同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科ISO15189體系文件29.氯化醋酸AS-D萘酚酯酶（AS-DCE）染色

1、同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科血液組項(xiàng)目操作指導(dǎo)書TJYYJYKMY/XMZ129第2版標(biāo)題氯化醋酸AS-D萘酚酯酶（AS-DCE）染色第1章 第29節(jié)第 PAGE 4 頁(yè) 共 NUMPAGES 4 頁(yè) 目的：保證氯化醋酸AS-D萘酚酯酶 適用范圍：氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色 項(xiàng)目名稱：氯化醋酸AS-D萘酚酯酶染色 檢測(cè)方法：化學(xué)染色 原理：血細(xì)胞內(nèi)的氯化醋酸AS-D萘酚酯酶將基質(zhì)液中的氯化醋酸AS-D萘酚水解，產(chǎn) 生AS-D萘酚，后者與堅(jiān)牢紫醬偶聯(lián)形成不溶性紅色沉淀，定位與胞漿內(nèi)。 試劑；6.1 品牌； 丙酮 上海試劑三廠 37%甲醛 上海試劑三廠磷酸氫二鈉 上海新華化工廠 磷酸二氫鉀 上海試

2、劑二廠氯化醋酸AS-D萘酚 SIGMANN-二甲基甲酰胺溶液 上海華工試劑廠鹽酸 上海試劑三廠付品紅 上海試劑二廠亞硝酸鈉 上海振興試劑廠6.2 貨號(hào)： 丙酮 13-20102365II 37%甲醛 13-20102569II磷酸氫二鈉 磷酸二氫鉀 13-001-0802-113II氯化醋酸AS-D萘酚 208-439NN-二甲基甲酰胺溶液 鹽酸 13-001-0806-003II付品紅 亞硝酸鈉 13-0010801220II6.3 包裝規(guī)格： 丙酮 500ml 37%甲醛 500ml磷酸氫二鈉 500g 磷酸二氫鉀 500g氯化醋酸AS-D萘酚 1gNN-二甲基甲酰胺溶液 500ml 鹽酸

3、 500ml付品紅 25g亞硝酸鈉 25g6.4 內(nèi)含物：6.4.1 固定液：甲醛-丙酮溶液6.4.2 六偶氮付品紅溶液 甲液：40g/L鹽酸付品紅溶液 付品紅 4g 2N鹽酸 100ml 乙液：40g/L亞硝酸鈉溶液 亞硝酸鈉 4g 蒸餾水 100ml應(yīng)用液： 甲液1份、乙液1份混合，褪至無(wú)色即可使用6.4.3 0.067mol/L磷酸鹽緩沖液PH7.66.4.4 基質(zhì)液：6.4.4.1稱取4mg氯化醋酸AS-D萘酚，加入0.3mlNN-二甲基甲酰胺溶解6.4.4.2加入9.6ml緩沖液（PH7.4）混勻，再加入六偶氮付品紅應(yīng)用液 儀器：顯微鏡 操作步驟：8.1 新鮮涂片冷固定液固定30秒8

4、.2 水洗待干8.3 浸入基質(zhì)液，在37水溫箱內(nèi)孵育1小時(shí)8.4 流水沖洗干凈8.5 用蘇木素復(fù)染1-2分鐘 線性范圍：無(wú)10 參考范圍：油鏡觀察，細(xì)胞漿內(nèi)橘紅色顆粒為陽(yáng)性11 臨床意義：正常血細(xì)胞染色反應(yīng)11.1 粒細(xì)胞系統(tǒng)：原粒細(xì)胞為陰性反應(yīng)或陽(yáng)性反應(yīng)，自早幼粒細(xì)胞至中性分葉核粒細(xì)胞均為陽(yáng)性反應(yīng)，酶活性并不隨細(xì)胞的成熟而增強(qiáng)。嗜酸性粒細(xì)胞為陰性反應(yīng)或弱陽(yáng)性反應(yīng)。嗜堿性粒細(xì)胞為陽(yáng)性反應(yīng)。11.2 單核細(xì)胞系統(tǒng)：為陰性反應(yīng)，個(gè)別單核細(xì)胞可呈弱陽(yáng)性反應(yīng)。11.3 其他細(xì)胞：幼紅細(xì)胞，淋巴細(xì)胞，漿細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。12 病人準(zhǔn)備標(biāo)本要求：采取病人骨髓液涂片13 注意事項(xiàng)：13.1 標(biāo)本新鮮13.2 染色時(shí)間要充分。13.3 沖洗