(整理)生物工藝答案

1、精品文檔精品文檔第一章生物藥物概論生物藥物有哪幾類？DNA重組藥物與基因藥物有什么區(qū)別？（1）重組DNA藥物（又稱基因工程藥物）（2）基因藥物：以遺傳物質(zhì)DNA、RNA為物質(zhì)基礎(chǔ)制造的藥物（3）天然生物藥物（4）合成或半合成生物藥物生物藥物有哪些作用特點(diǎn)？（一）藥理學(xué)（pharmacology）特性：1、活性強(qiáng)：體內(nèi)存在的天然活性物質(zhì)。2、治療針對(duì)性強(qiáng)，基于生理生化機(jī)制。3、毒副作用一般較少，營養(yǎng)價(jià)值高。4、可能具免疫原性或產(chǎn)生過敏反應(yīng)（二）、理化特性：含量低、雜質(zhì)多、工藝復(fù)雜、收率低、技術(shù)要求高；組成結(jié)構(gòu)復(fù)雜，具嚴(yán)格空間結(jié)構(gòu)，才有生物活性。對(duì)多種物理、化學(xué)、生物學(xué)因素不穩(wěn)定。3活性高，有效劑

2、量小，對(duì)制品的有效性，安全性要嚴(yán)格要求（包括標(biāo)準(zhǔn)品的制訂）。DNA重組藥物主要有哪幾類？舉例說明之。1）細(xì)胞因子干擾素（IFN）類藥物（2）細(xì)胞因子白介素類和腫瘤壞死因子（3）造血功能藥物（4）生長(zhǎng)因子類藥物（5）重組蛋白和多肽類激素（6）心血管病治療劑與酶制劑（7）重組疫苗與治療性抗體術(shù)語：藥物與藥品生物藥物，DNA重組藥物：又稱基因工程藥物，應(yīng)用基因工程和蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造的重組活多肽,蛋白質(zhì)及其修飾物基因藥物：這類藥物是以基因物質(zhì)（RNA或DNA及其衍生物）作為治療的物質(zhì)基礎(chǔ)，包括基因治療用的重組目的DNA片段、重組疫苗、反義藥物和核酶等。反義藥物：以人工合成的10幾十個(gè)反義寡核苷酸序列

3、與模板DNA或mRNA互補(bǔ)形成穩(wěn)定的雙鏈結(jié)構(gòu)，抑制靶基因的轉(zhuǎn)錄和mRNA的翻譯，從而起到抗腫瘤和抗病毒作用。核酸疫苗：是指將編碼外源性抗原的基因插入到含真核表達(dá)系統(tǒng)的載體上，然后直接導(dǎo)入人或動(dòng)物體內(nèi)，讓其在宿主細(xì)胞中表達(dá)抗原蛋白，該抗原蛋白可直接誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答。RNAi:在實(shí)驗(yàn)室中是一種強(qiáng)大的實(shí)驗(yàn)工具，利用具有同源性的雙鏈RNA（dsRNA）誘導(dǎo)序列特異的目標(biāo)基因的沉寂，迅速阻斷基因活性。第二章生物制藥工藝技術(shù)基礎(chǔ)生物活性物質(zhì)的濃縮與干燥有哪些主要方法？濃縮方法：鹽析；有機(jī)溶劑沉淀；高分子脫水；超濾；真空濃縮或薄膜濃縮干燥方法：低溫真空干燥；噴霧干燥；冷凍干燥簡(jiǎn)述生物活性物質(zhì)分離純化的特

4、點(diǎn)和分離純化的主要原理。生化制藥工藝中分離純化特點(diǎn)：生物材料組成復(fù)雜目的物含量低易變性、失活分離方法有很大經(jīng)驗(yàn)成分步驟多，逐級(jí)分離產(chǎn)品驗(yàn)證與化學(xué)上純度概念不完全相同分離純化原理：根據(jù)分子形狀與分子大小根據(jù)電荷差異根據(jù)分子極性與溶解度大小根據(jù)吸附特性根據(jù)生物配基特性怎樣保存微生物菌種？何謂菌種退化？如何檢查菌種退化？菌種保藏方法:斜面低溫保存液體石蠟封藏法甘油冷凍法冷凍干燥法液氮保藏法菌種退化：菌種的生活能力、產(chǎn)抱子能力衰退和特殊產(chǎn)物產(chǎn)量的下降統(tǒng)稱退化檢查方法：?jiǎn)挝蝗莘e中發(fā)酵液的活性物質(zhì)含量，瓊脂培養(yǎng)皿上的單菌落形態(tài)，不同培養(yǎng)時(shí)期菌體細(xì)胞的形態(tài)和主要遺傳特性，發(fā)酵過程中PH變動(dòng)情況，發(fā)酵液的氣味

5、、色澤。誘變育種的總體流程是怎樣的？選擇出發(fā)菌需注意哪些事項(xiàng)？1)出發(fā)菌株的選擇穩(wěn)定性；具備某種優(yōu)良性狀的菌株；對(duì)誘變劑敏感；生理狀態(tài)及生長(zhǎng)時(shí)間(2)誘變處理化學(xué)誘變；物理誘變；生物誘變(3)篩選：隨機(jī)篩選；半理性化篩選生物制藥工藝中試放大的目的是什么？建立穩(wěn)定工藝、大批量制備足量合格產(chǎn)品，供應(yīng)臨床前與臨床研究；(2)研究工藝參數(shù)制定工藝規(guī)程和檢定規(guī)程，為正式生產(chǎn)提供工藝參數(shù)，保證能在以后生產(chǎn)中應(yīng)用。酶固定化的方法有哪些類別？（1）吸附法：分為物理吸附法和離子交換吸附法；（2）包埋法：將酶或細(xì)胞定位于凝膠高聚物網(wǎng)絡(luò)中，如卡拉膠，海藻膠，聚丙烯酰胺；（3）共價(jià)鍵結(jié)合法：酶分子與載體分子，通過化學(xué)

6、偶聯(lián)使酶與載體共價(jià)結(jié)合；（4）交聯(lián)法：用雙功能試劑將酶與載體交聯(lián)固定化。術(shù)語冷凍干燥：較低溫度（-15C以下），快速地將細(xì)胞凍結(jié)，并且保持細(xì)胞完整，然后在真空中使水分升華。噴霧干燥薄膜濃縮自然選育誘變育種轉(zhuǎn)基因動(dòng)物蛋白質(zhì)工程：在基因水平上設(shè)計(jì)表達(dá)新的功能蛋白蛋白質(zhì)組學(xué)：研究細(xì)胞、組織或個(gè)體全部蛋白質(zhì)的表達(dá)狀態(tài)與功能狀態(tài)是后基因組時(shí)代的重要研究方向，我國已承擔(dān)肝臟蛋白質(zhì)組學(xué)的10%研究工作。酶工程：是酶學(xué)與工程學(xué)互相滲透結(jié)合，發(fā)展形成的生物技術(shù)，它是從應(yīng)用目的出發(fā)，研究酶和應(yīng)用酶的特異催化功能，并通過工程化過程將相應(yīng)原料轉(zhuǎn)化成所需產(chǎn)物的技術(shù)。immobilizedenzyme：同一個(gè)克隆的雜交瘤

7、細(xì)胞基因相同，合成并分泌的特異性抗體質(zhì)地均一，這種抗體即是單克隆抗體?？贵w酶：具催化能力的免疫球蛋白稱為抗體酶模擬酶：用合成高分子來模擬酶的結(jié)構(gòu)、特性、作用原理以及酶在生物體內(nèi)的化學(xué)反應(yīng)過程。組合生物合成：是指應(yīng)用基因重組技術(shù)重新組合微生物藥物的基因簇，產(chǎn)生一些新的非天然的基因簇，從而合成許多新的非天然的化合物，為生物藥物的篩選提供豐富的化合物資源藥物基因組學(xué)：是一門研究個(gè)人的基因遺傳如何影響身體對(duì)藥物的反應(yīng)的一門科學(xué)。DNAShuffling:通過對(duì)目的基因酶切成隨機(jī)片段，然后進(jìn)行PCR重聚，由于同源重組而產(chǎn)生基因突變的方法.定向進(jìn)化：在實(shí)驗(yàn)室條件下人工模擬生物大分子自然進(jìn)化過程，在體外對(duì)基

8、因進(jìn)行隨機(jī)誘變，使基因發(fā)生大量變異，并定向選擇出所需性質(zhì)的突變體，從而可以在短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)自然界幾百萬年才能完成的進(jìn)化過程。甘油冷凍保藏法，液氮保藏法，斜面保藏法，沙土管保藏法第三章生物材料的預(yù)處理去除發(fā)酵液中雜蛋白有哪幾種方法？（1）加入凝聚劑（2）加入絮凝劑（3）吸附（4）等電點(diǎn)沉淀（5）加各種沉淀劑沉淀（6）變性沉淀去除發(fā)酵液中鈣、鎂、鐵離子的方法有哪些？影響絮凝效果的主要因素有哪些？（1）絮凝劑的分子量（2）絮凝劑的用量（3）溶液pH值（4）攪拌速度和時(shí)間：細(xì)胞破碎有哪些方法？各有什么特點(diǎn)？超聲波破碎細(xì)胞的原理？超聲波空穴作用使細(xì)胞破裂。術(shù)語凝聚作用：在某些電解質(zhì)作用下，使膠體粒子的擴(kuò)散

9、雙電層的排斥電位降低，破壞了膠體系統(tǒng)的分散狀態(tài)，而使膠體粒子聚集的過程。絮凝作用：往膠體懸浮液中加入絮凝劑時(shí)，膠?？蓮?qiáng)烈的吸附在絮凝劑表面的功能基團(tuán)，而且一個(gè)高分子聚合物的許多鏈節(jié)分別吸附在不同顆粒的表面，產(chǎn)生架橋連接，形成粗大的絮凝團(tuán)沉淀出來，有助于過濾，這一過程既是絮凝作用。滲透壓沖擊法：先把細(xì)胞放在高滲溶液中，細(xì)胞發(fā)生收縮，然后將介質(zhì)快速稀釋或?qū)⒓?xì)胞轉(zhuǎn)入水或緩沖液中，細(xì)胞快速膨脹，使產(chǎn)物釋放至溶液中。錯(cuò)流過濾超聲波破壁酶法破壁高壓勻漿法高速珠磨法反復(fù)凍融法滲透壓沖擊法液氮研磨法丙酮粉第四章萃取法1、溶劑萃取法的基本原理，其特點(diǎn)是什么？物質(zhì)在兩種互不相溶的液相中分配特性不同。溶劑萃取法優(yōu)點(diǎn)

10、：操作可連續(xù)化，速度快，生產(chǎn)周期短；對(duì)熱敏物質(zhì)破壞少；采用多級(jí)萃取時(shí)，溶質(zhì)濃縮倍數(shù)大、純化度高。2、溶劑萃取法按操作方式不同，可分為哪幾類？各有什么特點(diǎn)？單級(jí)萃取：操作簡(jiǎn)單多級(jí)錯(cuò)流萃?。寒?dāng)萃取劑量相同時(shí)，多級(jí)萃取收率較單級(jí)萃取高。多級(jí)逆流萃?。狠腿┖牧枯^少，萃取液平均濃度較高。3、影響有機(jī)溶劑萃取的因素有哪些？萃取劑的選擇需遵循哪些原則？乳化液PH溫度和萃取時(shí)間鹽析作用溶劑種類、用量及萃取方式的選擇萃取劑選擇原則：分配系數(shù)愈大愈好，若分配系數(shù)未知，貝y可根據(jù)“相似相容”的原則,選擇結(jié)構(gòu)相似的溶劑選擇分離因素大于1的溶劑料液與萃取溶劑的互溶度愈小愈好盡量選擇毒性低的溶劑溶劑的化學(xué)穩(wěn)定性要好，腐

11、蝕度低，沸點(diǎn)不宜太高，揮發(fā)性要低，價(jià)格便宜，來源方便，便于回收。4、使用有機(jī)溶劑萃取時(shí)，改變pH值將如何影響酸性或堿性抗生素的分配系數(shù)？PH低有利于酸性抗生素萃取，分配系數(shù)高；PH高有利于堿性抗生素萃取，分配系數(shù)高。5、乳化劑為何能使乳狀液穩(wěn)定？界面膜形成防止液滴碰撞聚沉界面電荷液滴間互相排斥阻止液滴聚集介質(zhì)粘度增強(qiáng)界面膜強(qiáng)度。6、破壞乳狀液的方法有哪些？1.加入表面活性劑2離心3加電解質(zhì)4加熱5吸附法破乳6高壓電破乳7稀釋法7、影響乳狀液類型的因素有哪些？相體積乳化劑分子空間構(gòu)型界面張力容器壁性質(zhì)8、雙水相萃取的優(yōu)缺點(diǎn)有哪些？影響雙水相萃取的因素有哪些？9、超臨界流體萃取有哪些特點(diǎn)？常用的流

12、體為哪種？影響超臨界流體萃取的因素有哪些？超臨界萃取的流程主要有哪幾種類型？具有廣泛的適應(yīng)性：萃取效率高，過程易于調(diào)節(jié)：分離工藝流程簡(jiǎn)單：有些分離過程可在接近室溫下完成分離過程必須在高壓下進(jìn)行，設(shè)備及工藝技術(shù)要求高，投資比較大，普及應(yīng)用較為困難。二氧化碳?jí)毫Υ笮?、溫度、助溶劑、物料性質(zhì)等溫法等壓法吸附法10、術(shù)語：有機(jī)溶劑萃取反萃?。狠腿∧孢^程，萃取液與反萃取劑接觸，溶劑由有機(jī)相轉(zhuǎn)入液精品文檔精品文檔精品文檔精品文檔精品文檔精品文檔精品文檔項(xiàng)目物理吸附精品文檔項(xiàng)目物理吸附化學(xué)吸附相的過程。雙節(jié)線多級(jí)錯(cuò)流萃取多級(jí)逆流萃取反膠束萃取超臨界流體萃取雙水相萃取，能斯特分配定律，表觀分配系數(shù)，萃取因素，

13、萃取劑，萃余液，HLB值第五章沉淀和結(jié)晶1、什么是“鹽析沉淀”？鹽析的基本原理？鹽析法是利用各種生物分子在濃鹽溶液中溶解度的差異，通過向溶液中引入一定數(shù)量的中性鹽，使目的物或雜蛋白以沉淀析出，達(dá)到純化目的的方法。中和表面電荷破壞蛋白質(zhì)表面水化層2、影響鹽析效果的因素有哪些？無機(jī)鹽種類蛋白質(zhì)種類蛋白質(zhì)濃度溫度PH3、影響有機(jī)溶劑沉淀的因素有哪些？有機(jī)溶劑種類及用量PH溫度無機(jī)鹽含量某些金屬離子的助沉淀作用樣品濃度4、有哪些方法可形成過飽和溶液？蒸發(fā)法溫度誘導(dǎo)法鹽析結(jié)晶法透析結(jié)晶法有機(jī)溶劑結(jié)晶法等點(diǎn)點(diǎn)法微量擴(kuò)散法化學(xué)反應(yīng)結(jié)晶法共沸蒸餾結(jié)晶5、哪些因素可影響晶體的大??？過飽和度溫度攪拌速度晶種6、等

14、電點(diǎn)沉淀有哪些特點(diǎn)？如何應(yīng)用？對(duì)于兩性物質(zhì)，等電點(diǎn)時(shí)凈電荷為零，分子間排斥電位降低，吸引力增大，能相互聚集起來，發(fā)生沉淀。7、術(shù)語：Ks鹽析：在一定PH和溫度下改變離子強(qiáng)度進(jìn)行鹽析?！胞}析：在一定離子強(qiáng)度下改變PH和溫度進(jìn)行鹽析鹽析分布曲線：表征蛋白質(zhì)沉淀速度，-Ds/dP對(duì)鹽飽和度P的關(guān)系曲線透析結(jié)晶法：第六章吸附法1、化學(xué)吸附與物理吸附的區(qū)別？項(xiàng)Q%理乳附化爭(zhēng)敦附作用力葩德華力化學(xué)鍵力戦小，接近液化熱較丸，接近反應(yīng)熱較快，席要的燔化能很小AL需要一走的活紀(jì)能哌附分子屬單分子裁多分子屢單分子2、吸附劑及被吸附物的極性對(duì)吸附的影響如何?極性吸附劑易吸附極性物質(zhì)，非極性吸附劑易吸附非極性物質(zhì)；極

15、性吸附劑適宜從非極性溶劑中吸附極性物質(zhì)；非極性吸附劑適宜從極性溶劑中吸附非極性物質(zhì)。3、吸附劑用量及被吸附物濃度對(duì)吸附效果的影響如何？一般吸附物濃度大時(shí)，吸附量也大，但吸附選擇性下降。吸附劑用量大，吸附總量上升，選擇性下降。4、例舉兩種以上常用吸附劑的性質(zhì)和用途。5、大網(wǎng)格高聚物吸附劑（大孔吸附樹脂）與傳統(tǒng)吸附劑相比有何優(yōu)點(diǎn)？選擇性好解吸容易理化性質(zhì)穩(wěn)定機(jī)械強(qiáng)度好可反復(fù)使用流體吸力較小其孔隙大小、骨架結(jié)構(gòu)和極性，可按照需要，根據(jù)不同的原料和合成條件而改變，因此可適用于吸附各種有機(jī)化合物。適合弱電解質(zhì)及非離子型化合物分離6、術(shù)語：正吸附：吸附提取液中有效成分負(fù)吸附：吸附除去提取液中雜質(zhì)大網(wǎng)格高聚

16、物吸附劑：第七章1.V=V+VKe0idVe淋出體積0粒間體積Kid對(duì)于某種大小的溶質(zhì)分子來說可以滲透進(jìn)去的那部分孔體積，是總的V孔體積i的一部分Kd分配系數(shù)凝膠層析原理：當(dāng)具有一定分子量分布的高聚物溶液從柱中通過時(shí)，較小的分子在柱中停留時(shí)間比大分子停留的時(shí)間較長(zhǎng)，樣品各組分即按分子大小順序而分開，最先淋出的是最大的分子2.常用的凝膠層析的名稱，特點(diǎn)和用途a.葡聚糖凝膠商品名為SephadexG類其交聯(lián)度是通過交聯(lián)劑的加量及反應(yīng)條件來控制的。特點(diǎn)：孔徑。穩(wěn)定性。吸附作用。芳香族化合物和雜環(huán)化合物用途：對(duì)烯酸，稀堿，鹽溶液穩(wěn)定還能經(jīng)受高壓滅菌B修飾葡聚糖凝膠（一）親脂性葡聚糖凝膠（Lipophi

17、licSephadex）骨架結(jié)構(gòu)上引入一些有機(jī)基團(tuán)，如甲基、羥丙基，使呈親脂性，同時(shí)保留親水性。（二）交聯(lián)葡聚糖離子交換劑（Sephadex-ion-exchanger）將活性交換基團(tuán)連接于葡聚糖凝膠上制成的各種交換劑。（三）Supperdex系凝膠由高交聯(lián)度多孔瓊脂糖與葡聚糖共價(jià)結(jié)合而成。Sephacryl系凝膠是由烯丙烷基葡聚糖經(jīng)甲叉雙丙烯酰胺共價(jià)交聯(lián)制成的。理化穩(wěn)定性好，為硬性凝膠，可耐高壓滅菌。C聚丙烯酰胺凝膠商品名為生物凝膠-P(Bio-GelP)該凝膠由丙烯酰胺組成；以亞甲基雙丙烯酰胺為交聯(lián)劑，聚合而成。特點(diǎn):1、孔徑;2、穩(wěn)定性、強(qiáng)度；3、無非特異吸附，保存方便;4、編號(hào)反映出它

18、的分離界限。D瓊脂糖類凝膠(Sepharose)特點(diǎn)：1、沒有共價(jià)鍵的交聯(lián)。2、孔徑瓊脂糖的濃度。3、瓊脂糖凝膠的化學(xué)穩(wěn)定性較差。4、非特異性吸附力低。5、顆粒強(qiáng)度差。6、分離范圍大。3.凝膠的選擇一凝膠性質(zhì)、分離目的.將分子量極為懸殊的兩類物質(zhì)分開，如蛋白質(zhì)與鹽類,稱作類分離或組分離。（2）將分子量相差不大的大分子物質(zhì)加以分離，如分離血清球蛋白與白蛋白，這叫做分級(jí)分離。一）層析柱的選擇對(duì)于類分離，柱床體積一般為樣品溶液體積的5倍，柱比5到10。對(duì)于分級(jí)分離，柱床體積大于樣品體積25倍以上，甚至多達(dá)100倍。柱比在25至100之間二）填柱凝膠柱底部支持物，有棉花、玻璃纖維、玻璃珠、垂熔玻璃等。

19、空柱中應(yīng)留約1/5的水或溶劑.不斷攪拌下使膠粒均勻沉降，使不發(fā)生凝膠分層和膠面傾斜。（一）分子擴(kuò)散（二）渦流擴(kuò)散（三）流動(dòng)相中傳質(zhì)阻力（三）固定相中傳質(zhì)阻力分子量的測(cè)定在凝膠的分離范圍內(nèi)，不同分子量的物質(zhì)其洗脫體積V及分配e系數(shù)K值隨分子量增加而下降。d對(duì)于一個(gè)特定凝膠柱，待測(cè)定物質(zhì)的洗脫體積與分子量的關(guān)系符合公式V二KlogM+Ce（1）求解法：（兩個(gè)已知分子量的蛋白質(zhì)過柱）二CKlogMel1=CKlogMe22（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線法：（先以3個(gè)以上已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白過柱）:標(biāo)準(zhǔn)曲線法準(zhǔn)確性較高名解層析柱長(zhǎng)度與直徑的比值稱作“柱比”全排阻：分子量最大，大于該種凝膠的排阻限，完全不能進(jìn)入顆粒內(nèi)部

20、，只能從顆粒間隙流過C全滲入：分子量最小，小于該種凝膠的滲入限，其分子可以自由進(jìn)出凝膠顆粒D.排阻系數(shù)K:他反應(yīng)了物質(zhì)分子進(jìn)出凝膠的程度，對(duì)一d定種類規(guī)格的凝膠，物質(zhì)的排阻系數(shù)值為該物質(zhì)的特征常數(shù)（V=V+Ve0iK）dE將分子量極為懸殊的兩類物質(zhì)分開，如蛋白質(zhì)與鹽類，稱作類分離或組分離將分子量相差不大的大分子物質(zhì)加以分離，如分離血清球蛋白與白蛋白，這叫做分級(jí)分離層析柱由于進(jìn)出口之間液位壓力差形成的對(duì)凝膠顆粒的壓力稱作“操作壓”H凝膠層析中，兩物質(zhì)（A和B）和分辨率（R）定義為I用交聯(lián)葡聚糖作為薄層層析的支撐載體，稱“薄層凝膠層析”J內(nèi)水體積：凝膠過濾層析中，柱床的凝膠顆粒內(nèi)的溶劑體積。外水體

21、積：層析中物質(zhì)在過柱過程中完全不被滯留的洗脫液體積，相當(dāng)于層析柱流動(dòng)相的體積。第八章1洗脫：（1）調(diào)節(jié)洗脫液的pH值。（2）用高濃度的同性離子將目的物離子取代下來。對(duì)陽離子交換樹脂而言，目的物的pl值愈大（愈堿），將其洗脫下來所需溶液的pH值也愈高。2命名：強(qiáng)酸類1100號(hào)弱酸類101200;強(qiáng)堿類201300;弱堿類301400;中強(qiáng)酸類401500交聯(lián)度：是合成載體骨架時(shí)交聯(lián)劑重量的百分?jǐn)?shù)，用“X”將樹脂編號(hào)與交聯(lián)度分開。弱酸101X4其交聯(lián)度為4%。國內(nèi)常用樹脂命名：724;732;717例：（一）苯乙烯型離子交換樹脂（二）丙烯酸型離子交換樹脂3.影響離子交換選擇性的因素：離子價(jià)與離子水合半徑離子價(jià)與離子濃度交換環(huán)境樹脂結(jié)構(gòu)偶極離子排斥4偶極離子的排斥作用（p251）：偶極離子RSO-Na+H+NRCOO-RSO-H+NRC