微生物的實(shí)驗室培養(yǎng)學(xué)案有答案

1、課題 1 微生物的試驗室培育【目標(biāo)定位】了解培育基的根底學(xué)問，進(jìn)展微生物培育和無菌技術(shù)的操作?！咀灾黝A(yù)習(xí)】一、培育基：1概念：人們依據(jù)微生物對的不同需求，配制出供其的養(yǎng)分基質(zhì)叫培育基?？煞譃榕嘤团嘤?養(yǎng)分構(gòu)成：各種培育基一般都含有、和，此外還要滿足微生物生長對、以及的要求。3培育乳酸桿菌時需在培育基中添加、培育霉菌時需將培育基 PH 調(diào)至菌時需將PH 調(diào)至、培育厭氧微生物則需供給條件。二、無菌技術(shù)：閱讀“無菌技術(shù)”，爭辯答復(fù)以下問題：(一)獲得純潔培育物的關(guān)鍵是，具體操作如下：對試驗操作的、操作者的和進(jìn)展。將用于微生物培育的、和等器具進(jìn)展。為避開四周環(huán)境中微生物的污染，試驗操作應(yīng)在四周

2、進(jìn)展。試驗操作時應(yīng)避開已經(jīng)滅菌處理的材料用具與相接觸。(二)消毒和滅菌消毒是指。常用的方法有、消毒法。滅菌是指常用的方法有：、滅菌。分別適用于那些用具？2無菌技術(shù)除了防止培育物被污染外，還具有的目的是什么？3利用干熱滅菌箱對玻璃器皿滅菌時物品不能擺得太擠，目的是什么？思考4物品裝入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后，要首先翻開排氣閥，煮沸并排解鍋內(nèi)冷空氣，其目的是；隨后關(guān)閉排氣閥連續(xù)加熱，氣壓升至 ，溫度為 ，并維持 min；最終切斷熱源，使溫度自然降溫，氣壓務(wù)必降至?xí)r翻開鍋蓋，其目的是防止。三、試驗操作大腸桿菌的純化培育：本試驗所用的培育基是，本試驗可分成兩個階段進(jìn)展。一制備牛肉膏蛋白胨固體培育基1制備牛

3、肉膏蛋白胨固體培育基的操作步驟是：、。作中需要不斷用玻璃棒攪拌的目的是什么？6牛肉膏和蛋白胨主要為微生物供給什么等養(yǎng)分物質(zhì)？倒平板：待培育基冷卻至?xí)r在酒精燈火焰四周操作進(jìn)展。其過程是：在火焰旁右手拿，左手；使錐形瓶的瓶口；左手將培育皿，右手，馬上蓋上皿蓋。待平板冷卻凝固后，將平板。思考 7錐形瓶的瓶口通過火焰的目的是什么？思考 8平板倒置的目的是什么？思考 9假設(shè)皿蓋和皿底之間粘有培育基，則該平板能否培育微生物？為什么？二純化大腸桿菌微生物接種：最常用的是法和有穿刺接種和斜面接種等。平板劃線法是的操作將聚攏的其操作步驟是：將在酒精燈火焰上灼燒直至。在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán)，并翻開大腸桿菌的菌種

4、試管的棉塞。將菌種試管口通過火焰到達(dá)的目的。將冷卻的接種環(huán)伸入到。將菌種試管口再次通過火焰后塞上棉塞。將皿蓋翻開一條縫隙，把接種環(huán)，蓋上皿蓋，不要劃破培育基。灼燒接種環(huán)冷卻后從復(fù)上述過程完成三四、五區(qū)域內(nèi)劃線。留意不要將相連。將平板培育。思考 10取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是什么？最終灼燒接種環(huán)的目的是？在作其次次以及其后的劃線操作時為什么總是從上一次劃線的末端開頭劃線？稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)展一系列的梯度，然后將進(jìn)展培育。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時，即可獲得單個細(xì)菌形成的。系列稀釋操作：取盛有mL 水的無菌試管6 支，編號101、102、103、104、105、106。用灼燒冷卻的移液管吸取mL

5、菌液注入編號為101 試管中，并吹打3 次使之混勻。從101 倍液中吸取mL 菌液注入到編號為 102 試管內(nèi)吹打均勻，獲得 102 倍液。依此類推。11系列稀釋操作的留意事項是什么？涂布平板操作：將浸在盛有的燒杯中。取少量不超過，滴加到培育基外表。將的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻。用涂布器將菌液地涂布在培育基的外表。涂布時可液分布均勻。四、結(jié)果分析與評價培育未接種培育基的作用是什么？，假設(shè)有菌落形成，說明什么？在肉湯培育基上，大腸桿菌菌落顏色？形態(tài)？培育 12h 和 24h 后的菌落大??？；菌落分布位置？緣由？123種特征不同的菌落是什么緣由？13頻繁使用的菌種利用什么法保存？長期

6、保存菌種的方法是什么？【隨堂檢測設(shè)計】以下關(guān)于微生物養(yǎng)分的說法，正確的選項是 A同一種物質(zhì)不行能既作碳源又作氮源碳源都能供給能量c除水以外的無機(jī)物僅供給無機(jī)鹽氮源也能供給能量殺滅哪些部位的雜菌A接種針、手、培育基壓鍋、手、接種針C培育基、手、接種針種針、手、高壓鍋A操作挨次為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌 B將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放人燒杯 C50左右時進(jìn)展倒平板D510 min【拓展訓(xùn)練設(shè)計】以下有關(guān)培育基的表達(dá)正確的選項是 A培育基是為微生物的生長生殖供給養(yǎng)分的基質(zhì) B培育基只有兩類：液體培育基和固體培育基 C固體培育基中參加少量水即可制成液體培育基 不同培育基的具體配方不同，但一般都

7、含 A碳源、磷酸鹽和維生素B氮源和維生素C水、碳源、氮源和無機(jī)鹽元素、氧元素、氫元素、氮元素3獲得純潔培育物的關(guān)鍵是B接種純種細(xì)菌以下常用的無菌操作中錯誤的選項是用酒精擦拭雙手B用氯氣消毒水源 C試驗操作應(yīng)在酒精燈火焰四周進(jìn)展玻璃器皿(吸管、培育皿)可用酒精擦拭有關(guān)倒平板的操作錯誤的選項是將滅過菌的培育皿放在火焰旁的桌面上B使翻開的錐形瓶瓶口快速通過火焰C將培育皿翻開，培育皿蓋倒放在桌子上平板冷卻凝固后需要倒過來放置有關(guān)平板劃線操作正確的選項是 A使用已滅菌的接種環(huán)、培育皿，操作過程中不再滅菌 B翻開含菌種的試管需通過火焰滅菌，取出菌種后需馬上塞上棉塞c將沾有菌種的接種環(huán)快速伸入平板內(nèi)，劃三至

8、五條平行線即可D最終將平板倒置，放人培育箱中培育有關(guān)稀釋涂布平板法，表達(dá)錯誤的選項是 A首先將菌液進(jìn)展一系列的梯度稀釋 C再放在適宜條件下培育 涂布平板操作需要用到接種環(huán)、滴管、酒精燈B接種環(huán)、移液管、酒精燈C涂布器、移液管、酒精燈器、接種環(huán)、酒精燈9將接種后的培育基和一個未接種的培育基都放入37恒溫箱的目的是A比照觀看培育基有沒有被微生物利用分析培育基是否被雜菌污染C沒必要放人未接種的培育基D為了下次接種時再使用菌種保藏應(yīng)把握的條件是1濕度 2 低溫3 枯燥4 有光5隔絕空氣6適當(dāng)有氧A146B236C156 11平板冷卻凝后要將平板倒置，其意義是A利于大腸桿菌的接種B防止雜菌污染C利于培育

9、的冷卻D 防止皿蓋冷卻水倒流入培育基12鑒定培育基的制作是否合格的方法是：將制備好的培育基放在中保溫 1-2天看有無，假設(shè)沒有說明制作合格，反之則不合格。參考答案根底學(xué)問一、1.養(yǎng)分物質(zhì) 生長生殖 液體固體水.碳源氮源 無機(jī)鹽PH 特別養(yǎng)分物質(zhì)氧氣維生素，酸性，中性或微堿性，無氧1:CNPS是構(gòu)成細(xì)胞原生質(zhì)的根本元素，約占原生質(zhì)總量的97以上。二 一雜菌 1.空間 衣著 手，清潔和消毒 2.器皿接種用具，培育基，滅菌3.酒精燈火焰 4.四周的物品二1.略 巴氏消酒精2.略灼燒 干熱高壓蒸氣2:3避開阻礙熱空氣流通。4有利于鍋內(nèi)溫度上升，100k Pa，121，1530，零，容器中的液體暴沸，試

10、驗操作、1稱量溶化滅菌倒平板5：防止牛肉膏吸取空氣中水分。防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯裂開。6糖 維生素 和 有機(jī)氮2：50，錐形瓶，拔出棉塞，快速通過火焰，翻開一條縫隙，將培育基倒入培育皿，倒過來放置7消滅瓶口的雜菌，防止雜菌感染培育基。8防止培育基冷卻過程中形成的水滴落到培育基外表。9不能?？諝庵须s菌會在這些粘附培育基上生殖，并污染皿內(nèi)培育基。10增大接種面積，保持通氣并防止雜菌感染。答案。二、平板劃線 .稀釋涂布平板135條平行線，第一區(qū)劃線末端開頭向其次區(qū)域內(nèi)，第五區(qū)的劃線與第一區(qū)劃線，倒置放在培育箱中防止細(xì)菌污染環(huán)境和操作者。獲得由單個細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。2，9mL，滅菌。，1。，112c

11、m1支移液管結(jié)果分析與評價1比照，培育基滅菌不徹底。2呈白色，為圓形，光滑有光澤，邊緣整齊。3大小不同；菌落數(shù)增多。思考 14有培育基滅菌不徹底或雜菌感染等。4冰箱中，36個月轉(zhuǎn)種培育一次，缺點(diǎn)是保存時間較短，簡潔發(fā)生污染和變異；后者將菌種與無菌體積等量混合后保存在20冷凍箱中?！纠?1】解析：此題考察學(xué)生對微生物的養(yǎng)分和能源的理解。對異養(yǎng)微生物來說，含 C、H、O、NCOCON。是無機(jī)物，22能合成作用的能源。答案：D啟發(fā)：含C、H、o、N無機(jī)碳源不能供給能量；無機(jī)物也可供給碳源、氮源和能源。【例 2】 解析：此題考察學(xué)生對無菌技術(shù)的把握。高壓蒸氣滅菌鍋是滅菌的一個設(shè)備，通常用于物的接種工具，如接種環(huán)。 答案：C基等器具進(jìn)展滅菌。至 50，用手觸摸錐形瓶剛剛不燙手，并且培育基處于溶化狀態(tài)。平板冷卻幾分鐘后還需倒置。答案：A啟發(fā)：固體培育基的制作步驟是溶化【例 4】解析：滅菌是微生物發(fā)酵過程的一個重要環(huán)節(jié)。A 說的是滅菌的目的，由于發(fā)酵所用的菌種大多是單一的純種，整個發(fā)酵過程不能混入其他微生物雜菌，是錯誤的，由于滅菌的目的是防止雜菌污染，但實(shí)際操作中不行能只消滅雜菌，而是消滅全部微生物。C 菌必需在接種前，假設(shè)接種后再滅菌就會把所接菌種也殺死。答案：B根底自測一、1A2C3D4D5C6C7D8D9C。11D。12。C。13。