液質(zhì)聯(lián)用操作規(guī)程

1、液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程 1液質(zhì)聯(lián)用儀操作規(guī)程 18 頁(yè)SOPI-Xevo-TQSFSIDC適用范圍TQSMS/MS 質(zhì)譜儀，適用于食品、藥品中各種有機(jī)物的定性、定量分析，是一種具有高靈敏度的檢測(cè)儀器，儀器由主機(jī)、計(jì)算機(jī)和數(shù)據(jù)處理軟件等組成。職責(zé)操作人員依據(jù)本規(guī)程操作儀器，認(rèn)真填寫試驗(yàn)使用記錄。保管人員負(fù)責(zé)對(duì)儀器進(jìn)展定期維護(hù)和保養(yǎng)。3操作程序日常操作步驟： 設(shè)置樣品表 運(yùn)行樣品定量打印報(bào)告。注：假設(shè)一個(gè)星期內(nèi)不運(yùn)行樣品請(qǐng)不要關(guān)質(zhì)譜儀，使其保持真空。project 的操作步驟：project用標(biāo)準(zhǔn)品調(diào)諧編輯質(zhì)譜方法編輯UPLC 方法設(shè)置樣品表運(yùn)行樣品定量 打印報(bào)告。開機(jī)：徹底開機(jī)挨次儀器已關(guān)閉 win

2、dows 正常啟動(dòng) 30s 或者是有響聲。5min，離子源透視鏡里面亮。 界面菜單MS1 turbo 內(nèi)升到80至少抽真空4 個(gè)小時(shí) 查看真空狀態(tài)主界面massconsole-界面左側(cè)xevotqmsdetector加號(hào)開放-msdisplay碰撞室真空度達(dá)7.xe-5mbar 。日常開機(jī)挨次儀器未關(guān)閉 預(yù)備樣品 灌注二元泵樣器 建立液相方法 平衡液相3.3.1. 預(yù)備流淌相 10mM。3.3.2.樣品要求0.22um 的膜過濾。3.3.3 灌注二元泵 MSConsole,UPLC 交互顯示界面，點(diǎn)擊左欄 Acquity 3 分鐘。 Wash5cycles,Samplesyringe20eo0

3、t 開頭灌注. 左右。設(shè)定流速，平衡液相在MasslynxInletMethod status , 0.2ml/min,50:50。預(yù)備質(zhì)譜3.4.1. 計(jì)算化合物單同位素養(yǎng)量數(shù) Calculator, 輸入化合物的分子式ClBr 等正確的輸入方法,Monoiso,IonMode:離子 ,Calculate。Intellistart 進(jìn)展自動(dòng)調(diào)諧 MSTune圖標(biāo)，翻開調(diào)諧窗口，單擊IonModeES+ 或ES- ，單擊APIGas 圖標(biāo)翻開氮?dú)?，單擊翻開高壓 相流速0.2ml/min, 水：乙腈的比例為50:50。把標(biāo)準(zhǔn)品調(diào)諧液放入質(zhì)譜儀塑料瓶位置處的 A或 B 或 C號(hào)位(注:濃度在 20

4、0ppb左右)A,FlowState LC Purge 圖標(biāo)。 模式，設(shè)定 Function 為 MS1 scan， 5響應(yīng)比較穩(wěn)定。保存調(diào)諧文件：FileSaveAs 至已建的工程下。 TQMSDetector Method ，ES+ 輯窗口，選擇 Switch to Advanced (化合物名稱) ，MolecularMass/Formula分子量或分子式)AdductA+M+H+，選擇LoadExistingSampleTune Name MRM Method 前框打鉤，并在方框出輸入MRM 方法的文件名，路徑為已建的工程下。在PrintReport 前方框打鉤，ConeVoltage

5、 ，CollisionEnergy 處為默認(rèn)值，F(xiàn)luidics 下 SampleFlowRate 參數(shù)與 式下的進(jìn)樣參數(shù)保持全都單擊右邊的Start開頭自動(dòng)調(diào)消滅 ，查看intellistart 報(bào)告查看 intellistart 中自動(dòng)生成的質(zhì)譜方法：xSdSd 編輯對(duì)話框 , e, 中保存的質(zhì)譜方法的文件，雙擊方法,如覺察自動(dòng)調(diào)諧生產(chǎn)Channels 窗口手動(dòng)修改參數(shù)，填寫 end 時(shí)間 ，此時(shí)間必需與液相色譜方法運(yùn)行時(shí)間保持全都FileSaveAs, 保存質(zhì)譜方法文件。建立液相方法編輯液相方法Inlet ，輸入溶劑名稱，runtime 及梯度洗脫程序，runtime OK, FileS

6、aveAsLoadMethod ，平衡液相。建立樣品列表 samplelist File InletFile, InjectVolume 中輸入進(jìn)樣體積，可右鍵Add, 增加樣品表的行數(shù)，保存樣品表：FileSaveAs 。數(shù)據(jù)采集和處理. OK Real-time . 圖，單擊 DefaultRange 圖標(biāo)。DisplayMass 查看Function,DisplayTIC 查看 的數(shù)據(jù)FunctionFunctionFunction，MSScan 的數(shù)據(jù)。MSScan Addtrace ，單OK。 質(zhì)譜圖 在色譜圖中選擇 Display TIC, 選擇ScanWaveDSAddtrace

7、 ，單擊OK。3.6.3.3. 選擇ProcessCombinespectra. 分別用右鍵輸入信號(hào)和本底噪音.單擊OK. DaughterScan ProcessSmoothOK。數(shù)據(jù)處理-外標(biāo)定量法 單擊建方法圖標(biāo)，建一個(gè)定量方法。 (添加的化合物)圖標(biāo)，添加一個(gè)的化合物。 和Compound Name前面打勾 下低濃度標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖，Display/Mass chromatogram選出要定量的化合物的離子對(duì)，一般強(qiáng)度高的化合物用來做為定量 Acquisition Function Number, Quantification Trace, Predicted window 將自動(dòng)輸入到

8、定量方法中。留意：在色譜圖上拉的時(shí)候，要遵循兩個(gè)原則，拉的位置要以色譜峰的峰尖左右對(duì)稱，拉的寬度要超過峰的起點(diǎn)和終點(diǎn)。單擊工作曲線圖標(biāo)，在工作曲線設(shè)置頁(yè)面，填入ng/mlug/kg，ppbppm 等。Conc.A。PolynomialTypeLinear. 可依據(jù)自己行業(yè)的規(guī)定 WeithtingFunction(權(quán)重)_1/x 依據(jù)自己行業(yè)規(guī)定假設(shè)全部的化合物均用一樣的工作曲線的參數(shù)，Yes翻開積分參數(shù)列表，選中xkd打勾， 并不是很對(duì)稱的色譜圖，可先在色譜圖上先設(shè)定參數(shù)，積分，好積分參數(shù)滿足之 分方法，Smooth 方法建議用 smooth iteration1,smoothwidth2重

9、復(fù)上面的過程把其他幾個(gè)化合物的信息全部參加 ， 文件夾中，正確的 samplelist 項(xiàng)之外還要有sampletype,ConA, 等選中要處理 方法單擊OK 后，消滅定量結(jié)果對(duì)話框?？梢罁?jù)自己的需要，用鼠標(biāo)右鍵，ChangColumnOrder 來 中的選項(xiàng)。關(guān)機(jī)程序日常關(guān)機(jī)：2 分鐘，流速設(shè)為30 80%20 分鐘， 停流速，水相，沖洗至少30 80%20 分鐘，停流速，柱溫為室溫。面masstune 或者電腦下面儀器圖標(biāo)界面左側(cè)偏上 界面或者電腦下面儀器圖標(biāo)6個(gè) 關(guān)高壓masstune界面右下角 100度以 界面或者電腦下面儀器圖標(biāo)左側(cè)偏上。ES+source-temperature-

10、desolvation 徹底關(guān)機(jī)先完成日常關(guān)機(jī) 10 以 界面左側(cè)偏上diagnostics-vacuum-sourceturbospeed%退出軟件，其他界面先退出，主界面最終退出關(guān)質(zhì)譜電源 電源挨次無(wú)所謂，關(guān)氮?dú)獍l(fā)生器，氬氣。UPSUPS 電源，計(jì)算機(jī)電源。日常維護(hù)、保養(yǎng)及留意事項(xiàng)儀器室要保持干凈、干凈、無(wú)塵；配套設(shè)施布局合理。20-25，保持恒溫；相對(duì)濕度最好關(guān)閉離子源內(nèi)的真空隔離閥。用一字鏍絲刀順時(shí)針方向擰開機(jī)械泵上的 Gas Ballast30 分鐘后再把 GasBallast 閥旋轉(zhuǎn)到原來關(guān)閉的ESIAPCI開高壓之前肯定要先開氮?dú)?，關(guān)氮?dú)庵翱隙ㄒ汝P(guān)高壓。ESI面：三氟乙酸TFA多用于蛋白質(zhì)和多肽分析，但對(duì)ESITEAm/z102M+H+峰，有可能會(huì)抑制某些堿性化合物在正ESIESI的響應(yīng)；(phosphate,borate,citrate,etc.)；外表活性劑、清潔劑和去污劑 (會(huì)抑制離子化)；以及無(wú)機(jī)酸 (sulphuric acid, phosphoric acid etc.)等。連接 UPLC 泵、色譜柱、注射泵以及 ESI 探頭時(shí)，要將儀器置于 standby 狀態(tài)。條件下，應(yīng)當(dāng)做質(zhì)量數(shù)校正。時(shí)間