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1、實(shí)驗(yàn)課程名稱: 生化實(shí)驗(yàn)(甲)指導(dǎo)老師:成績(jī):_實(shí)驗(yàn)名稱:酶的基本性質(zhì)實(shí)驗(yàn)底物專一性、激活劑和抑制劑、最適溫度(. 影響酶活性的激活劑和抑制劑)實(shí)驗(yàn)類型: 同組學(xué)生: 陳頌贊、一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅ū靥睿┒?shí)驗(yàn)內(nèi)容和原理(必填)三、實(shí)驗(yàn)材料與試劑(必填)四、實(shí)驗(yàn)器材與儀器(必填)五、操作方法和實(shí)驗(yàn)步驟(必填)六、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和處理七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析(必填)八、心得一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?. 了解激活劑和抑制劑對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響。2. 學(xué)習(xí)檢定激活劑和抑制劑影響酶促反應(yīng)速度的原理和方法。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和原理在酶促反應(yīng)過程中,酶的活性常受某些物質(zhì)的影響,有些物質(zhì)能使酶的活性增加,稱為激活劑;某些物質(zhì)它們并

2、不引起酶蛋白變性,但能使酶分子上的某些必需基團(tuán)(主要是指酶活性中心上的一些基團(tuán))發(fā)生變化,因而引起酶下降,甚至喪失,致使酶反應(yīng)速度降低,稱為酶的抑制劑。酶的激活劑種類:1、一些簡(jiǎn)單的無機(jī)離子,如Mg2+、Cl-等;2、一些中等大小的有機(jī)分子,如抗壞血酸等也是激活劑,它們對(duì)某些含巰基的酶具有激活作用;3、有些酶的催化作用易受某些抑制劑的影響,因而能除去抑制劑的物質(zhì)也可稱為激活劑,如 EDTA能除去重金屬,因而能解除重金屬對(duì)酶的抑制作用。4、具有蛋白質(zhì)性質(zhì)的大分子物質(zhì),這些激活劑是指可對(duì)某些無活性的酶原起作用的酶。酶的抑制劑有許多種:如重金屬離子(Ag+、Hg2+、Pb2、Cu2等)、CO、氯化物

3、、H2S、砷化物、氟化物、生物堿、有機(jī)磷等都是抑制劑。少量的激活劑或抑制劑就能影響酶的活性,而且常具有特異性。值得注意的是激活劑和抑制劑不是,各種激活劑對(duì)酶的作用是不同的。本實(shí)驗(yàn)利用淀粉被水解的不同階段產(chǎn)物與碘有不同顏色反應(yīng),定性觀察唾液淀粉酶在酶促反應(yīng)中激專業(yè):生物科學(xué):學(xué)號(hào):3130000985日期:2014.11.4地點(diǎn):生物實(shí)驗(yàn)中心裝訂線活或抑制現(xiàn)象。淀粉經(jīng)酶促水解為葡萄糖的不同階段的產(chǎn)物與碘作用的顏色反應(yīng)如下:淀粉紫色糊精紅色糊精無色糊精麥芽糖葡萄糖I2顯藍(lán)色顯紫色顯紅色不顯色不顯色不顯色(碘色)(碘色)(碘色)仍為多糖(無還原性)(有還原性)本實(shí)驗(yàn)中,Cl-為唾液淀粉酶的激活劑;C

4、u2+為唾液淀粉酶的抑制劑。利用淀粉被水解的不同階段產(chǎn)物與碘有不同的呈色反應(yīng),定性觀察唾液淀粉酶在酶促反應(yīng)中激活和抑制現(xiàn)象。淀粉 + 碘藍(lán)色水解的程度是通過水解混合物遇碘溶液所呈現(xiàn)的顏色之變化來判斷的。三、實(shí)驗(yàn)材料與試劑1、實(shí)驗(yàn)材料新鮮唾液2、實(shí)驗(yàn)試劑 唾液淀粉酶(學(xué)生)取唾液 1ml 至 50ml 量筒中,用蒸餾水稀釋至 50ml,用棉花過濾備用。唾液稀釋倍數(shù)因人而異,可稀釋 50400 倍,甚至更高。0.1%淀粉溶液1.0%氯化鈉溶液1.0%硫酸銅溶液1.0%硫酸鈉溶液碘化鉀-碘液四、實(shí)驗(yàn)器材與儀器裝訂線1.試管及試管架2.量筒3.漏斗4.脫脂棉花5.點(diǎn)滴板6.吸量管7.恒溫水?。?7)五

5、、操作方法和實(shí)驗(yàn)步驟取試管 4 支,按下表操作:注意: 找出準(zhǔn)確的保溫時(shí)間,是本實(shí)驗(yàn)是實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癯晒Φ年P(guān)鍵步驟之一,唾液淀粉酶液濃度可根據(jù)個(gè)人情況而定,通過 37水浴溶保溫計(jì)時(shí),反應(yīng)時(shí)間最好在 815min 以內(nèi),只有確定準(zhǔn)確的保溫時(shí)間才能進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。 加入酶液后,務(wù)必充分搖勻,保證酶與全部淀粉液接觸的反應(yīng)才能得到理想的顏色梯度變化結(jié)果。 碘化鉀碘液不要過早地加到點(diǎn)滴板上,以免碘液揮發(fā),影響顯色效果。六、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和處理裝訂線試管試劑處理12340.1%淀粉溶液(ml)33331% 硫酸銅溶液(ml)11% 氯化鈉溶液(ml)11% 硫酸鈉溶液(ml)1蒸餾水(ml)1唾液淀粉酶(ml)1111混勻

6、,37恒溫水浴,保溫 10min碘化鉀-碘液(滴)1111觀察結(jié)果深藍(lán)色淡黃色深藍(lán)色紅棕色七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析一號(hào)管顏色最深說明銅離子對(duì)唾液淀粉酶有較強(qiáng)的抑制性;二號(hào)管顏色最淺說明氯離子對(duì)唾液淀粉酶有促進(jìn)作用;3 號(hào)管顏色介于 4 號(hào)(蒸餾水)與 1 號(hào)之間,但比理論色深,說明鈉離子對(duì)唾液淀粉酶有一定抑制作用,而且本實(shí)驗(yàn)用的酶不夠強(qiáng)或稀釋倍數(shù)過高。八、心得激活劑可分哪幾類?本實(shí)驗(yàn)中 NaCl、硫酸銅是屬于哪種類型?答:激活劑可分為:簡(jiǎn)單無機(jī)離子、中等大小有機(jī)分子、能出去抑制劑的物質(zhì)、具有蛋白質(zhì)性質(zhì)的大分子物質(zhì)等。NaCl 屬于簡(jiǎn)單無機(jī)離子;CuSO4 屬于重金屬抑制劑。本實(shí)驗(yàn)中,1,2,3,4 管各有何用意?為什么要設(shè)計(jì)第 3 管和第 4 管?答:第 4 管作為空白對(duì)照;第 3 管用以證明 Na+ 和 SO42- 不影響淀粉酶的活性;第 2 管證明 Cl-對(duì)于淀粉酶是激活劑;第 1 管證明 Cu+對(duì)于淀粉酶是抑制劑。抑制劑與變性

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