痛瀉要方的抗炎鎮(zhèn)痛止瀉作用及對PGE2cAMP信號通路的影響

1、痛瀉要圓的抗炎鎮(zhèn)痛止瀉做用及對PGE2/cAMP疑號通路的影響【摘要】目的探求痛瀉要圓的抗炎鎮(zhèn)痛做用機(jī)制。要收采與兩甲苯致小鼠耳腫脹法沒有俗觀察抗炎做用;采與酶聯(lián)免疫法測定冰醋酸致痛小鼠血渾中火線腺素E2(PGE2)戰(zhàn)環(huán)磷酸腺苷(AP)的濃度;采與年夜黃致瀉法沒有俗觀察止瀉做用。結(jié)果痛瀉要圓對兩甲苯致小鼠耳腫脹、對冰醋酸致痛小鼠均有較著抑制做用;并隱著降低冰醋酸致痛小鼠血渾中PGE2戰(zhàn)AP濃度;能延少小鼠排烏糞的埋伏期，隱著裁加烏糞排擠數(shù)量。結(jié)論痛瀉要圓具有良好抗炎鎮(zhèn)痛止瀉做用，PGE2/AP疑號通路參加了痛瀉要圓的抗炎鎮(zhèn)痛做用?！鹃]鍵詞】痛瀉要圓;抗炎鎮(zhèn)痛止瀉;PGE2/AP疑號通路Abst

2、rat：bjetiveTstudyanti-inflaatry,analgesiandanti-diarrheaehanisfTngxieYafang.ethdsThediethylbenzene-ausedsellingfuseearasusedtbservetheanti-inflaatryeffet.EnzyelinkediunsrbentassayasusedteasurethePGE2andAPlevelsinserufaetiaid-induedpainie.Therhubarb-indueddiarrheaasusedtbservetheanti-diarrheaeffet.Re

3、sultsTheanti-inflaatryeffetnthesellingfuseearausedbydiethylbenzeneandtheanti-diarrheaeffetntherhubarb-indueddiarrheaassignifiant.ThePGE2andAPnentratininbldserufaeti-aid-induedpainieassignifiantlyredued.Thedeliteseneftheusesrbusnigerexretinasprlnged,andthequantityftheexretinassignifiantlydereased.nlu

4、sinTngxieYafanghassignifiantanti-inflaatry,antipainandanti-diarrheaeffets,andPGE2/APsignalpathaypartiipatesintheanti-inflaatry,analgesieffets.Keyrds：TngxieYafang;Anti-inflaatry;Antipainandanti-diarrhea;PGE2/APsignalpath痛瀉要圓是醫(yī)治痛瀉之癥的傳統(tǒng)丹圓，由黑術(shù)、黑芍、陳皮戰(zhàn)防風(fēng)組成，?丹溪心法?戰(zhàn)?景岳齊書?皆有記載，具有健脾舒肝、止痛止瀉的做用，主治背痛背瀉、腸叫背痛、年夜便鼓

5、瀉等。如今多用于潰瘍性結(jié)腸炎戰(zhàn)腸易激綜開癥的背痛等癥的醫(yī)治1，但其抗炎鎮(zhèn)痛做用機(jī)制尚沒有明晰。有文獻(xiàn)研討說明，火線腺素E2(prstaglandinE2，PGE2)正在痛痛的收死中起著慌張的做用2，3，而痛痛戰(zhàn)痛覺過敏是機(jī)閉毀傷或炎癥經(jīng)常陪隨的死理病理過程，谷氨酸、P物量等神經(jīng)遞量或神經(jīng)肽和細(xì)胞內(nèi)的疑號轉(zhuǎn)導(dǎo)路子參加此過程，3，5-環(huán)磷酸腺苷(yliadensinenphsphate，AP)是最早創(chuàng)制的第兩疑使，也是AP疑號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)中的閉鍵環(huán)節(jié)，并對某些神經(jīng)遞量起調(diào)節(jié)做用4，5。果而，本真止采與對兩甲苯致小鼠耳腫脹法戰(zhàn)死年夜黃致背瀉法沒有俗觀察痛瀉要圓的抗炎止瀉做用，并測定冰醋酸致痛小鼠血渾中P

6、GE2戰(zhàn)AP的濃度，進(jìn)一步探求痛瀉要圓的抗炎鎮(zhèn)痛做用機(jī)制。1材料與儀器1.1植物與分組SPF級NIH小鼠，體量量1822g，植物開格證號2022A023，購自廣東省醫(yī)教真動做物中心。隨機(jī)分為5組：模型比擬組，陽性比擬組(鹽酸小檗堿)，痛瀉要圓低、中、下劑量組(11.8，23.6，47.2g死藥量kg-1;相等與成人2，4，8倍等效劑量)。1.2試藥與儀器痛瀉要圓真止用黑術(shù)、黑芍、陳皮戰(zhàn)防風(fēng)購自廣州致疑中藥飲片(批號：080605)，按處圓比例稱與藥材一定量，煮沸30in后過濾上渾液，用火浴稀釋到所需濃度。鹽酸小檗堿，廣州市市橋藥業(yè)產(chǎn)品，批號080711。死理鹽火，四川科倫藥業(yè)股分產(chǎn)品，批號T0

7、80712B。冰醋酸，廣州化教試劑廠產(chǎn)品，批號071102-24。PGE2試劑盒購自上海太陽死物妙技公司，AP試劑盒購自好國RDsystes公司。SunRise酶標(biāo)儀(奧天時Sunrise公司)，TG16-S臺式下速離心計心情(湖北賽特湘儀離心計心情儀器)，ZD-85恒溫振蕩器(常州國華電器)，BP211D型電子闡收天仄。2要收2.1痛瀉要圓對兩甲苯致小鼠耳腫脹的做用6，7將小鼠50只隨機(jī)分為5組(每組10只)：模型比擬組、痛瀉要圓低、中、下劑量組、鹽酸小檗堿組。各組連續(xù)灌胃給藥7d，1次/d，模型組給以等體積的死理鹽火。終次給藥1h后，將兩甲苯0.03l均勻涂于小鼠左耳，2h后處死，用曲徑8

8、的挨孔器將左左兩耳廓一樣部位等里積與下兩圓耳片，用電子天仄準(zhǔn)確稱出量量，以左左耳重量之好做為腫脹度，策畫腫脹抑制率。2.2痛瀉要圓對冰醋酸致痛小鼠鎮(zhèn)痛做用8，9及血渾中PGE2、AP的測定將小鼠50只隨機(jī)分為5組(每組10只)：模型比擬組，痛瀉要圓低、中、下劑量組，鹽酸小檗堿組。各組連續(xù)灌胃給藥7d，1次/d，模型比擬組給以等體積的死理鹽火。終次給藥后1h后背腔挨針0.6%冰醋酸溶液，每只10gkg-1。沒有俗觀察記載15in內(nèi)收死扭體反響(背部內(nèi)凸、軀干與后腿蔓延、臀部下起)的次數(shù)，沒有俗觀察后坐刻小鼠眼球后靜脈叢采血，用酶聯(lián)免疫法按試劑盒操做分析測定血渾中PGE2(ngL-1)、AP(nl

9、L-1)的露量。2.3痛瀉要圓對年夜黃致瀉的做用10將小鼠50只隨機(jī)分為5組(每組10只)：模型比擬組、痛瀉要圓低、中、下劑量組、鹽酸小檗堿組。各組連續(xù)灌胃給藥7d，1次/d，模型比擬組給以等體積的死理鹽火。終次給藥前禁食12h，于終次給藥后1h，各組小鼠每只灌服死年夜黃火提液(1gl-1，露活性碳終0.1gl-1)0.5l，記載6h內(nèi)帶有碳終的干糞便個數(shù)，做為早期背瀉排泄目的，以灌服死年夜黃火提液后到第1次碳終背瀉物呈現(xiàn)的工夫為背瀉的埋伏期。2.4統(tǒng)計要收各組真止數(shù)據(jù)均用s表示，使用SPSS11.0硬件包單果素圓好闡收法舉止各組件比擬。3結(jié)果4會商痛瀉要圓具有良好的抗炎做用，能使小鼠耳廓腫脹

10、度較著加沉，對兩甲苯致小鼠耳腫有較著抑制做用，其抗炎做用呈較隱著的量效閉連，下劑量可隱著抑制小鼠耳廓腫脹，抑制率較下，與陽性藥抑制率接遠(yuǎn)，中、低劑量抑制做用較強(qiáng)。痛瀉要圓能較著抑制醋酸而至小鼠扭體反響，具有很強(qiáng)的鎮(zhèn)痛做用，PGE2正在痛痛的收死中起著慌張的做用，機(jī)閉正在遭到毀傷戰(zhàn)炎癥時部分可釋放出PGE2、組胺戰(zhàn)黑三烯等炎性致痛物量而惹起痛痛。而且PGE2既可間接刺激神經(jīng)終梢惹起痛痛，前進(jìn)痛覺覺得器對此外致痛果子的敏理性，也可啟動痛痛所介導(dǎo)的疑號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路2，3。有文獻(xiàn)說明，AP可惹起覺得神經(jīng)元過火快樂戰(zhàn)痛覺過敏4;對于少暫吸食阿片類成癮者停藥時期收死的痛覺過敏也是因為AP降低所招致的5。果而，本真即將0.6%冰醋酸給以小鼠背腔挨針后，經(jīng)由過程測定小鼠血渾中PGE2戰(zhàn)AP的濃度，以沒有俗觀察各劑量痛瀉要圓收死的鎮(zhèn)痛做用能可與PGE2/AP疑號通路變化有閉。結(jié)果說明模型比擬組小鼠血渾中PGE2戰(zhàn)AP濃度隱著刪加;鹽酸小檗堿組及痛瀉要圓低、中、下劑量組PGE2、AP濃度與模型組比擬隱著裁加;與鹽酸小檗堿組比擬，痛瀉要圓下劑量組PGE2、AP濃度亦呈裁加。由此可知，較年夜劑量痛瀉要圓收死的鎮(zhèn)痛做用年夜要與降低血渾中的PGE2，加沉冰醋酸刺激部分機(jī)閉收死的炎癥反響，裁加內(nèi)源性致痛物量的收死;同時又裁加痛覺覺得神經(jīng)細(xì)胞收死第兩疑使AP，前進(jìn)對痛覺的耐受性，裁加痛覺敏