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1、第 PAGE28 頁 共 NUMPAGES28 頁生理學(xué)學(xué)生實(shí)驗(yàn)報(bào)告昆明理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院 生理學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告(供臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)使用 )實(shí)驗(yàn)一 一 坐骨神經(jīng) 腓腸肌標(biāo)本制備 1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)基本得組織分離技術(shù); 2、學(xué)習(xí)與掌握制備蛙類坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本得方法; 3、了解刺激得種類。 實(shí)驗(yàn)原理蛙類得一些基本生命活動(dòng)與生理功能與恒溫動(dòng)物相似,若將蛙得神經(jīng)肌肉標(biāo)本放在任氏液中,其興奮性在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)可保持不變。若給神經(jīng)或肌肉一次適宜刺激,可在神經(jīng)與肌肉上產(chǎn)生一個(gè)動(dòng)作電位,肉眼可瞧到肌肉收縮與舒張一次,表明神經(jīng)與肌肉產(chǎn)生了一次興奮。在機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)中常利用蛙得坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本研究神經(jīng)、肌肉得興奮、

2、興奮性,刺激與反應(yīng)得規(guī)律與肌肉收縮得特征等,制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本就是機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)得一項(xiàng)基本操作技術(shù)。3 實(shí)驗(yàn)對(duì)象 蛙 4 實(shí)驗(yàn)藥品 任氏液 儀器與器械普通剪刀、手術(shù)剪、眼科鑷(或尖頭無齒鑷)、金屬探針(解剖針)、玻璃分針、蛙板(或玻璃板)、蛙釘、細(xì)線、培養(yǎng)皿、滴管、電子刺激器.6 實(shí)驗(yàn)方法與步驟 破壞腦、脊髓 取蛙一只,用自來水沖洗干凈(勿用手搓)。左手握住蛙,使其背部向上,用大拇指或食指使頭前俯(以頭顱后緣稍稍拱起為宜).右手持探針由頭顱后緣得枕骨大孔處垂直刺入椎管(圖 31)。然后將探針改向前刺入顱腔內(nèi),左右攪動(dòng)探針3 次,搗毀腦組織。如果探針在顱腔內(nèi),應(yīng)有碰及顱底骨得感覺。再將探針退回至

3、枕骨大孔,使針尖轉(zhuǎn)向尾端,捻動(dòng)探針使其刺入椎管,搗毀脊髓。此時(shí)應(yīng)注意將脊柱保持平直。針進(jìn)入椎管得感覺就是,進(jìn)針時(shí)有一定得阻力,而且隨著進(jìn)針蛙出現(xiàn)下肢僵直或尿失禁現(xiàn)象。若腦與脊髓破壞完全,蛙下頜呼吸運(yùn)動(dòng)消失,四肢完全松軟,失去一切反射活動(dòng).此時(shí)可將探針反向捻動(dòng),退出椎管。如蛙仍有反射活動(dòng),表示腦與脊髓破壞不徹底,應(yīng)重新破壞。圖 2-11 搗毀蟾蜍脊髓 剪除軀干上部、皮膚及內(nèi)臟用左手捏住蛙得脊柱,右手持粗剪刀在前肢腋窩處連同皮膚、腹肌、脊柱一并剪斷(圖31-2),然后左手握住蛙得后肢,緊靠脊柱兩側(cè)將腹壁及內(nèi)臟剪去(注意避開坐骨神經(jīng)),并剪去肛門周圍得皮膚,留下脊柱與后肢(圖13)。圖-2 橫斷脊柱

4、圖 2-1-3 剪除軀干上部及內(nèi)臟 剝皮一只手捏住脊柱得斷端(注意不要捏住脊柱兩側(cè)得神經(jīng)),另一只手捏住其皮膚得邊緣,向下剝?nèi)ト亢笾闷つw(圖 2-1)。將標(biāo)本放在干凈得任氏液中.將手及使用過得探針、剪刀全部沖洗干凈.圖 24 剝?nèi)テつw 分離兩腿用鑷子取出標(biāo)本,左手捏住脊柱斷端,使標(biāo)本背面朝上,右手用粗剪刀剪去突出得骶骨(也可不進(jìn)行此步).然后將脊柱腹側(cè)向上,左手得兩個(gè)手指捏住脊柱斷端得橫突,另一手指將兩后肢擔(dān)起,形成一個(gè)平面。此時(shí)用粗剪刀沿正中線將脊柱盆骨分為兩半(注意勿傷坐骨神經(jīng))。將其中一半后肢標(biāo)本置于盛有任氏液中備用,另一半放在蛙板上進(jìn)行下列操作. 辯認(rèn)蛙后肢得主要肌肉 蛙類得坐骨神

5、經(jīng)就是由第 7、9 對(duì)脊神經(jīng)從相對(duì)應(yīng)得椎間孔穿出匯合而成,行走于脊柱得兩側(cè),到尾端(肛門處)繞過坐骨聯(lián)合,到達(dá)后肢背側(cè),行走于梨狀肌下得股二頭肌與半膜肌之間得坐骨神經(jīng)溝內(nèi),到達(dá)膝關(guān)節(jié)腘窩處有分支進(jìn)入腓腸肌。 游離坐骨神經(jīng)與腓腸肌 用蛙釘或左手得兩個(gè)手指將標(biāo)本繃直、固定。先在腹腔面用玻璃分針沿脊柱游離坐骨神經(jīng),然后在標(biāo)本得背側(cè)于股二頭肌與半膜肌得肌肉縫內(nèi)將坐骨神經(jīng)與周邊得結(jié)締組織分離直到腘窩,但不要傷及神經(jīng),其分支待以后用手術(shù)剪剪斷。同樣用玻璃分針將腓腸肌與其下得結(jié)締組織分離并在其跟腱處穿線、結(jié)扎。 剪去其它不用得組織,操作應(yīng)從脊柱向小腿方向進(jìn)行。(a)剪去多余得脊柱與肌肉將后肢標(biāo)本腹面向上,將

6、坐骨神經(jīng)連同 23 節(jié)脊椎用粗剪刀從脊柱上剪下來.再將標(biāo)本背面向上,用鑷子輕輕提起脊椎,自上而下剪去支配腓腸肌以外得神經(jīng)分支,直至腘窩(圖31-5A),并搭放在腓腸肌上。沿膝關(guān)節(jié)剪去股骨周圍得肌肉,并將股骨刮凈,用粗剪刀剪去股骨上端得 1/(保留/),制成坐骨神經(jīng)小腿得標(biāo)本。(b)完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本將脊椎與坐骨神經(jīng)從腓腸肌上取下,提起腓腸肌得結(jié)扎線剪斷跟腱。用粗剪剪去膝關(guān)節(jié)以下部位,便制成了坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本(圖 315B). 檢驗(yàn)標(biāo)本用鑷子夾持坐骨神經(jīng)中樞端,如腓腸肌發(fā)生迅速而明顯得收縮,說明標(biāo)本得興奮性良好。標(biāo)本浸入盛有任氏液得培養(yǎng)皿中備用。圖 2-5 分離坐骨神經(jīng)(A)與坐骨神經(jīng)腓腸

7、標(biāo)本(B) 7 注意事項(xiàng) 在操作過程中,應(yīng)給神經(jīng)與肌肉滴加任氏液,防止表面干燥,以免影響標(biāo)本得興奮性。標(biāo)本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘,使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定,再開始實(shí)驗(yàn)效果會(huì)較好。8 實(shí)驗(yàn)圖像 10 結(jié)果及分析p 搗毀腦脊髓后得蛙應(yīng)有何表現(xiàn)? 制備好得神經(jīng)肌肉標(biāo)本為何要放在任氏液中? 如何判斷制備得神經(jīng)肌肉標(biāo)本得興奮性? 1 思考題 用各種刺激檢驗(yàn)標(biāo)本興奮性時(shí),為什么要從中樞端開始? 刺激有幾種形式?驗(yàn)實(shí) 實(shí)驗(yàn)二 二心臟灌流 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、1。法方流灌臟心體離蛙習(xí)學(xué)2、觀察 Na 、K 、a 2+ 、H + 、腎上腺素、乙酰膽堿等因素對(duì)心臟活動(dòng)得影響。 2 實(shí)驗(yàn)原理心臟得正常節(jié)律性活動(dòng)需要一個(gè)適宜

8、得內(nèi)環(huán)境(如 Na + 、K + 、Ca 2+ 等得濃度及比例、pH 值與溫度),而內(nèi)環(huán)境得變化則直接影響到心臟得正常節(jié)律性活動(dòng)。在體心臟還受交感神經(jīng)與迷走神經(jīng)得雙重支配,交感神經(jīng)末梢釋放去甲腎上腺素,使心肌收縮力加強(qiáng),傳導(dǎo)速度加快,心率加快;迷走神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿,使心肌收縮力減弱,心肌傳導(dǎo)速度減慢,心率減慢。將失去神經(jīng)支配得離體心臟保持于適宜得理化環(huán)境中(如任氏液),在一定時(shí)間內(nèi)仍能產(chǎn)生自動(dòng)節(jié)律與收縮.而改變?nèi)问弦旱媒M成成分,離體心臟得活動(dòng)就會(huì)受到影響。3 實(shí)驗(yàn)對(duì)象蛙4 實(shí)驗(yàn)藥品 、素腺上腎 000:1、CK%1、lCa%、laN%5、液氏任:00 乙酰膽堿 5 儀器與器械計(jì)算機(jī)生物信號(hào)

9、采集與處理系統(tǒng)(或二道生理記錄儀)、張力換能器、蛙類常用手術(shù) 器械一套、玻璃分針、蛙板、蛙釘、蛙心插管、蛙心夾、試管夾、滴管(支)、試劑瓶( 個(gè))、燒杯、雙凹夾、萬能支架、細(xì)線。 6 實(shí)驗(yàn)方法與步驟1、標(biāo)本得制備(1)離體蛙心標(biāo)本制備(斯氏蛙心插管法)取蟾蜍一只,打開胸腔,暴露心臟。在主動(dòng)脈干下方穿雙線,一條在左主動(dòng)脈上端結(jié)扎作插管時(shí)牽引用;另一根在動(dòng)脈球上方打一活結(jié)備用(用以結(jié)扎與固定插管)。玻璃分針將心臟向前翻轉(zhuǎn),在心臟背側(cè)找到靜脈竇,在靜脈竇以外得地方做一結(jié)扎(切忽扎住靜脈竇),以阻止血液繼續(xù)回流心臟(也可不進(jìn)行此操作)。圖1 插管進(jìn)入心室示意圖 左手提起左主動(dòng)脈上方得結(jié)扎線,右手持眼科

10、剪在左主動(dòng)脈根部(動(dòng)脈球前端)沿向心方向剪一斜口,將盛有少許任氏液、大小適宜得蛙心插管由此開口處輕輕插入動(dòng)脈球。當(dāng)插管尖端到達(dá)動(dòng)脈球基部時(shí),應(yīng)將插管稍向后退(因主動(dòng)脈內(nèi)有螺旋瓣會(huì)阻礙插管前進(jìn)),并將插管尾端稍向右主動(dòng)脈方向及腹側(cè)面傾斜,使插管尖端向動(dòng)脈球得背部后方及心尖方向推進(jìn),在心室收縮時(shí)經(jīng)主動(dòng)脈瓣進(jìn)入心室(見圖 3-1)。注意插管不可插得過深,插管得斜面應(yīng)朝向心室腔,以免插管下口被心室壁堵住。若插管中任氏液面隨心室得收縮而上下波動(dòng),則表明插管進(jìn)入心室,可將動(dòng)脈球上已準(zhǔn)備好得松結(jié)扎緊,并固定于插管側(cè)面得鉤上,以免蛙心插管滑出心室。剪斷結(jié)扎線上方得血管,輕輕提起插管與心臟,在左右肺靜脈與前后腔

11、靜脈下引一細(xì)線并結(jié)扎(參考圖 31),于結(jié)扎線外側(cè)剪去所有相連得組織則得到離體蛙心。此步操作中應(yīng)注意靜脈竇不受損傷并與心臟連結(jié)良好.最后,用任氏液反復(fù)換洗插管內(nèi)得任氏液,直到插管中無殘留血液為止。此時(shí),離體蛙心標(biāo)本制備成功,可供實(shí)驗(yàn).左手拉住腹主動(dòng)脈上結(jié)扎線頭,于動(dòng)脈球上剪一小口,將裝有魚用生理鹽水得得蛙心套管插入動(dòng)脈球,并順勢推入心室,此時(shí)可以瞧到套管內(nèi)得液面隨心臟搏動(dòng)而上下移動(dòng)。用滴管不斷更換套管中得灌流液,沖洗心室直至沒有血液為止,束緊備用線連同套管尖端一起結(jié)扎,并將線頭系在套管壁上得小突起上,達(dá)到固定作用。最后剪斷腹主動(dòng)脈,提起心臟用線盡量遠(yuǎn)離靜脈竇將其她血管結(jié)扎。在結(jié)扎外方剪斷各組織

12、.此時(shí)心臟完全離體,借灌流液而正常搏動(dòng)。、接連置裝驗(yàn)實(shí) 固管插心蛙將-43 圖按定于支架上,在心室舒張時(shí)將連有一細(xì)線得蛙心夾在心臟舒張時(shí)夾住心尖,并將細(xì)線以適宜得緊張度與張力換能器相連。張力傳感器得輸出線與計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)或二道生理記錄儀得輸入通道相連。()記錄心臟在只有任氏液時(shí)得收縮曲線,觀察心率及收縮幅度,并將其作為正常對(duì)照。(2)Na+得作用:用吸管吸出插管中得任氏液后,換以等量得 0、65%氯化鈉溶液,記錄并觀察心跳得變化。有變化出現(xiàn)時(shí),應(yīng)立即將插管內(nèi)液體吸出,并以等量任氏液換洗 23次,至心跳恢復(fù)正常。)3(,中液流灌入加液溶鈣化氯得2 滴 2將:用作得+2aC記錄并觀察心

13、跳變化。有變化出現(xiàn)時(shí),應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常.(4)K+得作用:將 1滴 2%得氯化鉀溶液加入灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時(shí),應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。(5)腎上腺素得作用:將 12 滴 1:0000 腎上腺素加入灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時(shí),應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。(6)乙酰膽堿得作用:將 1滴 1:000 乙酰膽堿加入灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時(shí),應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次,至心跳曲線恢復(fù)正常。7 注意事項(xiàng)、制備離體心臟標(biāo)本時(shí),勿傷及靜脈竇。、蛙心夾應(yīng)在心室舒張期一次性夾住心尖,避

14、免因夾傷心臟而導(dǎo)致漏液.3、每一觀察項(xiàng)目都應(yīng)先描記一段正常曲線,然后再加藥并記錄其效應(yīng).加藥時(shí)應(yīng)在心跳曲線上予以標(biāo)記,以便觀察分析p .、各種滴管應(yīng)分開,不可混用.5、在實(shí)驗(yàn)過程中,插管內(nèi)灌流液面高度應(yīng)保持恒定;儀器得各種參數(shù)一經(jīng)調(diào)好,應(yīng)不再變動(dòng)。、6.果結(jié)驗(yàn)實(shí)得后加添量劑物藥意注切密并,加滴量適再可,顯明不果效若后藥給給藥量必須適度,加藥出現(xiàn)變化后,就應(yīng)立即更換任氏液,否則會(huì)造成不可挽回得后果,尤其就是 K,H+稍有過量,即可導(dǎo)致難以恢復(fù)得心臟停跳。7、標(biāo)本制備好后,若心臟功能狀態(tài)不好(不搏動(dòng)),可向插管內(nèi)滴加 12 滴 2%CC或 1:10000 腎上腺素,以促進(jìn)(起動(dòng))心臟搏動(dòng)。在實(shí)驗(yàn)程

15、序安排上也可考慮促進(jìn)與抑制心臟搏動(dòng)得藥物交換使用。、謹(jǐn)防灌流液沿絲線流入張力傳感器內(nèi)而損壞其電子元件。 問題與解釋1、插管插入后,管中得液面不能隨心臟搏動(dòng)而波動(dòng),或波動(dòng)幅度不大,影響結(jié)果得觀察。()插管插到了主動(dòng)脈得螺旋瓣中,未進(jìn)入心室。(2)插管插到了主動(dòng)脈壁肌肉與結(jié)締組織得夾層中.)3(。壁室心到觸抵端尖管插 (4)插管尖端被血凝塊堵塞。2、插管后,心臟不跳動(dòng).)(。損受竇脈靜或室心(2)插管尖端深入心室太多;或尖端太粗,心臟太小(魚類容易出現(xiàn))影響到心室臟得收縮。(3)心臟機(jī)能狀態(tài)不好。 實(shí)驗(yàn) 圖像 氯化鈉 氯化鈣 氯化鉀 腎上腺素 乙酰膽堿 10 實(shí)驗(yàn)結(jié)果剪貼記錄曲線,并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行

16、分析p 討論。驗(yàn)實(shí) 實(shí)驗(yàn) 三影響尿 液 生成得因素 1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康脛?dòng)對(duì)素因理生同不察觀,法方得流引管套管尿輸或管套胱膀用習(xí)學(xué)物尿量得影響。加深對(duì)尿生成調(diào)節(jié)得理解。2 實(shí)驗(yàn)原理位單腎過流液血是就尿時(shí)經(jīng)過腎小球?yàn)V過,腎小管重吸收與分泌而形成得,凡對(duì)這些過程有影響得因素都可影響尿得生成。腎小球得濾過作用取決于腎小球得有效濾過壓,其大小取決于腎小球毛細(xì)血管血壓,血漿得膠體滲透壓與腎小囊內(nèi)壓。影響腎小管重吸收作用主要就是管內(nèi)滲透壓與腎小管上皮細(xì)胞得重吸收能力,后者又為多種激素所調(diào)節(jié)。 3 實(shí)驗(yàn)對(duì)象兔 4 實(shí)驗(yàn)藥品 醫(yī)用酒精、生理鹽水、溫?zé)岬蒙睇}水,利尿激素。 儀器與設(shè)備計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)(或二道

17、生理記錄儀、電子刺激器)、壓力換能器、保護(hù)電極、記滴器、恒溫浴槽、哺乳動(dòng)物手術(shù)器械一套、兔手術(shù)臺(tái)、氣管插管、膀胱導(dǎo)管(或輸尿管導(dǎo)管)、動(dòng)脈插管、注射器(1 ml、0 ml)及針頭、燒杯、試管架及試管、酒精燈等。6 方法與步驟1、標(biāo)本得制備(1)實(shí)驗(yàn)兔在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)給予足夠得菜與飲水.(2)稱重動(dòng)物,耳緣靜脈注射0得氨基甲酸乙酯溶液(5 mlkg體重)進(jìn)行麻醉,待動(dòng)物麻醉后仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上。()在頸部手術(shù)暴露氣管,施氣管插管;分離左側(cè)頸總動(dòng)脈,按常規(guī)將充滿肝素生理鹽水得動(dòng)脈插管插入其內(nèi),通過血壓換能器連至記錄裝置,描記血壓。分離右側(cè)得迷走神經(jīng),穿線備用,用溫生理鹽水紗布覆蓋創(chuàng)面。()尿液得收集可選

18、用膀胱導(dǎo)管法或輸尿管插管法。、骨恥自法尿?qū)щ装蚵?lián)合上緣向上沿正中線作 4 長皮膚切口,再沿腹白線剪開腹壁及腹膜(勿傷腹腔臟器),找到膀胱,將膀胱向尾側(cè)翻至體外(勿使腸管外露,以免血壓下降)。再于膀胱底部找出兩側(cè)輸尿管,認(rèn)清兩側(cè)輸尿管在膀胱開口得部位。小心地從兩側(cè)輸尿管下方穿一絲線,將膀胱上翻,結(jié)扎膀胱頸部。然后,在膀胱頂部血管較少處作一荷包縫合,再在其中央剪一小口,插入膀胱導(dǎo)管,收緊縫線、結(jié)扎固定.膀胱導(dǎo)管得喇叭口應(yīng)對(duì)著輸尿管開口處并緊貼膀胱壁。膀胱導(dǎo)管得另一端通過橡皮導(dǎo)管與直管連接至記滴器,并在它們中間充滿生理鹽水。管尿輸插管法滴器。手術(shù)完畢后,用溫生理鹽水紗布覆蓋腹部切口。圖 37 兔輸尿

19、管及膀胱導(dǎo)尿法 1、輸尿管 、插膀胱導(dǎo)管部位 3、膀胱導(dǎo)管 2、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 (1)記錄正常情況下每分鐘尿分泌得滴數(shù)。()耳緣靜脈注射8得 0、9Nal 溶液 20,觀察尿量得變化。()耳緣靜脈注射去利尿激素 1ml,觀察尿量得變化.)(切,毛剪部腹上:術(shù)手部腹上開胸骨劍突部位得皮膚,沿腹白線切開長約 2 c得切口,小心分離、暴露劍突軟骨及骨柄,用金冠剪剪斷劍骨柄,將縛有長線得金屬鉤鉤于劍突中間部位,線得另一端連張力換能器, 記錄呼吸。()迷走神經(jīng)得作用:切斷一側(cè)迷走神經(jīng),呼吸運(yùn)動(dòng)有何變化? 7項(xiàng)事意注 注意事項(xiàng)1、選擇家兔體重在 2、3、0g 左右,實(shí)驗(yàn)前給兔多喂菜葉,或用橡皮導(dǎo)尿管向兔胃內(nèi)灌入

20、 405 清水,以增加基礎(chǔ)尿量.、手術(shù)動(dòng)作要輕揉,腹部切口不宜過大,以免造成損傷性閉尿.剪開腹壁避免傷及內(nèi)臟。3、因?qū)嶒?yàn)中要多次進(jìn)行耳緣靜脈注射,因此要注意保護(hù)好兔得耳緣靜脈。應(yīng)從耳緣靜脈得遠(yuǎn)端開始注射,逐漸向耳根部推進(jìn).、圍周與壁管入插免避意注,時(shí)管插管尿輸?shù)媒Y(jié)締組織中;插管要妥善固定,不能扭曲,否則會(huì)阻礙尿得排出。、5得序順驗(yàn)實(shí)安排就是:在尿量增加得基礎(chǔ)上進(jìn)行減少尿生成得實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,在尿量少得基礎(chǔ)上進(jìn)行促進(jìn)尿生成得實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目.一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)需在上一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)作用消失,血壓、尿量基本恢復(fù)正常水平時(shí)再開始。6、刺激迷走神經(jīng)強(qiáng)度不宜過強(qiáng),時(shí)間不宜過長,以免血壓過低,心跳停止。8 問題 分析p 1、開始實(shí)驗(yàn)尚未

21、給藥時(shí),尿量就很少或無尿(1) 兔體缺水()兔本身機(jī)能狀況低下,()輸尿管插管未插入輸尿管內(nèi),或輸尿管堵塞,或輸尿管扭曲。)4(過口切部腹大,引起抗利尿激素分泌,血壓下降,尿量減少。(5) 氣溫太低,動(dòng)物未保溫,血管收縮,尿量減少. 9 實(shí)驗(yàn) 圖像 正常 一側(cè)神經(jīng)被剪 兩側(cè)神經(jīng)被剪 增大無效腔 01 實(shí)驗(yàn)結(jié)果、壓張舒、壓縮收括包(壓血得見所驗(yàn)實(shí)項(xiàng)各錄記,果結(jié)驗(yàn)實(shí)貼剪平均壓)與尿量變化。分析p 這些變化產(chǎn)生得原因。 1 思考題、靜脈快速注射生理鹽水對(duì)尿量有何影響,為什么?2、靜脈注射利尿激素對(duì)尿量有何影響,為什么? 3.迷走神經(jīng)在節(jié)律性呼吸運(yùn)動(dòng)中起何作用? 驗(yàn)實(shí) 實(shí)驗(yàn)四 四 心血管活動(dòng)得神經(jīng)體液

22、調(diào)節(jié) 1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康脤W(xué)習(xí)記錄哺乳動(dòng)物動(dòng)脈血壓得直接測定方法,并觀察神經(jīng)體液因素對(duì)心血管活動(dòng)得調(diào)節(jié)。 2 實(shí)驗(yàn)原理心 。節(jié)調(diào)得制機(jī)身自與液體、經(jīng)神受動(dòng)活管血心,下況情理生常正在臟受交感神經(jīng)與副交感神經(jīng)得支配。心交感神經(jīng)興奮時(shí),使心率加快、心肌收縮力加強(qiáng),心內(nèi)興奮傳導(dǎo)加快,心輸出量增加、動(dòng)脈血壓升高。心迷走神經(jīng)興奮時(shí),使心率減慢、心房肌收縮力減弱、房室傳導(dǎo)減慢,從而使心輸出量減少、動(dòng)脈血壓下降。在神經(jīng)調(diào)節(jié)中以頸動(dòng)脈竇-主動(dòng)脈弓得減壓反射尤為重要,當(dāng)動(dòng)脈血壓升高時(shí),壓力感受器發(fā)放沖動(dòng)增加,通過中樞反射性引起心率減慢、心肌收縮力減弱、心輸出量下降、血管舒張與外周阻力降低,使血壓降低。反之,當(dāng)動(dòng)脈壓下降時(shí)

23、,壓力感受器發(fā)放沖動(dòng)減少,神經(jīng)調(diào)節(jié)過程又使血壓回升。支配血管得交感縮血管神經(jīng)興奮時(shí),使血管收縮、外周阻力增加、動(dòng)脈血壓升高。壓得兔家力感受器得傳入神經(jīng)在頸部從迷走神經(jīng)分出,自成一支,稱為減壓神經(jīng),其傳入沖動(dòng)隨血壓變化而變化.管血心對(duì)們它。節(jié)調(diào)得素因液體等素腺上腎甲去與素腺上腎受還動(dòng)活管血心得作用既有共性,又有特殊性。關(guān)鍵取決于心、血管壁上哪一種受體占優(yōu)勢。腎上腺素對(duì) 與 受體均有激活作用,去甲腎上腺素主要激活 受體而對(duì) 受體作用很小,因而使外周阻力增加,動(dòng)脈血壓升高,但對(duì)心臟得作用要比腎上腺素弱。 3 實(shí)驗(yàn)對(duì)象 。兔家 4 實(shí)驗(yàn)藥品或(脂乙酸甲基氨02,水鹽理生3%戊巴比妥鈉),肝素(0 Um

24、l-1),:100腎上腺素,1:000 去甲腎上腺素,1:10000 乙酰膽堿. 儀器與器械計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)(或二道生理記錄儀、刺激器),兔手術(shù)臺(tái),手術(shù)器械一套,氣管插管,動(dòng)脈夾,動(dòng)脈套管、血壓換能器,保護(hù)電極,棉線,紗布,棉球、注射器(50、1、2 ml),支架,雙凹夾. 6 實(shí)驗(yàn)方法與步驟 1、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:(1)麻醉與固定:家兔稱重后,耳緣靜脈緩慢注射 20%氨基甲酸乙酯(5 mlkg-)或 3%戊巴比妥鈉(1 mkg)進(jìn)行麻醉。當(dāng)動(dòng)物四肢松軟,呼吸變深變慢,角膜反射遲鈍時(shí),表明動(dòng)物已被麻醉,即可停止注射。將麻醉得家兔仰臥位固定于兔手術(shù)臺(tái)上。(2)分離頸部神經(jīng)、血管與插氣管插管:頸

25、部剪毛,沿頸部正中線切開皮膚 57 cm,用止血鉗鈍性分離皮下組織及淺層肌肉,暴露與分離氣管;分離左、右兩側(cè)頸總動(dòng)脈(左頸總動(dòng)脈盡量分離長些,以做動(dòng)脈插管用。當(dāng)向頭端追索到甲狀軟骨上緣,可見到左頸動(dòng)脈分支為頸外與頸內(nèi)動(dòng)脈,在頸內(nèi)動(dòng)脈基部有一膨大處,為頸動(dòng)脈竇。分離右側(cè)得迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)與減壓神經(jīng)。在分離得氣管、頸總動(dòng)脈及神經(jīng)下方各穿一不同顏色得線備用(見1)。圖 3-1 頸部分離 (3)進(jìn)行氣管插管(圖 3)圖 3-5 氣管插管示意圖 (4)進(jìn)行動(dòng)脈插管做插管手術(shù)前經(jīng)耳緣靜脈注射肝素(500 Ukg1),在左側(cè)頸總動(dòng)脈插入動(dòng)脈插管(圖353)。圖 3-5頸動(dòng)脈插管示意圖 2.連接實(shí)驗(yàn)裝置:能

26、換壓血與通三過通管插脈動(dòng)將統(tǒng)系理處集采號(hào)信物生機(jī)算計(jì)器連接,血壓換能器與計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)得壓力通道連接;刺激電極與系統(tǒng)得刺激輸出連接;減壓神經(jīng)得記錄電極導(dǎo)線與系統(tǒng)得一個(gè)通道連結(jié)。啟動(dòng)計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理分析p 系統(tǒng),按系統(tǒng)程序提示進(jìn)行血壓信號(hào)定標(biāo),調(diào)整放大增益。3、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 )1(變者二察觀,形波壓血脈動(dòng)與形波電放經(jīng)神壓減下況情常正錄記化關(guān)系,注意觀察減壓神經(jīng)得群集性放電與血壓得波動(dòng)就是否同步?每一群集性放電持續(xù)時(shí)間?血壓正常值就是多少?同時(shí)辨認(rèn)血壓波得一級(jí)波與二級(jí)波,三級(jí)波(圖 7、102):圖 35 兔頸總動(dòng)脈得血壓曲線(示波器記錄)一級(jí)波(心搏波):由心室舒縮活動(dòng)所引起得血壓

27、波動(dòng),心縮時(shí)上升,心舒時(shí)下降,其頻率與心率一致。二級(jí)波(呼吸波):由呼吸運(yùn)動(dòng)所引起得血壓波動(dòng),吸氣時(shí)血壓先下降,繼而上升,呼氣時(shí)血壓先上升,繼而下降,其頻率與呼吸頻率一致.三級(jí)波:不常出現(xiàn),可能由心血管中樞得緊張性活動(dòng)得周期變化所致。)2(動(dòng)總頸閉夾脈用動(dòng)脈夾夾閉右側(cè)頸總動(dòng)脈 115 s,觀察血壓與減壓神經(jīng)放電得變化。在出現(xiàn)一段明顯變化后,突然放開動(dòng)脈夾,血壓又有何變化。()牽拉頸總動(dòng)脈手持左側(cè)頸總動(dòng)脈上得遠(yuǎn)心端結(jié)扎線,向心臟方快速牽拉 3 .觀察血壓與減壓神經(jīng)放電得變化.若持續(xù)牽拉,血壓與減壓神經(jīng)放電會(huì)有何變化? )4(注脈靜射乙酰膽堿待血壓基本穩(wěn)定后, 由耳緣靜脈注入 1:10000 乙酰

28、膽堿、20、3 ml,觀測血壓與減壓神經(jīng)放電得變化.注意動(dòng)脈血壓降低到何種程度時(shí),群集型放電才減少?或完全停止及其恢復(fù)過程。()靜脈注射去甲腎上腺素待血壓基本穩(wěn)定后,由耳緣靜脈注入 1:10000 去甲腎上腺素 0、20、3 l,觀測血壓與減壓神經(jīng)放電得變化。注意何時(shí)沖動(dòng)發(fā)放增多?何時(shí)分辨不出群集形式?直到血壓繼續(xù)增加而發(fā)放沖動(dòng)得頻率不再增加(圖 355)。圖 3 家兔減壓神經(jīng)放電與動(dòng)脈血壓得關(guān)系(示波器記錄) 注射 Ed 后(:100)1ml 1015s 后,血壓上升,減壓神經(jīng)放電增加,最后變?yōu)槌掷m(xù)發(fā)放(示波器記錄) 注射c(1:1000)0、3m 05s 后,血壓下降,減壓神經(jīng)放電頻率逐漸

29、減少最后停止(示波器記錄)()刺激迷走神經(jīng)外周端待血壓基本穩(wěn)定后,結(jié)扎并剪斷右側(cè)迷走神經(jīng),電刺激迷走神經(jīng)外周端,觀察血壓與心率得變化.待血壓變化明顯時(shí)停止刺激。)7(激刺減壓神經(jīng)在血壓基本恢復(fù)正常后,雙重結(jié)扎減壓神經(jīng),并在兩結(jié)扎線中間剪斷減壓神經(jīng),分別用中等強(qiáng)度電流刺激減壓神經(jīng)得中樞端與外周端,并同時(shí)作標(biāo)記。觀察心率與血壓變化,待血壓出現(xiàn)較明顯變化后,停止刺激。7 注意事項(xiàng)()本實(shí)驗(yàn)麻醉應(yīng)適量,麻醉藥注射速度要慢,同時(shí)注意呼吸變化,以免過量引起動(dòng)物死亡。如果實(shí)驗(yàn)時(shí)間過長,動(dòng)物蘇醒掙扎,可適量補(bǔ)充麻醉藥物。()儀器與動(dòng)物要接地,并注意適當(dāng)?shù)闷帘巍?3)每觀察一個(gè)項(xiàng)目,必須待血壓與心率恢復(fù)正常后,

30、才能進(jìn)行下一個(gè)項(xiàng)目。)4(每次靜脈注射完藥物后應(yīng)立即推注 0、 ml 生理鹽水,以防止藥液殘留在針頭內(nèi)及局部靜脈中而影響下一種藥物得效應(yīng)(5)實(shí)驗(yàn)中注射藥物較多,要注意保護(hù)耳緣靜脈。(6)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,必須結(jié)扎頸總動(dòng)脈近心端后再拔除動(dòng)脈插管。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果剪貼各項(xiàng)記錄曲線,每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)記錄必須包括實(shí)驗(yàn)前得對(duì)照、實(shí)驗(yàn)開始得標(biāo)記及實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 得注釋。比較各種處理前后血壓與減壓神經(jīng)放電有何變化,分析p 血壓與減壓神經(jīng)放電之間存在何種關(guān)系。 實(shí)驗(yàn)曲線 0 思考題 1、正常血壓曲線得一級(jí)波、二級(jí)波及三級(jí)波各有何特征?其形成機(jī)制如何? 2、動(dòng)物動(dòng)脈血壓就是怎樣形成得?如何受神經(jīng)體液調(diào)節(jié)? 3.短時(shí)間夾閉右側(cè)頸總動(dòng)脈(

31、未插管一側(cè))對(duì)全身得血壓與心率有何影響?若夾閉部位在頸動(dòng)脈竇上,影響就是否相同?4、試分析p 以上各種實(shí)驗(yàn)因素引起動(dòng)脈血壓與心率變化得機(jī)制。、如何證明減壓神經(jīng)就是傳入神經(jīng)?不能再同意作者的觀點(diǎn)!生理學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制備一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康募耙髮W(xué)習(xí)蛙類動(dòng)物雙毀髓的方法掌握制備坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的操作技術(shù),為此后有關(guān)的神經(jīng)肌肉實(shí)驗(yàn)打下基礎(chǔ)。二、實(shí)驗(yàn)原理蛙或兩棲類動(dòng)物的一些基本生命活動(dòng)及生理功能與溫血?jiǎng)游锝疲移潆x體組織需要的生活條件非常簡單,易于控制和掌握。因此在生理學(xué)實(shí)驗(yàn)中,坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本是研究神經(jīng)肌肉生理最常用的對(duì)象,經(jīng)常用來研究神經(jīng)肌肉的興奮性、刺激與反應(yīng)的規(guī)律、肌肉收

32、縮的特點(diǎn)、興奮性的周期性變化等。三、實(shí)驗(yàn)對(duì)象蟾蜍或蛙。四、實(shí)驗(yàn)器材及藥品蛙類手術(shù)器械一套(金屬探針1根,粗剪刀、眼科剪刀各1把,圓頭鑷子、眼科鑷子各1把,玻璃分針2根),蛙板和玻璃板各1塊,培養(yǎng)皿,滴管,廢物缸、鋅銅弓,絲線,棉花;任氏液。五、實(shí)驗(yàn)方法及步驟1、雙毀髓:左手握蟾蜍,背部向上。用食指按壓其頭部前端,拇指壓住軀干的背部,使頭向前俯;右手持毀髓針,由兩眼之間中線向后方劃觸,觸及兩耳后腺之間的凹陷處即是枕骨大孔的位置。將毀髓針由凹陷處垂直刺入枕骨大孔,然后針尖向前刺入顱腔,在顱腔內(nèi)攪動(dòng),以毀腦組織。再將毀髓針退至枕骨大孔,針尖轉(zhuǎn)向后方,與脊柱平行刺入椎管,以搗毀脊髓。脊髓徹底搗毀時(shí),可看到蟾蜍后肢突然蹬直,然后癱軟,此時(shí)的動(dòng)物為雙毀髓動(dòng)物。2、

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