化藥的回收率如何做

1、 回收率包括絕對回收率和相對回收率。絕對回收率考察的是經(jīng)過樣品處理后能用于分析的藥物的比例。因為不論是生物基質(zhì)還是制劑輔料中的藥物，經(jīng)過樣品處理都有一定的損失。做為一個分析方法，絕對回收率一般要求大于50%才行。它是在空白基質(zhì)中定量加入藥物，經(jīng)處理后與標(biāo)準(zhǔn)品的比值。標(biāo)準(zhǔn)品為流動相直接稀釋而來，而不是同樣品一樣處理。若一樣，只是不加基質(zhì)來處理，可能會有很多影響因素被此屏蔽掉。如全部轉(zhuǎn)移有機(jī)相時只轉(zhuǎn)移了98%等。也就因此失去了絕對回收率的考察初衷。相對回收率嚴(yán)格來說有兩種。一種是回收試驗法，一種是加樣回收試驗法。前者是在空白基質(zhì)中加入藥品，標(biāo)準(zhǔn)曲線也是同此，這種測定用得較多，但有標(biāo)準(zhǔn)曲線重復(fù)測定的

2、嫌疑。第二種是在已知濃度樣品中加入藥物，來和標(biāo)準(zhǔn)曲線比，標(biāo)準(zhǔn)曲線也是在基質(zhì)中加藥物。相對回收率主要考察準(zhǔn)確度。準(zhǔn)確度系指用該方法測定的結(jié)果與真實值或認(rèn)可的參考值之間接近的程度。有時也稱真實度。一定的準(zhǔn)確度為定量測定的必要條件，因此涉及到定量測定的檢測項目均需要驗證準(zhǔn)確度，如含量測定、雜質(zhì)定量試驗等。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)建立，對于制劑一般以回收率試驗來進(jìn)行驗證。試驗設(shè)計需考慮在規(guī)定范圍內(nèi)，制備3個不同濃度的試樣，各測定3次，即測定9次，報告已知加入量的回收率（）或測定結(jié)果平均值與真實值之差及其可信限。含量測定原料藥可用已知純度的對照品或符合要求的原料藥進(jìn)行測定，或用本法所得結(jié)果與已建立準(zhǔn)確度的

3、另一方法測定的結(jié)果進(jìn)行比較。制劑可用含已知量被測物的各組分混合物進(jìn)行測定。如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的被測物進(jìn)行測定，必要時，與另一個已建立準(zhǔn)確度的方法比較結(jié)果。一般制劑的含量測定的回收率是向輔料中加入處方量80、100%、120%已知含量的主藥，按含量測定的方法測定。溶出度測定方法的回收率按處方量50、80、100加入主藥進(jìn)行測定。雜質(zhì)定量試驗雜質(zhì)的定量試驗可向原料藥或制劑中加入已知量雜質(zhì)進(jìn)行測定。如果不能得到雜質(zhì)，可用本法測定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)行比較，如藥典方法或經(jīng)過驗證的方法。如不能測得雜質(zhì)的相對響應(yīng)因子，可在線測定雜質(zhì)的相關(guān)數(shù)據(jù)，如采用二極管陣列檢測器測定紫外光

4、譜，當(dāng)雜質(zhì)的光譜與主成分的光譜相似，則可采用原料藥的響應(yīng)因子近似計算雜質(zhì)含量（自身對照法）。并應(yīng)明確單個雜質(zhì)和雜質(zhì)總量相當(dāng)于主成分的重量比（）或面積比（）。百度文庫-讓每個人平等地提升自我相同或不同，后者則可進(jìn)一步驗證測定方法取樣量多少更為適合。為了反映各次回收率的實驗波動情況，建議除寫出各次試驗的實測數(shù)據(jù)，并計算實測值的均數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)差（S）及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。.回收率測定；含量測定方法的建立，多以回收率估計分析的誤差和操作過程的損失以評價方法的可靠性，回收率試驗要求與藥材申報資料含量測定方法考察基本相同。加樣回收試驗，即于已知相對標(biāo)準(zhǔn)偏差較小的實驗波動較小，重復(fù)性較好。計算方法如下：叮噺

5、原荃=y-100被測成分含量的成藥中再精密加入一定量的被測成分純品，依法測定。測定值應(yīng)在線性范圍內(nèi)，用實測值與原樣品含被測成分量之差，除以加入純品量，計算回收率。A：樣品所含被測成分量B：加入純品量C：實測值回收率試驗至少需進(jìn)行5次試驗（n=5）,或三組平行試驗（n=6），加入欲測樣品或成分量n為每次實測數(shù)據(jù)的個數(shù)，為n次實測數(shù)據(jù)的總和，Ex2為n次實測數(shù)據(jù)之平方值的總和?；厥章室话阋笤?5-105，有些方法操作步驟繁復(fù)，可要求在90110。值得指出的是，在一些回收率試驗中，常見到所謂的加樣回收測定，不是在樣品制備開始時即加入純品，而是加到制備好的供試液中。這樣并不能說明被測成分在提取、純化

6、2.當(dāng)藥品的量由80%變化為100%,120%時,藥品等步驟中是否損失。還有在薄層掃描測定時，將供與輔料的比例變化否?試品溶液，對照品溶液分別點(diǎn)于薄層板上，同時將供試品與對照品溶液再重疊點(diǎn)于薄層板的同一原點(diǎn)上，測定計算，這只能反映板上回收率，而不是全部含量測定方法的回收率，實驗設(shè)計不符合要求?；幍幕厥章嗜绾巫?(1)一種方法是稱取對照品與輔料按處方比例混合,80%,100%,120%各三份,測得值/加入值.=回收率.(2)另一種方法是已知濃度的樣品中加入80%,100%,120%的對照品,回收率=(測得值-樣品中的量)/加入量.這種方法應(yīng)該是加樣回收吧?化藥是不是通常采用方法(1)?化藥通常

7、采用方法(1)。2.當(dāng)藥品的量由80%變化為100%,120%時,藥品與輔料的比例應(yīng)當(dāng)隨比例變化。你所說的第一種方法是對于化藥制劑回收率的做法，而第二種加樣回收率一般用于中藥化學(xué)藥品是由化學(xué)原料藥與輔料通過一定的配比制成的，我們在確定方法的準(zhǔn)確度時，通過第1種方法，加入量就是藥物含量的真值，在獲得測定值就可以得到回收率，這種方法是最準(zhǔn)確的為了保證在藥品含量的波動時仍能夠獲得良好的準(zhǔn)確度，需要做高、中、低三個濃度回收率，因此，藥物量變化時，輔料不變。對于中藥，由于藥物是以藥材經(jīng)過加工制成的，制劑中除輔料、主藥外還含有藥材中的其它成分，這些成分可以也會影響測定的準(zhǔn)確度，并且一般的中百度文庫-讓每個

8、人平等地提升自我百度文庫-讓每個人平等地提升自我 藥制劑無法像西藥那樣獲得模擬處方，無法將中藥過程中被測成分的損失等情況，所以對照品必須加制劑中的目標(biāo)成分剔除而不改變其組成，所以在驗入到被測樣品中按擬定實驗方法處理。在中藥某種證其準(zhǔn)確度時需要做加樣回收率。指標(biāo)成分的測定中回收率反映樣品處理過程中被回收率（準(zhǔn)確性），主要是考慮當(dāng)藥品量在一定范測成分的損失，不完全代表方法的準(zhǔn)確性，考察方圍內(nèi)（通常為20）變化時，輔料對其測定的影響情況，所以當(dāng)藥品的量由80%變化為100%,120%時,輔料的加入量不變，仍按100的量加入。我們最近在做中藥的時候發(fā)現(xiàn)一個問題,就是在做方法學(xué)考察的時候,回收率的計算.

9、化學(xué)藥品是精密稱定對照品,加入到已知含量的供試品溶液中來測定回收率.那么在中藥的加樣回收率測定中就出現(xiàn)一個問題,如果是以對照品直接加入到供試品中,就考察不到供試品含量測定的前期提取與純化過程中待測成分的損失.所以應(yīng)該加入到已知含量的供試品中,經(jīng)過同樣的步驟來測定.這樣一來,一定會有部分的損失,我想問的是:回收率的范圍是不是有嚴(yán)格的規(guī)定?（比如化藥的98%-102%）RSD值的限度是多少?做加樣回收率的目的就是考察樣品在提取等處理法時更應(yīng)該看重回收率的重復(fù)性（RSD）是否好。而RSD的大小與被測物的量有關(guān)，痕量分析時RSD會變大。RSD值還會與采用的分析方法有關(guān)，如GC手動進(jìn)樣時的RSD值一般比

10、HPLC定量進(jìn)樣環(huán)進(jìn)樣的RSD值大，所以應(yīng)該沒有明確的標(biāo)準(zhǔn)，所以應(yīng)該實事求是，但在建立方法時應(yīng)力求方法的重復(fù)性好。我認(rèn)為分析的物質(zhì)在微克水平，用HPLC法時RSD最好不要大于5。如果所建方法的回收率過高或過低最好每次用隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線方法進(jìn)行計算測定結(jié)果，以消除樣品處理過程中被測組分的損失。那做加樣回收的過程到底是怎樣的？是先測定出已知樣品含量以后，再用已知樣品加入標(biāo)準(zhǔn)品，再重復(fù)一次含量測定時所需要的操作嗎？這樣做可以嗎？會不會有很大的誤差阿？我的意思是實際上做顯示不出來誤差，但是總覺得這樣做不是很把握各位還有什么做法嗎？加樣回收，從名稱中解釋就是把標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)加入到樣品中測定回收率，主要是考察方法的

11、提取率與穩(wěn)定性一般應(yīng)先做重復(fù)性試驗，確定樣品中的標(biāo)準(zhǔn)物含量，然后根據(jù)樣品中的標(biāo)準(zhǔn)物含量折算需加入標(biāo)準(zhǔn)品量（一定要在前處理之前加入標(biāo)準(zhǔn)品，考察方法的提取率是不是呀），按含量測定方法進(jìn)行測定，計算回收率。中藥的要求是95-105%，但是有人說不論回收率是多少只要穩(wěn)定性好也可以，就是說中藥中的測定成份是很小的，只要按方法能控制質(zhì)量就可以，這是和化藥非常之大的區(qū)別一般情況下加樣回收率在95%105%，但如果供試品溶液的制備過程比較復(fù)雜，范圍可以擴(kuò)大到90%110%,RSD一般在3%以下。做加樣回收率的目的就是考察樣品在提取等處理過程中被測成分的損失等情況，所以對照品必須加入到被測樣品中按擬定實驗方法處

12、理。在中藥某種指標(biāo)成分的測定中回收率反映樣品處理過程中被測成分的損失，不完全代表方法的準(zhǔn)確性，考察方法時更應(yīng)該看重回收率的重復(fù)性（RSD）是否好。而RSD的大小與被測物的量有關(guān)，痕量分析時RSD會變大。RSD值還會與采用的分析方法有關(guān)，如GC手動進(jìn)樣時的RSD值一般比HPLC定量進(jìn)樣環(huán)進(jìn)樣的RSD值大，所以應(yīng)該沒有明確的標(biāo)準(zhǔn)，所以應(yīng)該實事求是，但在建立方法時應(yīng)力求方法的重復(fù)性好。我認(rèn)為分析的物質(zhì)在微克水平，用HPLC法時RSD最好不要大于5。如果所建方法的回收率過高或過低最好每次用隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線方法進(jìn)行計算測定結(jié)果，以消除樣品處理過程中被測組分的損失。加樣回收率就是在制備供試品溶液時，加入一定量

13、所測對照品溶液，制備成供試品溶液。之后按下列公式計算：回收率=（測出對照品總量一取樣相當(dāng)對照品量）/添加此對照品量x100%樣回收率是驗證方法的，首先你必須保證樣品的含量是已知的（至于怎么找到這種樣品，不管是偷是搶還是搶，反正你得弄到)，這個時候用那個方法我看有前輩講，按原含量的80，100，120加進(jìn)行含量測定，現(xiàn)在先假設(shè)這個方法是正確的。如標(biāo)，那么這個“原含量”是指藥材中的待測成分嗎？果測定結(jié)果和樣品的真實含量是一致的(既加樣回收率結(jié)果合格)，就說明這個假設(shè)是正確的，即這個含量測定方法是可行的。反之，這個方法就是不可行的我忘記了加樣回收率方法,請各位專家多多指教.是去多少藥材,加多少對照品

14、好?共三個濃度中間濃度：藥材中主藥與對照品加起來等于含測時的濃度，它們的比例為1：1。低濃度：藥材量不變，對照品量為中間濃度時的一半。高濃度：藥材量不變，對照品量為中間濃度時的倍。藥材和對照品各占一半，測定總的含量，減去藥材對應(yīng)的量后與加入的對照品量的比值即為加樣回收率。做加樣回收率時，樣品的量應(yīng)該加入多少，標(biāo)樣應(yīng)該加入多少？按什么算的。還有加樣回收率計算時樣品的含量如何算，是已知的嗎我的理解是這樣的:回收率,根據(jù)藥典規(guī)定,可以做同一濃度下的6份,也可以做三個不同濃度(80，100，120),每個濃度平行做三份,一共9份.樣品為A.標(biāo)樣為B對于第一中情況,一般配成含量測定下情況的濃度做,這時樣

15、品量和標(biāo)樣分別占1/2.(A/2+B/2)對于第二中情況.80，(A/2+B/2)*80%100,(A/2+B/2)*100%120,(A/2+B/2)*120%加樣回收中樣品的含量是已知的,回收率的計算為(實測結(jié)果量-加入樣品量)/標(biāo)樣量*100%計劃做一個加樣回收率，片劑的，現(xiàn)在樣品已經(jīng)有了，原來有一個方法a,可以測定，現(xiàn)在我想改用方法b測定含量，具體怎么做，我用方法a要求達(dá)到95%以上，樣品制備過程復(fù)雜的可降低到測定好含量，再用方法b,在樣品中加入一定的對90%。生物樣品可更低。因為在樣品的基礎(chǔ)上又加照品，再測定一遍嗎，那樣我的含量測定方法b的結(jié)果不是要比含量測定的濃度大好多嗎，那樣測定

16、的結(jié)果可靠嗎？想問一下版里的兄弟怎么做加樣回收率呀，懂的幫幫忙呀，急呀如果你的a方法已經(jīng)建立成熟（請注意前提是你的a方法經(jīng)過方法學(xué)證明是可靠的），你就用a方法測定一下樣品的含量，同樣的樣品你再用b方法測定一下（當(dāng)然兩個測定方法都要一定的樣本數(shù)量），如果兩者的結(jié)果接近，就說明b方法回收率達(dá)到要求，可準(zhǔn)確測定樣品，當(dāng)然還要做其他的穩(wěn)定性、精密度方法學(xué)了，但回收率就可以這樣做，我認(rèn)為就是用已知證明未知，用a方法做為一個參照而已，這個在藥典方法學(xué)里都有介紹，但一般都幾乎沒人用這種方法建立回收率研究，因為比較麻煩，要建立兩套系統(tǒng)。所以一般都是加樣回收。加樣回收就是在已知濃度的樣品里加該樣品量的80%、1

17、00%、120%的對照品，然后測定結(jié)果，結(jié)果減去已知的量再除以加入量就是回收率，一般都了1倍左右的對照品，濃度就比平常高了，所以你取樣時可取平常的一半，這樣對照品一加濃度就跟平常測定濃度一樣了，這些都要靈活處理，不要一成不變。此外上面這種方法中藥做的比較多。而對于單體或者化藥，一般加樣回收不在已知濃度的樣品里，而是在處方量比例的敷料里直接加對照品，其他都一樣，這樣的原因是中藥復(fù)雜，他的樣品環(huán)境難以模擬，所以要用已知濃度的樣品來模擬，而西藥成分單一，敷料比例清楚，環(huán)境容易模擬，所以并不需要里面一定要含有已知濃度的成分。你把原理搞清楚了，就明白怎么靈活處理了。我沒有見過像ydlyq戰(zhàn)友這樣做加樣回

18、收的，提一點(diǎn)個人愚見：1，既然你的含量方法已經(jīng)更改，那么首先你應(yīng)該對改后的方法通過一系列方法學(xué)驗證，確定方法的準(zhǔn)確性與可行性。這樣才能保證加樣回收試驗結(jié)果的可信度。2，你的兩種方法可能測定的含量結(jié)果差異不大，但是這兩種方法畢竟有其不同之處，不然就不會有的原料藥進(jìn)行測定，或用本法所得結(jié)果與已建立準(zhǔn)所謂的“兩種方法”，所以我還是建議用你最終確定的方法測定含量，再用該方法進(jìn)行加樣回收測定，這樣的話，既可以保證現(xiàn)有樣品的含量準(zhǔn)確度，同時也可以更好的提高回收率的準(zhǔn)確性。歡迎其他戰(zhàn)友參與討論。面戰(zhàn)友分析的很好，我根據(jù)指導(dǎo)原則和藥典談一下體會：準(zhǔn)確度確度的另一方法測定的結(jié)果進(jìn)行比較。制劑制劑可用含已知量被測

19、物的各組分混合物進(jìn)行測定。如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中加入已知量的被測物進(jìn)行測定，;必要時，與另一個已建立準(zhǔn)確度的方法比較結(jié)果。根據(jù)以上原則，你可以用常規(guī)回收率的做法，按處方量加入80、100、120的已知含量的原料或?qū)φ掌?，每個配置三個濃度，共9個進(jìn)行測定，計準(zhǔn)確度系指用該方法測定的結(jié)果與真實值或認(rèn)可算回收率，原則上可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：各濃度下的平的參考值之間接近的程度。有時也稱真實度。一定的準(zhǔn)確度為定量測定的必要條件，因此涉及到定均回收率均應(yīng)在%之間，9個回收率數(shù)據(jù)的相對標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）應(yīng)不大于。儀器分析如HPLC法量測定的檢測項目均需要驗證準(zhǔn)確度，如含量測定、雜質(zhì)定量試驗等。準(zhǔn)確度應(yīng)

20、在規(guī)定的范圍內(nèi)一般要求在%，容量分析法要求%。根據(jù)以上原則，如果你的方法a已經(jīng)驗證是準(zhǔn)確可建立，對于制劑一般以回收率試驗來進(jìn)行驗證。試驗設(shè)計需考慮在規(guī)定范圍內(nèi)，制備3個不同濃度的靠的，可以進(jìn)行兩個方法測定的統(tǒng)計分析，確定兩個方法是否有統(tǒng)計學(xué)差異，如果兩個方法的方法學(xué)試樣，各測定3次，即測定9次，報告已知加入量的回收率（）或測定結(jié)果平均值與真實值之差及驗證后沒有統(tǒng)計學(xué)差異，根據(jù)實際情況酌情選擇其一訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。其可信限。原料藥原料藥可用已知純度的對照品或符合要求標(biāo)題：藥品含量測定方法設(shè)計中的幾個問題正文：藥品含量測定方法設(shè)計中的幾個問題審評三部藥學(xué)組張哲峰藥品的含量或效價是評定藥品的主要指標(biāo)之一

21、，設(shè)計其測定方法時，應(yīng)根據(jù)藥品特性、劑型、處方、鑒別試驗和純度檢查綜合考慮，當(dāng)鑒別試驗和純度檢查保證了專屬性和純度的情況下，含量測定方法的選擇要著眼于準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性和可重復(fù)性。原料藥：對于組份單一的原料藥，首選精密度高，操作簡便、快速的容量法測定含量，可根據(jù)藥物分子中所具有的官能團(tuán)及其化學(xué)性質(zhì)，選用不同的容量分析方法，但應(yīng)符合如下條件：（1）反應(yīng)須按一個方向完全進(jìn)行；（2）反應(yīng)要迅速，必要時可通過加熱或加入催化劑等方法提高反應(yīng)速度；（3）共存物不得干擾主要反應(yīng)，或能用適當(dāng)方法消除；（4）確定等當(dāng)點(diǎn)的方法要簡單、靈敏；（5）標(biāo)化滴定液所用基準(zhǔn)物質(zhì)易得，并符合純度高、組成恒定且與化學(xué)式符合、性質(zhì)穩(wěn)

22、定（標(biāo)化時不發(fā)生副反應(yīng)）等要求。方法敘述中要強(qiáng)調(diào)：（1）供試品的取用量應(yīng)滿足滴定精度的要求（消耗滴定液約20ml）；（2）滴定終點(diǎn)的判斷要明確，如選用指示劑法，應(yīng)考慮其變色敏銳，提供滴定曲線，并用電位法校準(zhǔn)其終點(diǎn)顏色。（3）為排除因加入其它試劑或混入雜質(zhì)對測定結(jié)果的影響，或便于剩余滴定法的計算，可采用“將滴定的結(jié)果用空白試驗校正”的辦法；（4）最后要給出滴定度（采用四位有效數(shù)字）。容量法測定含量要注意參加反應(yīng)的應(yīng)是藥物分子活性部分，而不應(yīng)是次要的酸根或堿基部分。如鹽酸西替立嗪、鹽酸氨溴索，有研究者采用氫氧化鈉滴定液滴定法直接測定其含量，事實上這種方法測定的是其中鹽酸的含量，由于其成鹽工藝中的酸

23、、堿配比不當(dāng)時，可嚴(yán)重影響成品酸堿度，故此法的測定結(jié)果并不能代表其活性成分有機(jī)堿的含量，這種方法不能準(zhǔn)確把握其有效成分含量。應(yīng)采用非水滴定法，以無水冰醋酸為溶劑屏蔽掉鹽酸的干擾，用高氯酸滴定其有機(jī)堿的含量。高氯酸非水滴定法因適應(yīng)性廣（適用于有機(jī)弱堿及其鹽類）、方法簡便和測定結(jié)果精密等優(yōu)點(diǎn)，在化學(xué)原料藥的 含量測定中較為常用。百度文庫-讓每個人平等地提升自我RSD%)如用容量法不適宜時，可考慮選用HPLC法，尤其在有關(guān)物質(zhì)干擾，或多組份物質(zhì)時，具有特殊優(yōu)勢。因儀器或操作間的偏差較大，一般不選用UV法，尤其不首選“吸收系數(shù)法”定量，不選用末端吸收峰作測定波長；須用UV法時，可采用不受儀器及其它變化

24、影響的“對照品比較法”定量，測定溶液的吸收度宜在間。元素測定法如定氮法，在其它方法均不適宜時可采用，但因不能反映化合物含量的變化情況，此法不可用于穩(wěn)定性考察中。制劑：選用方法時應(yīng)考慮輔料等的干擾，首選方法一般為HPLC法，在有關(guān)物質(zhì)、輔料不干擾的情況下，也可選用UV法或原料藥項下的容量法，復(fù)方制劑首選HPLC法較為適宜。方法的驗證：訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的含量測定法不同于一般質(zhì)量考察的方法，須經(jīng)過嚴(yán)格的方法學(xué)驗證，不同原理的測定法具有不同的驗證內(nèi)容及要求：(1)容量分析法的驗證：精密度：用原料藥精制品考察方法精密度，平行試驗5個樣本的的回收率(測定值與理論值的比值)計算，應(yīng)在之間(n=5,RSD%)；滴

25、定終點(diǎn)確定的依據(jù)：包括滴定曲線的繪制，如用指示劑法確定終點(diǎn)，應(yīng)用電位法校準(zhǔn)終點(diǎn)顏色，提供指示劑顏色與電位變化情況的對比結(jié)果；耐用性：考察測定條件(供試液穩(wěn)定性、樣品提取次數(shù)、時間等)有微小變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度，如測試條件要求苛刻時則應(yīng)在方法中注明。(2)HPLC法的驗證：精密度：RSD2%(n=5)；準(zhǔn)確度：用于制劑時，要考察輔料的影響，將一定量藥物加到按處方比例配制的輔料中(為標(biāo)示量的80%120%)制成高、中、低三個劑量，混合均勻后，每個劑量取三份樣品，按擬定方法測定回收率，應(yīng)在98%102%之間(n=9,RSD，截距應(yīng)趨于零，并提供線性關(guān)系圖；專屬性：輔料、有關(guān)物質(zhì)或降百度

26、文庫-讓每個人平等地提升自我百度文庫-讓每個人平等地提升自我 分析法，此項可不作主要要求。類別:審評三部有兩種方法：一種是加入100%平行制備6份樣品。解產(chǎn)物峰對主藥峰應(yīng)無干擾；耐用性：考察測定條件（供試液穩(wěn)定性、流動相組成和pH值、不同品牌或批號的同類色譜柱、柱溫、流速、樣品提取次數(shù)、時間等）有微小變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度，如測試條件要求苛刻時則應(yīng)在方法中注明；靈敏度：作為常量分析法，此項可不作主ill；ill；r、-要要求。（3）UV法的驗證：精密度：RSDSl%（n=5）；準(zhǔn)確度：方法同HPLC法，回收率應(yīng)在98%102%之間（n=9,RSDS2%）,同時要求輔料、有關(guān)物質(zhì)或降

27、解產(chǎn)物在測定波長處無吸收。線性范圍：用已知含量的精制品配制一系列濃度的溶液（n=57,吸收度A在間），用濃度C對峰面例如：樣品中待測組分的含量是lOOmg，則加入100%的對照品（即lOOmg對照品），同樣方法作六份。另一種是80%，100%，120%各制備三份樣品例如：樣品中待測組分的含量是lOOmg，則加入80%的對照品（即80mg對照品）制備3份，加入100%的對照品（即100mg對照品）制備3份，加入120%的對照品（即120mg對照品）制備3份?；厥章史秶话阍?5%-105%積A或峰高h(yuǎn)或被測物的響應(yīng)值之比進(jìn)行回歸處理，線性方程的相關(guān)系數(shù)r應(yīng)，截距應(yīng)趨于零，并提供線性關(guān)系圖；耐用性

28、：考察測定條件（供試液穩(wěn)定性、樣品提取次數(shù)、時間、比色法中顯色劑用量、反應(yīng)溫度、時間、pH值等）有微小變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度，如測試條件要求苛刻時則應(yīng)在方法中注明；靈敏度：作為常量出現(xiàn)異?？赡艿脑颍菏紫饶阋獪y定你加入的樣品中是否含有要檢測的有機(jī)溶劑，若有，有多少，在實際運(yùn)算中你是否算了進(jìn)去。你的樣品的溶解性怎么樣？你配制溶液時，稱量是否準(zhǔn)確？你是否已排除儀器，頂空進(jìn)樣等外在因素？有關(guān)回收率的基本知識我不太懂，我不是學(xué)藥物分析的，你們討論的問題我都看不懂。只好問個弱智的問題?；厥章?（測得值-樣品中的量）/加入量這個公式中的加入量是什么單位??？如果我把一定量的溶液加入到一定量的血漿

29、中，加入量是不是就是加入標(biāo)準(zhǔn)液的體積？例如標(biāo)準(zhǔn)液（滲透壓290）15ml加入到15ml的血漿（通過儀器測得滲透壓300）中，混勻后測得滲透壓X,那應(yīng)該怎么計算加樣回收率？回收率=（測得值-樣品中的量）/加入量其中的測得值、樣品中得量、加入量這三個東東單位應(yīng)該相同,而且單位都應(yīng)該是質(zhì)量或者摩爾,比如都是“克”。而不應(yīng)該是體積,因為樣品在溶液中得濃度并不是完全相同。.回收率=（測得值-樣品中的量）/加入量這個公式中的加入量是什么單位??？加入量即向樣品溶液中加入的待測成分標(biāo)準(zhǔn)品的量。2.如果我把一定量的溶液加入到一定量的血漿中，加入量是不是就是加入標(biāo)準(zhǔn)液的體積？加入量是加入標(biāo)準(zhǔn)品的量,即濃度乘以體積

30、。加入方法1、同一樣品,制備相同濃度的6份樣品（樣品取樣量減半,以1：1比例加入對照品）2、同一樣品,制備3個濃度的供試品,每個濃度分別制備3份供試液,對照品的加入有以下3種方式：a、取相同量樣品9份（一般為樣品取樣量的一半）,設(shè)計個濃度,按不同比例加入對照品。中間濃度一般按1：1比例加入,低、高濃度可選：1、：1的比例。加入的對照品的量要適當(dāng),保證供試品溶液的濃度（或量）在考察的線性范圍內(nèi)。b、取3個不同量的樣品各3份，每個取樣量分別按1：1比例加入對照品，中間濃度應(yīng)選定在正常測定濃度，其他兩個濃度可以結(jié)合范圍考察的最高、最低點(diǎn)進(jìn)行測定。c、按標(biāo)示量計算的組分，可參照化學(xué)藥品測定方法，取9份

31、樣品，按：1、1：1、1：的比例加入對照品（樣品取樣量減半）。需要報告的數(shù)據(jù)樣品中待測成分含有量對照品加入量測定量回收率計算值（%）相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD%）測定數(shù)據(jù)的精度要求回收率（%）95105%RSDHPLCV3%我補(bǔ)充兩點(diǎn)加以說明：100%，120%）,每個濃度平行做三份,一共9份.樣品為A.標(biāo)樣為B對于第一中情況,一般配成含量測定下情況的濃度做,這時樣品量和標(biāo)樣分別占1/2.（A/2+B/2）對于第二中情況.80%，（A/2+B/2）*80%100%,（A/2+B/2）*100%120%,（A/2+B/2）*120%1，上述回收率實驗結(jié)果精度要求僅針對中藥而言；加樣回收中樣品的含量是已

32、知的,即回收率（）95105%,RSD要求：TLCSV5%,HPLC或GCV3%。2,而審評中心黃曉龍老師針對05版藥典在CDE中發(fā)表文章指出,回收率的準(zhǔn)確度可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：各濃度下的平均回收率均應(yīng)在%之間,9個回收率數(shù)據(jù)的相對標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）應(yīng)不大于。HPLC法的線性回歸方程一般是A=kC+b（A為峰面積,C為樣品濃度）我的理解是這樣的:回收率,根據(jù)藥典規(guī)定,可以做同一濃度下的6份,也可以做三個不同濃度（80%,回收率的計算為（實測結(jié)果量-加入樣品量）/標(biāo)樣量*100%回收率的通用公式是:回收率（%）=（加標(biāo)樣品測定值-樣品測定值）/加標(biāo)量X100%濃度來表示計算公式:回收率（%）=（加標(biāo)樣

33、品測定值-樣品測定值*加標(biāo)樣品中測定液體的比例）/加標(biāo)量X100%（注意在這里加標(biāo)量是用濃度來表示的,即:加標(biāo)量=標(biāo)準(zhǔn)濃度*加入標(biāo)準(zhǔn)量/總體積）從物質(zhì)的量或質(zhì)量來計算的話為：回收率（%）=（加標(biāo)樣品測定值*總體積-樣品測定值*樣品加入體積）/（標(biāo)準(zhǔn)濃度*加入的標(biāo)準(zhǔn)體積）x100%峰面積計算公式回收率（）=（A樣加標(biāo)A樣）/A標(biāo)*100%這樣認(rèn)為是否正確？好像還有回收率和加樣回收率之分，花藥一般做回收率，中藥一般做加樣回收率。因為中藥樣品沒辦法做相同樣品基質(zhì)的空白對照，只能在試樣中加入已知濃度的溶液，然后計算增加量的回收率而化學(xué)藥品可以制備空白對照的，所以就是回收率拉回收率=（加標(biāo)試樣測定值一試

34、樣測定值）x100/加標(biāo)量回收率測定；含量測定方法的建立，多以回收率估計分析的誤差和操作過程的損失以評價方法的可靠性，回收率試驗要求與藥材申報資料含量測定方法考察基本相同。加樣回收試驗，即于已知被測成分含量的成藥中再精密加入一定量的被測成分純品，依法測定。測定值應(yīng)在線性范圍內(nèi)，用實測值與原樣品含被測成分量之差，除以加入純品量，計算回收率。A：樣品所含被測成分量B：加入純品量C：實測值回收率試驗至少需進(jìn)行5次試驗（n=5）,或三組平行試驗（n=6）,加人欲測樣品或成分量相同或不同，后者則可進(jìn)一步驗證測定方法取樣量多少更為適合。為了反映各次回收率的實驗波動情況，建議除寫出各次試驗的實測數(shù)據(jù)，并計算

35、實測值的均數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)差（S）及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。相對標(biāo)準(zhǔn)偏差較小的實驗波動較小，重復(fù)性較好。計算方法如下：n為每次實測數(shù)據(jù)的個數(shù),Zx為n次實測數(shù)據(jù)的總和，Zx2為n次實測數(shù)據(jù)之平方值的總和。回收率一般要求在95-105，有些方法操作步驟繁復(fù)，可要求在90110。值得指出的是，在一些回收率試驗中，常見到所謂的加樣回收測定，不是在樣品制備開始時即加入純品，而是加到制備好的供試液中。這樣并不能說明被測成分在提取、純化等步驟中是否損失。還有在薄層掃描測定時，將供試品溶液，對照品溶液分別點(diǎn)于薄層板上，同時將供試品與對照品溶液再重疊點(diǎn)于薄層板的同一原點(diǎn)上，測定計算，這只能反映板上回收率，而不是全部含

36、量測定方法的回收率，實驗設(shè)計不符合要求。日內(nèi)精密度是低中高三個濃度各處理一份，分別于一日內(nèi)不同時間進(jìn)樣測定結(jié)果為日內(nèi)精密度，而低中高三個濃度各處理一份于五日內(nèi)測定結(jié)果為日間精密度。回收率測定；含量測定方法的建立，多以回收率估計分析的誤差和操作過程的損失以評價方法的可靠性，回收率試驗要求與藥材申報資料含量測定方法考察基本相同。加樣回收試驗，即于已知被測成分含量的成藥中再精密加入一定量的被測成分純品，依法測定。測定值應(yīng)在線性范圍內(nèi)，用實測值與原樣品含被測成分量之差，除以加入純品量，計算回收率。A：樣品所含被測成分量B：加入純品量C：實測值回收率試驗至少需進(jìn)行5次試驗（n=5）,或三組平行試驗（n=

37、6）,加人欲測樣品或成分量相同或不同，后者則可進(jìn)一步驗證測定方法取樣量多少更為適合。為了反映各次回收率的實驗波動情況，建議除寫出各次試驗的實測數(shù)據(jù)，并計算實測值的均數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)差（S）及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。相對標(biāo)準(zhǔn)偏差較小的實驗波動較小，重復(fù)性較好。計算方法如下：n為每次實測數(shù)據(jù)的個數(shù),工x為n次實測數(shù)據(jù)的總和，x2為n次實測數(shù)據(jù)之平方值的總和?；厥章室话阋笤?5-105，有些方法操作步驟繁復(fù)，可要求在90110。值得指出的是，在一些回收率試驗中，常見到所謂的加樣回收測定，不是在樣品制備開始時即加入純品，而是加到制備好的供試液中。這樣并不能說明被測成分在提取、純化等步驟中是否損失。還有在薄層

38、掃描測定時，將供試品溶液，對照品溶液分別只要電化學(xué)反應(yīng)可靠，其回收率都接近100%。點(diǎn)于薄層板上，同時將供試品與對照品溶液再重疊點(diǎn)于薄層板的同一原點(diǎn)上，測定計算，這只能反映板上回收率，而不是全部含量測定方法的回收率，實驗設(shè)計不符合要求。準(zhǔn)確度是有兩種計算方法：因為做準(zhǔn)確度校正的方法有兩種（空白回收與加樣回收）回收率：測定值/加入量*100%加樣回收試驗：（測定值-樣品含量值）加入量100%脫離測量的目的與組份的含量范圍，只講回收率是沒有什么參考價值的。比如測量10ppm的組份，回收率給有90120就非常好；但測量10%含量的組份，那你的分析方法的回收率應(yīng)該在98102%間才是被認(rèn)可的。再說分析

39、方法，光譜法，如AAS，ICP等，回收率可以是90110%，因為分析對象的絕對含量較少；但對于容量分析，如滴定法，重量法，那回收率就應(yīng)該越接近100%越好。有一個例外，就是電量法（庫侖法），常量微量的回收率都比較好，因為這個方法的定量基礎(chǔ)是法拉第定律，回收率測定；含量測定方法的建立，多以回收率估計分析的誤差和操作過程的損失以評價方法的可靠性，回收率試驗要求與藥材申報資料含量測定方法考察基本相同。加樣回收試驗，即于已知被測成分含量的成藥中再精密加入一定量的被測成分純品，依法測定。測定值應(yīng)在線性范圍內(nèi)，用實測值與原樣品含被測成分量之差，除以加入純品量，計算回收率。A：樣品所含被測成分量B：加入純品

40、量C：實測值回收率試驗至少需進(jìn)行5次試驗（n=5）,或三組平行試驗（n=6）,加人欲測樣品或成分量相同或不同,后者則可進(jìn)一步驗證測定方法取樣量多少更為適合。為了反映各次回收率的實驗波動情況,建議除寫出各次試驗的實測數(shù)據(jù),并計算實測值的均數(shù),標(biāo)準(zhǔn)差（S）及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。相對標(biāo)準(zhǔn)偏差較脫離測量的目的與組份的含量范圍，只講回收率是小的實驗波動較小，重復(fù)性較好。計算方法如下：n為每次實測數(shù)據(jù)的個數(shù),工x為n次實測數(shù)據(jù)的總和，x2為n次實測數(shù)據(jù)之平方值的總和?；厥章室话阋笤?5-105,有些方法操作步驟繁沒有什么參考價值的。比如測量10ppm的組份，回收率給有90120就非常好；但測量10%

41、含量的組份，那你的分析方法的回收率應(yīng)該在98102%間才是被認(rèn)可的。再說分析方法，光譜法，如AAS，復(fù)，可要求在90110。ICP等，回收率可以是90110%，因為分析對象的值得指出的是，在一些回收率試驗中，常見到所謂的加樣回收測定，不是在樣品制備開始時即加入純品，而是加到制備好的供試液中。這樣并不能說明被測成分在提取、純化等步驟中是否損失。還有在薄層掃描測定時，將供試品溶液，對照品溶液分別點(diǎn)于薄層板上，同時將供試品與對照品溶液再重疊點(diǎn)于薄層板的同一原點(diǎn)上，測定計算，這只能反映板上回收率，而不是全部含量測定方法的回收率，實驗設(shè)計不符合要求。準(zhǔn)確度是有兩種計算方法：因為做準(zhǔn)確度校正的方法有兩種（

42、空白回收與加樣回收）回收率：測定值/加入量*100%加樣回收試驗：（測定值-樣品含量值）/加入量*100%絕對含量較少；但對于容量分析，如滴定法，重量法，那回收率就應(yīng)該越接近100%越好。有一個例外，就是電量法（庫侖法），常量微量的回收率都比較好，因為這個方法的定量基礎(chǔ)是法拉第定律，只要電化學(xué)反應(yīng)可靠，其回收率都接近100%。加樣回收率就是在制備供試品溶液時，加入一定量所測對照品溶液，制備成供試品溶液。之后按下列公式計算：回收率=（測出對照品總量一取樣相當(dāng)對照品量）/添加此對照品量x100%樣回收率是驗證方法的，首先你必須保證樣品的含量是已知的（至于怎么找到這種樣品，不管是偷是搶還是搶，反正你

43、得弄到），這個時候用那個方法進(jìn)行含量測定，現(xiàn)在先假設(shè)這個方法是正確的。如果測定結(jié)果和樣品的真實含量是致的（既加樣回試品中被測成分含有量之和必須在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性收率結(jié)果合格），就說明這個假設(shè)是正確的，即這范圍之內(nèi)；加入的對照品的量要適當(dāng)，過小則引起個含量測定方法是可行的。反之，這個方法就是不可行的?；厥章始瓤梢钥疾鞙y定方法的準(zhǔn)確度，同時也可考察測定方法的專屬性。試想，如果某個測定方法專屬性不好，那么回收率試驗的結(jié)果肯定是偏高的。準(zhǔn)確度系指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，一般用回收率（）表示。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)測試。用于定量測定的分析方較大的相對誤差，過大則干擾成分相對減少，真實性

44、差?；厥章?=（C-A）/B*100%式中，A為供試品所含被測成分量；B為加入對照品量；C為實測值。2.數(shù)據(jù)要求在規(guī)定范圍內(nèi)，取同一濃度的供試品，用6個測定結(jié)果進(jìn)行評價；或設(shè)計3個不同濃度，每個濃度各分別制備3份供試品溶液進(jìn)行測定，用9個測定結(jié)果進(jìn)行評價，一般中間濃度加入量與所取法均需做準(zhǔn)確度驗證。1.測定方法的準(zhǔn)確度供試品含量之比控制在1:1左右，其他兩個濃度分別約為供試品含量的80%和120%。應(yīng)報告可用已知純度的對照品做加樣回收率測定，即于已知被測成分含量的供試品中再精密加入一定量的已知純度的被測成分對照品，依法測定。用實測值與供試品中含有量之差，除以加入對照品量計算回收率。在加樣回率收

45、試驗中須注意對照品的加入量與供供試品取樣量、供試品中含有量、對照品加入量、測定結(jié)果和回收率（）計算值，以及回收率（%）的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）或可1、回收率藥物分析中通常采用加標(biāo)回收率，北京大學(xué)分析化學(xué)教材給出的公式是：此與yaoshenghua給出式子基本上是一樣的。所不同的是等號右邊不加“%”?！?”可以理解為除100，也可理解為單位符號。我國國家標(biāo)準(zhǔn)都是如上式等式左加“%”號，右邊不加。日本中學(xué)、大學(xué)化學(xué)教材統(tǒng)一左加“%”號，右邊不加。國標(biāo)上有權(quán)威性的分析化學(xué)專著也大多如此。這種寫法國際上沒有標(biāo)準(zhǔn)。2、準(zhǔn)確度國家標(biāo)準(zhǔn)GB/測量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度（正確度與精密度）第一部分：總則與定義引言中

46、稱：GB/T6379用兩個術(shù)語“正確度”與“精密度”來描述一種測量方法的準(zhǔn)確度。2005年中國藥典附錄中準(zhǔn)確度定義與GB/不同，應(yīng)以國標(biāo)為準(zhǔn)。國標(biāo)定義準(zhǔn)確度為“測試結(jié)果與接受參照值間的一致程度”，“當(dāng)用于一組測試結(jié)果時，由隨機(jī)誤差分量和系統(tǒng)誤差即偏倚分量組成”。準(zhǔn)確度曾被稱為“平均數(shù)的準(zhǔn)確度”，這種用法不被推薦。國家計量技術(shù)規(guī)范“測量不確定度評定與表示”（JJF-1059-1999）中明確指出“準(zhǔn)確度是一個定性概念。例如：可以說準(zhǔn)確度高低、準(zhǔn)確度為級、準(zhǔn)確度為3等及準(zhǔn)確度符合xx標(biāo)準(zhǔn)；盡量不使用如下表示：準(zhǔn)確度為、16mg、16mg及16mg?！保弧安灰眯g(shù)語精密度代替準(zhǔn)確度”。（1）、正確度

47、正確度指大量測試結(jié)果的（算術(shù)）平均值與真值或接受參照值之間的一致程度。正確度的度量通常用術(shù)語偏倚表示。偏倚是測試結(jié)果的期望與接受參照值之差，偏倚是系統(tǒng)誤差的總和。一般以回收率（%）表示正確度。（2）、精密度精密度是在規(guī)定條件下，獨(dú)立測試結(jié)果間的一致程度。精密度的度量通常以不精密度表達(dá)。精密度僅僅依賴于隨機(jī)誤差的分布而與真值或規(guī)定值無關(guān)。精密度量值一般用標(biāo)準(zhǔn)差或相對標(biāo)準(zhǔn)差表示。請參閱國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T6379.和中國醫(yī)院藥學(xué)雜志2007年第7期謅議2005年中國藥典的標(biāo)準(zhǔn)化我要建立一個HPLC測定含量的方法，包括：線性、精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性、加樣回收率、最低檢出限、樣品含量測定等試驗。我想問一下

48、以上試驗一定要按順序做嗎？我覺得樣品含量測定應(yīng)該先測，驗了，確定樣品溶液濃度，一般使峰面積1000左然后再做方法學(xué)試驗，今天一個老師讓我要先做方右就ok。法學(xué)，方法學(xué)做完之后再測樣品含量，但是樣品含量在還沒做的情況下，加樣回收率沒法做??？還有談下個人意見：首先最低檢出限沒有必要做，這是針對有關(guān)物質(zhì)的，與含量沒關(guān)系。至于樣品的濃度，如果先做方法學(xué)，萬一樣品測定時，超出線性范圍，難道又要補(bǔ)線性嗎？我能查到的文獻(xiàn)資料顯示只說要做這些試驗，但是沒見說那些先做那些后做。有沒有老師幫我解答這個疑惑？個人孤陋寡聞，好像沒見過書面說明要求方法學(xué)試驗順序的。但是，個人以為試驗按線性、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性、加樣

49、回收率、樣品含量測定這一套順序做下來還是比較合理的，實際中大家怎么操作就不清楚了。而且有些省事的小技巧，比如穩(wěn)定性的圖譜可從重復(fù)性試驗調(diào)幾張，應(yīng)該沒有問題（如果樓主首次做方法學(xué)試驗，建議還是完整一套做下來）。國內(nèi)做方法學(xué)時大部分做線性、精密度、可以預(yù)試驗考察一下，濃度不易過大，也不易過小。其余的我覺得應(yīng)該先做精密度，這說明你的儀器沒什么問題；然后做穩(wěn)定性，考察你的樣品是否穩(wěn)定，是否需要臨用前現(xiàn)配，或者避光等苛刻性條件；接下來做線性，通過線性說明你應(yīng)該用一點(diǎn)法還是兩點(diǎn)法測含量；最后呢，就是回收率，只有回收率合格，你的含量測定才能保證是正確的。以上做完了，那你就可以測含量了！要建立一個HPLC測定

50、含量的方法，包括：線性、精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性、加樣回收率、最低檢出限、樣品含量測定等試驗。我想問一下以上試驗一定要按順序做嗎？重復(fù)性、穩(wěn)定性、加樣回收率、樣品含量這六項。國外比較看重最低檢出限。個人感覺加樣回收試驗最重要，樓主可以先測下樣品含量，應(yīng)該不費(fèi)事。至于樣品測定時是否超出線性范圍，那就需要預(yù)試不一定按照順序作，但是重要性及理論上和最終報告的順序應(yīng)該是先考察你這個方法的特異性，確認(rèn)你研究的就是你的目的化合物才能繼續(xù)作?。。海┢浯慰疾旎厥章?，精密度和準(zhǔn)確度，精密度也就是重復(fù)性的意思，你的方法回收率高，并且準(zhǔn)確而且重復(fù)性好。再下來才考察線性，LLOQ（最低定量限）和各種穩(wěn)定性。本量要充足。

51、至于線性范圍先估計一個，然后在試劑測定時如果有超出線性范圍（超出ULOQ）的就補(bǔ)作一個稀釋穩(wěn)定性，如果你的LLOQ太高那就沒轍了。我覺得加樣回收率應(yīng)該可以作，為什么不能作呢？這和你的樣本有什么關(guān)系？一般作分析方法，首先你要在色譜或質(zhì)譜上確認(rèn)你#J*#J*#J*#J*#J*#J*#J*#J*#J*#J*#J*#J*#J*#J*我覺得樣品含量測定應(yīng)該先測，然后再做方法學(xué)試驗，今天一個老師讓我要先做方法學(xué)，方法學(xué)做完之后再測樣品含量，但是樣品含量在還沒做的情況下，加樣回收率沒法做??？還有如果先做方法學(xué)萬一樣品測定時，超出線性范圍，難道又要補(bǔ)線性嗎？我能查到的文獻(xiàn)資料顯示只說要做這些試驗但是沒見說那些

52、先做那些后做。有沒有老師幫我解答這個疑惑？當(dāng)然是首先作方法學(xué)考核，不然你的方法失誤導(dǎo)致測量錯誤然后再產(chǎn)生估計錯誤，那就慘了。不過你可以先少量測定一個人的濃度作出估計。前提是樣的觀察化合物就是目標(biāo)化合物，等你心中有數(shù)時，應(yīng)該說特異性（或選擇性）已經(jīng)考察了，然后你摸制備方法時的重復(fù)性和精密度也需要留意，回收率也要留意，等你的方法確定了，然后再考察線性。等一切妥當(dāng)后，應(yīng)該嚴(yán)格按照SFDA或FDA對于生物樣本定量方法學(xué)考核內(nèi)容進(jìn)行考核。這時順序已經(jīng)不重要了，重要的就是如何合理安排時間將這些東東搞定了。如果做含量方法學(xué),可以不用做最低檢出量,但是應(yīng)該要加波長選擇、專屬性試驗（包空白輔料）然后就是線性、精

53、密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性、加樣回收率、樣品含量測定等試驗1、做線性時可以使用對照品，也可以使用原料藥，百度文庫-讓每個人平等地提升自我 選用哪種，你按成本考慮；做線性時可以不干燥，因為你不是用線性計算含量，而是確定一個范圍，干不干燥只是截距不同而已，如果水分或溶劑量較大，或者以活性成分計時，可以折算的。如果你的干燥文獻(xiàn)是標(biāo)準(zhǔn)（國家、國際藥品標(biāo)準(zhǔn)）的話，你必須要與其晶型一致，也就是說明你的樣品也應(yīng)該穩(wěn)定；如果不是標(biāo)準(zhǔn)，則你要看一看是否穩(wěn)定（當(dāng)然不是指穩(wěn)定性試驗），如果不太確定的話，可以考察加干燥劑的減壓干燥的方法。當(dāng)然你也可以考慮是否可以用水分測定來代替干燥失重，畢竟測定結(jié)果比較快，但要進(jìn)行可行性研究。2、回收率測定要看你的檢測項目，一般含量測定要求80%、100%、120%；含量均勻度一般為70%、100%、130%（如與含量方法或溶劑不同）；而溶出度一般為50%、80%、100%；對于釋放度個人認(rèn)為則應(yīng)考慮每個限度范圍的中值濃度的回收率；而對于定量測定的有關(guān)物質(zhì)，可以考慮限度值的50%、100%、150%的回收率?；厥章拾ń^對回收率和相對回收率。絕對回收率考察的是經(jīng)過樣品