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文檔簡介
1、同濟大學附屬同濟醫(yī)院檢驗科臨檢組血項操作指導書TJYYJYKLJ/XYZ113第2版標題: 紅斑狼瘡細胞檢查操作指導書第1章 第13節(jié)第 PAGE 3 頁 共 NUMPAGES 3 頁1. 目的:保證紅斑狼瘡細胞檢查結(jié)果準確、可靠。2. 適用范圍:查找紅斑狼瘡細胞3. 項目名稱:紅斑狼瘡細胞檢查4. 檢驗方法:改良血塊法5. 檢測原理:紅斑狼瘡患者血液內(nèi)的紅斑狼瘡因子為一種抗核蛋白的Ig G抗體,它作用細胞核抗原決定蔟,并使細胞核脹大,失去原有的染色質(zhì)致密結(jié)構(gòu),形成一種均勻無結(jié)構(gòu)的圓形煙霧狀物質(zhì),稱均勻體。這種均勻體蛋白在補體作用下,被成熟中性多核細胞吞噬后即為紅斑狼瘡細胞。6. 試劑:6.1
2、 品牌:瑞氏染液(自配),原料為上海生化試劑廠生產(chǎn)的。 6.2 貨號:瑞氏粉:Q/GHSC1463-2000;甲醇:GB/T683-19936.3 包裝規(guī)格:瑞氏粉:25g/瓶;甲醇:500ml/瓶6.4 內(nèi)含物:6.4.1 瑞氏染液:瑞氏粉;甘油;甲醇6.4.2 緩沖液:去離子水7. 儀器:OLYMPUS顯微鏡8. 操作步驟:8.1 抽取患者血液2-3ml,注于小試管,于室溫待凝。8.2 于剛凝固形成時,用竹簽將凝塊攪碎,并將殘余血塊除去。8.3 將血置離心機內(nèi)2000r/min離心10min,使白細胞聚集在同一層面,以利于狼瘡細胞形成。8.4 置37溫箱溫育2小時。8.5 取出白細胞層及上
3、下各少許,置紅細胞比積管,以2000r/min離心,沉淀10min。8.6 吸去上層液,吸白細胞層,制成薄血片3-4張。8.7 以瑞氏染液染色,鏡檢。9. 參考范圍:陰性10. 臨床意義:10.1 多出現(xiàn)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡.其活動期較緩解期陽性率高。10.2 膠原性疾病如風濕病,類風濕性關(guān)節(jié)炎,結(jié)節(jié)性動脈炎,硬皮病及皮肌炎等有時也可查到此種細胞。10.3 未找到狼瘡細胞并不能否定紅斑狼瘡的診斷,應(yīng)進一步作其它有關(guān)免疫學檢查。11. 病人準備、標本要求:抽取患者血液2-3ml,注于干凈試管內(nèi)。12. 注意事項:12.1 操作時間不能超過3小時,時間過短,狼瘡細胞形成不佳。時間過長,細胞溶解過多,影響檢出。12.2 注意與果餡細胞鑒別,果餡細胞多為單核細胞吞嗤淋巴細胞核所形成,核仍保持染色質(zhì)結(jié)構(gòu)和染色特性(著紫紅色)。13. 參考資料
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