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文檔簡介
1、熒光分析法測定鄰-羥基苯甲酸和間-羥基苯甲酸 1一 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)選擇熒光激發(fā)和發(fā)射波長的方法用熒光分析法進(jìn)行多組分含量的測定掌握熒光光度計(jì)的基本構(gòu)造和使用方法2二 實(shí)驗(yàn)原理1 激發(fā)光譜與發(fā)射光譜(激發(fā))系間竄躍kf3相對強(qiáng)度萘的激發(fā)和熒光光譜激發(fā)光譜熒光光譜42 定量分析方法If = 2.3 I0 l c = Kc l c 0.05, If與c方呈線性關(guān)系5鄰-羥基苯甲酸 間-羥基苯甲酸 pH 5.5和pH 12時(shí)的熒光強(qiáng)度相同pH 5.5:無熒光pH 12:發(fā)射熒光6pH5.5: 測定鄰羥基苯甲酸,間羥基苯 甲酸不干擾pH12: F未知(pH12)=F鄰羥基苯甲酸+F間羥基苯甲酸F間羥基苯甲
2、酸= F未知(pH12)-F未知(pH5.5)7三 熒光光度計(jì)光源第一單色器第二單色器激發(fā)熒光樣品池檢測系統(tǒng)熒光光度計(jì)示意圖82 分光系統(tǒng)(雙單色器)第一單色器作用:選擇激發(fā)波長第二單色器作用:分離出熒光發(fā)射波長1 光源氙弧燈:250-800 nm連續(xù)光譜高壓汞燈:線光譜3 樣品池 四面透光4 檢測器 光電倍增管9四 實(shí)驗(yàn)步驟1. 繪制鄰羥基苯甲酸和間-羥基苯甲酸的激發(fā)光譜與發(fā)射光譜,選擇定量分析的激發(fā)和發(fā)射波長。2. 鄰羥基苯甲酸和間-羥基苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定3. 未知樣中鄰羥基苯甲酸和間-羥基苯甲酸含量的測定10五 數(shù)據(jù)記錄及處理以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo),鄰羥基苯甲酸濃度為橫坐標(biāo)繪制鄰羥基苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線根據(jù)pH5.5未知液的熒光強(qiáng)度及鄰羥基苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線求出稀釋未知液中鄰羥基苯甲酸含量,然后計(jì)算原未知液中鄰羥基苯甲酸含量(mg/L)。繪制間羥基苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算未知液中間羥基苯甲酸的熒光強(qiáng)度根據(jù)間羥基苯甲酸標(biāo)準(zhǔn)曲線及F間羥基苯甲酸求出稀釋未知液中間羥基苯甲酸含量,然后計(jì)算原未知液中間羥基苯甲酸含
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