照射分析物。基質分子吸收的能量轉變成固體混合物內基質的電子激發(fā)能，瞬間使其由固態(tài)轉變成氣

6、態(tài)，形成基質離子。在中性分析物和激發(fā)出的基質離子、質子及金屬陽離子之間的碰撞過程中，發(fā)生了分析物的離子化，便產生了質子化分子或陽離子化分子。這過程并不導致高分子發(fā)生鏈斷裂，通常只生成分子離子及分子離子的多聚體。離子化后的分子被電場加速進入飛行時間質量分析器而被檢測。飛行時間假設被分析物離子化后帶電荷為，加速電壓和飛行距離一定,被電場加速后的分子離子具有相同的動能：即質荷比與飛行時間的平方成正比。只要測得飛行時間，即可換算成質荷比。在檢測時，質荷比小的離子先到達檢測器。注意：這里是質荷比，而非分子量，與分子離子所帶的電荷數(shù)有關。-的特點1)軟電離，不會把分子打碎()檢測范圍寬()()可以檢測混合

7、物()耐鹽()靈敏度高(可達級)突出特點：一延遲引出-源后裂解公司的一一提高儀器分辨率采取了兩個行之有效的方法：增大了離子飛行路程且不增加飛行管長度，提高了分辨率延遲引出技術儀器構造LineardetectorNewFocusingLensandBeamSteeringPlateNew6micronWiderTimedReflectorIonSelectorDetector真空系統(tǒng)激光源可調高壓Variablevoltagegridheldata%oftheaccel.voltageGroundedgridIonizationRegionPotentialGradientSampleplate

8、ataccelerating_voltagesWiderReflectorEntranceAperture高壓范圍：涉及到的參數(shù)：，m飛行管FlightTub無場區(qū)，離子勻速飛行檢測器Detector共有兩個檢測器：（對應兩種模式）檢測器類型：（微通道片多通道片）實驗成功的關鍵因素a基質基質的作用：一是從激光脈沖中吸收能量；二是使被測分子分離成單分子狀態(tài)。第一個作用要求基質對激光光源有很強的吸收，因此目前文獻報道的基質化合物均為含苯環(huán)的有機化合物；第二個作用要求基質和被測高分子具有很好的相容性，同時不能有分子間的相互作用。離子化試劑合成高分子化合物一般難以通過加質子使其離子化，往往需要添加堿金屬鹽類或銀、銅等過渡金屬鹽類形成離子絡合物，達到離子化的目的。對于極性高分子化合物（含有雜原子，如）來說，堿金屬鹽類是比較有效的離子化試劑。（）沒有雜原子的非極性合成高分子（如），加入銀或銅鹽后可以成功的離子化。（）含胺官能團的化合物（如蛋白質、多肽），可有基質幫助（提供氫離子）直接質子化，不需外加金屬