三七種子脂溶性化學(xué)成分研究

1、三七種子脂溶性化學(xué)成分研究【摘要】目的對(duì)三七種子的脂溶性部位進(jìn)展化學(xué)成分研究。方法采用硅膠柱進(jìn)展別離純化，經(jīng)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)分析鑒定化學(xué)構(gòu)造。結(jié)果別離得到8個(gè)化合物，分別鑒定為羽扇豆-20-烯-3,16-二醇-3-阿魏酸酯()、三棕櫚酸甘油酯()、人參炔醇()、-谷甾醇()、胡蘿卜苷()、羽扇豆醇()、16-羥基羽扇豆醇()、人參皂苷Rh4()。結(jié)論化合物為首次從天然產(chǎn)物中獲得，化合物為首次從該種植物中別離得到。【關(guān)鍵詞】三七;種子;脂溶性成分Abstrat：bjetiveTstudytheheialnstituentsfseedsfPanaxntginseng.ethdsIslatinan

2、dpurifiatinerearriedutnrepeatedsiliagellunhratgraphy.Thestruturesfthepundsereidentifiedbyphysiheialprpertiesandspetralanalysis.ResultsEightpundsereislatedandidentifiedasLup-2-ene-3,16-dil-3-ferulate(),hexadeaniaidglyerinester(),panaxynl()，-sitsterl()，dausterl(),Lupel(),16-Hydrxylupel()，GinsensideRh4

3、().nlusinpundasbtainedfrnaturalprdutsfrthefirsttie.pundasislatedfrthisplantfrthefirsttie.Keyrds：SeedsfPanaxntginseng;Seeds;Lipphilinstituents三七Panaxntginseng(Burk.)F.H.hen為五加科人參屬植物，主要分布于我國的云南、廣西，是我國特有的名貴中藥材，具有化淤止血、活血定痛之成效。傳統(tǒng)主要應(yīng)用于人體內(nèi)外各種出血之癥及跌打損傷、瘀滯腫痛。三七的化學(xué)成分與藥理研究已經(jīng)比擬深化，研究說明三七含皂苷、黃酮、三七素等活性物質(zhì)。藥理研究說明對(duì)防治

4、心腦血管疾病有顯著作用，還具有降血脂、降血糖、降血壓、抗炎癥、抗疲勞、耐缺氧、抗衰老和進(jìn)步機(jī)體免疫力等活性(崔秀明.中藥三七的道地性研究.中國藥科大學(xué)2022博士論文)。目前對(duì)三七的根、莖、葉的研究已有大量報(bào)道，三七種子的化學(xué)成分研究報(bào)道較少且不深化。本文從產(chǎn)自云南文山的三七種子中別離得到8種化合物，分別鑒定為羽扇豆-20-烯-3,16-二醇-3-阿魏酸酯()、三棕櫚酸甘油酯()、人參炔醇()、-谷甾醇()、胡蘿卜苷()、羽扇豆醇()、16-羥基羽扇豆醇()、人參皂苷Rh4()。其中化合物為首次從天然產(chǎn)物中獲得，化合物為首次從該種植物中別離得到。1儀器與材料三七種子由文山州三七研究院藥物研究所

5、提供。熔點(diǎn)用XR-I型顯微熔點(diǎn)儀測(cè)定(溫度計(jì)未校正);旋光用JAS-20旋光儀測(cè)定;質(zhì)譜用VGAutSpe-3000型質(zhì)譜儀測(cè)定;NR用BrukerAV-400超導(dǎo)核磁共振儀測(cè)定，5D5N為溶劑，TS內(nèi)標(biāo)。青島海洋化工廠消費(fèi)的硅膠;TL用青島化工廠消費(fèi)的硅膠G預(yù)制薄板。展開劑：氯仿甲醇(1008.51.5);石油醚丙酮(7391);石油醚醋酸乙酯(7391)。顯色劑：10%的H2S4-EtH溶液。2方法與結(jié)果2.1提取與別離采自文山的三七種子24.5kg，用70%的乙醇回流提取，回收溶劑得乙醇提取物7.8kg。乙醇提取物用少量水溶解后，用氯仿萃取3次，得氯仿提取物186g，水層再用正丁醇萃取3

6、次，剩余水局部揮干的3.5kg提取物，正丁醇局部用11的飽和食鹽水萃取1次(水層棄去)，正丁醇局部回流蒸干得提取物520g，然后用少量水溶解通過D101大孔吸附樹脂柱層析，先用水洗脫得到揮干物80g，然后用70%EtH洗脫得到三七總皂苷350g，再用95%EtH洗脫得到揮干物45g。氯仿提取物186g經(jīng)硅膠柱層析，以氯仿-甲醇(10091)梯度洗脫得到7個(gè)流分，各流分分別反復(fù)經(jīng)正相硅膠柱層析,反相柱層析(Rp-8,Rp-18,IHP-20P),葡聚糖柱層析(sephadexLH-20)，目前得到8個(gè)化合物。化合物(200g),(10g),(20g),(5.0g),(50g),(100g),(1

7、50g),(1g)。2.2構(gòu)造鑒定2.2.1化合物白色粉末.p.101104，14.6D=+24.59(=0.67,Hl3)。UVHl3ax(lg=4.18)320，295，240。IR(KBrax,-1):3449,1668,979。1HNR(5D5N,400Hz):3.61(1H,dd,J=10.8,5.2Hz,H-3),4.59(1H,dd,J=10.9,5.4Hz,H-16),2.50(1H,H-19),0.92(3H,s,H-23),0.88(3H,s,H-24),0.89(3H,s,H-25),1.05(3H,s,H-26),1.00(3H,s,H-27),0.80(3H,s,H-

8、28),4.61(1H,H-29),4.71(1H,H-29),1.25(3H,s,H-30),6.27(1H,d,J=16.0Hz,H-2),6.90(1H,d,J=8.2Hz,H-8),7.56(1H,d,J=16.0Hz,H-3),7.03(1H,dd,J=8.0,1.9Hz,H-9),7.08(1H,d,J=2.0Hz,H-5),3.92(3H,s,H-10)，13NR(5D5N,100Hz)。見表1。IR顯示有羥基(3449-1)，雙鍵(1632-1)，羰基(1688-1)的信號(hào)，UV顯示320n有強(qiáng)吸收，說明有一個(gè)大的共軛體系?；衔锝?jīng)5%H2S4水解，通過紙層析與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，顯示

9、有16-羥基羽扇豆醇和阿魏酸存在。負(fù)離子FAB-S給出準(zhǔn)分子離子峰/z617(-H)-，負(fù)離子HR-FAB-S給出準(zhǔn)確準(zhǔn)分子離子峰/z617.4214(-H)-，推定分子式為40H585。在1HNR譜中，H0.80，0.88，0.89，0.92，1.00，1.05，1.25，3.92(各3H，s)說明分子中有8個(gè)甲基，H4.60(1H，br.s)，4.71(1H，s)顯示有兩個(gè)烯氫質(zhì)子，同時(shí)H6.27(1H,d),7.56(1H,d)且J=16.0Hz,說明有一個(gè)反式雙鍵的存在。13NR(DEPT)譜給出了40個(gè)碳原子信號(hào)，顯示有8個(gè)甲基，10個(gè)亞甲基，12個(gè)次甲基，10個(gè)季碳。其中167.1

10、為一個(gè)酯羰基碳原子信號(hào)，亞甲基109.0為一個(gè)端基雙鍵碳原子信號(hào)。比擬化合物與16-羥基羽扇豆醇的碳譜數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)除側(cè)鏈局部外，二者極為相近。分析化合物的HB圖譜，H-29(H4.71，4.63)和H-30(H1.25)與-20(149.9)相關(guān)，H-18(H2.50)和和H-21(H1.95)與-20(149.9)相關(guān)，說明化合物1的雙鍵位于20(29)位。另外，-23(16.6)、-24(27.9)和-1(38.4)與H-3(H4.60)相關(guān)，-1(38.4)與H-3(H4.60)相關(guān)，-9(167.1)與H-3(H4.60)相關(guān)，說明化合物的酯羰基與16-羥基羽扇豆醇的-3位相連。綜合上述

11、數(shù)據(jù)，推定化合物構(gòu)造為：羽扇豆-20-烯-3,16-二醇-3-阿魏酸酯(Lup-2-ene-3,16-dil-3-ferulate)。構(gòu)造見圖1。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.圖1化合物構(gòu)造圖2.2.2化合物在常溫下呈淡黃色液體。經(jīng)多種溶劑系統(tǒng)層析均呈一個(gè)斑點(diǎn)。IR(KBrax,-1):1740(-H),1155(-),715(強(qiáng)峰，n4)?；衔?與KHS4共熱放出甘油醛的刺激味，不能使高錳酸鉀及溴水褪色，說明無雙鍵及復(fù)原基團(tuán)。13NR(Dl3,100Hz)H:173(酯羰基)，172.6(甘油局部-碳接羰基，-H-)，69(d，H-),62.5(t,-H2-)，29.8(強(qiáng)峰，直鏈長鏈脂肪羥特征峰

12、)，14.1(H3)?；衔?經(jīng)5%KH水解，中和，經(jīng)G層析，保存時(shí)間(t=3in27s)與三棕櫚酸甘油酯一致。FD-S：+804，以上數(shù)據(jù)說明化合物為三棕櫚酸甘油酯。2.2.3化合物紅色油狀物，14.6D=-28.8(=1.59,Hl3)。分子式17H24，IR(KBrax,-1):3380(-H),2257(),1640(=)。1HNR(Dl3,400Hz):0.88(3H,t,J=6.9Hz,H-17),1.251.35(10H,H-12H-16),2.02(2H,dt,J=6.7Hz,H-11),3.04(2H,dd,J=0.7,6.9Hz,H-8),4.92(1H,t,J=5.4Hz

13、,H-3),5.24(1H,dt,Jd=10.2Hz,Jt=1.1Hz,Ha-1),5.38(1H,dtt,Jd=10.4Hz,Jt=6.9,1.3Hz,H-9),5.47(1H,dt,Jd=16.8Hz,Jt=11Hz,Hb-1),5.51(1H,dtt,Jd=10.5Hz,Jt=7.4,1.3Hz,H-10),5.94(1H,ddd,J=17.1,10.2,5.4Hz,H-2)。13NR(Dl3,100Hz):14.2(-17),17.8(-8),22.7(-16),27.3(-11),29.2(-14),29.3(-12),29.3(-13),31.9(-15),63.6(-3),64.

14、4(-6),71.7(-5),74.3(-4),80.4(-7),117.1(-1),122.0(-9),133.2(-10),136.2(-2)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的3(R)-十七碳-1,9(Z)-二烯-4,6-二炔-3-醇即人參炔醇1根本一致。2.2.4化合物白色針狀結(jié)晶(丙酮)，29H50,.p.:138140,414;Ei-S/z(%):414+(100),396(27),381(18),367(3),354(5),329-85+(20),303(34),289(5),273-S+(15),255(15),231-S-42+(12),213(16),145(17),109(14),69

15、(25)。1HNR(Dl3,500Hz):5.30(1H,d,J=5.2Hz,H-6),3.50(1H,H-3),0.98(3H,s,H-19),0.91(3H,d,J=6.5Hz,H-21),0.83(3H,d,J=1.8Hz,H-29),0.81(3H,d,J=4.0Hz,H-27),0.80(3H,s,H-26),0.67(3H,s,H-18);13NR(Dl3,100Hz):19.8q,19.4q,19.0q,18.8q,12.0q,11.9q,21.1t,23.1t,24.3t,26.1t,28.3t,31.9t,34.0t,37.3t,39.8t,42.3t,42.3t,121.7

16、d,71.8d,56.8d,56.1d,50.1d,45.9d,36.1d,29.2d,140.8s,36.5s,31.6s.以上數(shù)據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)樣品-谷甾醇根本一致。2.2.5化合物白色無定型粉末，35H606,.p.：288289，23D=-40.83。(=0.63,吡啶);IR(KBrax,-1):3400(H),2490,2930,2850(H3,H2),1628(=),1375,1365(-H3及偕二甲基)，1150，1068，1015(-).576;EIS/z414(苷元，6)，396(100)，381(7)，329(2)，303(5)，255(12)，231(3)，187(3)，161

17、(15)，145(21)，133(12)，119(10)，107(17)，95(22);1HNR(5D5N,500Hz):5.33(2H,d,J=2Hz,H-1,H-6),5.05(1H,d,J=7.4Hz,H-1),3.94(1H,H-3);13NR(5D5N,100Hz):苷元局部：140.8,121.7,78.4,56.7,56.0,50.1,45.9,42.3,39.8,39.2,37.3,36.7,36.2,34.0,32.0,31.9,30.0,29.3,28.3,26.2,24.3,23.2,21.0,19.8,19.2,19.0,18.8,11.9,11.8;葡萄糖局部：102

18、.4,78.3,77.9,75.1,71.5,62.7.以上數(shù)據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)樣品胡蘿卜苷根本一致。2.2.6化合物白色針晶(石油醚-醋酸乙酯),p.208210。20D+25.8(=0.77,Hl3)。IR(KBrax,-1):3408(-H),2943,2854,1637(末端雙鍵),1458,1381,1038,880(末端雙鍵).1HNR(5D5N,400Hz):3.17(1H,dd,J=10.8,5.2,H-3),2.39(1H,H-19),0.97(3H,s,H-23),0.73(3H,s,H-24),0.83(3H,s,H-25),1.03(3H,s,H-26),0.95(3H,s,H-

19、27),0.79(3H,s,H-28),4.69(1H,H-29),4.57(1H,H-29),1.68(3H,s,H-30).13NR(5D5N,100Hz)見表1，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)相符羽扇豆醇2根本一致。2.2.7化合物針狀結(jié)晶(e2)分子式：30H502分子量：442p.：218219旋光：20D+23(=1.18,Hl3)1HNR(5D5N,400Hz):3.45(1H,dd,J=10.8,5.2,H-3),3.93(1H,dd,J=10.9,5.4,H-16),2.65(1H,H-19),1.08(3H,s,H-23),0.87(3H,s,H-24),1.03(3H,s,H-25),1.15(3H,s,H-26),1.08(3H,s,H-27),0.79(3H,s,H-28),4.75(1H,H-29),4.91(1H,H-29),1.75(3H,s,H-30)13NR(5D5N,100Hz)。見表1。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)相符16-羥基羽扇豆醇3根本一致。2.2.8化合物白色粉末,.p.131132,14D=+40.0(=0.20,eH);負(fù)離子FAB-S/z(%):457(-H-,100);