DNA的粗提取與鑒定生物選修一高考考點(diǎn)總結(jié)

1、DNA的粗提取與鑒定生物選修一高考考點(diǎn)總結(jié) 理解了東西才記得準(zhǔn)，記得牢。所以必需“先懂后記”。這是最基本的記憶方法。下面是小偏整理的DNA的粗提取與鑒定生物選修一高考考點(diǎn)總結(jié)，感謝您的每一次閱讀。 DNA的粗提取與鑒定生物選修一高考考點(diǎn)總結(jié) 一、DNA的提取思路 提取生物大分子的基本思路是選用肯定的物理或化學(xué)方法分別具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。對于DNA的粗提取而言，就是要利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，提取DNA，去除其他成分。 二、DNA的理化性質(zhì) 1.DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同。利用這一特點(diǎn)，選擇適當(dāng)

2、的鹽濃度就能使DNA充分溶解，而使_雜質(zhì)_沉淀，或者相反，以達(dá)到分別目的。隨著NaCl溶液濃度的增大，DNA的溶解度_先減小后增大_。在_0.14mol/L_濃度下，DNA的溶解度最小，要使DNA充分溶解，一般采納_2mol/L_濃度的NaCl溶液。 此外，DNA不溶于酒精溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精溶液。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分別。 2.DNA對酶、高溫柔洗滌劑的耐受性：蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是對DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60-80的高溫，而DNA在80以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜，但對DNA沒有影響。 3.DNA的鑒定：在沸水浴條件下，DNA遇

3、二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。 三、試驗(yàn)設(shè)計(jì) 1.試驗(yàn)材料的選取：凡是含有DNA的生物材料都可以考慮，但是選用DNA含量較高的生物組織，勝利的可能性更大。你認(rèn)為教材供應(yīng)的材料中哪些不適合提取DNA?哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞、在液體培育基的大腸桿菌。(材料：魚卵、豬肝、菜花(花椰菜)、香蕉、雞血、哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培育基的大腸桿菌) 2.破裂細(xì)胞，獵取含DNA的濾液：動(dòng)物細(xì)胞的破裂比較簡單，以雞血細(xì)胞為例，在雞血細(xì)胞液中加入肯定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌，過濾后收集濾液即可。提取花椰菜的DNA時(shí)，在搗碎的花椰菜中加入肯定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分

4、的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液。 教材問題 為什么加入蒸餾水能使雞血細(xì)胞裂開? 蒸餾水對于雞血細(xì)胞來說是一種低滲液體，水分可以大量進(jìn)入血細(xì)胞內(nèi)，使血細(xì)胞脹裂。 加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么? 洗滌劑是一些離子去污劑，能溶解細(xì)胞膜，有利于DNA的釋放;食鹽的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。 假如研磨不充分，會(huì)對試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生怎樣的影響? 研磨不充分會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全，提取的DNA量變少，影響試驗(yàn)結(jié)果，導(dǎo)致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍(lán)色等。 此步驟獲得的DNA濾液中可能含有哪些細(xì)胞成分? 可能含有核蛋白、多糖和RNA等雜質(zhì) 3.去除濾液中的雜質(zhì)： 方案一：利用DNA

5、在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，通過掌握NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)。詳細(xì)做法是：在濾液中加入NaCl，使NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為2mol/L，過濾除去不溶的雜質(zhì)，再調(diào)整NaCl溶液物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L,析出DNA，過濾去除溶液中的雜質(zhì)，再用物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液溶解DNA。 方案二：直接在濾液中加入嫩肉粉，反應(yīng)10-15min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)。 方案三：將濾液放在60-75的恒溫水浴箱中保溫10-15min，留意嚴(yán)格掌握溫度范圍。目的是除去擔(dān)蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。 教材問題 為什么反復(fù)地溶解與析出DNA，能夠去除雜質(zhì)? 用高濃度的鹽溶液溶解DN

6、A，能除去高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出，能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。 方案二與方案三的原理有什么不同? 方案二是利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質(zhì)分開;方案三利用的是DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同，從而使蛋白質(zhì)變性，與DNA分別。 4.DNA的析出與鑒定： 將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液(體積分?jǐn)?shù)為95%)，靜置2-3min，溶液中會(huì)消失白色絲狀物，這就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分。 取兩支20ml的試管，各加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，

7、用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入4ml的二苯胺試劑?；旌蟿蚍Q后，將試管置于沸水浴中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍(lán)。 四、操作提示 1.以血液為試驗(yàn)材料時(shí)，每100ml血液中需要加入3g檸檬酸鈉，防止血液凝固。 2.加入洗滌劑后，動(dòng)作輕緩、嚴(yán)厲，否則簡單產(chǎn)生大量的泡沫，不利于后續(xù)步驟的操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要輕緩，以免加劇DNA分子的斷裂，導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。 3.二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，否則會(huì)影響鑒定的效果。 高中學(xué)習(xí)生物的最佳方法 1、理解記憶 理解了東西才記得準(zhǔn)，記得牢。所以必需“先懂后記”

8、。這是最基本的記憶方法。 2、聯(lián)系實(shí)際記憶 常說“學(xué)以致用”，反過來“用也可促學(xué)”。把生活實(shí)踐中的閱歷學(xué)問應(yīng)用到課堂學(xué)習(xí)中來，激發(fā)學(xué)習(xí)樂觀性的同時(shí)，也會(huì)記得更堅(jiān)固。例如：“管理農(nóng)作物時(shí)進(jìn)行松土，可以促肥”記“植物的根部汲取礦質(zhì)元素離子必需要氧氣促進(jìn)根的有氧呼吸”;“氧氣療法驅(qū)除蛔蟲”記“蛔蟲的異化作用方式是厭氧型”。 3、形象記憶 內(nèi)容形象、直觀、記憶就深刻、難忘。把學(xué)問形象化能關(guān)心記憶。例如：U(象尿桶)脲嘧啶C(象半圓包過來)胞嘧啶A(象線飄起來)腺嘌呤T(象胸前的十字架)胸腺嘧啶DNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)可以借助DNA的實(shí)物模型或多媒體形象顯示關(guān)心記憶。 4、英漢互譯記憶 抽象的生物字符借助英語記起來就便利易懂。例如：HHear(canthear聽不懂H區(qū)受損表現(xiàn)為“聽覺性失語癥”)SSpeak(cantspeak不能講S區(qū)受損表現(xiàn)為“運(yùn)動(dòng)性失語癥”)ADP中的DDouble“雙倍”;所以ADP稱“二磷酸腺苷” 5、口訣記憶 將生物學(xué)學(xué)問編成“順口溜”，生動(dòng)好玩，印象深刻，不易遺忘。例如推斷遺傳病的顯性或隱性關(guān)系“無(病)中生有(病)為(該遺傳病為)隱性(遺傳病)”“有(病)中生無(病)為(該遺傳病為)顯性(遺傳病)”;大量元素他(C)請(H)楊(O)丹(N)