酶促反應(yīng)動力學(xué)

1、第3章 酶催化反應(yīng)動力學(xué)（2學(xué)主要內(nèi)容： 3.1 酶催化反應(yīng)速度 3.2 底物濃度對酶促反應(yīng)速度的影響 3.3 抑制劑對酶促反應(yīng)速度的影響 3.4 其它因素對酶促反應(yīng)速度的影響Page 1酶催化反應(yīng)動力學(xué)也稱酶促反應(yīng)動力學(xué)（kinetics of enzyme-catalyzed reactions），是研究酶促反應(yīng)速度以及影響此速度的各種因素的科學(xué)。在研究酶的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系以及酶的作用機制時，需要酶促反應(yīng)動力學(xué)提供相關(guān)的實驗證據(jù)；為了找到最有利的反應(yīng)條件從而提高酶催化反應(yīng)的效率以及了解酶在代謝過程中的作用和某些藥物的作用機制等，也需要我們掌握酶促反應(yīng)動力學(xué)的相關(guān)規(guī)律。因此，對于酶促反應(yīng)動力

2、學(xué)的研究既有要的理論意義又具有相當(dāng)?shù)膶嵺`價值。2酶促反應(yīng)動力學(xué)以化學(xué)動力學(xué)為基礎(chǔ)，通過對酶促反應(yīng)速度的測定來討論諸如底物濃度、抑制劑、溫度、pH和激活劑等因素對酶促反應(yīng)速度的影響。酶的動力學(xué)研究包括哪些內(nèi)容 ?重 要3溫度、pH及激活劑都會對酶促反應(yīng)速度產(chǎn)生十分重要的影響，酶促反應(yīng)不但需要最適溫度和最適pH，還要選擇合適的激活劑。而且在研究酶促反應(yīng)速度以及測定酶的活力時，都應(yīng)選擇相關(guān)酶的最適反應(yīng)條件。43.1酶催化反應(yīng)速度如果我們以產(chǎn)物生成量(或底物減少量)來對反應(yīng)時間作圖，便可以得到如圖3-1所示的曲線圖。5圖3-1 酶促反應(yīng)的速度曲線該曲線的斜率表示單位時間內(nèi)產(chǎn)物生成量的變化，因此曲線上任

3、何一點的斜率就是相應(yīng)橫坐標(biāo)上時間點的反應(yīng)速度。從圖中的曲線可以看出在反應(yīng)開始的一段時間內(nèi)斜率幾乎不變，然而隨著反應(yīng)時間的延長，曲線逐漸變平坦，相應(yīng)的斜率也漸漸減小，反應(yīng)速度逐漸降低，顯然這時測得的反應(yīng)速度不能代表真實的酶活力。6引起酶促反應(yīng)速度隨反應(yīng)時間延長而降低的原因很多，如底物濃度的降低、產(chǎn)物濃度增加從而加速了逆反應(yīng)的進行、產(chǎn)物對酶的抑制或激活作用以及隨著反應(yīng)時間的延長引起酶本身部分分子失活等等。因此在測定酶活力時，應(yīng)測定酶促反應(yīng)的初速度，從而避免上述各種復(fù)雜因素對反應(yīng)速度的影響。由于反應(yīng)初速度與酶量呈線性關(guān)系，因此可以用測定反應(yīng)初速度的方法來測定相關(guān)制劑中酶的含量。7酶活力測定時需注意：

4、1 選擇反應(yīng)的最適溫度，根據(jù)不同的底物和緩沖液選擇反應(yīng)的最適pH。2 速度要快，取反應(yīng)的初速度3 底物濃度要足夠大（一般在10Km以上）使酶被底物飽和，以充分反應(yīng)待測酶的活力8測定酶活力的基本原理：酶蛋白的含量很低，很難直接測定其蛋白質(zhì)的含量，且常與其他各種蛋白質(zhì)混合存在，將其提純耗時費力。故不能直接用重量或體積等指標(biāo)來衡量。測定產(chǎn)物增加量測定底物減少量9測定酶活力常用的方法：分光光度法（spectrophotometry）熒光法（fluorometry）同位素法（isotope method）電化學(xué)方法（electrochemical method）其他方法：如旋光法、量氣法、量熱法和層析法

5、等103.2 底物濃度對酶促反應(yīng)速度的影響中間絡(luò)合物學(xué)說中間絡(luò)合物學(xué)說也稱酶底物中間絡(luò)合物學(xué)說，最早是由Henri和Wurtz兩位科學(xué)家提出的。在1903年，Henri在用蔗糖酶水解蔗糖實驗研究化學(xué)反應(yīng)中底物濃度與反應(yīng)速度的關(guān)系時發(fā)現(xiàn)，當(dāng)酶濃度不變時，可以測出一系列不同底物濃度下的化學(xué)反應(yīng)速度，以該反應(yīng)速度對底物濃度作圖，可得到如圖3-2所示的曲線。 11圖3-2 底物濃度對酶促反應(yīng)速度的影響12從該曲線圖可以看出，當(dāng)?shù)孜餄舛容^低時，反應(yīng)速度與底物濃度的關(guān)系呈正比關(guān)系，反應(yīng)表現(xiàn)為一級反應(yīng)。然而隨著底物濃度的不斷增加，反應(yīng)速度不再按正比升高，此時反應(yīng)表現(xiàn)為混合級反應(yīng)。當(dāng)?shù)孜餄舛冗_到相當(dāng)高時，底物

6、濃度對反應(yīng)速度影響逐漸變小，最后反應(yīng)速度幾乎與底物濃度無關(guān)，這時反應(yīng)達到最大反應(yīng)速度（Vmax），反應(yīng)表現(xiàn)為零級反應(yīng)。13根據(jù)這一實驗結(jié)果，Henri和Wurtz提出了酶促化學(xué)反應(yīng)的酶底物中間絡(luò)合物學(xué)說。該學(xué)說認(rèn)為：當(dāng)酶催化某一化學(xué)反應(yīng)時，酶(E)首先需要和底物(S)結(jié)合生成酶底物中間絡(luò)合物即中間復(fù)合物(ES)，然后再生成產(chǎn)物(P)，同時釋放出酶。該學(xué)說可以用下面的化學(xué)反應(yīng)方程式來表示： S + E ES P + E14我們根據(jù)中間絡(luò)合物學(xué)說很容易解釋圖3-2所示的實驗曲線，在酶濃度恒定這一前提條件下，當(dāng)?shù)孜餄舛群苄r酶還未被底物所飽和，這時反應(yīng)速度取決于底物濃度并與之成正比。隨著底物濃度不斷

7、增大，根據(jù)質(zhì)量作用定律，中間復(fù)合物ES生成也不斷增多，而反應(yīng)速度取決于ES的濃度，故反應(yīng)速度也隨之增高但此時二者不再成正比關(guān)系。15當(dāng)?shù)孜餄舛冗_到相當(dāng)高的程度時，溶液中的酶已經(jīng)全部被底物所飽和，此時溶液中再也沒有多余的酶，雖增加底物濃度也不會有更多的中間復(fù)合物ES生成，因此酶促反應(yīng)速度變得與底物濃度無關(guān)，而且反應(yīng)達到最大反應(yīng)速度（Vmax）。當(dāng)我們以底物濃度S對反應(yīng)速度v作圖時，就形成一條雙曲線。在此需要特別指出的是，只有酶促催化反應(yīng)才會有這種飽和現(xiàn)象，而與此相反，非催化反應(yīng)則不會出現(xiàn)這種飽和現(xiàn)象。16酶促反應(yīng)的動力學(xué)方程式（米氏方程） 1913年Michaelis和Menten兩位科學(xué)家在前

8、人工作的基礎(chǔ)上，根據(jù)酶促反應(yīng)的中間絡(luò)合物學(xué)說，推導(dǎo)出一個數(shù)學(xué)方程式，用來表示底物濃度與酶反應(yīng)速度之間的量化關(guān)系，通常把這個數(shù)學(xué)方程式稱為米氏方程：其中Km稱為米氏常數(shù) 17米氏常數(shù)的含義Km值就代表著反應(yīng)速度達到最大反應(yīng)速度一半時的底物濃度。 18米氏常數(shù)的應(yīng)用價值Km是酶的一個特征性常數(shù)：也就是說Km的大小只與酶本身的性質(zhì)有關(guān)，而與酶濃度無關(guān)。 Km值還可以用于判斷酶的專一性和天然底物，Km值最小的底物往往被稱為該酶的最適底物或天然底物。Km可以作為酶和底物結(jié)合緊密程度的個度量指標(biāo)，用來表示酶與底物結(jié)合的親和力大小。已知某個酶的Km值，就可以計算出在某一底物濃度條件下，其反應(yīng)速度相當(dāng)于Vma

9、x的百分比。 Km值還可以幫助我們推斷具體條件下某一代謝反應(yīng)的方向和途徑，只有Km值小的酶促反應(yīng)才會在競爭中占優(yōu)勢。 193.3抑制劑對酶促反應(yīng)速度的影響由于酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，凡可使酶蛋白變性而引起酶活力喪失的作用都稱為失活作用(inactivation)。如果由于酶必需基團的化學(xué)性質(zhì)發(fā)生改變，但酶并未發(fā)生變性，而引起酶活力降低或喪失的作用則稱為抑制作用(inhibition)。導(dǎo)致酶發(fā)生抑制作用的物質(zhì)稱為抑制劑(inhibitor)。20由于抑制作用與變性作用從本質(zhì)而言是不同的，因此與變性劑對酶的變性作用無選擇性不同的是，抑制劑對酶的抑制作用是有選擇性的，即一種抑制劑只能使某一種酶或?qū)δ骋活?/p>

10、酶產(chǎn)生抑制作用。21對酶抑制作用的探討是研究酶的結(jié)構(gòu)與功能、酶的催化機制以及闡明機體代謝途徑的基本手段，也可以為醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)中設(shè)計新藥物和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中設(shè)計新農(nóng)藥提供重要的理論依據(jù)，從這個角度而言，對酶抑制作用的研究不僅具有重要的理論意義，而且具有突出的實踐價值。223.3.1抑制作用的類型根據(jù)抑制劑與酶的作用方式的區(qū)別以及抑制作用是否可逆，我們可以將抑制作用分為兩大類，即：不可逆的抑制作用可逆的抑制作用。233.3.1.1 不可逆的抑制作用由于抑制劑與酶的必需基團以共價鍵的形式結(jié)合而引起酶活力降低或喪失，因此不能用透析、超濾等物理方法去除抑制劑而使酶復(fù)活，這種抑制作用是不可逆的，我們稱之為不可逆抑制

11、。此時被抑制的酶分子受到抑制劑對其不同程度的化學(xué)修飾，因此不可逆抑制從本質(zhì)上來說就是酶的修飾抑制。24不可逆抑制劑 通常把不可逆抑制劑分為兩種類型，即非專一性不可逆抑制劑和專一性不可逆抑制劑。25非專一性不可逆抑制劑 主要包括以下六大類：a)有機磷化合物b)有機汞、有機砷化合物：抑制含巰基的酶。c)重金屬鹽：能使酶蛋白變性而失活。d)烷化劑：與酶必需基團中的巰基、氨基、羧基、咪唑基和硫醚基等結(jié)合，從而抑制酶活性。e)硫化物、氰化物和CO：這類物質(zhì)能通過與酶中金屬離子形成較為穩(wěn)定絡(luò)合物的形式，來抑制酶的活性。f)青霉素（Penicillin）：青霉素可通過與糖肽轉(zhuǎn)肽酶活性部位絲氨酸羥基共價結(jié)合的

12、方式，使糖肽轉(zhuǎn)肽酶失活，導(dǎo)致細菌細胞壁合成受阻，從而損害細菌生長。26專一性不可逆抑制劑 可以分為Ks型和Kat型兩大類。a)Ks型不可逆抑制劑：具有與底物相類似的結(jié)構(gòu)b)Kat型不可逆抑制劑：該類抑制劑不但具有與天然底物相類似的結(jié)構(gòu)，而且抑制劑本身也是酶的底物，這類不可逆抑制劑的特點是專一性極高，因此也被稱為自殺性底物（suicide substrate）。273.3.1.2 可逆的抑制作用由于抑制劑與酶以非共價鍵的形式結(jié)合而引起酶活力降低或喪失，但是能用透析、超濾等物理方法除去抑制劑而使酶復(fù)活，這種抑制作用是可逆的，我們稱之為可逆抑制(reversible inhibition)。28根據(jù)

13、可逆抑制劑與底物的關(guān)系，我們將可逆抑制作用分為三種類型，它們分別是競爭性抑制、非競爭性抑制和反競爭性抑制。29競爭性抑制(competitive inhibition) ：是最常見的一種可逆抑制作用。抑制劑(I)與底物(S)競爭酶(E)的同一結(jié)合部位，因此抑制劑的存在直接影響底物與酶的正常結(jié)合。這是由于酶的活性部位不能同時既與底物結(jié)合又與抑制劑結(jié)合，所以在底物和抑制劑之間會產(chǎn)生競爭，從而形成一定的平衡關(guān)系。30對于絕大多數(shù)競爭性抑制劑而言，其結(jié)構(gòu)與底物結(jié)構(gòu)十分類似，因此也能與酶的活性部位結(jié)合形成可逆的酶-抑制劑復(fù)合物EI，但酶-抑制劑復(fù)合物EI不能分解成產(chǎn)物P，導(dǎo)致相應(yīng)的酶促反應(yīng)速度下降。其抑

14、制程度取決于底物和抑制劑的相對濃度，可以通過增加底物濃度的方法來解除這種抑制作用。這類抑制最典型的例子是丙二酸和戊二酸競爭與琥珀酸脫氫酶結(jié)合，但不能催化脫氫反應(yīng)。31非競爭性抑制(noncompetitive inhibition) ：這類抑制作用的特點是底物(S)和抑制劑(I)可以同時與酶(E)結(jié)合，兩者之間不存在競爭關(guān)系。但是在酶與抑制劑結(jié)合后，還可以進一步與底物結(jié)合形成酶-底物-抑制劑復(fù)合物ESI；酶與底物結(jié)合后，也可以進一步與抑制劑結(jié)合形成酶-底物-抑制劑復(fù)合物ESI。但是這種中間的三元復(fù)合物，即酶-底物-抑制劑復(fù)合物ESI不能進一步分解產(chǎn)生產(chǎn)物，因此相應(yīng)的酶促反應(yīng)速度下降。32由于這

15、類抑制劑與酶活性部位以外的基團相結(jié)合，因此其結(jié)構(gòu)與底物結(jié)構(gòu)并無相似之處，而且不能用增加底物濃度的方法來解除這種抑制作用，故稱非競爭性抑制。這類抑制最典型的例子是亮氨酸是精氨酸酶的一種非競爭性抑制劑。還有某些重金屬離子如Ag+、Cu2+、Hg2+、Pb2+等對酶的抑制作用也屬于這一類。33反競爭性抑制(uncompetitive inhibition) ：這類抑制作用的特點是只有在酶(E)與底物(S)結(jié)合后，才能與抑制劑(I)結(jié)合，形成酶-底物-抑制劑復(fù)合物ESI，與非競爭性抑制相似，這種中間的三元復(fù)合物，即酶-底物-抑制劑復(fù)合物ESI不能進一步分解產(chǎn)生產(chǎn)物，因此相應(yīng)的酶促反應(yīng)速度下降。34這種

16、抑制作用在單底物反應(yīng)中比較少見，而常見于多底物反應(yīng)中。目前已經(jīng)證明，肼類化合物對胃蛋白酶的抑制作用、氰化物對芳香硫酸酯酶的抑制作用、L-Phe和L-同型精氨酸等多種氨基酸對堿性磷酸酶的抑制作用都屬于反競爭性抑制。35圖3-3酶與底物或抑制劑結(jié)合的中間物363.3.2可逆抑制作用和不可逆抑制作用的鑒別鑒別可逆抑制作用和不可逆抑制作用，除了用透析、超濾和凝膠過濾等物理方法能否除去抑制劑來判斷外，還可采用化學(xué)動力學(xué)的方法來區(qū)分。37圖3-4 可逆抑制劑與不可逆抑制劑的區(qū)別（一）曲線1，無抑制劑；曲線2，不可逆抑制劑；曲線3，可逆抑制劑38在測定酶活力的系統(tǒng)中加入一定量的抑制劑，然后測定不同酶濃度條件

17、下的酶促反應(yīng)初速度，以酶促反應(yīng)初速度對酶濃度作圖。在測定酶活力的系統(tǒng)中不加抑制劑時，以酶促反應(yīng)初速度對酶濃度作圖得到如圖3-4曲線1所示的一條通過原點的直線；當(dāng)測定酶活力的系統(tǒng)中加入一定量的不可逆抑制劑時，由于抑制劑會使一定量的酶失活，因此只有加入的酶量大于不可逆抑制劑的量時，才表現(xiàn)出酶活力。39以酶促反應(yīng)初速度對酶濃度作圖得到如圖3-4曲線2所示的一條與曲線1平行的相交于橫坐標(biāo)正側(cè)的直線，所以不可逆抑制劑的作用相當(dāng)于把原點向右移動；當(dāng)測定酶活力的系統(tǒng)中加入一定量的可逆抑制劑時，由于抑制劑的量是恒定的，因此以酶促反應(yīng)初速度對酶濃度作圖得到如圖3-4曲線3所示的一條通過原點，但斜率較低于曲線1的

18、直線。403.3.3可逆抑制作用動力學(xué)對于可逆抑制劑與酶結(jié)合后產(chǎn)生的抑制作用，可以根據(jù)米氏學(xué)說基本原理加以推導(dǎo)，來定量說明可逆抑制劑對酶促反應(yīng)速度的影響，下面著重討論三種類型可逆抑制作用的化學(xué)動力學(xué)。413.3.3.1 競爭性抑制在競爭性抑制中，底物(S)或抑制劑(I)與酶(E)的結(jié)合都是可逆的，因此存在著如下的化學(xué)平衡式：42在加入競爭性抑制劑后，Vmax不變，Km變大，KmKm，而且Km隨抑制劑濃度I的增加而增加。抑制分?jǐn)?shù)與抑制劑濃度I成正比，而與成反應(yīng)物濃度S反比。雙倒數(shù)作圖所得直線相交于縱軸，這就是競爭性抑制作用的特點。43圖3-5 競爭性抑制曲線443.3.3.2 非競爭性抑制在非競

19、爭性抑制中，抑制劑(I)與酶(E)或酶-底物復(fù)合物(ES)以及底物(S)與酶-抑制劑復(fù)合物(EI)的結(jié)合都是可逆的，因此存在著如下的化學(xué)平衡式：45在加入非競爭性抑制劑后，Km值不變，Vmax變小，而且Km= Km，Vmax隨I的增加而減小。抑制分?jǐn)?shù)與抑制劑濃度I成正比，而與底物濃度S無關(guān)，即I不變時，任何S的抑制分?jǐn)?shù)是一個常數(shù)。雙倒數(shù)作圖所得直線相交于橫軸，這是非競爭性抑制作用的特點。46圖3-6 非競爭性抑制曲線473.3.3.3 反競爭性抑制反競爭性抑制的特點是，酶(E)必須先與底物(S)結(jié)合，然后才與抑制劑(I)結(jié)合，即抑制劑(I)與酶-底物復(fù)合物(ES)的結(jié)合是可逆的，因此存在著如下

20、的化學(xué)平衡式：48在加入反競爭性抑制劑后，Km及Vmax都變小，而且KmKm，VmaxVmax，即表觀Km及表觀Vmax，都隨I的增加而減小。抑制分?jǐn)?shù)既與抑制劑濃度I成正比，也與底物濃度S成正比。雙倒數(shù)作圖為一組平行線，這是反競爭性抑制作用的特點。49圖3-7 反競爭性抑制曲線50為了方便理解和記憶，我們現(xiàn)將無抑制劑和有抑制劑等不同情況下的米氏方程和Vmax及Km的變化總結(jié)歸納在表3-1中。51為了便于比較三種抑制類型的區(qū)別，我們可以用Dixon作圖法求Ki，只要以抑制劑濃度I為橫坐標(biāo)，以酶促反應(yīng)速度的倒數(shù)1/v為縱坐標(biāo)，采用一個以上的底物濃度S，然后給出不同S時的直線，再由這些直線的交點即可

21、以得到Ki，如圖3-8所示。 52圖3-8 Dixon作圖法求Ki（S2S1）A. 非競爭性抑制 B. 競爭性抑制 C. 反競爭性抑制533.4 其它因素對酶促反應(yīng)速度的影響其它各種影響酶促反應(yīng)速度的因素主要包括溫度、pH和激活劑等。543.4.1溫度對酶促反應(yīng)速度的影響和絕大多數(shù)化學(xué)反應(yīng)一樣，酶促化學(xué)反應(yīng)速度也和溫度密切相關(guān)。溫度對酶促化學(xué)反應(yīng)速度的影響主要表現(xiàn)在兩個方面，其一是當(dāng)溫度升高時，與一般化學(xué)反應(yīng)一樣，反應(yīng)速度加快，這種影響可以用反應(yīng)的溫度系數(shù)來衡量。55所謂反應(yīng)的溫度系數(shù)是指反應(yīng)溫度提高10 ，其反應(yīng)速度與原來反應(yīng)速度之比，通常用Q10來表示。對大多數(shù)酶而言，酶促化學(xué)反應(yīng)的溫度系

22、數(shù)Q10多為2，即溫度每升高10，酶促化學(xué)反應(yīng)速度為原反應(yīng)速度的2倍。其二是由于酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，因此隨著溫度逐漸升高，酶蛋白會因逐漸變性而失活從而導(dǎo)致酶促化學(xué)反應(yīng)速度下降。56在不同溫度條件下進行某種酶促化學(xué)反應(yīng)，然后將所測得的酶促反應(yīng)速度相對于溫度來作圖，即可得到如圖3-9所示的鐘罩形曲線。從該曲線我們可以看出，在較低的溫度范圍內(nèi)，酶促化學(xué)反應(yīng)速度隨溫度升高而增大，但在超過一定溫度后，酶促化學(xué)反應(yīng)速度不見上升反而下降，因此只有在某一溫度條件下，酶促化學(xué)反應(yīng)速度達到最大值，通常把這個溫度稱為酶促化學(xué)反應(yīng)的最適溫度(optimum temperature)。在一定條件下每種酶都有其催化反應(yīng)的最

23、適溫度。57一般來說，動物細胞內(nèi)的酶最適溫度一般為3540，植物細胞中的酶最適溫度較動物細胞中稍高，通常在4050之間，而微生物中的酶最適溫度差別則較大，如用于進行PCR反應(yīng)的Taq DNA聚合酶的最適溫度可高達70。58需要指出的是，最適溫度不是酶的特征物理常數(shù)，相反它常常受到其他各種條件如底物種類、作用時間、pH和離子強度等因素影響。一般而言，酶促反應(yīng)進行時間長時酶的最適溫度低，酶促反應(yīng)進行時間短則最適溫度高，所以只有在規(guī)定的酶促反應(yīng)時間內(nèi)才可確定酶的最適溫度。59圖3-9 溫度對酶促反應(yīng)速度的影響 酶在固體狀態(tài)下比在溶液中對溫度的耐受力更高。酶的冰凍干粉制劑通常在冰箱中可存放幾個月以上，

24、而酶溶液一般在冰箱中只能保存數(shù)周。所以酶制劑以固體保存為佳。604.5.2 pH對酶促反應(yīng)速度的影響除溫度影響之外，酶的活力還受到環(huán)境pH的影響。通常在一定pH下，酶會表現(xiàn)出最大活力，而一旦高于或低于此pH，酶活力就會降低，我們把表現(xiàn)出酶最大活力時的pH稱為該酶的最適pH，在不同pH條件下進行某種酶促化學(xué)反應(yīng)，然后將所測得的酶促反應(yīng)速度相對于pH來作圖，即可得到如圖3-10所示的鐘罩形曲線。61圖3-10 pH對酶活力的影響62與酶促化學(xué)反應(yīng)的最適溫度不同的是，各種酶在一定條件下都有其特定的最適pH，因此最適pH是酶的特性之一。但是酶的最適pH并不是一個常數(shù)，它受諸如底物種類和濃度、緩沖液種類

25、和濃度等眾多因素的影響，因此只有在一定條件下最適pH才有意義。63絕大多數(shù)酶的最適pH在58之間，動物體內(nèi)的酶最適pH多在6.58.0之間，植物及微生物中的酶酶最適pH多在4.56.5左右。但并不排除例外，如胃蛋白酶的最適pH為1.5，肝中精氨酸酶最適pH為9.7等等。64pH影響酶活力的原因可能包括以下幾個方面：(1)過酸或過堿使酶的空間結(jié)構(gòu)遭到破壞，引起酶變性從而導(dǎo)致酶構(gòu)象的改變、酶活性隨之喪失。(2)當(dāng)pH改變不是十分劇烈時，酶雖未發(fā)生變性，但其活力已經(jīng)受到影響。這是由于pH影響了底物的解離狀態(tài)或酶分子活性部位上有關(guān)基團的解離狀態(tài)或酶-底物復(fù)合物的解離狀態(tài)，而使底物不能與酶結(jié)合形成酶-底物復(fù)合物，或者形成酶-底物復(fù)合