如何解決液相的“堵”和“漏”

1、Word文檔 【實(shí)驗干貨】如何解決液相的“堵”和“漏”？ 液相色譜對于許多人來說都是很好上手的儀器了，是屬于“易學(xué)難用”的儀器，有些閱歷豐富，用了好幾年的分析員們也會習(xí)慣于一些錯誤操作，引發(fā)出一些儀器的故障。液相色譜最常見的故障就是“堵”和“漏”，那么接下來遠(yuǎn)慕就以這兩點(diǎn)來分別說明。 堵 “堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓特別上升，直接緣由就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端，最主要緣由就是流淌相里有雜質(zhì)，雜質(zhì)的主要來源就是細(xì)菌?！岸隆钡木売?、配制流淌相時細(xì)菌污染首先，我們要熟悉到，一般的國產(chǎn)甲醇其實(shí)不需要額外過濾處理，直接使用沒有問題。即使是有些固態(tài)微粒雜質(zhì)，也能在液相流路系統(tǒng)最前端的過濾

2、頭上排解，真正簡單引起問題的，是水中的細(xì)菌。新制備的純水在室內(nèi)放置幾天就會長菌，而這些細(xì)菌雖然肉眼不行見，卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙，造成柱子很快報廢。這就是在配制流淌相時造成的細(xì)菌污染的緣由，解決它的方法很簡潔，就是確保水的牢靠性。這里有兩種方式推舉：（1）最/抱負(fù)的方式當(dāng)然是購買試驗室專用純水機(jī)，既便利又牢靠，質(zhì)量也放心。唯1的缺點(diǎn)就是價格不菲。（2）成箱購買市售品牌純潔水，如，500mL一支的怡寶或娃哈哈，這些水的質(zhì)量足以應(yīng)付液相色譜的要求。先隨機(jī)抽取一支做一下細(xì)菌/平板試驗，待菌落數(shù)合格方可使用。這樣每次只要單獨(dú)開一支即可，也很便利。每次成本2元左右。這里特殊指出一個細(xì)節(jié)：在絕大多數(shù)書

3、本上，凡談到配制流淌相都會談到最終有一個過濾的步驟。但是從我們長期使用的實(shí)際效果來說，只要能保證水的質(zhì)量，這一步完全可以也應(yīng)當(dāng)去除。緣由有以下三點(diǎn)：（1）流淌相過濾在理論上有好處，但是，實(shí)際操作時由于不行能做到專瓶專用，反而簡單造成的交叉污染，對于配比簡單的流淌相影響更大。（2）流淌相過濾在經(jīng)濟(jì)成本上不劃算。買一套過濾裝置要6000多元，且過濾器公認(rèn)是比較簡單損壞的設(shè)備。最主要是過濾片的成本太高，一片就要幾十元。按一般液相柱的正常使用壽命計算，過濾片的成本會遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于色譜柱的成本。（3）流淌相過濾對于工作效率成本不劃算。使用溶劑過濾器有一個預(yù)清洗、裝備、使用、用后清洗，晾干的過程，至少也有一個小

4、時的時間。這個成本也不能忽視。（4）在實(shí)際工作未發(fā)覺流淌相不過濾會對柱壽命有任何影響。我們起碼有6年時間沒有做過流淌相過濾的工作，但是和國內(nèi)同行相比較，在同等使用強(qiáng)度下我們的柱壽命是比較長的。2、使用流淌相時的細(xì)菌污染流淌相剛開頭沒有長菌，在使用時卻產(chǎn)生了細(xì)菌污染。這主要是在使用多元液相色譜儀時的一種不良使用習(xí)慣造成的。讓我們舉個例子：50的甲醇水流淌相，有兩種使用方式。一種方式是在上機(jī)前就配好混合在一起，另一種方式是在流路A放純甲醇，流路B放純水。從單純試驗效果來說，后一種有明顯的優(yōu)點(diǎn)：首先是簡潔，不需要試驗者另個計算配比混合，其次就是比例精確，能得到保留時間重復(fù)性極/好的試驗效果。但是，它

5、有一個致命的缺陷，就是純水在流淌相瓶中幾天時間就會長細(xì)菌（許多狀況下不僅僅用純水作流淌相，而是用緩沖鹽溶液，本身就是優(yōu)質(zhì)肥料，細(xì)菌長得更快速），一旦有細(xì)菌柱子就壞得很快。所以這種方式要求操作人員每次試驗都要用新制備的純水，更要求在每次試驗后把水相換掉，換成甲醇沖洗潔凈，這一點(diǎn)在實(shí)際工作中許多人意識不強(qiáng)，就是意識到了但多次使用中總有一兩次會遺漏，但是往往這一兩次就足以產(chǎn)生致命的影響。由于液相色譜柱的堵塞是不行逆的。所以，寧可犧牲小小的保留時間的重復(fù)性，也不要用純水溶液作為流淌相的一組。從實(shí)際試驗效果來說，我建議用10的甲醇水代替純水溶液（以前我做過不同比例甲醇水的細(xì)菌總數(shù)試驗，在5就基本可以抑菌

6、，在10及以上就可以完全殺菌了），這樣可以有效排解長細(xì)菌的隱患，既可作流淌相，也可沖柱。就算是在配制流淌相時會計算得麻煩一些，但是一次麻煩，終身受益。3、不適當(dāng)操作：（1）在更換零件時選擇的型號有誤，接口不是很匹配，在擰緊的時候產(chǎn)生變形而使得管路堵塞。（2）樣品處理液凈化得不潔凈，長期會在六通閥和柱之間形成堵塞不暢。（3）在使用手動六通閥時，有些人可能由于手勁小的緣由，轉(zhuǎn)動的不到位，于是造成流路形成了死堵，壓力快速上升超過警戒值。（4）在使用金屬管路作出廢液管時，應(yīng)當(dāng)留意最好廢液瓶中先放一些水，并把廢液管的出口端放在液面下。假如位于在液相上且試驗使用較高濃度的緩沖鹽溶液，在停機(jī)時可能在出口端結(jié)

7、晶成塊并造成堵塞。這種狀況不常見，但卻的確發(fā)生過。漏液相色譜儀從流淌相瓶到廢液瓶之間的流路是一個全封閉體系，內(nèi)部壓力很高，但外部卻能保證一滴不漏。假如某個部件發(fā)生了漏液，那就是故障所在。漏液的緣由分兩種：（1）接觸硬件不當(dāng)在更換零件如流路管或換柱時，換的接頭接口不匹配，造成漏液。要留意不同公司的柱子接頭許多是不同的，甚至同一家公司在不同時期生產(chǎn)的液相柱接頭也有很大區(qū)分。當(dāng)然選用PEEK接頭是一個較好的解決方法，不僅通用性好，而且靠手?jǐn)Q就能保證不漏液。即使是接口本身是匹配的，但是假如操作不當(dāng)也會漏液，一種不當(dāng)就是力度把握不好，擰得太緊或太松；另一種不當(dāng)就是致命的錯誤：滑絲，這是往往是動手力量不太強(qiáng)，螺絲釘很少擰的工犯的錯誤，滑絲的后果不僅是漏液那么簡潔，常造成重要部件的報廢。解決這個問題只能靠惡補(bǔ)基本功來試驗，那就是擰螺絲。（2）使用儀器不當(dāng)假如是輸送泵漏液，最常見的緣由就是在活塞位置緩沖鹽析出造成。析出的緣由有兩個，一是使用緩沖鹽溶液時突然加入了純甲醇而析出，這種錯誤很簡單避開，這是盡量不要用純的甲醇和純水。只要相互有10的比例就不會消失這個問題。另一緣由是在用緩沖鹽溶液（不論甲醇含量有多少）作流淌相時，試驗結(jié)束后沒有換甲醇水沖洗，使得微滲的