秦皮提取物對小鼠急性肝損傷保護作用的實驗研究

1、秦皮提取物對小鼠急性肝損傷保護作用的實驗研究【關(guān)鍵詞】秦皮；,急性肝損傷；,保護作用摘要：目的研究秦皮提取物對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的保護作用。方法60只雄性昆明小鼠隨機分為正常對照組，模型對照組，陽性對照組，大中小劑量給藥組。大中小劑量給藥組分別按2.0，1.0，0.5g/kg灌胃秦皮提取物；陽性對照組按0.1g/kg灌胃水飛薊賓；正常對照組和模型對照組以等體積生理鹽水灌胃，共6d。第5天，模型對照組、陽性對照組和給藥組按2.0l/kg腹腔注射l4，正常對照組腹腔注射等體積生理鹽水。比擬各組丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alaninetransainase,ALT)超氧化物歧化酶(superxide

2、disutase,SD)和丙二醛(alndialdehyde,DA)含量。結(jié)果秦皮提取物能顯著降低四氯化碳所致小鼠各組ALT含量的升高(P0.05)，同時能升高SD的活性,降低DA的含量(P0.05)。結(jié)論秦皮提取物對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷具有一定的保護作用。關(guān)鍵詞：秦皮；急性肝損傷；保護作用PrtetiveEffetfAshBarkExtratAgainstAuteLiverInjuryinieAbstrat：bjetiveTinvestigatetheprtetiveeffetfashbarkextratagainstarbntetrahlrideinduingauteliverinj

3、uryinie.ethdsSixtyaleieererandlydividedintnralntrlgrup,delntrlgrup,psitiventrlgrup,high-dsagegrup,iddledsagegrupandldsagegrup.Theieintheabvegrupserefedfr6days.Thedruggrupserepretreatedintragastriallyith2.0，1.0，0.5g/kgashbarkextrat,psitiventrlgrupaspretreatedintragastriallyith0.1g/kgsilybin.ntrlieere

4、giventhesaevluephysilgialsaline.nthe5thdayffeeding,theieexeptnralntrlgruperegivenintraperitneally2.0l/kgarbntetrahlride.Tentyfurhursaftertheintxiatin,theseruALT,SDativitiesandDAntentereeasuredineahgrupabve.ResultsAshbarkextratsignifiantlydereasedarbntetrahlrideinduingautehepatiinjuryithinreasingthea

5、tivityfALTandthententfDA,inreasedtheativityfSDinseru.nlusinItisrevealedthatashbarkextratanpreventthel4frinduingauteliverinjuryiniethrughitsantixidatin.Keyrds：Ashbarkextrat;Liverinjury;Prtetiveeffet秦皮是木犀科植物苦櫪白蠟樹FraxinusrhynhphyllaHane的枯燥枝皮，主要具有清熱燥濕、收斂、明目之成效，用于熱立泄瀉、赤白帶下、目赤腫痛等1。通過體外挑選秦皮提取物的去除DPPH二苯代苦味酰

6、自由基自由基的才能強濃度50g/l時，去除率為66.8%，本實驗進一步研究秦皮提取物對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷的保護作用，并對其作用機理進展了初步討論。1材料與方法1.1材料秦皮采自吉林省長白山一帶，經(jīng)延邊大學(xué)藥學(xué)院劉永鎮(zhèn)教授鑒定為真品。1kg白芷切碎后，用70%甲醇回流提取3次，1h/次，溫度50，合并3次濾液，減壓濃縮，得白芷浸膏210g。1.2試劑與儀器飛薊賓購自西安華萃生物技術(shù)有限責(zé)任公司，丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)超氧化物歧化酶(SD)和丙二醛(DA)試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，其他試劑均為國產(chǎn)分析純。使用的儀器有小型離心機(Siga113)，722型分光光度計中國廈門分析

7、儀器廠和生化分析儀(SPTHEE2,SP4430)等。1.3動物分組昆明種雄性小鼠60只，體重202g，由延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)部動物科提供。按隨機表法將其分為正常對照組，模型對照組，陽性對照組，大、中、小劑量給藥組，每組各10只。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.1.4給藥方法大中小劑量給藥組分別按2.0，1.0，0.5g/kg灌胃秦皮醇提取物；陽性對照組按0.1g/kg灌胃水飛薊賓；正常對照組和模型對照組以等體積生理鹽水灌胃，2次/d,連續(xù)6d，末次給藥后1h,除正常對照組外，其余均腹腔注射0.1%l4花生油溶液2.0l/kg，禁食，不禁水。24h后摘眼球取血，別離血清。取血后脫頸椎處死，剖腹，取出肝，分別稱重

8、取出0.1g，參加0.9l生理鹽水進展勻漿。1.5生化檢測按試劑盒說明測定ALT，SD活性和DA含量。1.6統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示，各組樣本均數(shù)間差異的假設(shè)檢驗用方差分析(ANVA),P0.05認(rèn)為有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1秦皮提取物對l4引起小鼠急性肝損傷血清ALT活性的影響結(jié)果見表1。模型組ALT較正常組明顯升高，有顯著性差異(P0.01)，說明l4引起造模成功。大中小劑量給藥組與模型組比擬P0.05，說明秦皮提取物顯著降低l4引起急性肝損傷小鼠血清ALT含量的升高。2.2秦皮提取物對l4引起小鼠急性肝損傷SD活性和DA含量的影響結(jié)果見表1。大、中劑量給藥組與模型組比擬均P0.05

9、，SD活性在中劑量時升高(P0.05)，說明秦皮醇提取物能升高l4引起急性肝損傷小鼠肝組織SD活性，同時降低小鼠肝組織DA的含量。表1秦皮提取物對l4引起小鼠急性肝損傷ALT，SD活性和DA含量的影響略與模型對照組比擬，*P0.05，*P0.013討論肝損傷是由多種病因引起并且可以有多種因素參與的復(fù)雜過程2。四氯化碳引起肝損傷是傳統(tǒng)的肝毒模型，它對肝損傷的毒性作用是通過脂質(zhì)過氧化作用進展的。l4在肝微粒體細(xì)胞色素P-450酶激活下產(chǎn)生活性自由基l3，l3可進一步與氧反響，形成具有更強反響活性的l3，這些自由基與肝細(xì)胞內(nèi)大分子發(fā)生共價結(jié)合，也可攻擊肝細(xì)胞膜不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過氧化，損傷肝細(xì)胞膜

10、的構(gòu)造和功能，使膜通透性升高，導(dǎo)致細(xì)胞腫脹壞死3。存在于肝細(xì)胞質(zhì)中的可溶性酶AST，ALT在肝細(xì)胞損傷后釋放入血，血清中兩者程度上下可以反響肝細(xì)胞損傷程度，可作為早期肝損傷的指標(biāo)。本實驗結(jié)果顯示模型對照組ALT活性顯著高于正常對照組，說明急性肝損傷模型成功P0.01。秦皮提取物顯著降低l4所致小鼠急性肝損傷血清ALT的升高P0.05，說明藥物具有一定的肝保護作用。DA是脂質(zhì)過氧化的最終產(chǎn)物，可嚴(yán)重破壞細(xì)胞膜構(gòu)造，導(dǎo)致細(xì)胞腫脹、壞死，含量上下可反響氧化的損傷程度3，4，大、中劑量給藥組降低急性肝損傷小鼠血清DA含量P0.05。自由基是人體正常生化過程的中間產(chǎn)物。只有當(dāng)自由基產(chǎn)生過多或者機體內(nèi)的酶系統(tǒng)過少時才導(dǎo)致疾病，這其中主要有氧自由基和脂質(zhì)自由基。SD是細(xì)胞內(nèi)主要的防御性抗氧化酶，可以去除自由基，并可抑制自由基啟動的脂質(zhì)過氧化反響，從而起到保護細(xì)胞膜構(gòu)造與功能的完好作用。秦皮提取物對此有一定的改善作用，說明秦皮提取物可能通過保護細(xì)胞膜，去除氧自由基抑制脂質(zhì)過氧化而對肝細(xì)胞起到保護作用。參考文獻：1中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國藥典中藥彩色圖集,1995年版.廣州：廣東科技出版社,1996：352.2EisburgerJH.ehanissfatinfantixidantsasexepli