技術(shù)路線圖(國自然)

1、實驗萬事屋”出品技術(shù)路線例子1（藍色已完成，紫色為實驗?zāi)康模┣捌诠ぷ鳎ㄒ寻l(fā)表SCI）組織標(biāo)本證實xx是重要的抑癌因子xx在乳腺癌組織中表達下調(diào)/缺失、癌旁高表達XX細胞實驗功能驗證腫瘤組織和癌旁組織亞細胞定位不同實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品MCF-7細胞低表達MDA-MB-231細胞較高表達,實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品XX-RNAiXX過表達體外功能實驗-+/-功能驗證，初步分子機制侵襲轉(zhuǎn)移實驗實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品XX在乳腺癌中確切的分子調(diào)控機制11J深度測序分析XX改變引起PathwayArray檢測凋亡、侵收隹臨床300例乳癌樣未的基因表達譜的改變襲轉(zhuǎn)移相關(guān)通路蛋白表

2、達變化J收集臨床300例乳癌樣本J實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品根據(jù)下游靶分子群，利用生物信息軟件Genes2Networks、Go-anaslysis建.立XX調(diào)控相關(guān)的信號通路制備組織芯片，檢測分析XX的表達、亞細胞定位，回顧性分析XX和腫瘤預(yù)后、分型的相關(guān)性實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品GSTpulldown聯(lián)合Co-IP實驗驗證與XX直接相互作用的蛋白ChIP聯(lián)合芯片技術(shù)鑒定與XX發(fā)生相互作用的基因DNAXX蛋白結(jié)構(gòu)生物信息學(xué)分析制備互作蛋白突變體，分析相互作用結(jié)合位點DNA結(jié)合驗證qPCR實驗驗證XX的結(jié)合目的基因RNAi/回復(fù)過表達實驗驗證XX對下游信號通路的調(diào)控作用EMSA實

3、驗驗證XX的結(jié)合目的基因總結(jié)XX發(fā)揮調(diào)控作用的精細分子機制實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品例子2（細胞水平、組織水平分開畫圖，如果有動物水平再另外畫一個）1、細胞水平：2、組織水平實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品例子3實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品例子4實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品DNA蛋白Papnet篩查宮頸癌變蛋白DNA實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品HPV致病DNA正向示蹤分析HPV致病蛋白逆向求源分析實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品分

4、離克隆宮頸癌細胞的表達差異DNA核酸印跡雜交分析篩查致病DNA病毒致癌分子調(diào)控機理分析致癌相關(guān)蛋白一級分析合成相應(yīng)mRNA生物探針表達譜基因芯片雜交分析鑒定異表達白致癌相關(guān)蛋白二維顯示分析卑算機距陣分訃芯片融蛋白分解析譯致病基因DNA核苷酸序列實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品病毒致癌蛋白分子生物特性分析提出干預(yù)阻斷宮頸癌發(fā)生方案及策略實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品例子5實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品例子6（可以再改進下，不夠美觀）實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品例子7研究對象；大鼠研究層

5、次：器官水平細胞水平分子水平動物模型：心肌缺血/苒灌注單個心肌細胞心肌細胞鈣敏感受體復(fù)制方法：離體心臟灌流離體心臟灌流分子生物學(xué)技術(shù)（預(yù)灌-曠置-復(fù)灌）（膠原酶消化）（KT-PCR等）實驗分組：對照組C&R激動劑4R激動劑組缺血/再灌注組（正常缺血再灌注）其它因素組正常對照組觀察指標(biāo)：冠脈流出液和組織勻漿中氧自由基和LDH心電圖，心功能測定心肌超微結(jié)構(gòu)細胞內(nèi)游離鈣離子電流細胞爛亡（Caspase_3）CaR的mRNA表達CaR蛋白質(zhì)表達(Noitheiii.Wesrem等)實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品例子8“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品

6、實驗萬事屋”出品例子9“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品技術(shù)路線“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品研究對氯A研究層次1動物模型,復(fù)制方法,實驗分組觀察指標(biāo)1細胞內(nèi)游離鈣有關(guān)離子電流細胞凋亡細胞周期冠脈流出液和組織勻漿中多胺，氧自由基和LDE含量右電圖描記心功能測定心肌超徹結(jié)構(gòu)和定檢多胺代謝關(guān)鍵酶活性mRNA和蛍白就表達FasFns-LBcl-2BaxaCaspas-3,caspas-8“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品研究目的,揭示*噺鈿如多黑吹炳昨的“實驗萬事屋”出品實驗萬事屋”出品“實驗萬

7、事屋”出品實驗萬事屋”出品例子10（圖不夠清楚，但仍可以看出結(jié)構(gòu)清晰）(aiico牡理NocodazolEir-RL.lfc.l-USAL相工蛋白al-IUKal-la第轟亡掲主雷白用山泌干ML右港狂再業(yè)IT低羸足毀粕仁燈離鷹用期相工I：tfTflcSMWWwaiaa舌時們希測.NcZxfi話NiHT同祜于讒性利EIF證躊曲莊啟甜31于帶域址*平為京朋刎扯卜E*自擊平禮旦毗1-翳9中蹶藹SSE3iffffrt；staCBITEfest1ilFatWiflffjft詢麻子WKIt*TJH椎黑氏白*平KBHCJHJl惜測經(jīng)IT爲(wèi)曰単羸罰迂當(dāng)3逹廉INi&tt-WJHI-IH白斗平BJlni?響辰施罰農(nóng)述研ANocodwftKae/un雀仲爪f隣自浚誣并它擁亡相英準(zhǔn)臼崔測旳船初芝asl-lLIT*afiftjl揄包左亡胎按匿白HRT曲