DB32-T 3762.7-2020新型冠狀病毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)范 第7部分：空氣樣本檢測(cè)與評(píng)估-（高清現(xiàn)行）

1、ICS 11.020C 62DB32江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)DB 32/T 3762.72020 新型冠狀病毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)范 第 7 部分：空氣樣本檢測(cè)與評(píng)估Technical specifications for SARS-CoV-2 detection Part 7: Air sample detection and evaluation 2020 - 03 - 02 發(fā)布2020 - 03 - 03 實(shí)施江蘇省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā) 布DB32/T 3762.72020I 前 言DB32/T 3762新型冠狀病毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)范目前分為以下部分：第1部分：生物樣本采集、運(yùn)輸和保存；第2部分：病毒分離與鑒定；第

2、3部分：核酸熒光PCR檢測(cè)程序；第4部分：重組酶介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增程序；第5部分：血清IgM和IgG抗體酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)程序；第6部分：血清IgM和IgG抗體膠體金免疫層析檢測(cè)程序；第7部分：空氣樣本檢測(cè)與評(píng)估；第8部分：物體表面檢測(cè)與評(píng)估；第9部分：醫(yī)務(wù)人員職業(yè)暴露檢測(cè)與評(píng)估。本部分為DB32/T 3762 的第7部分。本部分按照GB/T 1.1-2009 給出的規(guī)則起草。本部分由江蘇省衛(wèi)生健康委員會(huì)提出。本部分由江蘇省衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本部分起草單位：江蘇省疾病預(yù)防控制中心、蘇州第五人民醫(yī)院、蘇州大學(xué)附二院、昆山市疾病預(yù)防控制中心、南京醫(yī)科大學(xué)。本部分主要起草人：周連、崔侖標(biāo)、徐斌、丁震

3、、程軍平、徐佳南、錢志遠(yuǎn)、羅曉明、沈歡喜、朱寶立。DB32/T 3762.72020 PAGE 4 新型冠狀病毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)范 第 7 部分：空氣樣本檢測(cè)與評(píng)估 范圍本部分規(guī)定了空氣中新型冠狀病毒的樣本分類、現(xiàn)場(chǎng)采樣、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和評(píng)估。本部分適用于于新型冠狀病毒肺炎流行期間空氣中新型冠狀病毒的檢測(cè)，其它呼吸道病毒的空氣樣本檢測(cè)可參照?qǐng)?zhí)行。規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。WS 395 公共場(chǎng)所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)規(guī)范DB32/T 3762.3-2020新型

4、冠狀病毒檢測(cè)技術(shù)規(guī)范 第3部分：核酸熒光PCR檢測(cè)程序Doc9284-AN/905 危險(xiǎn)品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件3.1呼出氣冷凝液 exhaled breath condensate，EBC一種高度稀釋的體液，含有氣道內(nèi)襯液體及其可揮發(fā)成分，是肺內(nèi)生化、炎癥的標(biāo)記物。EBC檢測(cè)是一種無創(chuàng)檢測(cè)呼吸道疾病炎癥的方法，可以評(píng)價(jià)氣道炎癥和氧化應(yīng)激程度，具有安全、可靠、簡(jiǎn)便、易行、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。呼吸道冷凝液微生物的檢測(cè)，可用于鑒別病原菌。樣本分類呼出氣冷凝液原理采用呼出氣低溫冷凝加撞擊的原理，采集呼出氣中的生化物質(zhì)及氣溶膠顆粒。儀器設(shè)備呼出氣冷凝液采集器：采集效率 1

5、50L/min，冷凝溫度-100，預(yù)冷時(shí)間 3 min5min。波紋管：一次性，可伸縮。冷凝盒：一次性。凍存管：2mL。室內(nèi)空氣、空調(diào)送風(fēng)、空調(diào)新風(fēng)和室外排風(fēng)原理采用旋風(fēng)分離式與撞擊式相結(jié)合，將空氣中的顆粒物直接采集到液體中，檢測(cè)采集樣本中的病毒。儀器設(shè)備便攜式小流量生物氣溶膠采樣器：流量 14 L/min20L/min，切割點(diǎn) 0.5m，采集液 3 mL 5mL，時(shí)間自設(shè)。便攜式大流量生物氣溶膠采樣器：流量300L/min，切割點(diǎn) 0.5m0.8m，采集液 3 mL 15mL，時(shí)間自設(shè)。采樣頭：一次性，和儀器配套。采樣桶/采樣瓶：和儀器配套。采集管：一次性，3 mL15 mL。凍存管：3 m

6、L15 mL。氣溶膠采集液病毒咽試紙采集液或者無菌水。現(xiàn)場(chǎng)采樣采樣人員防護(hù)穿戴工作服、一次性工作帽、一次性手套、防護(hù)服、KN95/N95 及以上顆粒物防護(hù)口罩或醫(yī)用防護(hù)口罩、 防護(hù)面屏或護(hù)目鏡、工作鞋或膠靴、防水靴套等。點(diǎn)位分布發(fā)熱門診、ICU病房、普通病房、護(hù)士站、病房走廊、實(shí)驗(yàn)室、CT室、集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)與新風(fēng)口、室外排風(fēng)口。布點(diǎn)原則集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)按照 WS/T395 進(jìn)行設(shè)點(diǎn)；普通病房100 間，抽取病房數(shù)量的 3%5%進(jìn)行布點(diǎn)；普通病房100 間，抽取病房數(shù)量的 1%3%進(jìn)行布點(diǎn)。室內(nèi)面積不足 50m2 的設(shè)置 1 個(gè)采樣點(diǎn)， 50 m2200m2 的設(shè)置 2 個(gè)采樣點(diǎn)，200m

7、2 以上的設(shè)置 35 個(gè)采樣點(diǎn)。采樣點(diǎn)按均勻布點(diǎn)原則布置；距離地面高度 1.2m1.5m，距離墻壁不小于 1m；避開通風(fēng)口、通風(fēng)道等；同時(shí)考慮離傳染源遠(yuǎn)近。樣本運(yùn)輸新型冠狀病毒空氣樣本運(yùn)輸包裝分類屬于B類，對(duì)應(yīng)的聯(lián)合國(guó)編號(hào)為UN3373，包裝符合國(guó)際民航組織文件Doc9284危險(xiǎn)品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則的PI650分類包裝要求；通過其他交通工具運(yùn)輸?shù)目蓞⒄找陨蠘?biāo)準(zhǔn)包裝。實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)負(fù)壓 P2 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備消毒劑：75%乙醇、0.55%含氯消毒劑（需每天新鮮配制）：緩沖間有效氯 1 瓶；核心區(qū)生安柜內(nèi) 75%乙醇、有效氯各 1 瓶，生安柜外 75%乙醇、有效氯 1 瓶。進(jìn)入 P2 實(shí)驗(yàn)室，檢查垃圾袋、

8、紙巾、Tip 頭、凍存管、凍存盒、EP 管、封口膜、標(biāo)簽筆、一次性乳膠手套、核酸提取試劑數(shù)量，不足時(shí)應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充。在生安柜內(nèi)鋪一次性軟吸收墊；在垃圾缸內(nèi)放置垃圾袋，倒少量含氯消毒劑。負(fù)壓 P2 實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)在生安柜內(nèi)兩人同時(shí)操作。取出待檢樣本，在生安柜內(nèi)打開密封袋，核對(duì)送檢單，在樣本管上標(biāo)記，注明采樣地點(diǎn)、日期、樣本類型等。若管壁外有不明液體，應(yīng)用有效氯消毒劑擦拭。暫不檢測(cè)樣本放轉(zhuǎn)運(yùn)凍存盒，預(yù)留待檢測(cè)樣本放置位置。對(duì)于未分裝拭子樣本需進(jìn)行分裝，分裝于 2 mL 帶螺旋蓋內(nèi)有墊圈凍存管。所有樣本旋緊管蓋后需用封口膜密封。廢棄Tip 頭打入含氯消毒劑的廢液缸中，注意需浸入液體中。將核酸提取試劑槽樣本

9、孔（第一孔）中的裂解液吸出至 1.5mL EP 管中，每管加入 20L 用于病毒 DNA/RNA 提取的蛋白酶K 和 200L 樣本，在渦旋器上充分振蕩混勻后室溫孵育 10min。將 EP 管置于離心機(jī)中短暫離心（12000rpm10min ），離心完成后將 EP 管中裂解后的樣本吸回至核酸提取試劑槽的樣本孔（第一孔）中。將試劑槽加套管置入全自動(dòng)核酸提取儀中進(jìn)行核酸提取。剩余樣本旋緊管蓋后需用封口膜密封，放入樣本轉(zhuǎn)運(yùn)盒。取出提取好的核酸，轉(zhuǎn)入 1.5 mL EP 管，注明采樣地點(diǎn)、日期、樣本類型等。將核酸管放入核酸轉(zhuǎn)運(yùn)盒，連同樣本轉(zhuǎn)運(yùn)盒進(jìn)行盒內(nèi)外消毒后轉(zhuǎn)出生安柜。負(fù)壓 P2 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后生安柜內(nèi)

10、清場(chǎng)：使用后的核酸提取條/板放入垃圾袋，包扎垃圾袋，含氯消毒劑噴灑消毒外表面， 將一次性軟吸收墊噴灑含氯消毒劑后折疊。手消毒后將垃圾袋和一次性軟吸收墊一起帶出生安柜放入核心區(qū)中號(hào)垃圾袋。試管架，試驗(yàn)臺(tái)面、移液器等噴灑含氯消毒劑消毒后用 75%乙醇擦拭。關(guān)閉生安柜，開啟紫外消毒。消毒反穿衣、脫一次性反穿衣放入中號(hào)垃圾袋，包扎垃圾袋。消毒垃圾袋外表面、核酸和樣本轉(zhuǎn)運(yùn)盒。退出核心區(qū)，將中號(hào)垃圾袋放入緩沖區(qū)大號(hào)垃圾袋內(nèi)。每日固定時(shí)間對(duì)核心區(qū)進(jìn)行過氧化氫終末消毒，消毒前應(yīng)以塑料袋覆蓋機(jī)器如核酸提取儀、離心機(jī)等，記錄終末消毒記錄。在緩沖區(qū)按合理程序脫卸個(gè)人防護(hù)用品。脫內(nèi)層手套前開啟核心間紫外。出緩沖區(qū)，將垃圾袋放入高壓滅菌器高壓，并記錄。開啟緩沖區(qū)紫外消毒。將核酸交核酸檢測(cè)