中醫(yī)藥大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)課件第14章 細(xì)胞工程

1、 第14章 細(xì)胞工程 cell engineering 湖北中醫(yī)藥大學(xué) 趙剛本章主要內(nèi)容與要求 1、細(xì)胞融合（熟悉） 2、轉(zhuǎn)基因技術(shù)（掌握） 3、細(xì)胞拆合 （了解） 4、染色體工程（了解） 5、基因工程（了解） 6、單克隆抗體（熟悉） 7、基因工程制藥（了解）細(xì)胞工程概述* 細(xì)胞工程是生物工程的一分支；* 是利用細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)按預(yù)先設(shè)計(jì)改造細(xì)胞的結(jié)構(gòu)使之獲得新性狀的技術(shù)；* 按操作不同分為 細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、細(xì)胞拆合、染色體工程、染色體組工程。第1節(jié) 細(xì)胞工程原理與方法一、細(xì)胞融合（cell fusion）-細(xì)胞并合、 體細(xì)胞雜交用促融合因子使兩種不同細(xì)胞 融為一體，產(chǎn)生雜種細(xì)胞的技術(shù)。

2、在20cen50s建立：日本岡田善雄發(fā)現(xiàn)仙臺(tái)病毒可誘導(dǎo) 小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞融合。 1975年， 德國 米爾斯坦（Milstain）等人 創(chuàng)立 淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)，制備單克隆抗體。* 細(xì)胞融合技術(shù)可使任意細(xì)胞間發(fā)生融合，產(chǎn)生遠(yuǎn)緣雜種細(xì)胞。例：番茄 馬鈴薯細(xì)胞 “泡馬豆”-pomato（potato + tomato ）外型似番茄、花果似土豆（78y 德國）。細(xì)胞融合技術(shù)要點(diǎn)* 常用促融劑：仙臺(tái)病毒、聚乙二醇、電場(chǎng)、 激光 * 選擇雜種細(xì)胞的方法： 將親本細(xì)胞標(biāo)以不同 遺傳標(biāo)記， 再通過選擇性培養(yǎng)基讓雜種細(xì)胞增殖。* 操作步驟： 制備有遺傳標(biāo)記的親本細(xì)胞； 用聚乙二醇或電場(chǎng)誘導(dǎo)融合； 選擇培養(yǎng)出雜

3、種細(xì)胞； 雜種細(xì)胞的鑒定。 二、轉(zhuǎn)基因技術(shù)transgene technology利用顯微注射等方法將外源基因?qū)爰?xì)胞，使其整合到基因組中并能穩(wěn)定表達(dá)和遺傳的技術(shù)。1980，耶魯大學(xué)Gordon將一種外源基因通過顯微注射導(dǎo)入小鼠受精卵中，使新生小鼠都獲得了該基因。1982，華盛頓大學(xué)Palmiter 將大鼠生長(zhǎng)激素基因注入小鼠受精卵中，培育出超級(jí)小鼠（supermouse）， 體積大一倍。 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：轉(zhuǎn)基因羊、轉(zhuǎn)基因牛、轉(zhuǎn)基因豬 轉(zhuǎn)基因魚。轉(zhuǎn)基因猴受精卵的顯微注射操作轉(zhuǎn)基因技術(shù)所需設(shè)備及操作轉(zhuǎn)基因小鼠的操作轉(zhuǎn)基因小猴Andi（綠色熒光蛋白表達(dá)）轉(zhuǎn)基因牛的技術(shù)流程目的基因的替換普通果蠅與轉(zhuǎn)基因果蠅三、細(xì)胞拆合（細(xì)胞質(zhì)工程） * 細(xì)胞結(jié)構(gòu)或組分的重新組合細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核、細(xì)胞器的移植或代換，如核移植。 * 目的：創(chuàng)造細(xì)胞質(zhì)（細(xì)胞器）與細(xì)胞核 的雜種細(xì)胞。 * 動(dòng)物克隆技術(shù)體細(xì)胞與卵細(xì)胞間 的核移植。* 1997年2月英國Roslin研究所Wilmut用該技術(shù)克隆羊（Dolly），當(dāng)年最大科學(xué)成果。世界首例哺乳動(dòng)物克