魚粉品質檢測與鑒別方法

1、魚粉品質檢測與鑒別方法蔣郁朝張曉江（廣東新糧實業(yè)有限公司新糧飼料T東新會529000隨著畜禽、水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)興起和飼料工業(yè)的迅速發(fā)展，勢必給原料供應商 帶來了商機，魚粉作為一種優(yōu)質蛋白質飼料原料日趨短缺，價格較高。但一 些企業(yè)和商人為謀取暴利常常在生產(chǎn)和流通領域中向魚粉摻入一些偽假雜物 質，摻假摻雜現(xiàn)象嚴重，極大地降低了優(yōu)質蛋白質飼料原料一一魚粉品質。 而飼料原料優(yōu)劣直接關系到飼料產(chǎn)品質量的好壞，沒有好的原料，飼料企業(yè) 也無法配制出優(yōu)質飼料產(chǎn)品，并且造成飼料生產(chǎn)企業(yè)和養(yǎng)殖專業(yè)場（戶）巨 大的經(jīng)濟損失。魚粉中常見的摻假摻雜物為：植物性物質、非蛋白質含氮化 合物、血粉、羽毛粉、鞋革粉和碳酸鹽類等非魚粉

2、物質。本文對當前魚粉中 摻假摻雜物的鑒別方法作一些介紹，以供參考。一、魚粉中摻入植物性物質的檢測凡植物性來源的物質均含有淀粉和木質素。淀粉可與碘化鉀反應，產(chǎn)生 藍色或藍黑色化合物；木質素在酸性條件下，可與間苯三酚反應，產(chǎn)生紅色 化合物。故利用上述兩種反應，即可迅速檢測魚粉中是否含有植物性來源的 摻假摻雜物。.淀粉檢測方法：稱取待檢樣品12克于100毫升燒杯中，加入45倍蒸儲水加熱至沸3 一5分鐘以浸出淀粉。冷卻后過濾，在濾液中滴入12滴碘碘化鉀溶液（稱 取碘化鉀6克加入100毫升蒸儲水中，再加入2克碘，溶解后遙勻，置棕色 瓶中保存），若溶液即現(xiàn)藍色或黑藍色，則表明被檢樣品中摻入含淀粉物質。.木

3、質素檢測方法：取被待檢樣品少許平鋪于表面皿中，用間苯三酚溶液（稱2克間苯三酚溶入100毫升90%乙醇中，溶解后遙勻，置溶量瓶中保存?zhèn)溆谩＃┙?，放?58分鐘，再滴加23滴濃鹽酸，若被檢樣品中出現(xiàn)散布的深紅色點，說明 被檢樣品中摻入含木質素物質。且加水后，此深紅色部分即會浮上表面。二、魚粉中摻入棉籽餅粕的檢測先將20目和40目分樣篩疊放在一起，然后稱取待檢樣品 250克于分樣 篩，搖篩56分鐘，即將被檢樣品分成粗、中、細 3部分。觀察中層40目 篩上物，若見篩中央散布有細短絨棉纖維，相互團絮在一起，呈深黃或棕黃 色，篩四周有不少深褐色棉籽外殼碎片，可初步證實魚粉中摻有棉籽餅粕。為進一步證實，可

4、在20-50倍顯微鏡下進行觀察，可見中央部分樣品散 布有細短棉絨纖維該纖維卷曲，半透明，有光澤，白色，并混有少量深褐色 棉籽殼碎片（厚硬、具彈性）C碎片斷面有淺色或深褐色相交疊的色層。有時 可見一些棉纖維仍附著在外殼上或埋在棉餅中。三、魚粉中摻入血粉的檢測.血色素結晶法：取微量粉碎了的待檢樣品放在載玻片上，加 12滴高山試液進行混合，蓋 上蓋玻片，遠火加溫，放置48分鐘后，用100倍的顯微鏡進行鏡檢；存在 獸血粉時，可看到橙一紅色的柱狀，針狀，菊花狀或束狀的血色原結晶。高山試液配制：取毗咤3毫升，葡萄糖溶液（30W/V% 10毫升和氫氧化鈉 溶液（10W/V% 3毫升混合均勻，保存在棕色瓶內備

5、用。.聯(lián)苯胺法：血粉中含有鐵質，該鐵質具有類似過氧化物酶作用，能分解過氧化氫放 出新生態(tài)氧，使聯(lián)苯胺氧化成聯(lián)苯胺藍，出現(xiàn)藍色環(huán)、點。根據(jù)環(huán)點的有無， 即可判斷出魚粉是否摻入血粉。取少許待檢樣品放入白瓷皿或白色滴板中，加入聯(lián)苯胺冰醋酸混合液 數(shù)滴（溶解1克聯(lián)苯胺于100毫升冰醋酸內，后用150毫升蒸儲水稀釋）浸 濕被檢樣品，再加3%過氧化氫液2滴，如被檢樣品有血粉存在，血粒四周即 呈現(xiàn)深綠或藍綠色，反則為淡綠色。.熒光法：取經(jīng)細粉碎了的待檢樣品0.5克放在表面皿上，用乙醇潤濕后，加魯米諾溶 液5毫升，在暗處觀察，存在獸血粉時，獸血粉能發(fā)出強烈青色熒光，約可 持續(xù)觀察12分鐘；若為魚血粉，則加入試

6、劑后能發(fā)出強烈熒光，但 5秒鐘 左右即行消失；若為雞血粉則不發(fā)熒光。魯米諾（Luminal）溶液配制：稱0.2克魯米諾溶解在50毫升過氧化鈉 溶液（0.5W/V%中（使用時配制）。.硫富酸氨法：稱取2克待檢樣品置于凱氏燒瓶中，加入20毫升硝酸、10毫升高氯酸進 行消化1520分鐘，待消化液冷卻后加入25毫升蒸儲水，然后轉入100毫 升燒瓶中，取5毫升此溶液于椎形瓶中，加入5毫升0.1摩/升硫富酸氨溶液， 進行觀察，此時若溶液顏色有桔黃色變?yōu)檠t色則說明被檢樣品摻有血粉， 若溶液為無色則說明被檢樣品未摻有血粉。四、魚粉中摻入非蛋白質含氮化合物的檢測1、魚粉中摻入鏤鹽、尿素的檢測（1）奈氏試劑法：

7、鏤鹽一般均含氨態(tài)氮。尿素在堿性條件下經(jīng)月尿酶催化也可生成氨態(tài)氮。 奈氏試劑可與氨態(tài)氮反應生成棕紅色膠體絡合物，并可依紅棕-紅褐-深紅 色的顏色變化。稱取待檢樣品12克加入100毫升燒杯中，加蒸儲水10毫升，混合均 勻，振動攪拌3分鐘后，靜置20分鐘，以便摻入的鏤鹽或尿素充分溶入水，備用。另取試管一支，加奈氏試劑 2毫升（稱碘化鉀5克加入5毫升蒸儲水 中，邊攪拌邊緩慢滴加入25%氯化汞飽和溶液至稍有紅色沉淀出現(xiàn)。再加 40 毫升40% NaOH溶液，最后用蒸儲水稀釋至100毫升，混勻放置棕色試劑瓶 中保存）。然后沿管壁用滴管加上述待檢樣品浸出液12滴，液面立即呈現(xiàn)出棕紅色環(huán)，則表明被檢樣品摻入有

8、鏤鹽。若液面呈現(xiàn)出白或黃色環(huán)，被檢 樣品可疑摻入有尿素，再用月尿酶法進行進一步檢測。（2）月尿酶法：稱取10克待檢樣品于250毫升燒杯中，加入100毫升蒸儲水攪拌、過濾， 取濾液少許于點滴板上，加 23滴甲基紅指示劑（0.1克甲基紅溶入100毫 升95%乙醇中），再滴加23滴月尿素酶溶液（0.2克月尿素酶溶入100毫升95% 乙醇中）.在4050c水浴上加熱12分鐘，靜置5分鐘。若點滴板上呈深 紫紅色，則說明被檢樣品中摻入了尿素。無月尿素酶時，可用下法檢測。取兩份 1.5克待檢樣品分別加入兩支試管 中,其中一支加入少許生黃豆粉，然后兩支試管各加入5毫升蒸儲水，搖勻后置 4045c恒溫水浴鍋中3

9、0分鐘，再滴加23滴甲基紅指示劑。若加生黃豆 粉的試管中呈較深紫紅色，則說明被檢樣品摻入了尿素。稱取待檢樣品23克加入250毫升三角瓶中，加蒸儲水100毫升，黃豆 粉濾液20毫升（稱5克生黃豆粉入100毫升水中浸泡1小時，過濾），加塞 搖勻。置40-45 C恒溫水浴鍋內溫熱30分鐘（溫度不宜超過45C,否則月尿酶 失活）、最后用鐐子取紅色石蕊試紙一條浸入該溶液中，若試紙變藍，則表明 被檢樣品摻有尿素。（3）定量法：取一個500毫升燒瓶置可調溫電爐上，用玻璃管，皮管連接冷凝管，冷 凝管口浸入滴有3滴甲基紅一澳甲酚綠指示劑和 50毫升1 %的硼酸接收液 中，接通冷凝水，此即定量檢測的蒸儲裝置。然后

10、將懷疑摻有尿素的樣品液 快速無損地倒入燒瓶中（三角瓶用蒸儲水沖洗3次，使所有殘液、殘渣全部入燒瓶中），并加蒸儲水至燒瓶1/2處。加熱瓶內溶液至沸騰后調低電爐溫 度，使溶液保持沸而不溢狀態(tài)。當蒸儲出瓶內溶液1/3后，用紅色石蕊試紙蘸一下冷凝管口的儲出液，若試紙不變色，停止蒸儲。用標準的HCI溶液滴定接收液呈灰紅色即為終點。根據(jù)所耗HCI毫升數(shù)即可計算出試樣中摻入尿素的百分含量。試樣中尿素含量% = 0.03*V*N/WV 一滴定所耗標準HCI液毫升數(shù)N-HCI標準液的實際當量濃度 W一試樣 重量0.03 尿素含氮相對V、N的比值.魚粉中摻入尿素的檢測（1）二苯（并）吐匕喃醇法：稱取待檢驗樣品放入

11、具塞三角瓶中，加 50毫升蒸儲水，攪拌15分鐘后， 用濾紙過濾；取5毫升濾液放入燒杯中，加15毫升醋酸攪拌每隔5分鐘加1 毫升二苯（并）吐匕喃醇溶液二次，放置 15分鐘后，邊攪拌邊加水10毫升；存在尿素時，逐漸生成白色絮狀沉淀，這種呈白色絮狀沉淀反應被稱為二苯（并）毗喃醇反應。（2）格里斯試劑法：該法原理是在酸性條件下尿素與亞硝酸鈉作用，產(chǎn)生黃色反應。若無尿 素，則亞硝酸鈉與對氨基苯磺酸發(fā)個重氮反應，其產(chǎn)物與a 一蔡胺起偶氮作用，呈紫紅色。稱取待檢驗樣品1克加入燒杯中，加20毫升蒸儲水混勻，靜置20分鐘。 取上清液3毫升入50毫升三角瓶中，加1 %亞硝酸鈉液1毫升、濃H2SO41 毫升，搖勻后

12、靜置5分鐘、待泡沫消失后，加格里斯試劑 0.5g,搖勻.若呈 現(xiàn)黃色則說明被檢樣品摻有尿素，呈現(xiàn)紫紅色說明被檢樣品未摻有尿素。加格里斯試劑配制：稱取酒石酸89克，對氨基苯磺酸10克，% 一蔡胺 1克，混合均勻并研碎，放置棕色瓶內保存?zhèn)溆谩?魚粉中摻入縮二月尿的檢測該法依據(jù)縮二月尿在硫酸銅、酒石酸鉀鈉的堿性溶液中與Cu+結合生成紫紅 色化合物的原理，檢測魚粉中是否摻有縮二月尿。稱取待檢樣品3克于100毫升燒杯中，加入30毫升蒸儲水中，在不斷攪 拌下，于50c加熱30分鐘，冷卻，用慢速濾紙干濾。吸取上述濾液 4毫升入 試管中，加入2.0毫升酒石酸鉀鈉溶液和 2.0毫升硫酸銅溶液，搖勻，在 30 5

13、c的恒溫水浴鍋中放置 15分鐘，冷卻至室溫后，立即觀察，若溶液呈 顯藍色表示被檢樣品未摻有縮二月尿，若溶液呈顯紫紅色則說明被檢樣品摻有 縮二月尿，且顏色越深，摻人比例越大。1.5%硫酸銅溶液配制：稱取15克硫酸銅溶于水中，過濾，用水稀釋至1L。5%酉石酸鉀鈉溶液配制：稱取 40克氫氧化鈉溶解于500mLk中，冷卻， 加入50克酒石酸鉀鈉溶解后，用水稀釋至 1L,混勻，靜置過夜備用。.魚粉中摻入月尿醛聚合物的檢測月尿醛聚合物在濃硫酸的作用下分解成甲醛與氨，甲醛與變色酸（銘變酸， 1.8-二羥基秦-3.6二磺酸）的濃硫酸溶液一起微熱，形成一種紫色或紫紅色 的化合物。稱取待檢樣品23克燒杯中，用石油

14、醍（或乙醍）脫脂，吹干溶劑后將 樣品移至培養(yǎng)皿內，在體視鏡下（放大倍數(shù)為 1020倍）將白色或淺黃色易 碎的無定形固體可疑物，用眼科鐐子小心夾取數(shù)粒于 50毫升干燒杯內，再將 燒杯放到體視鏡下，確認可疑物已移放到燒杯內，然后滴加0.51毫升變色酸濃硫酸溶液，并把燒杯放在電爐上微熱 12分鐘，如溶液變成紫色（或紫 紅色），則被檢樣品中含有月尿醛聚合物（“蛋白精”）。此方法選擇性強，靈敏度高，檢出限量為：0.05毫克（月尿醛聚合物）。2 %變色酸溶液配制：稱取變色酸0.2克于200毫升干燥的燒杯中，加入 100毫升濃硫酸，電爐上微熱2分鐘并攪拌使之溶解，冷卻后，移入120毫升 棕色滴瓶內保存。五、

15、魚粉中摻入鞋革粉的檢測鞍革粉中銘經(jīng)灰化后部分可變成 6價銘，6價銘在強酸溶液中能與二苯基 卡巴腺發(fā)生反應，生成紫紅色水溶性銘 -二苯硫代卡巴腺的紫紅色水溶性化 合物。該反應極為靈敏，微量銘即可檢出。稱取待檢樣品13克入瓷塔鍋中，炭化后人茂福爐于550600C溫度灰 化30分鐘。如有黑點再繼續(xù)灰化30分鐘，取出冷卻后，用少許蒸儲水將灰 分濕潤，加入10毫升2 mol/L H 2 SO溶液使呈酸性，再加二苯基卡巴腺溶液 （稱取二苯基卡巴腺0.25克，加90沅醇至100毫升使溶解，搖勻，置棕色 瓶內保存。此試劑應為無色的液體，貯存于冰箱中，變色后不應使用。）數(shù)滴, 片刻后觀察顏色變化，如顏色呈現(xiàn)紫紅

16、色，即表明被檢測樣品中摻有鞋革粉。注：上述各法同樣適于玉米蛋白粉、飼料酵母等的摻假檢測。六、魚粉中摻入氯化物的檢測1硝酸銀法氯化物與稀硝酸和硝酸銀反應，生成白色氯化銀沉淀，根據(jù)沉淀有無， 即可判定是否接人氯化物。取待檢樣品l2克于20毫升試管中，加15毫升硝酸（1:2）,搖勻后靜 置23分鐘備用，用吸管吸取上述上清液2 3滴于載玻片上，加23滴5% 硝酸銀溶液，若摻有氯化物即產(chǎn)生白色沉淀（同時用正常魚粉作對比檢測） ； 為證實上述結果，可在白色沉淀上滴加 12滴NHOH （1 + 1）,滴處沉淀溶解 消失，即可進一步確定。2硝酸銀一銘酸鉀法魚粉中CL含量較高時與硝酸銀反應生成氯化銀沉淀，并與銘

17、酸鉀作用呈 現(xiàn)黃色。取5毫升0.01mol/L AgNO入試管中，加2滴10%S酸鉀溶液，然后再 加被檢樣少許，充分混勻。若試管中溶液呈黃色，說明被檢樣品中氯離子含 量0.14 % （同時做正常魚粉對比測定）。七、魚粉中摻入碳酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽的檢測.碳酸鹽的檢測碳酸鹽與稀鹽酸作用，產(chǎn)生 CO氣泡，根據(jù)氣泡有無即可鑒別。稱取待檢樣品5克于燒杯中，加入20毫升6摩/升鹽酸溶液，如迅速有 大量氣泡產(chǎn)生，并發(fā)出吱吱聲，則表示被檢樣品摻有碳酸鹽類的物質，反之 只見少量氣泡慢慢冒出，是魚骨等被鹽酸分解的結果。.硫酸鹽的檢測氯化鋼沉淀法樣品中的硫酸鹽與氯化鋼試液作用生成白色硫酸鋼沉淀。稱取待檢樣品10克

18、于250毫升的燒杯中，加30ml蒸儲水，充分攪拌后， 靜置10分鐘，過濾，取濾液10ml,在濾液中加入10%（化鋼試液，即生成白色沉淀物，加入10嘛硝酸溶液。如白色沉淀物不溶解，則表示被檢測的樣品 中摻有硫酸鹽類物質。乙酸鉛沉淀法樣品中的硫酸鹽與乙酸鉛試液作用生成白色硫酸鉛沉淀。稱取待檢樣品10克于250毫升的燒杯中，加30ml蒸儲水，充分攪拌后， 靜置10分鐘，過濾，取濾液10ml,在濾液中加入10%1酸鉛試液，即生成白 色沉淀屋。吸去上清液，加入10濃酸鏤試液2毫升。如白色沉淀物溶解。則 表示被檢測的樣品中摻有硫酸鹽類物質。.磷酸鹽的檢測稱取待檢樣品10克于250毫升的燒杯中，加30ml蒸

19、儲水，充分攪拌后， 靜置10分鐘，過濾，取濾液10ml,加入23滴稀硝酸，在酸性條件下，加入 0.51ml鋁酸鏤試液，加熱，生成黃色磷鋁酸鏤沉淀，該沉淀能溶于氫氧化鈉 和氨水試液。八、魚粉中摻入禽糞的檢測禽糞中含有尿酸，若飼料中混入或摻入禽糞，則可通過檢測尿酸確認。置少許待檢樣品于蒸發(fā)皿中，加入l + l硝酸充分濕潤，在水浴鍋上蒸干， 若有尿酸存在；則被檢樣品外圍呈紅褐色，滴下稀氨水時呈紫色，此種呈色 反應稱為紫尿酸鏤（Murexide）反應。九、魚粉中摻入羽毛粉的檢測（l ）取2份各1克待檢樣品分別加入兩只500毫升三角瓶中，一瓶加 1.25%HSO液100毫升；另一瓶加5%NaOHft 1

20、00毫升，劃線后煮沸30分 鐘（微火，并不斷添加蒸儲水以保持煮沸的酸堿濃度），靜置，棄去上清液、 用接種棒蘸取兩瓶中殘渣少許分別置兩個載玻片上； 要求薄層攤開。在50-100 倍顯微鏡下觀察。觀察可見，經(jīng) 1.25%HSO處理的殘渣，摻入由淺色羽制得 的水解羽毛粉，顏色呈金黃色；摻入由深雜色羽制得的水解羽毛粉，顏色是 深褐至黑色。其鏡下主要特征是：完全水解的羽毛粉呈半透明微粒狀，像松香 顆粒，顏色以黃為主，夾有灰色、褐色或黑色顆粒；光照有反光。水解不完 全的羽毛粉，羽干像半透明塑料管（有時為空心竹節(jié)狀），呈黃、白至褐色， 長短不一，表面光滑、透明、羽毛脫落處多有鋸齒邊，加熱過度者消失。羽 支呈

21、長、短碎片，蓬松，半透明，光澤暗淡，呈白或黃色，若加熱過度呈黑 色。羽小支呈粉狀，白色或呈奶油色，40倍顯微鏡下為小而松脆的碎片，有 光澤并結團。羽根呈圓扁管狀，黃至褐色，粗糙。堅硬，有光滑的邊。一般 優(yōu)質水解羽毛粉，上述結構特點往往多被破壞，呈碎玻璃樣小粒。所以鏡檢 時應仔細搜索未水解羽毛或水解不完全羽毛，以利鑒別。然而經(jīng)5%NaOM理的被檢樣品，因全部被溶，故無法見到任何羽毛痕跡。（2）稱取待檢樣品10克于100毫升燒杯中，加入四氯化碳80毫升、攪 拌后靜置沉淀。將漂浮層倒入濾紙過濾，濾物用電吹風吹于。取少許風干濾 物置載玻片上，于3050倍顯微鏡下觀察，除見有表面粗糙.具纖維結構的魚肉顆粒外，若摻有羽毛粉者，尚可見或多或少的羽毛、羽干和羽管（中空、 半透明）。經(jīng)水解的羽毛粉，有的形同玻璃碎粒，質地如塑膠，呈灰褐或黑色。（3）稱取待檢驗樣品1克放置于500毫升錐形燒瓶中，加入50毫