血清鈣Ca偶氮胂Ⅲ法測(cè)定-檢驗(yàn)科生化室作業(yè)書(shū)

1、【實(shí)用】檢驗(yàn)科SOP文件藥海無(wú)涯學(xué)無(wú)止境專注醫(yī)學(xué)領(lǐng)域血清鈣Ca偶氮腫田法測(cè)定.實(shí)驗(yàn)原理偶氮腫出比色終點(diǎn)法。鈣與偶氮腫田在中性條件下形成藍(lán)色復(fù)合 物，顯色強(qiáng)度與鈣濃度成正比。加入8-羥基唾咻-5-磺酸掩蔽鎂的干擾。.標(biāo)本采集病人準(zhǔn)備：無(wú)特殊要求。類型：血清、肝素血漿或尿液。.標(biāo)本存放：血清/血漿穩(wěn)定性：2025c保存可穩(wěn)定7天；48c 保存可穩(wěn)定3周；-20C保存可穩(wěn)定8個(gè)月。尿液穩(wěn)定性：2025c 保存可穩(wěn)定2天；48c保存可穩(wěn)定4天；-20C保存可穩(wěn)定3個(gè)月； 對(duì)24h尿液標(biāo)本加濃鹽酸10ml,并加熱標(biāo)本，使草酸鈣溶解。.標(biāo)本運(yùn)輸：室溫條件下運(yùn)輸.標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染的不能做測(cè)定。.實(shí)驗(yàn)材

2、料：上海申能鈣測(cè)定試劑盒（貨號(hào)：1111137170試劑：8X70ml）試劑組成磷酸鹽緩沖液pH7.550mmol/L8-羥基唾咻-5-磺酸5mmol/L偶氮腫出120mmol/L表面活性劑適量試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑避光保存于 28C,若無(wú)污染，可 穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。開(kāi)蓋后應(yīng)避免污染。變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有濁度時(shí)，表明有細(xì)菌污染，不能繼續(xù)使 用。注意事項(xiàng)：由于鈣離子到處都有，必須嚴(yán)加注意采取避免污 染。只使用一次性檢測(cè)用品。微量螯合劑（如EDTA等）都會(huì)阻礙顯色 復(fù)合物的生成。須嚴(yán)加注意。試劑中含疊氮鈉（0.95g/L）為防腐劑。 不可入口！避免接觸皮膚及粘膜。應(yīng)

3、采取必要的預(yù)防措施使用試劑。校準(zhǔn)品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準(zhǔn)品對(duì)自動(dòng)分析儀 進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SO項(xiàng)件質(zhì)控品：具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件.儀器：奧林巴斯AU1000生化分析儀.操作步驟項(xiàng)目基本參數(shù)：參見(jiàn) AU1000生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù).SOP文 件儀器操作步驟：參見(jiàn) AU1000生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件.檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析.質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做 為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2s為質(zhì)控警告限，3s為失控限，繪制質(zhì)控 圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見(jiàn)室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程 .SORt件。.計(jì)算方法：以T

4、ruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品鈣校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后， 在病人 結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi)，儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果，以mmol/L報(bào)告。12參考值范圍血清/血漿：2.152.57mmol/L尿液：女性：6.24mmol/24h男性：7.49mmol/24h（注：各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有自己的參考范圍。）參考值因性別、年齡、飲 食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建 立自己的參考值。.臨床意義：鈣測(cè)量用于診斷和治療副甲狀腺病，某些骨病，慢 性腎病和手足抽搐（間歇性肌肉收縮或痙攣）等。盡管體內(nèi)超過(guò)99%的鈣存在于骨骼和牙齒，臨床上最關(guān)心血液里的鈣。骨骼作為一個(gè)儲(chǔ) 存器，通過(guò)釋放鈣防止低血鈣和吸收鈣防止血清

5、鈣水平過(guò)高，保持血清鈣的相對(duì)穩(wěn)定。飲食中鈣的含量增加，吸收鈣的百分比就減少，因 此，吸收鈣的數(shù)量能夠保持相對(duì)穩(wěn)定。 在高鈣飲食中鈣吸收的輕微增 加被反映在增加的腎排泄中。鈣在許多細(xì)胞功能中起著重要作用， 細(xì) 胞內(nèi)如肌肉收縮和糖原代謝，細(xì)胞外如骨鈣化、凝血以及神經(jīng)沖動(dòng)傳 遞。血漿鈣有三種不同的形式：游離離子、和蛋白結(jié)合以及與陰離子（如磷酸根、檸檬酸根和碳酸氫根等）形成復(fù)合物?？傗}水平的降低 與多種疾病有關(guān)，如骨?。ㄓ绕涫枪琴|(zhì)疏松癥），腎?。ㄌ貏e是透析 患者），腸道吸收不良以及甲狀腺功能減退。總鈣水平升高為甲狀旁 腺機(jī)能亢進(jìn)，轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤及肉瘤樣惡性病變。 在預(yù)防骨質(zhì)疏松進(jìn) 行鈣的補(bǔ)充時(shí)，鈣的檢

6、測(cè)有助于臨床監(jiān)控。.操作性能線性范圍：0.016.25mmol/L。精密度：重復(fù)性的評(píng)估是根據(jù)NCCLS隹薦的標(biāo)準(zhǔn)方法，AU1000批內(nèi)重復(fù)性小于3%,總不精密度小于3%0用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS勺規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20 x(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)批間精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)樣品12.190.0260.21樣品2.200.040.50樣品23.120.0400.32樣品3.070.030.22樣品33.490.0630.43樣品3.420.060.48方法學(xué)比較：本公司的試劑盒（y）與某商品化試劑盒（x）,同時(shí)對(duì)

7、70個(gè)樣品進(jìn)行Ca檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下： y=1.02x-0.005mmol/L; r=0.999。靈敏度：本試劑的檢測(cè)限為 0.01mmol/L。病人結(jié)果可報(bào)告范圍0.016.25mmol/L,如樣品測(cè)定值超過(guò)上 限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9%氯化鈉溶液作1: 1稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘 以2。.超出范圍結(jié)果處理：本法線性上限為 6.25mmol/L。如樣品測(cè)定 值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9%氯化鈉溶液作1: 1稀釋，重新測(cè)定， 結(jié)果乘以2。.病危報(bào)警值的處理當(dāng)血清鈣測(cè)定值3.5mmol/L或1.6mmol/L時(shí)，在經(jīng)過(guò)復(fù)查等確認(rèn)手段處理后應(yīng)及時(shí)向臨床主管醫(yī)生匯報(bào)。.方法局

8、限性本法線性上限為6.25mmol/L。如樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9%氯化鈉溶液作1: 1稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以2。干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704 mol/L,膽紅素濃度684 mol/L,血紅蛋白濃度 5.00g/L,甘油三酯濃度 22.6mmol/L,鎂 濃度6.2mmol/L時(shí)沒(méi)有觀察到干擾。.補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時(shí)，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。.參考文獻(xiàn)ThomasL.ClinicalLaboratoryDiagnostics.1sted.FrankfurtTH-BooksVerlagsgesellschaft;1998p192-202.EndresDB,RudeRK.Mineralandbonemetabolism.InBurtisCA,AshwoodER.editors.Tietztextbookofclinicalchemistry.3rded.Philadelphia： W.B.SaundersCompany 1999.p.1395-1457.MichaylovaV,IlkovafPhotometricdeterminationofmicroamountsofcalciumwitharsenazoIII.AnalChimActa197