白蛋白測定試劑盒注冊技術審查指導原則

1、附件 1白蛋白 測定試劑 （盒）注冊技術審查 指 導 原則本指導原則旨在指 導注冊申 請人對白蛋白 測定試劑（盒） 注冊申 報資 料的準 備及撰寫，同時也為技術審評 部門審評 注 冊申報資料提供參考。本指導原則是對白蛋白 測定試劑（盒）的一般要求，申請 人應依據(jù)產(chǎn)品 的具體特性確定其中內容是否適用，若不適用， 需具體 闡述理由及相 應的科 學依據(jù)，并依據(jù) 產(chǎn)品的具體特性 對注冊申 報資 料的內容 進行充 實 和細化。本指導原則是供申 請人和 審查人員使用的指 導文件，不 涉及注冊 審批 等行政事 項，亦不作為法規(guī)強 制執(zhí)行，如有能 夠滿足法規(guī)要求的其他方法， 也可以采用，但 應提供詳細 的 研

2、究資料和 驗證資料。應 在遵循相關法 規(guī)的 前提下使用本指 導原則。本指導原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標 準體系及當前 認知水平下 制定的，隨著法 規(guī)、標 準體系的不斷完善和科學技 術 的不斷 發(fā)展，本指導原則相關內容也將 適 時進 行調整。一、適用范圍依據(jù)體外診 斷試劑 注冊管理 辦法（國家食品藥 品監(jiān)督 管理總局令 第 5 號）和食品藥 品監(jiān)管總局關于印 發(fā)體外 診 斷試劑分類子目錄的通知 （食藥監(jiān) 械管 2013 242 號），本指 導原則適用于按口類醫(yī)療器械管理的 白蛋白 檢測試劑（盒）， 產(chǎn)品類別為 ：n -1 用于蛋白質檢測的試劑。白蛋白測定試劑（盒）適用于使用溴甲酚綠法 BCG ）、溴甲酚

3、紫法（BCP ） 對血清、血漿 中白蛋白進行定量檢測的白蛋 白測定試劑 （盒） ，包括手工試劑和在半自 動、全自動 生化分 析儀上使用的 試劑。 本指導原則不適用于干化學方法 測定白蛋白 試劑（盒）。 二、注冊申報 資料要求（一）綜述 資料 白蛋白是屬于球蛋白的一種蛋白 質。廣泛分布在各種 動 植物中，在人體血液， 組織液中含有白蛋白，它最重要的作 用是維持膠體 滲透 壓。白蛋白的分子結 構含 585 個氨基酸殘 基的 單鏈多肽，分子量為 66458 ， 分子中含 17 個二硫 鍵，不 含有糖的 組分。在體液 pH7.4 的環(huán)境中，白蛋 白 為負離子， 每分子可以 帶有 200 個以上 負電荷

4、。它是血漿 中很重要的 載 體，許多水溶性差的物 質可以通 過與白蛋白的 結合而被運 輸。 白蛋白（又 稱清蛋白， albumin,Alb ）是由肝實質細胞合成， 在血 漿中的半壽期約為 1519 天，是血漿中含量最多的蛋白 質， 占血漿總蛋白的 40% 60% 。其合成率雖 然受食物中蛋白 質 含量的影響，但主要受血 漿中白蛋白水平 調節(jié)，在肝細胞 中 沒有 儲 存，在所有 細胞外液中都含有微量的白蛋白。白蛋白 是血 漿中含 量最多、分子最小、溶解度大、功能較 多的一種 蛋白 質。白蛋白增高主要見 于 血液 濃縮而致相 對性增高，如 嚴重脫水和休克、嚴 重燒傷、急性出血、慢性 腎 上腺皮 質

5、功 能減低癥。白蛋白降低常見 于肝硬化合并腹水及其他肝功能 嚴 重損害 （ 如急性肝壞死、中毒性肝炎等 ）營養(yǎng)不良、慢性消 耗性疾病、糖尿 病、嚴 重出血 腎 病綜合征等。綜述資料主要包括 產(chǎn)品預期用途、產(chǎn)品描述、有關生物 安全性的 說明、 研究結 果的總結評價以及同 類產(chǎn)品上市情況 介紹等內容，其中同 類產(chǎn) 品 上市情況介 紹部分應著重從方法 學、臨 床應用情況、性能指標 等方面 寫明 擬申報產(chǎn)品與目前 市場上已獲批準的同 類產(chǎn)品之 間的異同。應符 合體外診 斷 試劑注冊管理 辦法和關于公布體外診 斷試劑注冊申 報 資 料要求和批準 證明文件格式的公告 （國家食品藥 品監(jiān) 督管 理總 局公告

6、 2014 年第 44 號）的相關要求。（二）主要原材料研究資料（如需提供）試 劑 盒所用與白蛋白 結合的染料（如溴甲酚 綠或溴甲 酚紫）詳細試驗資料。如外觀、純 度或試劑 等級，供應商信息 和資質，采購合同、原輔 料 性能指 標及合格 證（檢驗證書）等。企 業(yè)內部參考品（白蛋白 標 準液）的原料選擇、制備、 定值過程及試 驗資 料；白蛋白標準液的溯源性文件，包括具 體溯源鏈、實驗方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng) 計 分析等 詳細資料。白蛋白 已具備有證參考物質 （如 CRM470 、ERM/IFCC ）， 生產(chǎn)企業(yè) 內部白蛋白 標 準品（液）應通過 建立自己的參考品體系并溯 源。（三）主要生產(chǎn)工藝及反 應體系

7、的研究 資料（如需提供）主要生 產(chǎn)工藝介紹，可以流程圖方式表示，并 簡要說 明主要生 產(chǎn) 工 藝的確定依據(jù)。產(chǎn) 品反 應 原理介 紹。檢測體系反 應條件確定：申請人應考慮反應時間、反應 溫度、實驗參 數(shù)、儀 器型號等條件 對產(chǎn) 品性能的影響，通 過 試驗 確定上述條件的最佳 組 合。檢測 體系中 樣品加 樣 方式及加 樣量確定：申請 人應考 慮樣品加樣方式、加樣 量對產(chǎn)品檢測結果的影響，通 過實驗 確定最佳的加 樣 方式及加 樣量。如樣 本需采取稀 釋 或其他必 要的方法 進行處理后方可用于 最 終檢測 ，申請人還應對 可用 于樣本稀釋的物質或處理方法 進行研究，通 過試驗 確定最 終 選擇的

8、用于 樣本稀釋的物質或處理方法。不同適用機型的反 應 條件如果有差異 應 分別詳述。（四）分析性能評估資料企業(yè)應 提交制造商在 產(chǎn)品研制 階段對試劑 盒進行的所 有性能驗證的研 究 資料，包括具體研究方法、實驗數(shù)據(jù)、質 控標準、統(tǒng)計 分析等 詳細資料。 對 于白蛋白 測定試劑 （盒）建 議選擇 多批 產(chǎn) 品對以下分析性能 進行研究：分析靈敏度、線 性范 圍、精密度、準確度等指標。對于適用多個機型的 產(chǎn)品，應 提供如 產(chǎn)品說明 書【適用 儀器】項 中 所列的所有型號 儀器的性能 評估資料及其 實驗參 數(shù)。性能評估應采用 臨床樣本，并盡量采用異常人群（低蛋 白血癥、肝硬化 患者）樣 本，如果線性范

9、 圍低端樣本不足，可 以考慮補充低 風險患者樣本或 健康人群。分析靈敏度： 分析靈敏度的確定常使用同批號試劑對已知濃度樣品（或有證參考物 質）在試劑盒規(guī)定參數(shù) 讀數(shù)點 下的吸光度 值 A） 或差值（ AA ），換算成 40.0g/L 的吸光度或 吸光度差 值。線性范圍：建立試劑線性范圍所用的樣本基質應盡可 能與臨床實際 檢測 的樣本相似，理想的 樣本為分析物濃度接 近預期測定上限的混合人血清， 且 應充分考 慮多倍稀 釋對樣 本基 質的影響精密度：測量精密度的 評估 應至少包括兩個 濃度水平 的樣本進行， 兩個濃度都 應在試劑 盒的測量范圍內且有一定 的臨床意義（醫(yī)學決定水平）， 通常選用該檢

10、測 指標的正常參 考區(qū)間附近和異常高 值樣本。兩個濃 度都選用 高 值樣品，可 能致 CV 偏小，也不能 選用接近最低 檢出限的 樣品，可能致 CV 偏大。4. 準確度（ 1）與企業(yè) 內部白蛋白校準品（液）的比 對研究 使用已溯源的企 業(yè) 內部定 值參考品 進行驗證，重點觀察 檢測結果的偏差情況。（2）方法學比對采用參考方法或國內 /國際普遍認為質 量較好的已上市 同類試劑 作為參 比方法，與 擬申報試劑 同時檢測臨 床樣品， 從測 定結果間 的差異了解 擬 申 報試劑 與參比方法 間的偏倚。在實施方法學比 對前， 應分別對擬 申報試劑 和對比試劑 進行初步 評估， 只有在確 認兩者都分 別符

11、合各自相關的 質量 標準后方可 進行比對試驗。方法學比對時應 注意 質量控制、 樣本類型、濃 度分布范 圍并對結果進行合理 的 統(tǒng)計學分析。5. 干擾物質 及交叉反 應研究。（五）參考區(qū)間確定資料參考區(qū) 間 確定所采用的 樣本來源、確定方法及詳細 的 試 驗資料。（六）穩(wěn)定性研究 資 料穩(wěn) 定性研究 資 料主要涉及申 報試劑 的 穩(wěn)定性研究。包括 效期穩(wěn)定性 （實時穩(wěn)定性）、運輸穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn) 定性及 熱穩(wěn) 定性等研究，申 請人可根 據(jù) 實際需要選擇合理的 穩(wěn)定性研究 方案。穩(wěn) 定性研究 資料 應包括研究方法 的確定依據(jù)、具體的 實施方案、詳細 的研究數(shù)據(jù)以及 結論。對 于效期 穩(wěn) 定 性研究

12、， 應提供至少三批 樣品在實際儲 存條件下保存至成品有效期 后的研究 資料。（七）臨床評價資料試劑（盒）按照體外診 斷試劑 注冊管理 辦法及關于 發(fā) 布體外診斷試劑臨 床試驗技術指導原則的通告（國家食品 藥品監(jiān)督管理總局 通告 2014 年第 16 號）進行臨床試驗。1.研究方法選擇境內已批準上市、臨 床普遍 認為質 量較 好的同 類產(chǎn) 品作為對比 試劑，采用試驗用體外 診斷試劑（以下稱考核試 劑）與之進行對比試驗 研究， 證明本品與已上市 產(chǎn)品等效或 優(yōu)于已上市 產(chǎn)品。建議 企業(yè)盡量 選擇方法學 相同、線 性范 圍 及精密度等性能接近的同 類試劑 作為對 比試劑。2. 臨床試驗機構的 選擇（

13、1）第二類產(chǎn)品申請人應當選定不少于 2 家（含 2 家）國 家食品藥品 監(jiān)督管理總局資質認可的臨床試驗機構開展 臨 床試驗。（ 2）臨床試驗 機構 應有能力提供 臨床評價所需的各 類樣 本，實驗 操 作人 員有足夠的時間熟悉檢測 系統(tǒng)的各 環(huán)節(jié)（儀 器、試劑、質 控及操作程序等），熟悉 臨床 試驗方案。在整個 實驗 中，考核試劑 和對比試劑 都應處 于有效的 質量控制下， 定期對儀器進行校準，最大限度保 證試驗 數(shù)據(jù)的準確 性及可 重復性。（3）不同的臨床試驗 機構應盡可能使用同一批次考核 試 劑進行臨床試 驗，以便對數(shù)據(jù)進行科學客 觀的統(tǒng)計分析。（4）對比試劑統(tǒng)一。臨床試驗 方案臨 床試驗實

14、 施前，研究人 員應從流行病學、統(tǒng)計學、臨 床醫(yī)學、檢驗 醫(yī) 學等多方面考 慮，設計 科學合理的 臨床研究 方案。各臨 床研究機構的方案 設 置應基本一致，且保 證在整 個臨 床試驗過 程中遵循 預定的方案 實施，不可 隨意改 動。整 個試驗過 程應在臨床研究機構的 實驗室內并由本 實驗 室的 技 術人員操作完成，申 報單 位的技 術人員除進行必要的技 術 指導外，不得隨 意干涉 實驗進 程，尤其是數(shù)據(jù)收集 過程。試驗方案中 應確定 嚴格的病例 納入 /排除 標準，任何已經(jīng) 入選 的病例 再被排除出 臨床研究都 應記錄 在案并明確 說明 原因。在試驗 操作過程中和 判定 試驗結 果時應采用盲法

15、及 樣 本隨機分配以保 證試驗結 果的客 觀性。 對 于新方法 測定白蛋 白試劑 建議明確 測定原理或方法學定 義的研究，應在 方案中 明確前后兩次 濃度變化有臨床意 義的標準。臨 床試驗中所涉 及的樣 本類型應與產(chǎn)品說明書一致，且每種 樣本類型例數(shù)的 選擇應 符合基本的 統(tǒng)計 學要求。臨 床試驗 機構選用的 對比試 劑與其適用機型匹配。研究對象選擇臨床試驗樣 本量的確定：申請人或臨床研究者 應根 據(jù)產(chǎn)品臨床使用 目的，與 該產(chǎn) 品相關疾病的 臨床發(fā)生率確定 臨床研究的 樣本量。在符合指 導 原則有關最低 樣 本要求的前 提下，還應符合 統(tǒng)計學要求。4.1.1 臨床研究的 總樣 本數(shù)至少 為

16、200 例4.1.2 應考慮樣本量的分布。樣 本量的 選擇應 符合 統(tǒng)計學 及相關指 導 原 則的要求。4.1.3 樣本濃度應覆蓋考核 試劑檢測 范圍，盡可能均勻分 布。不少于 30% 樣本的 測定值處于參考區(qū) 間以外，但在測量 范圍內。如果考核 試劑同時適用于血清或血 漿樣 本類型，可 完成一個 樣本 類型（血清或血漿）不少于 200 例的臨床研究， 同時可選至少 100 例血清或 血 漿同源樣本進行比對研究。建議在臨床試驗中選擇 部分含干 擾物質的標本進行 對比研究，包括 高脂、溶血、黃疸的樣本。血清中多種蛋白成分如 al- 球蛋白、轉鐵蛋白、觸珠蛋白也會和 BCG 或 BCP 反 應，以

17、從臨床角度 驗證對試劑的影響。統(tǒng)計 學分析對臨床試驗結 果的統(tǒng)計應選擇 合適的 統(tǒng)計方法，如相關 分析、線 性回 歸、受試 者工作特征（ Receiver Operating Characteristic curve, ROC ）曲線分析等。對 于對比實驗 的等效 性研究， 最常用是 對考核 試劑和對比試劑 兩組檢測結 果的相 關及線性回歸分析，應 重點觀察相關系數(shù)（ r 值）或判定系數(shù)R2）、回歸擬合方程（斜率和 y軸截距）等指標。結合臨床試 驗數(shù)據(jù)的正/ 偏態(tài)分布情況，建 議統(tǒng)計 學負責 人選擇 合理的 統(tǒng) 計學方法 進行分析，統(tǒng) 計分析應可以證明兩種方法的 檢測結 果無明 顯統(tǒng)計學差異。

18、在臨 床研究方案 中 應明確 統(tǒng)計檢驗 假 設，即評價考核 試劑與對比試劑是否等效的 標準。結果差異 樣本的 驗證在數(shù)據(jù)收集 過程中，對于兩種 試劑的檢測結 果有明 顯差 異的 樣本， 應采用臨床上普遍 認為質 量較好的第三種同 類試 劑進行驗證試驗 ，同時結 合 患者的 臨床病情 對差異原因及可 能結果進行分析。臨床 試驗總結報 告撰寫根據(jù)體外診 斷試劑臨 床試驗技術指導原則的要求，臨 床試驗報 告 應該對試驗 的整體 設計 及各個關 鍵點給予清晰、 完整的 闡述，應該對 整 個臨床試驗實 施過程、結果分析、結 論等 進行條理分明的描述，并 應包括必 要的基 礎數(shù)據(jù)和 統(tǒng)計 分析方法。建議

19、在臨床總結報 告中 對以下內容 進行 詳述。臨床試驗總 體設計及方案描述臨床試驗的整體管理情況、臨 床試驗機構 選擇、臨 床主要研究人 員簡 介等基本情況介 紹；病例納入 /排除 標準、不同年齡 段人群的 預期選擇 例數(shù)及 標準；樣本 類型，樣本的收集、處 理及保存等； 7.1.4 統(tǒng)計學方法、統(tǒng) 計軟件、評 價統(tǒng)計結 果的標準。具體的 臨床試驗 情況考核試劑 和對比試劑的名稱、批號、有效期及所用 機型等信息；對各研究 單位的病例數(shù)、病種分布情況進 行 總合， 建議 以列表 或 圖示方式 給出具體例數(shù)及百分比；質量控制，試驗人員培訓、儀器日常維護、儀 器校 準、質 控品運 行情況， 對檢測精密

20、度、室內質 控（質控品 測量 值）、抽查結 果 評估；具體試驗過 程，樣本檢測、數(shù)據(jù)收集、樣 本長期保 存、結 果不 一致 樣本的校 驗等。7.3 統(tǒng)計 學分析數(shù)據(jù)預處理、差異數(shù)據(jù)的重新檢測 或第三方 驗證以 及是否 納入 最終數(shù)據(jù)統(tǒng)計、對 異常值或缺失 值的處理、研究 過 程中是否涉及 對方案的修改定量 值相關性和一致性分析用回 歸分析 驗證兩種 試劑結 果的相關性，以 y=a+bx 和 R2 的形式給 出回歸分析的擬合方程，其中： y 是考核試劑結 果， x 是對比試劑結果， b 是方 程斜率，a是y軸截距，R2是判定系數(shù)，同 時應給 出b的95% （或99% ） 置信區(qū)間 ，定量值 結果

21、應無明 顯統(tǒng)計學差異。另外考 慮到在不同的 樣本濃度區(qū) 間試劑 的性能可能存 在一定差異，因 此，建 議對總 體濃度范圍進行區(qū) 間分層統(tǒng)計 ， 對不同濃度區(qū) 間內的 結果 進行相關性分析以更好的 驗證兩 種試劑的相關性。7.4 討論 和 結論對總體結果進行總結 性描述并 簡要分析 試驗結 果，對本 次臨床研究有 無特 別說 明，最后得出 臨床試驗結論。變 更事 項相關的 臨床試驗涉及 產(chǎn)品檢測 條件 優(yōu)化、增加與原樣 本類型具有可比性 的其他 樣本類型等變更事項，臨床試驗總樣 本數(shù)至少 為 100 例,并在至少 2 家（含 2 家 ） 臨床試驗機構開展 臨床試驗；變更 參考區(qū) 間的變化及增加

22、臨床適 應癥等變 更事項，應根據(jù)產(chǎn)品 具體 變更情況，酌情增加 臨床試驗總樣本數(shù)。（八）產(chǎn)品風險分析 資料產(chǎn)品主要 風險：體外診斷試劑產(chǎn) 品的 風險管理 報告應 符合 YY/T 0316 2008 醫(yī)療 器械 風險 管理對醫(yī)療器械的 應 用的有關要求，審查 要點包括：（ 1）與安全性有關特征的判定可參考YY/T0316 2008 附 錄 C。2）危害分析是否全面可參考YY/T 0316 2008 附錄 E3）風險控制的方案與 實施、綜 合剩余風險的可接受性 評價及生產(chǎn)和 生產(chǎn)后監(jiān)視相關方法可參考 YY/T 0316 2008 附錄 F、G、 J、H。白蛋白測定試劑（盒）的初始可預見性危害主要存

23、在于 產(chǎn)品的設計開 發(fā)、生產(chǎn)和使用環(huán)節(jié)。如產(chǎn) 品設計開發(fā)方面的 初始可預見危害主要有：關 鍵原材料選擇、配方各組 分適宜 的濃度等；生產(chǎn)方面的初始可 預見危害主 要有：水質的控制、 準確稱量、配制過 程的控制（交叉污染）等；使用的 初始可預 見危害主要有：未限制非 預期使用，未限制使用 環(huán)境及人員， 未告知正確使用，與生化分析 儀檢測系統(tǒng)匹配使用參數(shù)不當?shù)??？赡艿娘L險及其控制清單詳見表1。表1可能的風險及其控制清單風險識別可能的危害風險控制剩余風險評價產(chǎn)品設計開發(fā)驗證不充分某項性能達不到要求充分驗證與評價可接受程度關鍵原材料的選擇或供應商變更參與反應的原料不純或含有干擾反應的雜質導致測定結果不

24、可靠制定關鍵原材料驗收準則可接受程度不正確配制與pH控制稱量不準確產(chǎn)品某項性能 達不到要求；BCG和BCP 對pH值的差異性 導致的 結果不可靠依據(jù)SOP配制并做好記錄，控制pH值可接受程度與生化分析儀配套使用與檢測系統(tǒng)匹配不當導致測定結果的差異按產(chǎn)品說明書要求可接受程度保存條件對檢測試劑保存溫度不符合要按產(chǎn)品說明書要求可接受程度結果的影響求導致試劑變質參數(shù)設置不當在生化分析儀上參數(shù)設置 不當（如測定時間、試 劑 樣本比）導致的結果不可 靠按產(chǎn)品說明書要求， 手工測定時反應與 測定時間必須嚴格 控制可接受程度超過效期使用或試劑污染變質結果不可靠注意試劑有效期限，過效期、變質的試劑不可使用可接受

25、程度生物學危害：如防腐劑、生物源性血清等環(huán)境污染，扌接觸感染有關人源組分應滿足生物安全性要求；避免裸手操作可接受程度不正確的標識錯用或誤用產(chǎn)品在線與終檢把關可接受程度不正確的使用或由不熟練或未經(jīng)培訓的人員使用結果不可靠進行專業(yè)培訓及正確使用可接受程度產(chǎn)品包裝和剩余試劑的處理不當環(huán)境污染，扌接觸感染按醫(yī)療廢物相關法規(guī)處理可接受程度產(chǎn)品的安全性是否符合安全要求。當產(chǎn)品成分中含有人源或 動物源性材料時適用，應將此部分內容體現(xiàn) 在注冊的技術資料中，如綜述資料和/或原材料研究。生物安全性應滿 足企 業(yè)規(guī)定的要求，如包括但不限于 HBs抗原、HIV-1/2抗體、HCV抗體及梅 毒抗體檢測為陰性。（九產(chǎn)品技

26、術要求申請人應當在原材料 質量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下 ,根據(jù)申請人產(chǎn) 品研制、前期臨 床評價等結果,依據(jù)國家標準、行業(yè)標準及有關文獻，按 照關于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技 術要求編寫指導原則的通告（國家食品 藥品監(jiān)督管理 總局通告 2014 年第 9 號）的有關要求，編寫產(chǎn)品技 術要 求，內容主要 包含產(chǎn)品性能指 標和檢驗方法。1.產(chǎn)品適用的相關 標準（1）GB/T 191 2008 包裝儲運圖示標志（2）GB/T 21415 2008 體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準品和控制物 質賦值的計量學溯源性（3）GB/T 26124 2011 臨床化學體外 診斷試劑（盒）（4）YY/T 0316

27、2008 醫(yī)療器械風險管理對醫(yī)療器械 的應用（5）YY 0466 2003 醫(yī)療器械用于醫(yī)療器械標簽、標記 和提供 信息的符號（6）YY/T 1228 2014 白蛋白測定試劑（盒） 注：以上標準適用 最新版本。2.主要性能指 標外觀：至少應符合如下要求：試劑（盒）各組分應齊全、完整、液體無滲漏、無破 損；中英文包裝 標簽、標識字跡應清晰。裝量：應不少于 標識量。試劑空白吸光度：應符合生 產(chǎn)企業(yè)宣稱的要求。分析靈敏度：用已知 濃度或活性的 樣品進行測試 ，記錄在試劑 （盒）規(guī)定參數(shù)下 產(chǎn)生的吸光度改 變。換算為n單位吸光度差值（AA ） 或吸光度變化（ A/min ）。應符合生產(chǎn)企業(yè) 給定范圍

28、。2.5 線性范圍：用達到線性區(qū)間下限的低 濃度樣本稀釋達到線性區(qū)間 上限的高濃度樣本，混合成至少 5 個稀釋濃度 Xi ）。用試劑 （盒）捌測試以上樣本，每個稀 釋濃度測試3次，分別求出每個稀釋濃度檢測結果的均值yi）。以稀釋濃度Xi）為自變 量，以檢測結果均值 yi）為因變量求出線性回歸方程y=a+bx。計算線性回歸的相關系數(shù)（ r）。送（Xi-x）（yi y）=V（y y） 2 i）稀釋濃度Xi）代入求出線性回歸方程，計算 yi的估計值及yi與估計值 的相對偏差或絕對偏差。試劑（盒）線性在 10.0 , 60.0g/L 區(qū)間內：相關系數(shù) r 值 0.9902.5.210.0,20.0g/

29、L 區(qū)間內，線性偏差應不超過4.0g/L ；20.1 , 60.0g/L 區(qū)間內，線性偏差 應不超過 0%。2.6 精密度重復性：在重復性實驗條件下，同一批次 試劑對檢 測范圍內某 個濃度的白蛋白樣本進行重復檢測 10 次，變異 系數(shù) CV % ） 2.0%批間差：三個批次的檢測試劑對檢測 范圍內某個濃 度的白蛋白 樣本進行重復性檢測，其變異系數(shù) CV % ）值應 5.0% 檢測結 果計算公式 如下：x = XkT式中：Xmax Xi 中的最大值；xmin Xi 中的最小值。2.7 準確度：用可用評價常規(guī)方法的有證參考物質 （CRM ）對試劑（盒 進行測試，重復檢測 3 次，取測試結果均值 M

30、）， 按公式（ 3）計算相對偏 差（B% ）。相對偏差應不大于A6.0%。B% = （M - T） /TX100% 3）式中： M 為測試結果均值；T 為標準物質標示值，或各濃度人血清定 值。2.8 穩(wěn)定性2.8.1 開瓶穩(wěn)定性：試劑（盒）襯定的貯存條件下保存至 規(guī)定的時間， 產(chǎn)品的性能應至少符合線性、準確度和重復性 的要求。復溶穩(wěn)定性（干粉或凍干試劑適用） ：干粉式劑開瓶 后（復溶后） 在規(guī)定的貯存條件下保存至 預期時間內，產(chǎn)品的 性能應至少符合 線性、準 確度和重復性。效期穩(wěn)定性：試劑（盒）檄定的貯存條件下保存至 有效期末，產(chǎn) 品的性能應至少符合線性、重復性和準確度的 要求。2.9 校準品

31、和質控品（如適用） 若試劑盒配套校準品和 質控品，應參照 GB/T 21415 2008 體外診 斷 醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準品和控 制物質賦值的計量學溯源性的 要求溯源至國家或國際標 準 物質，并提供校準品溯源性文件及 質控品定值說明。溯源性 文件中應有賦 值程序、溯源鏈 和不確定度及其 評定要求。（十）產(chǎn)品注冊 檢驗報 告根據(jù)體外診 斷 試劑注冊管理 辦法要求，首次申請 注冊 的第二類 產(chǎn)品應提供具有相 應醫(yī)療器械檢驗資質和承檢范圍 的醫(yī)療器械 檢驗機構出 具的注冊 檢驗報告和產(chǎn)品技 術要求預 評價意見。（十一）產(chǎn)品說明書產(chǎn)品說明 書的格式 應符合關于發(fā) 布體外 診 斷試劑說 明

32、 書編寫指 導原則的通告（國家食品藥 品監(jiān)督管理 總局通告 2014 年第 17 號）的 要求。產(chǎn) 品說明書的所有內容均 應與申請 人提交的注冊申 報資 料中的相 關研究 結果保持一致 ,下面對 白蛋白測定試劑 （ 盒）說明書的重點內容 進 行詳細說 明，以指 導注冊申 報人 員更合理地完成 說 明書編制。1.【預期用途】 白蛋白測定試劑盒用于體外定量 檢測血清和 /或血漿 中 白蛋白 濃度，適用的樣本類型應結合實際的臨床研究情況 進 行確認。 臨 床上主要用于肝 臟功能及 營養(yǎng)狀況等疾病的 輔助 評價等。2.【檢測原理】白蛋白在一定 pH 值緩沖液中（ pH4.2 5.2 ）帶正電荷， 在有

33、非離 子型表面活性 劑存在 時 ，可與帶負電 荷的染料（溴 甲酚 綠或溴甲酚紫） 結合產(chǎn)生有色（藍綠 色或 綠色）復合物， 在一定波 長（600 630nm ） 處比色，顏色的深度與白蛋白 濃度 成正比。與同樣處 理的白蛋白 標準比 較，可求得白蛋白含量?！局饕M成成分】（1）說明 試劑包含主要組分的名稱、數(shù)量、比例或濃度等信2）試劑 中不包含但 對該項檢測 必須的組分，企業(yè)應列 出相關 試劑 /耗材的名稱、貨號及其他相關信息。（ 3）試劑 盒中不包含 質控品或其他耗材， 應說明經(jīng)驗證 后推薦配 合使用的商品化 質控品、校準品或其他耗材的生產(chǎn) 企業(yè)、產(chǎn) 品名稱以及 產(chǎn)品貨號等 詳細信息；如包含

34、校準品和 / 或質控品，應說明其主要 組成成分 及其生物學來源， 校準品 應注明其定 值及溯源性， 質控品應明確靶 值范圍?！緝Υ鏃l件及有效期】試劑的開封 穩(wěn)定性、效期穩(wěn)定性、運輸穩(wěn) 定性等信息做 詳細 介紹。 并對 開封后未使用 產(chǎn)品允 許暴露于空氣中的溫度、 濕度及有效期等條件 予以明確?！緲颖疽蟆恐攸c明確以下內容： （ 1（樣本采集：采集時間 點是 否受 臨床癥狀、用藥 情況 等因素的影響，具體采集部位及 類 型，詳述具 體的操作方法 或列出相關操作指南文件以指 導使用者（最好能 夠給 出具 體 圖示），盡量減少由于樣本采集或 處 理不當 對實驗 造成的影 響。（ 2（若待測樣本為血漿

35、應說 明所采用的抗凝 劑類型。 （3）樣本處 理及保存：樣本的保存條件及期限（短期、長 期）、運輸條件等。冷藏 /冷 凍樣本檢測前是否 須恢復室溫， 凍 融次數(shù)限制?！具m用儀器】所有適用的儀 器型號，并提供與 儀器有關 的重要信 息以指 導 用戶操作?！緳z驗方法】詳細說 明實驗 操作的各個步 驟，包括：（ 1）實驗 條件：實驗環(huán)境的溫度、濕度等注意事項 ，檢驗 試劑及樣本復溫等要求。2）試劑使用方法（手工 /半自動 /全自動）、注意事項。3）詳述待測樣品的預處理方法、步驟 及注意事項。4）明確樣本檢測加樣量及反應時間。5）詳述配套儀器設置過程。6）質量控制過程以及注意事項。【檢驗結果的解釋】結

36、合質控品對所有可能出現(xiàn)的結果進行合理的解釋。本 試劑的檢測結果僅供臨床參考， 對患者的臨床診治應結合其 癥狀 /體征、病史、其他實驗 室檢查及治療反應等情況綜合考慮。明確有可能存在的數(shù)值升高因素及數(shù)值 降低因素，說明 對何種條件下需要 進行重復檢測，以及在重復檢測時對待 測樣本可能采取的優(yōu)化條件等進行詳述?！緳z驗方法的局限性】1）明確干擾物質及濃度范圍對檢測結 果的影響；2）操作時必須嚴格按照操作 規(guī)程，精心操作才能得到 正確結果，對操作程序作任何修改都可能影響結果。3）檢測結果超出試劑盒線性范圍的處理方法。4）不同方法pH值要求對測定結果的影響方法變色區(qū)域pH升高時pH降低時BCG最適pH值

37、4.20, pH3.8 （黃色）5.4藍綠色）pH升咼可使染料空白增咼，與白 蛋白結合率下降說明變化趨 勢BCP最適pH值5.20,黃色一綠色說明變化趨勢說明變化趨 勢【產(chǎn) 品性能指 標】說明該產(chǎn) 品主要性能指 標，應至少包括：外觀、裝量、試 劑空白吸 光度、分析靈敏度、線 性范 圍、精密度、準確度和穩(wěn) 定性等。產(chǎn) 品性能 指 標應 不低于 YY/T 1228 2014 白蛋白 測定試劑（盒）標準要求。【注意事項】 應至少包括以下內容：（1）有關人源組分（如有）的警告，如：試劑內校準品或其 他可能含有人源物 質的 組分，雖已 經(jīng)通過了 HBs- Ag 、 HIV1/2-Ab 、 HCV-Ab

38、等 生物 傳染性 項目的檢測 ，但截至 目前，沒有任何一 項檢測 可以確保 絕 對安全，故仍 應將這些 組分作為潛在 傳染源對待。（2）建議實驗 室的環(huán)境要求，如 環(huán)境溫度、濕度等。（3）對采集 樣本的要求，建 議使用新 鮮血清或血 漿，勿使 用溶血 樣 本，明確樣本的 處理辦法。（4）對所有 樣本和反 應廢棄物都 視為傳 染源進行處理。（5）不同方法應說 明對檢測結 果的影響因素；使用不同生 產(chǎn)商的試 劑對 同一份 樣本進行檢測可能會存在差異。（6）本試劑 盒的檢測結 果僅供臨床參考，對患者的 臨床診 治應結合 其癥狀 /體征、病史、其他實驗 室檢查及治 療反應等 情況綜合考 慮?！緟⒖嘉墨I

39、】 注明引用的參考文獻。13. 【基本信息】（1）注冊人與生產(chǎn)企業(yè)為同一企 業(yè)的，按以下格式 標注 基本信息： 注冊人 /生產(chǎn) 企業(yè)名稱 住所 聯(lián) 系方式售后服 務單 位名稱聯(lián) 系方式生產(chǎn)地址生產(chǎn)許可證編號（2）委托生產(chǎn)的按照以下格式 標注基本信息：注冊人名稱住所聯(lián)系方式售后服務單位名稱聯(lián)系方式受托企業(yè)的名稱住所生產(chǎn)地址生產(chǎn)許可證編號三、審查關注點（一）產(chǎn)品名稱的要求 試劑（盒）的命名應參考食品 藥品監(jiān)管部門發(fā) 布的醫(yī)療器械分類目錄或國家標準、行業(yè)標準上的通用名稱，一般為“白 蛋白測定試劑（盒）（溴甲酚綠法）、白蛋白測 定試劑（盒）（溴甲酚 紫法）”。（二）試劑（盒）組成（見注冊申 報資料要求

40、）（三）反應機理或工作原理（ 見注冊申 報資料要求）（四）試劑主要性能指 標及其計算方法（見注冊申 報資料 要求）（五產(chǎn)品適用的相關標準表2相關產(chǎn)品標準GB/T 1.1 2009標準化工作導則 第1部分：標準的結構和編寫GB/T 191 2008包裝儲運圖示標志GB9969- 2008工業(yè)產(chǎn)品使用說明書總則YY/T 0316 2008醫(yī)療器械風險管理對醫(yī)療器械的應用YY/T 0466.1 2009醫(yī)療器械用于醫(yī)療器械標簽、標記和提供信息的付號 第1部分: 通用要求GB/T 26124 2011臨床化學體外診斷試劑（盒）YY/T 1228 2014白蛋白測定試劑（盒）產(chǎn)品適用及引用標準的審查可以

41、分兩步來進行。首先對引用標準的齊全 性和適宜性進行審查，也就是在編寫注冊產(chǎn) 品技術要求時與產(chǎn)品相關的國家、 行業(yè)標 準是否進行了引用，以及引用是否準確。其次對引用標準的采納情況進行審查。即所引用標準中 的條款要求，是否在產(chǎn)品技術要求中進行了實質性的條款引用。這種引用通常采用兩種方式，文字表述繁多內容復 雜的 可以直接引用 標準及條文號，比較簡單的也可以直 接引述具體要求。產(chǎn)品技術要求應符合相關的 強制性國家標準、行業(yè)標 準 和有關法律、法 規(guī) 的規(guī)定，并按國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā) 布的醫(yī)療 器械產(chǎn)品技術要求編 寫指導原則的要求編制。（六產(chǎn)品說明書和標簽樣稿應符合醫(yī)療 器械說明書和標簽管理 規(guī)定

42、（國家食品藥 品監(jiān)督管理 總 局令第6號）和體外診 斷試劑說明書編寫指導原貝0的要求，同時應 符 合YY/T 0466.1醫(yī)療器械用于醫(yī)療器械標簽、標記 和提供信息的符號 第1部分：通用要求 （ISO15223-1 ）。四、名詞解釋（一） 準確度Accuracy ） : 4測量值與可接受的參考值間的一致程度（二） 分析靈敏度 Analytical Sensitivity ）樣品中以一定 概率可被聲 明與零有差異的被 測量的最低 值。本指導 原則中 的分析靈敏度是指 測定規(guī) 定濃度樣本，在試劑盒規(guī)定參數(shù) 讀數(shù)點下的吸光度 值A）或差值（AA ）為 檢測系統(tǒng)的分析靈敏 度。（三） 精密度 Precision ）: 規(guī)定條件下，相互獨立的 測試 結果之 間的一致程度。精密度的程度是用統(tǒng)計學方法得到的測量不精密度的數(shù)字形式表示，如 標準差（SD）和變異系數(shù) （CV ）。五、參考文獻（一）體外診 斷試劑注冊管理 辦法（國家食品藥 品監(jiān)督 管理總局 令第 5 號